• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    葛根芩連湯對感染大腸桿菌小鼠血常規(guī)、血液內毒素及炎性細胞因子含量的影響

    2019-05-15 01:14:00張巍巍秦志華宋學文張林林
    中國獸藥雜志 2019年4期
    關鍵詞:連湯葛根芩氟苯尼

    王 新,張巍巍,楊 婧,叢 霞,秦志華, 宋學文,張林林,郭 沛,單 虎*

    (青島農業(yè)大學動物醫(yī)學院,山東青島 266109)

    產腸毒素大腸桿菌(EnterotoxigenicEscherichiacoli, ETEC)是引發(fā)斷奶仔豬腹瀉的重要病原菌之一,黏附性菌毛K88是主要致病因子[1-2]。目前臨床上治療仔豬大腸桿菌性腹瀉是以抗生素為主,但是由于抗生素的不規(guī)范使用導致大腸桿菌多重耐藥、交叉耐藥及藥物殘留的問題日趨嚴重,不僅造成環(huán)境的污染,而且嚴重威脅著人類的身體健康[1]。而中醫(yī)在上千年的發(fā)展進程中產生了大量“對癥下藥、辨證施治、標本兼治”的經(jīng)典方劑,葛根芩連湯就是經(jīng)典方劑之一,其在治療菌痢、腸傷寒等疾患中療效顯著,同時中草藥具有低殘留、不易產生耐藥性等優(yōu)點,受到國內外專家學者的關注[3-4]。本研究探討葛根芩連湯對于感染大腸桿菌小鼠血常規(guī)、血液內毒素及炎性細胞因子含量的影響,旨在為臨床應用葛根芩連湯防治仔豬大腸桿菌性腹瀉提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    1.1.1 試驗試劑 氯化鈉注射液購自貴州天地藥業(yè)有限責任公司,批號H52020070;TNF-α、IL-1β和IL-6酶聯(lián)免疫檢測試劑盒(48T)均購自南京建成生物工程研究所,批號分別為2018012501、2018012503、2018012509;內毒素檢測鱟試劑盒購自廈門鱟試劑生物科技股份有限公司,批號171018。

    1.1.2 試驗藥物 葛根、黃芩、黃連、炙甘草均購自山東省青島市城陽人民醫(yī)院,批號分別為104303、104301、140103、104120;氟苯尼考溶液購自天津市諾維動物藥業(yè)有限公司,批準文號獸藥字(2014)020132111。

    1.1.3 試驗菌株 大腸桿菌K88(青島農業(yè)大學動物醫(yī)學院臨床診斷學實驗室惠贈)

    1.1.4 試驗動物 SPF級昆明系小鼠,體重18~22 g,購自山東省濟南市朋悅實驗動物繁育有限公司。

    1.2 試驗方法

    1.2.1 藥液制備 參照《中國人民共和國藥典》中記載的中藥煎煮方法,“先煮葛根、后納諸藥”。稱取所需中藥,用分體式電子智能保健煲煎煮兩次。第一次煎煮加入 8倍量的水將藥材浸泡30 min,加熱煎煮1 h,將藥液經(jīng)四層紗布過濾后裝入1000 mL燒杯中,第二次加4倍量的水,加熱0.5 h,經(jīng)四層紗布過濾后,將兩次煎煮藥液合并,濃縮為1 g/mL 的中藥原液,高壓蒸汽滅菌后放入4 ℃冰箱備用。

    1.2.2 葛根芩連湯預防試驗和治療試驗

    1.2.2.1 分組及試驗設計 預防試驗:選取健康且體重相近昆明系小鼠80只,隨機分為葛根芩連湯組、氟苯尼考組、模型組、對照組,每組20只,雌雄各半。葛根芩連湯組及氟苯尼考組小鼠攻毒之前連續(xù)給藥5 d,并分別灌服1 mL葛根芩連湯(濃度1 g/mL)、1%的氟苯尼考溶液1 mL,模型組和對照組灌服等量的生理鹽水。葛根芩連湯組、氟苯尼考組和模型組分別于最后一次給藥3 h后腹腔注射0.1 mL大腸桿菌菌液(5×107CFU/mL),對照組注射等量的生理鹽水。

    治療試驗:試驗分組同預防試驗,葛根芩連湯組、氟苯尼考組和模型組分別于第一次給藥前3 h,腹腔注射0.1 mL大腸桿菌K88菌液(5×107CFU/mL),對照組注射等量的生理鹽水。攻毒3 h后葛根芩連湯組灌服濃度1 mL葛根芩連湯(濃度1 g/mL),氟苯尼考組灌服1%的氟苯尼考溶液1 mL,模型組、對照組灌服等量的生理鹽水。

    1.2.2.2 樣品采集與保存 小鼠攻毒12 h后進行眼眶后靜脈叢采血,將血液采集至肝素鈉抗凝管中用于血常規(guī)檢測,另采集血液至1.5 mL離心管中,室溫放置30 min后3500 rpm/min 離心10 min,收集血清于-20 ℃保存,并保證避免反復凍融。

    1.3.1 小鼠死亡率的統(tǒng)計 記錄并統(tǒng)計攻毒后48 h內各組的死亡數(shù)以及死亡率的動態(tài)變化。

    1.3.2 血常規(guī)指標檢測 檢測小鼠血液中白細胞、紅細胞、血小板等血常規(guī)指標。

    1.3.3 血液中細菌內毒素的含量 參照終點顯色法顯色基質鱟試劑盒說明書進行內毒素的含量測定。

    1.3.4 血液中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量 參照酶聯(lián)免疫檢測試劑盒說明書,檢測血清中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量。

    1.4 數(shù)據(jù)處理 數(shù)據(jù)采用SPSS22.0統(tǒng)計軟件中ANOVA(one way analysis of variance)法,用Duncan法進行均值的多重比較。結果用x±s表示。

    2 結果與分析

    2.1 小鼠死亡數(shù)和死亡率的動態(tài)變化 根據(jù)表1可知,預防和治療試驗中,模型組與對照組、葛根芩連湯組、氟苯尼考組相比死亡總數(shù)及死亡率均差異極顯著(P<0.01);預防試驗中,氟苯尼考組死亡率低于葛根芩連湯組,差異不顯著(P>0.05);治療試驗中,氟苯尼考組死亡率高于葛根芩連湯組,差異不顯著(P>0.05)。

    表1 小鼠死亡總數(shù)與死亡率的變化 (n=20)Tab 1 The dynamic changes of death ang mortality in mice (n=20)

    與模型組相比,aP<0.05,bP<0.01

    Compared with model group,aP<0.05,bP<0.01

    2.2 葛根芩連湯對感染大腸桿菌K88小鼠血常規(guī)指標的影響 由表2可知,預防試驗中,模型組的白細胞、中性粒細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞的數(shù)目均極顯著地高于對照組(P<0.01),淋巴細胞數(shù)目顯著地高于對照組(P<0.05)。葛根芩連湯組和氟苯尼考組白細胞、中性粒細胞、單核細胞數(shù)目均極顯著地高于對照組(P<0.01),并且極顯著地低于模型組(P<0.01),嗜酸性粒細胞數(shù)目與對照組相比顯著增高(P<0.05),同時極顯著低于模型組(P<0.01)。模型組以及葛根芩連湯組的紅細胞數(shù)目、血紅蛋白濃度極顯著地低于對照組(P<0.01);但葛根芩連湯組紅細胞數(shù)目、血紅蛋白濃度顯著地高于模型組(P<0.05)。氟苯尼考組的紅細胞數(shù)目與對照組沒有差異,血紅蛋白濃度顯著高于對照組(P>0.05),血小板數(shù)目,與對照組相比極顯著地降低(P<0.01),而與葛根芩連湯組相比極顯著升高(P<0.01);氟苯尼考組血小板數(shù)目與模型組沒有差異。

    由表3可知,與對照組相比,模型組白細胞、中性粒細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞和淋巴細胞數(shù)目顯著地增高(P<0.05),紅細胞數(shù)目、血紅蛋白濃度、血小板數(shù)目極顯著地降低(P<0.01);葛根芩連湯組的白細胞、中性粒細胞、單核細胞的數(shù)目極顯著高于對照組(P<0.01),并且極顯著低于模型組(P<0.01),同時淋巴細胞、嗜酸性粒細胞數(shù)目也均極顯著(P<0.01)低于模型組,以及血紅蛋白濃度、血小板數(shù)目均顯著地低于對照組(P<0.05),且均顯著高于模型組(P<0.05);氟苯尼考組中性粒細胞數(shù)目與葛根芩連湯組相比差異極顯著(P<0.01),并且極顯著高于葛根芩連湯組,血小板數(shù)目與葛根芩連湯組相比差異顯著(P<0.05),并且顯著低于葛根芩連湯組。

    表2 預防試驗小鼠血液中白細胞、紅細胞、血紅蛋白及血小板的數(shù)目(n=20)Tab 2 The content of WBC, RBC, Hb and platelet in blood of mice in prevention group (n=20)

    同行數(shù)據(jù)肩標小寫字母相同表示差異不顯著(P>0.05),小寫字母不同大寫字母相同表示差異顯著(P<0.05),大小寫字母均不同表示差異極顯著(P<0.01)

    The same row compares, the same lowercase letter means no significant difference (P>0.05), different lowercase letter means significant differences (P<0.05). And with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01)

    表3 治療試驗小鼠血液中白細胞、紅細胞、血紅蛋白及血小板的數(shù)目Tab 3 The content of WBC, RBC, Hb and platelet in blood of mice in treatment group

    同行數(shù)據(jù)肩標小寫字母相同表示差異不顯著(P>0.05),小寫字母不同大寫字母相同表示差異顯著(P<0.05),大小寫字母均不同表示差異極顯著(P<0.01)

    The same row compares, the same lowercase letter means no significant difference (P>0.05), different lowercase letter means significant differences (P<0.05). And with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01)

    2.3 小鼠血液中細菌內毒素的含量變化 由表4可知,預防試驗中,對照組、葛根芩連湯組及氟苯尼考組的內毒素含量極顯著低于模型組(P<0.01),且葛根芩連湯組極顯著高于對照組(P<0.01),氟苯尼考組與對照組相比差異不顯著,葛根芩連湯組與氟苯尼考組相比差異不顯著。治療試驗中,對照組和葛根芩連湯組的內毒素含量極顯著低于模型組(P<0.01),且葛根芩連湯組極顯著高于對照組(P<0.01);氟苯尼考組的內毒素含量與模型組含量差異顯著(P<0.05),與對照組相比差異極顯著(P<0.01),并且極顯著高于對對照組(P<0.01)。

    2.4 小鼠血液中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量變化

    由表5可知,預防試驗中,模型組TNF-α、IL-1β和IL-6含量均極顯著高于其它三組(P<0.01);與對照組相比,葛根芩連湯組三種炎性因子的含量均顯著地降低(P<0.05),氟苯尼考組與對照組無顯著性差異(P>0.05);氟苯尼考組IL-1β、IL-6顯著高于葛根芩連湯組(P<0.05),氟苯尼考組TNF-α極顯著高于葛根芩連湯組(P<0.01)。治療試驗中,模型組TNF-α、IL-1β和IL-6的含量均極顯著地高于其它三組(P<0.01);葛根芩連湯組、氟苯尼考組TNF-α、IL-1β和IL-6的含量與對照組相比均差異不顯著(P>0.05);葛根芩連湯組與氟苯尼考組三種炎性因子之間均均差異不顯著(P>0.05)。

    表4 各組小鼠血液中細菌內毒素的含量 (EU/mL)Tab 4 The content of bacterial endotoxin in every group(EU/mL)

    同列數(shù)據(jù)肩標小寫字母相同表示差異不顯著(P>0.05),小寫字母不同大寫字母相同表示差異顯著(P<0.05),大小寫字母均不同表示差異極顯著(P<0.01)

    The same column compares, the same lowercase letter means no significant difference (P>0.05), different lowercase letter means significant differences (P<0.05). And with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01)

    表5 小鼠血液中炎性因子的含量(ng/L)Tab 5 The content of inflammatory factors(ng/L)

    同列數(shù)據(jù)肩標小寫字母相同表示差異不顯著(P>0.05),小寫字母不同大寫字母相同表示差異顯著(P<0.05),大小寫字母均不同表示差異極顯著(P<0.01)

    The same column compares, the same lowercase letter means no significant difference (P>0.05), different lowercase letter means significant differences (P<0.05). And with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01)

    3 討論與結論

    3.1 葛根芩連湯對小鼠死亡率的影響 郭莎莎[5]、王華龍[6]研究發(fā)現(xiàn)葛根芩連湯可以有效地治療大腸桿菌性腹瀉,治愈率為98.45%。本試驗中葛根芩連湯表現(xiàn)出了較好的預防和治療大腸桿菌病的作用,并且預防效果接近于氟苯尼考,治療效果優(yōu)于氟苯尼考,結果與以上文獻報道一致。

    3.2 葛根芩連湯對小鼠血常規(guī)指標的影響 白細胞分為粒細胞、單核細胞、淋巴細胞三大類,其中粒細胞又可分為中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞。當發(fā)生細菌性感染時白細胞會出現(xiàn)病理性升高,其中以單核細胞、淋巴細胞和中性粒細胞的升高最為明顯,活化的白細胞還能夠分泌產生TNF-α、IL-1β、IL-6等促炎細胞因子,細胞因子的出現(xiàn)還能夠繼續(xù)趨化、激活白細胞。預防試驗與治療試驗研究發(fā)現(xiàn),葛根芩連湯組與模型組的各類白細胞數(shù)目均高于對照組,說明大腸桿菌感染小鼠后能夠引起小鼠體內一系列免疫反應。段凱文[7]等報道,黃連黃芩均能夠增強巨噬細胞的吞噬功能。故本試驗在攻毒12 h后檢測血細胞變化,發(fā)現(xiàn)葛根芩連湯組各類白細胞數(shù)目均低于模型組,由此推測葛根芩連湯中的有效成分可通過增強白細胞吞噬能力,在加速白細胞吞噬過程中抑制促炎細胞因子的釋放,使得該中藥方劑產生的一系列保護作用進而減輕小鼠體內的炎癥反應。

    試驗研究發(fā)現(xiàn)攻毒后的小鼠紅細胞及血紅蛋白含量均有所降低,但經(jīng)葛根芩連湯治療后,小鼠血液中紅細胞各項水平均有明顯提升。這可能是由于葛根芩連湯通過降低小鼠血液中的內毒素含量,進而提高血液中紅細胞的水平。研究報道,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)能夠抑制紅細胞生成,還能夠激活凝血因子Ⅶ,進而啟動內源性凝血途徑[8,9]。同時,試驗研究發(fā)現(xiàn)模型組小鼠在注射大腸桿菌后血小板明顯減少,葛根芩連湯組的血小板數(shù)目與對照組非常接近,可見葛根芩連湯對于因大腸桿菌感染引起的血小板減少癥有明顯的保護作用。模型組血小板減少可能與血小板過度消耗以及LPS侵入體內引起的彌散性血管內凝血有關[10]。邱艷萍[11]研究證明應用黃連素有抗血小板凝集的作用,并能夠用于防治腦血管中發(fā)生血小板血栓。

    3.3 葛根芩連湯對血液中內毒素含量的影響 大腸桿菌K88主要以菌毛、腸毒素和細菌崩解后產生的內毒素發(fā)揮致病作用,進而可導致機體發(fā)生腹瀉[12]。同時,革蘭氏陰性菌細胞壁中的LPS在細菌死亡崩解時大量釋放并且進入循環(huán)血液,造成內毒素血癥[13]。前期已通過預試驗對攻毒小鼠體內介導炎癥反應的受體表達量進行監(jiān)測,發(fā)現(xiàn)攻毒后12 h小鼠體內炎癥反應最強烈,預防試驗與治療試驗中葛根芩連湯組與氟苯尼考組、模型組均檢測出一定濃度的內毒素,但是葛根芩連湯組在預防試驗和治療試驗中其內毒素的含量均極顯著低于模型組(P<0.01),與章常華[14]等對于葛根芩連湯在代謝性疾病的治療過程中能夠顯著降低小鼠血清中LPS的結論一致。同時,試驗結果驗證了葛根芩連湯通過降低小鼠血液中的內毒素含量,進而提高血液中紅細胞和血小板的水平。

    3.4 葛根芩連湯對TNF-α、IL-1 β和IL-6分泌影響 TNF-α、IL-1 β和IL-6都屬于炎癥細胞因子,TNF-α能夠促進IL-1 β和IL-6的分泌,在發(fā)生炎癥和細胞凋亡的過程中具有重要意義[15]。試驗研究發(fā)現(xiàn)葛根芩連湯組小鼠血清中三種因子的含量與對照組相比均有所降低,這與易文[16]、馬建強[17]、趙月蓉[18]等人對相關中藥研究得出的中藥能夠抑制炎癥介質的合成與釋放結論相一致,而氟苯尼考組三種因子含量顯示與對照組沒有差異,由此可初步推測葛根芩連湯防治大腸桿菌病的免疫學機理。

    3.5 結論 葛根芩連湯對感染大腸桿菌K88小鼠具有預防和治療的作用。葛根芩連湯主要是通過降低血液中的內毒素及炎性因子的含量,進而降低機體炎癥反應水平,發(fā)揮保護作用。

    猜你喜歡
    連湯葛根芩氟苯尼
    The role of intestinal flora on tumorigenesis, progression,and the efficacy of PD-1/PD-L1 antibodies in colorectal cancer
    基于網(wǎng)絡藥理學探討葛根芩連湯治療放射性腸炎的作用機制
    氟苯尼考的毒副作用及其在豬臨床上的應用
    探究“氟苯尼考”在水產養(yǎng)殖中的應用
    當代水產(2019年11期)2019-12-23 09:03:58
    葛根芩連丸UPLC指紋圖譜建立及7種成分測定
    中成藥(2018年5期)2018-06-06 03:11:53
    酶聯(lián)免疫吸附法檢測水產品中的氟苯尼考
    葛根芩連湯治療潰瘍性結腸炎的研究進展※
    葛根芩連湯治療腹瀉的相關研究
    父子吃貨
    葛根芩連湯及其加減方治療小兒腹瀉的統(tǒng)計分析
    一进一出抽搐gif免费好疼 | а√天堂www在线а√下载| 精品免费久久久久久久清纯| 很黄的视频免费| xxx96com| 少妇 在线观看| 午夜免费成人在线视频| 亚洲精品一二三| 丰满的人妻完整版| 黄频高清免费视频| 欧美丝袜亚洲另类 | 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲一码二码三码区别大吗| 操出白浆在线播放| 在线观看免费高清a一片| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 欧美av亚洲av综合av国产av| 满18在线观看网站| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 国产1区2区3区精品| 日本黄色视频三级网站网址| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 嫁个100分男人电影在线观看| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 女性被躁到高潮视频| 最好的美女福利视频网| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产精品亚洲av一区麻豆| 男男h啪啪无遮挡| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 在线天堂中文资源库| 国产黄色免费在线视频| 亚洲情色 制服丝袜| 在线观看免费视频日本深夜| 国产91精品成人一区二区三区| 欧美在线一区亚洲| 久久伊人香网站| 美女国产高潮福利片在线看| 男女下面进入的视频免费午夜 | 成人三级黄色视频| 满18在线观看网站| 成人三级做爰电影| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲av电影在线进入| av福利片在线| 日日爽夜夜爽网站| 日韩精品青青久久久久久| 99在线人妻在线中文字幕| 午夜精品在线福利| 男男h啪啪无遮挡| 好男人电影高清在线观看| 日本黄色日本黄色录像| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 脱女人内裤的视频| 嫩草影视91久久| 国产亚洲欧美在线一区二区| 三级毛片av免费| 黄色毛片三级朝国网站| 国产av在哪里看| 国产免费现黄频在线看| 在线av久久热| 激情在线观看视频在线高清| 精品国产美女av久久久久小说| 亚洲五月天丁香| 高清av免费在线| 日韩精品中文字幕看吧| 他把我摸到了高潮在线观看| 久久午夜亚洲精品久久| 一级毛片女人18水好多| 精品人妻1区二区| 露出奶头的视频| 一进一出抽搐动态| 国产熟女xx| 涩涩av久久男人的天堂| 高清黄色对白视频在线免费看| 国产单亲对白刺激| av免费在线观看网站| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | videosex国产| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产精品久久久久成人av| 久久国产乱子伦精品免费另类| 成在线人永久免费视频| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲欧美日韩无卡精品| 免费搜索国产男女视频| 午夜免费鲁丝| 午夜免费成人在线视频| 一级片免费观看大全| 在线播放国产精品三级| 午夜视频精品福利| 香蕉丝袜av| 国产成人欧美在线观看| 日本vs欧美在线观看视频| 咕卡用的链子| 欧美黑人精品巨大| 久久九九热精品免费| 高潮久久久久久久久久久不卡| 老司机靠b影院| 在线天堂中文资源库| 一进一出抽搐动态| 岛国在线观看网站| 午夜福利,免费看| 后天国语完整版免费观看| 一级毛片精品| 最好的美女福利视频网| 电影成人av| 国产精品永久免费网站| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 叶爱在线成人免费视频播放| √禁漫天堂资源中文www| 在线观看66精品国产| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 人人妻人人澡人人看| av电影中文网址| 村上凉子中文字幕在线| 色精品久久人妻99蜜桃| 脱女人内裤的视频| 亚洲精品成人av观看孕妇| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 国产精品 国内视频| 亚洲在线自拍视频| 午夜影院日韩av| 欧美成人性av电影在线观看| www.精华液| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产午夜精品久久久久久| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| netflix在线观看网站| 91成人精品电影| 99国产综合亚洲精品| 成人国语在线视频| 国产乱人伦免费视频| 欧美午夜高清在线| 欧美日韩一级在线毛片| 欧美不卡视频在线免费观看 | 国产人伦9x9x在线观看| 精品人妻1区二区| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 精品久久久久久成人av| 久久久久久人人人人人| 亚洲中文av在线| 免费在线观看亚洲国产| 国产精品免费视频内射| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 免费不卡黄色视频| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 99久久国产精品久久久| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 欧美在线黄色| 久久久国产成人免费| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 国产麻豆69| 国产成+人综合+亚洲专区| 国产精品久久久av美女十八| 日韩人妻精品一区2区三区| 黄色丝袜av网址大全| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 精品第一国产精品| 亚洲人成77777在线视频| 久久中文字幕人妻熟女| 久久精品亚洲av国产电影网| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲一区二区三区不卡视频| 一级黄色大片毛片| 亚洲精品一区av在线观看| 国产一卡二卡三卡精品| 日本a在线网址| 美女 人体艺术 gogo| 欧美久久黑人一区二区| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 国产野战对白在线观看| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 日韩人妻精品一区2区三区| 成人亚洲精品av一区二区 | 国产精品久久久av美女十八| 日本免费a在线| 国产区一区二久久| 悠悠久久av| 国产av精品麻豆| 欧美中文综合在线视频| 大型黄色视频在线免费观看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 最新美女视频免费是黄的| 欧美一区二区精品小视频在线| 成在线人永久免费视频| 脱女人内裤的视频| 亚洲片人在线观看| 99久久国产精品久久久| 欧美成人午夜精品| 丝袜美腿诱惑在线| 精品一区二区三区av网在线观看| 欧美在线黄色| 性少妇av在线| 在线观看66精品国产| 色综合站精品国产| 国产精品一区二区免费欧美| 精品一品国产午夜福利视频| x7x7x7水蜜桃| 成人特级黄色片久久久久久久| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 成人亚洲精品av一区二区 | 99久久综合精品五月天人人| 男人舔女人的私密视频| 成人手机av| 精品国产国语对白av| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 在线观看免费视频网站a站| 后天国语完整版免费观看| 欧美性长视频在线观看| 久热这里只有精品99| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产精品1区2区在线观看.| 成人亚洲精品一区在线观看| 亚洲情色 制服丝袜| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 另类亚洲欧美激情| 夜夜看夜夜爽夜夜摸 | 波多野结衣av一区二区av| 黑丝袜美女国产一区| 久久久国产成人免费| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲中文字幕日韩| 日韩欧美一区视频在线观看| 成人亚洲精品av一区二区 | 久久中文字幕人妻熟女| 久久久国产成人精品二区 | 黄频高清免费视频| 老司机福利观看| 欧美精品啪啪一区二区三区| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 欧美在线一区亚洲| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产视频一区二区在线看| 一进一出好大好爽视频| 18美女黄网站色大片免费观看| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 日本wwww免费看| 亚洲熟女毛片儿| 丝袜美腿诱惑在线| 色综合婷婷激情| 1024香蕉在线观看| 亚洲avbb在线观看| 国产在线观看jvid| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久欧美精品欧美久久欧美| 99精品久久久久人妻精品| 欧美日韩精品网址| 精品免费久久久久久久清纯| 搡老熟女国产l中国老女人| 午夜福利,免费看| 一级片'在线观看视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 欧美国产精品va在线观看不卡| 日韩三级视频一区二区三区| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 欧美黑人精品巨大| 校园春色视频在线观看| 波多野结衣av一区二区av| 69精品国产乱码久久久| 身体一侧抽搐| 国产成人影院久久av| 国产免费男女视频| 久久久精品欧美日韩精品| 精品第一国产精品| 亚洲成人国产一区在线观看| √禁漫天堂资源中文www| 涩涩av久久男人的天堂| 老司机午夜十八禁免费视频| 午夜视频精品福利| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 久久久久久免费高清国产稀缺| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲人成电影免费在线| 黑人欧美特级aaaaaa片| 男人舔女人的私密视频| 满18在线观看网站| 十分钟在线观看高清视频www| 在线观看舔阴道视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 制服诱惑二区| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 欧美黑人精品巨大| 一边摸一边抽搐一进一小说| 正在播放国产对白刺激| 亚洲三区欧美一区| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 高清毛片免费观看视频网站 | 99久久99久久久精品蜜桃| 老熟妇仑乱视频hdxx| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 最新在线观看一区二区三区| 激情在线观看视频在线高清| 亚洲av美国av| bbb黄色大片| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 一区二区三区精品91| 欧美最黄视频在线播放免费 | 18禁美女被吸乳视频| 91大片在线观看| 韩国精品一区二区三区| 人成视频在线观看免费观看| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲成人免费av在线播放| cao死你这个sao货| 亚洲情色 制服丝袜| av欧美777| 大码成人一级视频| 色在线成人网| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 9热在线视频观看99| 欧美激情高清一区二区三区| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲精品av麻豆狂野| 免费在线观看完整版高清| 午夜成年电影在线免费观看| 午夜福利一区二区在线看| 校园春色视频在线观看| av欧美777| 色综合欧美亚洲国产小说| 亚洲欧美日韩无卡精品| 老司机午夜福利在线观看视频| 大型黄色视频在线免费观看| 美女 人体艺术 gogo| 日韩免费av在线播放| 这个男人来自地球电影免费观看| 99久久99久久久精品蜜桃| av免费在线观看网站| 一级片'在线观看视频| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 啦啦啦 在线观看视频| √禁漫天堂资源中文www| 国产深夜福利视频在线观看| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 国产xxxxx性猛交| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 精品人妻在线不人妻| 91国产中文字幕| 性少妇av在线| 日韩国内少妇激情av| 午夜福利欧美成人| 99在线视频只有这里精品首页| 国产免费男女视频| 亚洲男人天堂网一区| 桃色一区二区三区在线观看| 亚洲五月色婷婷综合| 国产成人精品在线电影| 成人18禁在线播放| 神马国产精品三级电影在线观看 | 咕卡用的链子| 亚洲国产看品久久| 在线观看日韩欧美| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产精品九九99| 精品欧美一区二区三区在线| 夜夜看夜夜爽夜夜摸 | 可以免费在线观看a视频的电影网站| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 男女之事视频高清在线观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 美女大奶头视频| 两性夫妻黄色片| a级毛片在线看网站| 在线观看免费高清a一片| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产成人av教育| 精品国产亚洲在线| 午夜精品久久久久久毛片777| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 精品一区二区三区四区五区乱码| 波多野结衣av一区二区av| 中文字幕色久视频| 久久狼人影院| 色尼玛亚洲综合影院| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 伦理电影免费视频| 天堂动漫精品| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产av精品麻豆| 又黄又粗又硬又大视频| 一个人观看的视频www高清免费观看 | av电影中文网址| 中文字幕人妻丝袜制服| 午夜激情av网站| 亚洲五月天丁香| 一边摸一边做爽爽视频免费| 麻豆国产av国片精品| 免费在线观看影片大全网站| 很黄的视频免费| 久久久国产欧美日韩av| 欧美成人免费av一区二区三区| av欧美777| 国产片内射在线| 亚洲激情在线av| 成人影院久久| 成年人免费黄色播放视频| 一区二区三区国产精品乱码| 两个人看的免费小视频| 狠狠狠狠99中文字幕| 美国免费a级毛片| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产三级黄色录像| 校园春色视频在线观看| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 999久久久国产精品视频| 午夜亚洲福利在线播放| 中文字幕最新亚洲高清| 中文字幕av电影在线播放| 国产精品久久久人人做人人爽| 久久久久国内视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 中文字幕人妻熟女乱码| 亚洲色图av天堂| 大陆偷拍与自拍| 天堂影院成人在线观看| 好男人电影高清在线观看| 久久人妻熟女aⅴ| 精品第一国产精品| 亚洲成人精品中文字幕电影 | 久久午夜亚洲精品久久| 色综合婷婷激情| 伊人久久大香线蕉亚洲五| av超薄肉色丝袜交足视频| 国产99久久九九免费精品| 99久久人妻综合| a级毛片在线看网站| 可以在线观看毛片的网站| 国产男靠女视频免费网站| 一个人免费在线观看的高清视频| 午夜成年电影在线免费观看| 不卡一级毛片| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 新久久久久国产一级毛片| 90打野战视频偷拍视频| 性少妇av在线| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 一进一出好大好爽视频| 精品久久蜜臀av无| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 99国产精品一区二区蜜桃av| 热re99久久国产66热| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 少妇的丰满在线观看| 欧美精品亚洲一区二区| 欧美黑人精品巨大| av福利片在线| 久久精品91蜜桃| 日韩av在线大香蕉| 咕卡用的链子| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲成国产人片在线观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国产精品成人在线| av国产精品久久久久影院| 亚洲成人精品中文字幕电影 | 久久热在线av| 精品一品国产午夜福利视频| 日本wwww免费看| 丁香六月欧美| 亚洲全国av大片| 免费看十八禁软件| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 日本黄色日本黄色录像| 色尼玛亚洲综合影院| 久久人人精品亚洲av| 桃红色精品国产亚洲av| 一级a爱视频在线免费观看| 一个人免费在线观看的高清视频| 成人永久免费在线观看视频| 丰满的人妻完整版| 多毛熟女@视频| 亚洲精品中文字幕在线视频| av超薄肉色丝袜交足视频| 女性被躁到高潮视频| 十八禁网站免费在线| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 乱人伦中国视频| a级毛片在线看网站| 中文字幕精品免费在线观看视频| 一进一出好大好爽视频| 精品久久久久久电影网| 少妇 在线观看| 免费高清在线观看日韩| 亚洲avbb在线观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 亚洲成人久久性| 国产黄色免费在线视频| 国产亚洲精品一区二区www| 天堂动漫精品| 色尼玛亚洲综合影院| av天堂在线播放| 欧美乱妇无乱码| 超碰成人久久| 黄色视频不卡| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产又色又爽无遮挡免费看| 精品无人区乱码1区二区| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 在线国产一区二区在线| 欧美激情极品国产一区二区三区| 天堂影院成人在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 老司机午夜十八禁免费视频| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 99riav亚洲国产免费| 一级a爱视频在线免费观看| 久久99一区二区三区| 欧美人与性动交α欧美软件| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 69精品国产乱码久久久| 在线国产一区二区在线| 国产免费现黄频在线看| av国产精品久久久久影院| 宅男免费午夜| 人妻久久中文字幕网| 又紧又爽又黄一区二区| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 亚洲成国产人片在线观看| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 岛国在线观看网站| 国产精品九九99| 免费av中文字幕在线| 亚洲成人精品中文字幕电影 | 淫妇啪啪啪对白视频| 精品一品国产午夜福利视频| e午夜精品久久久久久久| 亚洲一区二区三区色噜噜 | 国产成人啪精品午夜网站| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲成人免费电影在线观看| 老司机午夜十八禁免费视频| 1024香蕉在线观看| 黑人操中国人逼视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 精品电影一区二区在线| 亚洲精品国产一区二区精华液| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲色图av天堂| 热99re8久久精品国产| 午夜a级毛片| 国产激情欧美一区二区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 婷婷丁香在线五月| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 91国产中文字幕| 色在线成人网| 亚洲情色 制服丝袜| 日韩欧美免费精品| 免费在线观看影片大全网站| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产一区二区激情短视频| 欧美不卡视频在线免费观看 | 巨乳人妻的诱惑在线观看| 我的亚洲天堂| 久久精品国产亚洲av高清一级| 午夜视频精品福利| 亚洲男人的天堂狠狠| 五月开心婷婷网| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 两人在一起打扑克的视频| 男女床上黄色一级片免费看| 日韩精品中文字幕看吧| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 香蕉久久夜色| 午夜精品在线福利| 99re在线观看精品视频| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲自拍偷在线| 黄色a级毛片大全视频| 亚洲七黄色美女视频| 少妇粗大呻吟视频| www.精华液| av在线天堂中文字幕 | 国产精品 国内视频| 99久久人妻综合| 91老司机精品| 大型av网站在线播放| 好男人电影高清在线观看| 久久午夜综合久久蜜桃| 欧美日韩乱码在线| 免费在线观看影片大全网站| 国产精品永久免费网站| 亚洲性夜色夜夜综合| 精品国产亚洲在线| 欧美成人免费av一区二区三区| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲精品成人av观看孕妇| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 成年人免费黄色播放视频| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 高清欧美精品videossex| 午夜精品在线福利|