標準SN/T 1924-2011食品中瘦肉精測定方法優(yōu)化

王琳琳 陸陽

方法提要

試樣中的克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇和特布他林殘留量采用乙腈水溶液漩渦萃取，PRiME HLB固相萃取柱提取，采用甲醇-乙酸銨流動相上HPLC- MS測定，外標法定量。

試劑和材料

除另有說明外，所用試劑均為分析純，水為符合GB/T 6682 規(guī)定的一級水。

甲醇：色譜純；乙腈：色譜純；乙酸銨：色譜純；氮氣：純度≥99.999%；標準品：特布他林（Terbutalin sulfate），CAS編號：23031-32- 5，純度：96.70%；沙丁胺醇（Salbutamol free base），CAS編號：18559- 94- 9，純度：99.90%；克倫特羅（Clenbuterol hydrochloride），CAS編號：21898- 19- 1，純度：99.34%；萊克多巴胺（Ractopamine hydrochloride），CAS編號：90274- 24- 1，純度：97.0%；標準溶液曲線：配置四種標準溶液的混標曲線，濃度為200PPb、100PPb、50PPb、20PPb、10PPb。

儀器與設備

液相色譜-串聯四級桿質譜儀：配電噴霧離子源（ESI）；分析天平：感量為0.01g和0.1mg；漩渦混合器；冷凍離心機：轉速≥10000r/min；氮吹濃縮儀。

樣品處理

取生鮮豬肉2.50g，加入80%乙腈水溶液10mL，漩渦震蕩萃取1min，超聲波萃取3min，10000r/min高速離心5min，取5mL上清液直接加載到6cc規(guī)格PRiME HLB固相萃取柱，保持一秒一滴的流速，收集全部流出液。取4.00mL流出液在40℃下氮氣吹至小于0.5mL，殘留液體用10%甲醇水溶液定容至1.00mL，過0.2μm微孔濾膜，上液相質譜。

色譜和質譜條件

液相色譜條件：色譜柱：C18柱，150mm（柱長）×2.1mm（內徑），粒度5μm；流動相：甲醇- 5mmol/L乙酸銨溶液，梯度洗脫見表1。

流速：200μL/min；柱溫：35℃；進樣量：20μL。

質譜條件：離子化模式：電噴霧電離（ESI）正離子模式；質譜掃描方式：多反應監(jiān)測（MRM）；分辨率：單位質量分辨率；毛細管電壓：4200V；干燥氣溫度：350℃；干燥氣流量：11L/min；碰撞氣：氮氣；主要質譜參數見表2。

結果

標樣譜圖（見圖1）

樣品（豬肉）加標譜圖以及計算的加標回收率（見圖2、圖3）

特布他林、沙丁胺醇、萊克多巴胺、克倫特羅加標量均為50ppb，回收率分別為：87.8%、79.6%、64.2%；76.4%，回收率均達到滿意。

結果分析

（1）在樣品處理中用PriME HLB固相萃取柱代替了凈化過程，節(jié)約了很多人力以及時間；

（2）采用外標法，在經濟成本上做到了節(jié)約成本；

（3）流動相使用甲醇-乙酸銨溶液，用甲醇代替乙腈，在經濟上節(jié)約成本，在環(huán)境負擔上，檢驗員長期接觸乙腈對人體會產生一定危害，另外女性工作者長期接觸乙腈會增大不孕的概率；

（4）在回收率理想的前提下，本方法不僅節(jié)約了成本，節(jié)省了時間，還降低了危害。