豬瘟免疫不合格的情況分析與應(yīng)對(duì)措施

雷元元 涂明亮 劉 山 葛興農(nóng) 李海斌 周 宇 師 園

（陜西省延安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，陜西延安 716000）

豬瘟俗稱“爛腸病”，是由豬瘟病毒所引起的一種豬的急性、熱性、高度傳染性的疫病[1-3]。該病毒核心直徑約28～30 nm，病毒直徑約40～50 nm，表面有囊膜，基因組長度12.4 kb左右，為單鏈RNA病毒，外殼為六角形，核衣殼呈十二面體對(duì)稱。豬瘟病毒僅有1個(gè)血清型，目前世界上將豬瘟病毒分為1群、2群、3群3個(gè)基因群，我國主要流行基因2群。

豬為該病在自然界中的唯一宿主，該病四季流行，所有品種各個(gè)生長時(shí)期的豬均可感染，該病主要以接觸傳染為主，胚胎期接觸病毒可導(dǎo)致先天性免疫耐受。春秋兩季由于防治力度較大，豬瘟流行溫和，病例不典型，死亡率較低。豬瘟的致死率高，造成的損失嚴(yán)重，因此采取疫苗接種的方式預(yù)防豬瘟是十分重要的[4-6]。

盡管我國早在20世紀(jì)50年代就研制成功了安全性和免疫原性良好的豬瘟兔化弱毒疫苗，并在預(yù)防豬瘟發(fā)生的過程中發(fā)揮了重要作用，但由于近年來豬瘟的流行和發(fā)病特點(diǎn)發(fā)生了較大的變化，其流行形式從頻發(fā)的大流行轉(zhuǎn)變?yōu)橹芷谛?、波浪形的地區(qū)性散發(fā)性流行，出現(xiàn)了所謂的非典型豬瘟、溫和型豬瘟和“無名高熱綜合征”等，在存在上述種種跡象的地區(qū)和豬場(chǎng)往往同時(shí)出現(xiàn)無法解釋的免疫失敗。

2007年，豬瘟被列入國家強(qiáng)制免疫計(jì)劃；2017年，豬瘟退出強(qiáng)制免疫計(jì)劃。但在陜西省，豬瘟仍在陜西省中長期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012-2020年）之列，說明豬瘟仍是影響當(dāng)?shù)仞B(yǎng)豬業(yè)的重要疫病。在陜西省延安市部分縣區(qū)豬瘟免疫達(dá)不到預(yù)期目標(biāo)，出現(xiàn)免疫失敗。為了查清免疫失敗的原因，篩選適合當(dāng)?shù)氐拿庖叻椒?，達(dá)到應(yīng)有的免疫效果，特開展此項(xiàng)目，為延安市豬瘟免疫提供參考。

1 材料

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

200日齡左右的仔豬20頭（未免過豬瘟疫苗），來自5個(gè)圈舍，每個(gè)圈舍4頭，由延安市子長縣農(nóng)戶飼養(yǎng)。

1.2 疫苗

豬瘟活疫苗（兔源） （生產(chǎn)批號(hào)：20171209），由楊凌綠方生物工程有限公司生產(chǎn)。

1.3 檢測(cè)試劑盒

豬瘟間接血凝抗體檢測(cè)試劑盒（生產(chǎn)批號(hào)：20181022202），由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)。

2 方法 [7]

通過現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查2018年春季延安市部分縣區(qū)免疫情況，查找操作等可能引起豬瘟免疫失敗的原因。將20頭青年豬隨機(jī)分為A、B、C三組，A組4頭，B、C組每組8頭（以母豬為主），分組后編號(hào)、采血，A組為空白對(duì)照，不進(jìn)行任何處置。B組由實(shí)驗(yàn)員進(jìn)行免疫，首免60天后，加強(qiáng)免疫；C組隨當(dāng)?shù)卮悍肋M(jìn)行免疫，首免60天后，加強(qiáng)免疫。免疫后10、20、30天采血，以后間隔20天采血，分離血清，參照豬瘟間接血凝抗體檢測(cè)試劑盒說明書中檢測(cè)方法測(cè)定血清抗體效價(jià)，每組抗體取平均值。選取母豬抗體合格的3窩仔豬，每隔7天采血，測(cè)定母源抗體消長規(guī)律。

3 結(jié)果與分析

由表1可知，A組作為空白對(duì)照組，未檢出陽性血清，試驗(yàn)有效；B組免疫10天后，即出現(xiàn)陽性豬群個(gè)體，1個(gè)月后陽性率達(dá)75%，加強(qiáng)免疫之后陽性率迅速上升，長期維持較高的陽性率；C組免疫10天后逐漸出現(xiàn)陽性個(gè)體，1個(gè)月后陽性率達(dá)63%，加強(qiáng)免疫后陽性率迅速上升并長期保持。比較B、C 2組實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，以相同的免疫劑量、注射方式，不同操作人員免疫結(jié)果出現(xiàn)了明顯的差異，B組首免后達(dá)到國家規(guī)定的70%的免疫抗體合格率，而C組首免后未達(dá)標(biāo)，直到加強(qiáng)免疫后2組免疫抗體陽性率才均達(dá)到100%。由以上分析結(jié)果可見，政府采購疫苗質(zhì)量能夠達(dá)到相關(guān)規(guī)定，但基層防疫工作人員操作過程可能存在不當(dāng)之處，最終導(dǎo)致免疫結(jié)果不合格。

表1 免疫后抗體變化規(guī)律

由表2可知，當(dāng)母豬抗體水平較高時(shí)，新生仔豬抗體陽性率能夠達(dá)到100%，隨著時(shí)間的推移，仔豬體內(nèi)母源抗體水平逐漸降低，4周后抗體水平呈直線下降，8周后完全消失。

表2 仔豬母源抗體消長規(guī)律

4 討論

通過上述實(shí)驗(yàn)并對(duì)2018年延安市個(gè)別縣區(qū)春季、秋季疫苗防疫現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查、查閱資料分析總結(jié)后得出，豬瘟免疫效果不佳主要是由基層防疫工作人員對(duì)豬群免疫狀況不了解，免疫劑量不足、攜帶和保存疫苗過程中效價(jià)降低、制定的免疫程序不合理、造成疫苗中和母源抗體等因素引起，這與南文金等[8-10]研究結(jié)果相似。

4.1 疫苗運(yùn)輸及操作因素

基層冷鏈運(yùn)輸基礎(chǔ)設(shè)施不夠完善，設(shè)施缺乏或損壞，有的超出使用年限，加之大部分基層防疫員學(xué)歷較低，對(duì)冷鏈運(yùn)輸保障疫苗質(zhì)量認(rèn)識(shí)不到位，難以確保疫苗效價(jià)和動(dòng)物免疫質(zhì)量。部分縣區(qū)雖然具備良好的疫苗冷藏、保存、運(yùn)輸能力，但防疫員一次性從庫房領(lǐng)取過多疫苗，使部分疫苗反復(fù)凍融，造成疫苗失效；部分農(nóng)村在實(shí)際免疫過程中，飼養(yǎng)員未在現(xiàn)場(chǎng)，而防疫員未充分了解豬群的健康狀況便開始免疫，部分豬群由于處在病理期而免疫失敗，研究表明藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病、附紅細(xì)胞體感染等免疫抑制病都會(huì)影響豬瘟疫苗的免疫效果。部分防疫員在免疫時(shí)未得到畜主的配合，保定豬只困難，注射方式、注射部位不合理，有時(shí)出現(xiàn)漏針導(dǎo)致免疫失敗；在防疫過程中為了圖省事兒，一次注射多種疫苗，且沒有合理的時(shí)間間隔，多種疫苗相互抑制，使抗體產(chǎn)生受到干擾；部分豬群由于免疫應(yīng)激，在免疫后采食量相應(yīng)下降，飼養(yǎng)員人為注射或在飼料中添加抗生素等藥物，從而影響免疫效果。

4.2 首免日齡及母源抗體的干擾

仔豬出生時(shí)缺乏的γ-免疫球蛋白完全通過初乳獲得，特異性母源抗體水平與母豬抗體滴度呈現(xiàn)正相關(guān)。母源抗體的被動(dòng)免疫對(duì)新生仔豬非常重要，但母源抗體水平過高時(shí)，也會(huì)與弱毒疫苗產(chǎn)生中和作用，從而嚴(yán)重影響疫苗的免疫效果。有研究表明，當(dāng)仔豬母源抗體滴度小于等于32時(shí)，接種保護(hù)效果最佳；而母源抗體滴度大于32時(shí)，就會(huì)影響疫苗的保護(hù)性免疫，導(dǎo)致免疫失敗[11-12]。由本文研究可知，1個(gè)月內(nèi)母源抗體處于較高水平，1個(gè)月后母源抗體迅速下降。也有試驗(yàn)表明：5周齡后免疫保護(hù)作用較3周齡高，5周齡后免疫保護(hù)作用逐漸升高[13]，建議仔豬的首免日齡應(yīng)選擇在40天以后，首免1個(gè)月后進(jìn)行加強(qiáng)免疫。