迷迭香主要組分對(duì)沙門(mén)氏菌的抑制機(jī)理

蔡曉軍 孫楊贏 潘道東，2* 曹錦軒 曾小群 吳 振 楊雪松

（1 寧波大學(xué)浙江省動(dòng)物蛋白食品精深加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 浙江寧波315211 2 南京師范大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)系 南京210097）

沙門(mén)氏菌（Salmonella）是一種常見(jiàn)的食源性致病菌，在畜禽腸道帶菌率較高，常引起肉類(lèi)食品的污染，這是造成人類(lèi)沙門(mén)氏菌病的重要原因之一。人類(lèi)感染沙門(mén)氏菌會(huì)出現(xiàn)脫水，嘔吐、腹瀉等胃腸炎癥狀，嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致死亡。合理使用抗菌劑，降低畜禽原料肉沙門(mén)氏菌的帶菌率是控制食源性疾病爆發(fā)的一種常見(jiàn)手段[1-3]。目前，畜禽生產(chǎn)中常用抗菌劑主要有化學(xué)抗菌劑和天然抗菌劑，前者使用過(guò)多易造成細(xì)菌的耐藥性，甚至威脅人類(lèi)的健康。天然抗菌劑以其優(yōu)質(zhì)、安全、高效的特點(diǎn)備受關(guān)注[4]。香料植物作為天然抗菌劑精油的重要來(lái)源，在畜禽生產(chǎn)中應(yīng)用較多[5]。

迷迭香（Rosmarinus officinalis L.）是唇形科迷迭香屬香料植物，含有多種具有抗菌、抗氧化、抗癌、鎮(zhèn)痛消炎等功效的活性物質(zhì)[6]，在食品、制藥和醫(yī)學(xué)保健等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。迷迭香提取物及其精油的抑菌性主要與酚酸類(lèi)成分及萜烯類(lèi)成分有關(guān)[6]，其中，酚酸類(lèi)成分以鼠尾草酸和迷迭香酸含量較高，而萜烯類(lèi)成分則以1，8-桉葉素、樟腦及α-蒎烯最為常見(jiàn)[7-9]。研究表明，迷迭香酸[10]和鼠尾草酸[11]均有廣譜抑菌性，后者對(duì)大腸桿菌、綠膿桿菌及肺炎克雷伯氏菌等表現(xiàn)出與氯霉素效果相當(dāng)甚至更優(yōu)異的抗菌活性。1，8-桉葉素、樟腦、α-蒎烯、月桂烯[12]、β-石竹烯等[13]萜類(lèi)成分對(duì)大腸埃希氏菌、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌等多種致病菌均有較強(qiáng)的抑菌性。目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)迷迭香單體成分的報(bào)道多集中于生物活性研究及相關(guān)應(yīng)用上，而關(guān)于抑菌機(jī)理的報(bào)道較為少見(jiàn)。

本研究擬采用牛津杯法比較迷迭香中含量較高的6 種單體組分[6]——鼠尾草酸、1，8-桉葉素、樟腦、α-蒎烯、β-石竹烯和冰片（龍腦）對(duì)沙門(mén)氏菌的抑菌作用，找出最強(qiáng)抑菌組分，結(jié)合細(xì)菌細(xì)胞壁、細(xì)胞膜損傷以及相關(guān)酶活力確定其抑菌機(jī)理，為控制沙門(mén)氏菌源食源性疾病的爆發(fā)以及迷迭香成分的開(kāi)發(fā)提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試菌種與培養(yǎng)基

沙門(mén)氏菌（Salmonella）為寧波大學(xué)實(shí)驗(yàn)室保藏菌種。營(yíng)養(yǎng)肉湯（NB）培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)瓊脂（NA）培養(yǎng)基，購(gòu)于青島高科園海博生物技術(shù)有限公司。

1.2 材料及試劑

鼠尾草酸（60%，HPLC），上海源葉生物科技有限公司；1，8-桉葉素（99%）、（+）-冰片 （龍腦，98%），上海阿拉丁生化科技股份有限公司；（±）-樟腦（96%）、β-石竹烯（90%，來(lái)源于樟樹(shù)），北京百靈威科技有限公司；α-蒎烯（≥98%，GC），北京索萊寶科技有限公司；無(wú)水乙醇（分析純），國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；PBS 緩沖液 （干粉，1 L 含0.01 mol/L PO43+、0.8% NaCl，pH 7.2～7.4），北京酷來(lái)搏科技有限公司；堿式磷酸酶（AKP）測(cè)試盒、鉀（K）測(cè)試盒，南京建成生物工程研究所；GENMED正苯基萘胺攝入法細(xì)菌膜損傷熒光檢測(cè)試劑盒、GENMED 半乳糖苷酶釋放法細(xì)菌膜損傷熒光檢測(cè)試劑盒，上海杰美基因醫(yī)藥科技有限公司。

1.3 主要儀器與設(shè)備

電子數(shù)顯卡尺0～150 mm，桂林廣陸數(shù)字測(cè)控股份有限公司；LDZH-50KBS 型立式壓力蒸汽滅菌器，上海申安醫(yī)療機(jī)械廠；SW-CJ-2F 超凈工作臺(tái)，蘇州華科凈化設(shè)備有限公司；HWS-0288 智能型恒溫恒濕培養(yǎng)箱，寧波江南儀器制造廠；H2500R-2 高速冷凍離心機(jī)、H-2050R 高速冷凍離心機(jī)，長(zhǎng)沙湘儀實(shí)驗(yàn)儀器開(kāi)發(fā)有限公司；Eppendorf centrifuge 5418R，艾本德中國(guó)有限公司；Infinnite200pro 酶標(biāo)儀，瑞士TECAN 公司。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 迷迭香單體組分溶液的配制 選擇迷迭香6 種單體組分鼠尾草酸、1，8-桉葉素、 樟腦、α-蒎烯、β-石竹烯和冰片（龍腦）[6]。采用95%的乙醇溶液分別將6 種組分配成質(zhì)量濃度為20 mg/mL 的溶液，用直徑0.22 μm 的無(wú)菌過(guò)濾器過(guò)濾除菌，4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.2 菌懸液的制備及含菌平板的制備 活化后的沙門(mén)氏菌按照3%的比例接種至100 mL 肉湯培養(yǎng)基，37 ℃、150 r/min 振蕩培養(yǎng)18 h，以滅菌肉湯為溶劑，將菌液稀釋至105～106CFU/mL。向無(wú)菌培養(yǎng)皿中倒入20 mL 滅菌的瓊脂培養(yǎng)基，待凝固后分別加入0.1 mL 菌液（105～106CFU/mL），涂布均勻制成含菌平板備用。

1.4.3 迷迭香組分的抑菌活性 采用牛津杯法測(cè)定抑菌直徑，參照Diao 等[14]的方法并作適當(dāng)修改。瓊脂平板表面以間距2～3 cm 放置2 個(gè)無(wú)菌干燥牛津杯（外徑8 mm，內(nèi)徑6 mm，高10 mm）并輕輕按壓。向牛津杯中分別加入6 種質(zhì)量濃度為20 mg/mL 的迷迭香單體組分溶液各0.2 mL，用等體積95%乙醇溶液及生理鹽水作對(duì)照。平板于4 ℃放置1 h 后平放在37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，用游標(biāo)卡尺測(cè)定抑菌直徑，重復(fù)3 次。

1.4.4 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)1，8-桉葉素溶液抑制率的影響 以1，8-桉葉素為抑菌劑，預(yù)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，乙醇體積分?jǐn)?shù)低于10%，1，8-桉葉素不能溶解完全，過(guò)高則會(huì)表現(xiàn)抑菌作用，需篩選合適的溶劑濃度進(jìn)行后期試驗(yàn)。采用10%，20%，30%，40%和50%的乙醇肉湯溶液分別配制10 mg/mL 的1，8-桉葉素溶液，用肉湯倍比稀釋至5，2.5 mg/mL，以相應(yīng)濃度乙醇肉湯溶液作溶劑對(duì)照。向10 mL 無(wú)菌離心管中按體積比1∶1 分別加入105～106CFU/mL 菌懸液和0，2.5，5，10 mg/mL 1，8-桉葉素溶液混勻，管內(nèi)實(shí)際含1，8-桉葉素質(zhì)量濃度分別為0，1.25，2.5，5 mg/mL，設(shè)置2 種對(duì)照組：以無(wú)菌肉湯和相應(yīng)濃度無(wú)菌乙醇肉湯溶液分別作陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照。混勻置于37 ℃、150 r/min 恒溫振蕩培養(yǎng)24 h，測(cè)定各組樣品600 nm 處OD 值并按公式（1）計(jì)算抑制率[15]，重復(fù)測(cè)定3 次。

1.4.5 1，8-桉葉素對(duì)沙門(mén)氏菌的最小抑菌濃度（MIC）及細(xì)菌生長(zhǎng)曲線 取37 ℃培養(yǎng)12 h 的沙門(mén)氏菌按照一定比例加入到新的肉湯培養(yǎng)基中，調(diào)整菌密度約為107CFU/mL。最小抑菌濃度（MIC）測(cè)定[16]。用10%乙醇水溶液配制質(zhì)量濃度為10 mg/mL 的1，8-桉葉素儲(chǔ)備液，采用二倍稀釋法稀釋至5，2.5，1.25，0.625，0.3125 mg/mL。將藥液與菌液等比例混勻，置于37 ℃、150 r/min 條件下振蕩培養(yǎng)24 h，用生理鹽水作空白對(duì)照。以肉眼觀察菌液澄清的最低含藥量為MIC 值，重復(fù)測(cè)定3 次。

沙門(mén)氏菌生長(zhǎng)曲線繪制[17]。用10%乙醇肉湯溶液配制質(zhì)量濃度10 mg/mL 的儲(chǔ)備液，用肉湯稀釋適當(dāng)比例后加入到菌液中配成含藥終濃度分別為1 MIC 和2 MIC 的1，8-桉葉素溶液，用不含藥物的菌懸液作對(duì)照組。37 ℃、150 r/min 條件下振蕩培養(yǎng)24 h，每隔2 h 分別取樣測(cè)定OD600nm值，以取樣時(shí)間為橫坐標(biāo)、以O(shè)D600nm值為縱坐標(biāo)繪制沙門(mén)氏菌生長(zhǎng)曲線，重復(fù)測(cè)定4 次。

1.4.6 對(duì)細(xì)菌細(xì)胞壁通透性及鉀離子泄漏的影響 細(xì)胞壁通透性測(cè)定參照Xu 等[18]的方法并做適當(dāng)修改。取37 ℃培養(yǎng)12 h 的沙門(mén)氏菌于5 000 r/min 離心10 min 去上清，沉淀用無(wú)菌水洗滌3次后重懸至107CFU/mL。用10%乙醇水溶液配制10 mg/mL 的1，8-桉葉素儲(chǔ)備液，無(wú)菌水稀釋適當(dāng)比例后加入到菌懸液中配成含藥物終濃度分別為1MIC、2MIC 的1，8-桉葉素溶液，同時(shí)以不含藥物的菌液為對(duì)照組。樣品置于37 ℃、150 r/min 條件恒溫振蕩培養(yǎng)，取培養(yǎng)3 h 的菌懸液各1 mL，3 500 r/min 離心10 min，吸取上清液用堿性磷酸酶（AKP）試劑盒測(cè)定不同樣品培養(yǎng)液的AKP 含量，重復(fù)測(cè)定3 次。

鉀離子含量測(cè)定：取上述試驗(yàn)培養(yǎng)0，3 和6 h 的樣品各1 mL，3 500 r/min 離心10 min，取上清參照鉀（K）測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定鉀離子含量，結(jié)果按照說(shuō)明書(shū)公式，即公式（2）進(jìn)行計(jì)算，重復(fù)測(cè)定3次。

式中，x——樣本管絕對(duì)OD 值，即x=OD樣品－OD空白。

1.4.7 對(duì)細(xì)菌外膜損傷和內(nèi)膜損傷的影響 接種3%經(jīng)37 ℃培養(yǎng)12 h 的沙門(mén)氏菌菌液到50 mL 滅菌肉湯培養(yǎng)基中，37 ℃、150 r/min 條件繼續(xù)培養(yǎng)至OD600=0.50±0.01。取1.4.7 節(jié)所制儲(chǔ)備液用無(wú)菌水倍比稀釋成1MIC、2MIC 的1，8-桉葉素溶液，同時(shí)以不含藥物的菌液作對(duì)照組。細(xì)菌外膜和內(nèi)膜損傷程度分別按照GENMED 正苯基萘胺攝入法和GENMED 半乳糖苷酶釋放法細(xì)菌膜損傷熒光檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，結(jié)果以相對(duì)熒光單位（Relative Fluorescence Units）表示，重復(fù)測(cè)定3 次。

1.4.8 對(duì)細(xì)菌核酸物質(zhì)和可溶性蛋白泄漏的影響核酸物質(zhì)測(cè)定[17]：參照1.4.7 節(jié)制取沙門(mén)氏菌沉淀及1，8-桉葉素儲(chǔ)備液。沉淀用0.01 mol/L pH 7.4 的PBS 洗滌并重懸至107CFU/mL，儲(chǔ)備液用無(wú)菌水稀釋適當(dāng)比例后加入到菌懸液中配成含藥物終濃度分別為1MIC、2MIC 的1，8-桉葉素溶液，以不含藥物的菌液作對(duì)照組。37 ℃、150 r/min條件下培養(yǎng)6 h，每隔1 h 分別取樣1 mL，5 000 r/min 離心10 min，測(cè)定上清液在260 nm 處的吸光值，重復(fù)測(cè)定3 次。

蛋白質(zhì)含量的測(cè)定：取上述試驗(yàn)中培養(yǎng)2，4，6 h 的菌液各1 mL，5 000 r/min 離心10 min 后取上清液按照福林酚法于500 nm 處測(cè)定OD 值，用標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算蛋白濃度，重復(fù)測(cè)定3 次。

1.4.9 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 8.0 軟件one-way ANOVA 過(guò) 程 中 的Duncan’s multiplerange test 檢驗(yàn)過(guò)程進(jìn)行差異性分析，通過(guò)Origin8.5 軟件進(jìn)行繪圖。

2 結(jié)果與討論

2.1 迷迭香成分對(duì)沙門(mén)氏菌的抑菌直徑

如表1所示，迷迭香6 種組分對(duì)沙門(mén)氏菌的抑菌直徑均明顯高于對(duì)照組，以1，8-桉葉素抑菌直徑最大。結(jié)果表明，迷迭香6 種組分以1，8-桉葉素對(duì)沙門(mén)氏菌抑菌作用最強(qiáng)。迷迭香提取物及精油具有廣譜抑菌性，其抑菌活性顯著高于常見(jiàn)的食品防腐劑二丁基羥基甲苯（BHT）和苯甲酸[19]，且對(duì)不同細(xì)菌的抑菌效果與酚酸類(lèi)、 萜烯類(lèi)成分的種類(lèi)或含量有關(guān)[20-22]。1，8-桉葉素是迷迭香精油的主要組分，精油的抑菌作用表現(xiàn)為其主要組分的抑菌活性[22]。因此，選擇1，8-桉葉素為對(duì)象研究其對(duì)沙門(mén)氏菌的抑菌機(jī)理。

表1 迷迭香組分對(duì)沙門(mén)氏菌的抑菌直徑Table 1 Inhibition zone of Rosemary extract ingredients to Salmonella

2.2 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)1，8-桉葉素抑制率的影響

如圖1所示，乙醇體積分?jǐn)?shù)大于10%，對(duì)照組（0 mg/mL）和1，8-桉葉素試驗(yàn)組（5，2.5 mg/mL）的抑制率均接近于100%，不能排除乙醇的抑菌作用。當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為10%時(shí)，與對(duì)照組相比，5 mg/mL 試驗(yàn)組抑制率增加26.16%，乙醇抑菌作用相對(duì)降低。綜上所述，選取體積分?jǐn)?shù)為10%的乙醇溶液作為溶劑進(jìn)行后期試驗(yàn)。

圖1 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)1，8-桉葉素抑制率的影響Fig.1 Effect of ethanol concentration on the inhabitation ratio of 1，8-cineol

2.3 1，8-桉葉素最小抑菌濃度（MIC）及對(duì)沙門(mén)氏菌生長(zhǎng)曲線的影響

1，8-桉葉素的MIC 為2.5 mg/mL。如圖2所示，1MIC（2.5 mg/mL）和2MIC（5 mg/mL）2 個(gè)處理組的OD 值均呈先略微下降再趨于水平的趨勢(shì)，而對(duì)照組細(xì)菌持續(xù)增長(zhǎng)，在14 h 時(shí)達(dá)到穩(wěn)定期。說(shuō)明1，8-桉葉素在1MIC 和2MIC 兩種濃度下均能夠完全抑制沙門(mén)氏菌的生長(zhǎng)甚至殺死細(xì)菌。Sokovic等人[12]發(fā)現(xiàn)，1，8-桉葉素對(duì)大腸埃希氏菌、沙門(mén)氏菌、 金黃色葡萄球菌等多種致病菌均有抑菌性，與本試驗(yàn)結(jié)果相似。

圖2 1，8-桉葉素對(duì)沙門(mén)氏菌生長(zhǎng)曲線的影響Fig.2 Antibacterial kinetics of 1，8-cineol against Salmonella

2.4 對(duì)細(xì)胞壁通透性的影響

細(xì)菌中培養(yǎng)液AKP 含量間接反映出細(xì)胞壁的通透性[15]。由表2可知，加入1，8-桉葉素溶液后，菌液堿式磷酸酶（AKP）活力明顯增加，且1，8-桉葉素濃度越高，酶活力越大。表明1，8-桉葉素破壞了沙門(mén)氏菌細(xì)胞壁，從而使菌液AKP 含量增加。脂多糖是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的特有組成成分，與革蘭氏陰性致病菌的病原能力有關(guān)[24]。Zhao等[25]發(fā)現(xiàn)1，8-桉葉素能夠降低由脂多糖誘導(dǎo)的小鼠急性肺炎癥。1，8-桉葉素對(duì)革蘭氏陰性菌的抑菌活性總體高于革蘭氏陽(yáng)性菌[22]，可能是其與脂多糖相互作用的結(jié)果，致使細(xì)胞壁通透性受到破壞。

表2 1，8-桉葉素對(duì)沙門(mén)氏菌AKP 活力及細(xì)胞膜損傷的影響Table 2 The AKP activity and membrane damage of Salmonella treated with 1，8-cineol

2.5 對(duì)細(xì)菌外膜損傷和內(nèi)膜損傷的影響

如表2所示，添加1，8-桉葉素使沙門(mén)氏菌內(nèi)外膜的相對(duì)熒光強(qiáng)度顯著提高（P＜0.05），且隨著藥物濃度增加而增大。表明1，8-桉葉素對(duì)沙門(mén)氏菌的外膜和內(nèi)膜造成熒光損傷，且濃度越高，膜損傷程度越大。1，8-桉葉素通過(guò)誘導(dǎo)革蘭氏陰性菌的細(xì)胞膜損傷作用發(fā)揮抗菌活性[22]。Anjos 等[26]在研究皮膚的滲透機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn)，1，8-桉葉素分子內(nèi)部氫鍵的疏水作用能夠促進(jìn)自身分子到達(dá)雙層膜的中心地帶，分子的極性基團(tuán)在該區(qū)域通過(guò)吸引親水側(cè)的極性脂質(zhì)首基，破壞細(xì)胞膜極性接口處的氫鍵網(wǎng)絡(luò)，從而促進(jìn)膜分區(qū)，最終使分子透過(guò)膜結(jié)構(gòu)。這或許能夠解釋1，8-桉葉素對(duì)沙門(mén)氏菌外膜和內(nèi)膜的損傷機(jī)制。

2.6 對(duì)細(xì)菌鉀離子泄漏情況的影響

由圖3可知，與對(duì)照組相比，添加1，8-桉葉素使沙門(mén)氏菌K+發(fā)生泄漏，2MIC 處理組泄漏量顯著高于1MIC 處理組（P＜0.01），泄漏程度隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng)而有所增加。K+是微生物細(xì)胞內(nèi)的重要陽(yáng)離子，參與細(xì)胞內(nèi)部多種生理功能和代謝途徑，其功能主要在于維持細(xì)胞膜的滲透壓和穩(wěn)定性等[27]。當(dāng)細(xì)菌受到藥物抑制時(shí)，細(xì)胞膜流動(dòng)性和透性發(fā)生改變，造成胞內(nèi)K+等小分子物質(zhì)泄漏，影響細(xì)胞的功能特性甚至造成菌體死亡[28]。1，8-桉葉素能夠使沙門(mén)氏菌K+發(fā)生泄漏，表明細(xì)菌細(xì)胞膜的流動(dòng)性和通透性發(fā)生改變。

2.7 對(duì)細(xì)菌胞內(nèi)核酸物質(zhì)泄漏情況的影響

核酸物質(zhì)在260 nm 處有最強(qiáng)吸收峰，通過(guò)測(cè)定細(xì)菌培養(yǎng)液260 nm 處的吸光值可以判斷核酸物質(zhì)的泄漏情況[29]。由圖4可知，添加1，8-桉葉素溶液使培養(yǎng)液260 nm 處的吸光值明顯增加，且隨保鮮劑濃度的增加延長(zhǎng)和作用時(shí)間延長(zhǎng)顯著增大（P＜0.01），試驗(yàn)組的吸光值明顯高于對(duì)照組，4 h達(dá)到最大值。藍(lán)蔚青等[15]發(fā)現(xiàn)，添加復(fù)合保鮮劑能夠破壞熒光假單胞菌細(xì)胞膜的完整性。Yao 等[29]發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌細(xì)胞膜受損能夠引起胞內(nèi)物質(zhì)發(fā)生泄漏。1，8-桉葉素能夠使沙門(mén)氏菌核酸物質(zhì)外滲，表明沙門(mén)氏菌細(xì)胞膜的完整性受到破壞。

2.8 對(duì)細(xì)菌蛋白質(zhì)泄漏情況的影響

圖3 1，8-桉葉素對(duì)沙門(mén)氏菌鉀離子泄漏的影響Fig.3 Effect of 1，8-cineol on the content of K+ released from Salmonella

圖4 1，8-桉葉素對(duì)沙門(mén)氏菌OD260nm 的影響Fig.4 Effect of 1，8-cineol on the OD260nm of Salmonella

圖5 1，8-桉葉素對(duì)沙門(mén)氏菌胞外蛋白質(zhì)濃度的影響Fig.5 Effect of 1，8-cineol on extracellular protein concentration of Salmonella

如圖5所示，與對(duì)照組相比，添加1，8-桉葉素使沙門(mén)氏菌培養(yǎng)液中蛋白質(zhì)濃度增加，2MIC 處理組顯著高于1MIC 處理組（P＜0.01），作用時(shí)間越長(zhǎng)，蛋白質(zhì)濃度越大。蛋白質(zhì)是細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)重要組成成分，與細(xì)胞多種生理代謝活動(dòng)有關(guān)，細(xì)胞膜受損傷可引起胞內(nèi)蛋白質(zhì)泄漏[29]。本試驗(yàn)中1，8-桉葉素使沙門(mén)氏菌蛋白質(zhì)發(fā)生泄漏，說(shuō)明沙門(mén)氏菌細(xì)胞膜受到破壞，破壞程度隨著藥物濃度增加和作用延長(zhǎng)而增大。

3 結(jié)論

迷迭香6 種主要組分對(duì)沙門(mén)氏菌均有較強(qiáng)的抑菌作用，以1，8-桉葉素最強(qiáng)。1，8-桉葉素溶液在濃度為1MIC 和2MIC 時(shí)對(duì)對(duì)數(shù)期的沙門(mén)氏菌抑制效果顯著，它能夠破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁，損傷細(xì)菌的外膜和內(nèi)膜，改變并破壞細(xì)胞膜的通透性和完整性，引起胞內(nèi)物質(zhì)（K+、核酸、蛋白質(zhì)）外滲。細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的損傷破壞程度及胞內(nèi)物質(zhì)的外滲程度隨著藥液劑量的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng)而相應(yīng)增大。1，8-桉葉素抑制沙門(mén)氏菌的機(jī)理，主要是通過(guò)損傷細(xì)胞壁和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，從而破壞胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性而起作用。