離子色譜法測定冰硼散中硫酸鈉和氯化鈉的含量

王艷偉，王曉偉，代雪平

（河南省食品藥品檢驗(yàn)所，河南 鄭州 450018）

冰硼散出自明代《外科正宗》一書，由冰片、硼砂（煅）、朱砂、玄明粉等四味藥組成。具有清熱解毒，消腫止痛的功效；用于熱毒蘊(yùn)結(jié)所致的咽喉疼痛，牙齦腫痛，口舌生瘡[1]?，F(xiàn)收載于中國藥典2015年版一部。玄明粉為芒硝經(jīng)風(fēng)化干燥制得，主含硫酸鈉。中國藥典2015年版一部規(guī)定，玄明粉含硫酸鈉不得少于99.0%。目前藥典對冰硼散中硫酸鈉的含量未作限量規(guī)定，本次國家藥品評價(jià)性抽驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，部分廠家的冰硼散中硫酸鈉含量較低，氯化鈉含量較高。本文采用離子色譜法測定冰硼散中硫酸根離子和氯離子的含量，為冰硼散的質(zhì)量控制提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Dionex ICS-5000離子色譜儀，ICS-5000 EG-5淋洗液發(fā)生器，AERS 500（4 mm）離子抑制器，CD-5000電導(dǎo)檢測器（美國賽默飛世爾公司）；XPE205電子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；Milli-Q Advantage A10超純水系統(tǒng)（美國密里博公司）；KQ-300VDE型雙頻數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器公司）。

1.2 試藥

硫酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液（美國AccuStandard公司，批號：216105152，質(zhì)量濃度：1000 μg/ml）；氯離子標(biāo)準(zhǔn)溶液（美國AccuStandard公司，批號：216065004，質(zhì)量濃度：1000 μg/ml）；冰硼散（來自15家生產(chǎn)企業(yè)，共26批）；水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Thermo Dionex IonPac AS11-HC離子交換色譜柱（250 mm×4 mm），Thermo Dionex IonPac AG11-HC保護(hù)柱（50 mm×4 mm）；淋洗液：氫氧化鉀溶液（30 mmol/L）；流速：1.0 ml/min；柱溫：30 ℃；陰離子抑制器，抑制電流75 mA；電導(dǎo)檢測器，電導(dǎo)池溫度：35 ℃；進(jìn)樣量：25 μl[2-7]。

2.2 溶液的制備

2.2.1 混合陰離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 取硫酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液、氯離子標(biāo)準(zhǔn)溶液，加水制成每1 ml中含硫酸根離子40 μg、氯離子20 μg的混合陰離子標(biāo)準(zhǔn)溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備 取本品約0.1 g，精密稱定，置入100 ml量瓶，加水適量，超聲處理（功率250 W，頻率30 kHz）10 min，放冷，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液2 ml，置入10 ml量瓶，加水至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.3 陰性對照溶液的制備 按照處方比例和工藝制備缺玄明粉的陰性樣品，同供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。

2.3 系統(tǒng)適用性和專屬性試驗(yàn)

取混合陰離子標(biāo)準(zhǔn)溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各25 μl，分別注入離子色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果見圖1。供試品溶液色譜中，在與硫酸根離子、氯離子色譜峰保留時(shí)間相同的位置上有相應(yīng)的色譜峰，且該色譜峰與相鄰的色譜峰有較好的分離度，陰性對照溶液無干擾。

圖1 離子色譜圖

2.4 線性試驗(yàn)

精密量取硫酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液、氯離子標(biāo)準(zhǔn)溶液各1，2，4，6，8，10 ml，分別置入100 ml量瓶，用去離子水稀釋至刻度，搖勻，配制成含硫酸根離子、氯離子均為 10.0，20.0，40.0，60.0，80.0，100 μg/ml的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，按2.1項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣分析[8-9]。以硫酸根離子和氯離子濃度（μg/ml）分別與其對應(yīng)的色譜峰面積進(jìn)行線性回歸，得硫酸根離子的回歸方程為：Y=0.2189X-0.3167（R=0.9997，n=6），線性范圍為10.0～100 μg/ml；氯離子的線性回歸方程為Y=0.2919X-0.0432（R=0.9998，n=6），線性范圍為10.0～100 μg/ml。

2.5 精密度試驗(yàn)

取2.2.1項(xiàng)下混合對照品溶液，按2.1項(xiàng)色譜條件連續(xù)進(jìn)樣 6 次，測定各離子的峰面積。結(jié)果硫酸根離子與氯離子峰面積的RSD分別為0.1%，0.2%（n=6）。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一批冰硼散制備的供試品溶液，分別在制備后第0，2，4，8，12，16，24 h進(jìn)樣測定，結(jié)果硫酸根離子和氯離子峰面積的RSD分別為0.3%，0.2%。表明供試品溶液在24 h內(nèi)各離子穩(wěn)定性良好。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批冰硼散6份，按2.2.2項(xiàng)方法制備供試品溶液，按2.1項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣測定。結(jié)果硫酸根離子和氯離子的平均含量分別為0.3087，0.0992 g/g，RSD分別為0.1%，0.2%。

2.8 檢測限和定量限

精密量取硫酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液、氯離子標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用去離子水逐級稀釋，按2.1項(xiàng)色譜條件分別注入離子色譜儀，結(jié)果檢測限（信噪比3:1）均為0.001 μg/ml，定量限（信噪比10:1）均為0.003 μg/ml[10-11]。

2.9 加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的同一批冰硼散（硫酸根離子含量0.3087 g/g，氯離子含量0.0992 g/g）0.05 g，共6份，精密加入硫酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液15 ml、氯離子標(biāo)準(zhǔn)溶液5 ml，按2.2.2項(xiàng)方法制備供試品溶液，按2.1項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣，測定回收率，結(jié)果見表1、表2。

表1 硫酸根離子回收率試驗(yàn)結(jié)果

表2 氯離子回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.10 樣品測定

按2.1項(xiàng)下色譜條件和供試品溶液制備方法，測定26批冰硼散中硫酸根和氯離子的含量，分別折算成硫酸鈉和氯化鈉的含量，結(jié)果見表3。

表3 冰硼散含量測定結(jié)果

3 討論

試驗(yàn)分別用25，30，35 mmol/L氫氧化鉀溶液為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，結(jié)果表明以35 mmol/L氫氧化鉀溶液為流動(dòng)相時(shí)，出峰時(shí)間提前，分離效果不理想；以25 mmol/L氫氧化鉀為流動(dòng)相時(shí)，分析時(shí)間延長，硫酸根離子峰形變寬，塔板數(shù)降低；當(dāng)洗脫濃度為30 mmol/L可達(dá)到基線分離，峰形良好。

試驗(yàn)分別考察了柱溫為25，30，35 ℃下供試品溶液的色譜，結(jié)果表明柱溫為35 ℃時(shí)，分析時(shí)間延長，硫酸根離子峰型變寬，塔板數(shù)降低；柱溫為25 ℃時(shí)，出峰時(shí)間提前，分離效果不理想；柱溫為30 ℃時(shí)可達(dá)到基線分離，峰形良好[12]。

冰硼散制法中各藥味均為為原粉入藥，根據(jù)處方量計(jì)算，成品每1 g中含玄明粉應(yīng)為0.45 g，折算成硫酸鈉應(yīng)為不得少于0.41 g。26批冰硼散樣品中硫酸鈉的含量為0.005～0.53 g/g，22批符合限度，4批不符合限度。5批樣品檢出氯化物，以氯化鈉計(jì)為0.19～0.44 g/g，為玄明粉理論值的42.2%～97.8%，提示部分企業(yè)玄明粉原料中雜質(zhì)氯化物含量過高，企業(yè)對原料未進(jìn)行嚴(yán)格質(zhì)量控制。