血漿與紅細胞懸液上清液中抗體效價及血漿蛋白的含量分析

(鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院 河南省兒童醫(yī)院 鄭州兒童醫(yī)院，河南 鄭州 45000)

ABO血型系統(tǒng)是一種常用血型評價標準，血型分類主要取決于紅細胞膜上特異性抗原類型，A型者體內(nèi)存在A型抗原，B型者體內(nèi)存在B型抗原，AB型者存在兩種抗原，而O型者體內(nèi)不存在A型或B型抗原，但對這兩種抗原產(chǎn)生抗體[1]。由于不同血型的血液可產(chǎn)生抗體抗原凝集反應(yīng)，因此臨床輸血之前，必須進行交叉配血試驗[2]。本研究通過分離獻血者的血漿和紅細胞懸浮液，比較二者的抗體效價和蛋白含量。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取河南省中心血站2016年12月～2017年5月期間無償獻血的180名獻血者作為研究對象。根據(jù)ABO血型分類，A型63例，男30例，女33例，平均年齡(30.6±7.7)歲。B型組59例，男29例，女30例，平均年齡(29.2±8.2)歲。O型組58例，其中男29例，女29例，平均年齡(28.8±8.5)歲，3組獻血者的例數(shù)、性別比例、年齡等基本資料無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。納入標準[3]：經(jīng)相關(guān)檢查為合格獻血者；簽署知情同意書。排除標準：貧血癥患者；合并血液傳播性疾??；妊娠期及哺乳期婦女。

1.2 方法

所有獻血者均采用一次性血樣采集器收集血樣，并使用ACD保養(yǎng)液抗凝過濾，之后將離心機溫度設(shè)置為4℃，離心力3 220 g，并將已收集的血液400 mL全血離心10 min，200 mL血液離心8 min。之后將分離出的血漿再次離心3次，每次8 min并留取標本進行備用。之后往濃縮的紅細胞懸濁液中添加紅細胞保存液并充分搖勻，保存，添加量約為全血總量的1/4。添加搖勻后，取已經(jīng)混合好的懸濁液4 mL進行再次離心，并分離出上清液進行備用。再選取10例A型或B型獻血人員的紅細胞進行混合、洗滌2次，以生理鹽水將上述A、B型紅細胞配成濃度為3%的紅細胞懸濁液進行備用。

抗體效價檢測方法因血型不同而有一定差異。對O型血漿抗體效價的檢測方法為:使用已經(jīng)進行編號的試管，分別在1、2號試管中各加入血漿2滴；之后從第二管開始進行一定的倍比稀釋，稀釋后在分別加入對應(yīng)的A、B血型紅細胞進行充分搖勻后放入離心機進行1分鐘離心。取出后觀察結(jié)果，以不發(fā)生凝集的前一管作為標準記為抗體效價。對A、B行血漿抗體效價的檢測方法與O型血液測定方法類似，差別在于，A型血漿中添加B細胞，B型血漿中添加A細胞，以不發(fā)生凝結(jié)的前一管作為標準記為抗體效價。

蛋白含量檢測如下[4,5]：白蛋白測定采用溴甲酚綠法，總蛋白含量采用雙縮脲法。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

本次研究采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 17.0進行分析，其中計量資料采用t檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗，多組間比較采用F檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 抗體效價評價結(jié)果(見表1)

表1 抗體效價評價結(jié)果比較

2.2 血漿蛋白含量分析(見表2)

表2 血漿蛋白含量分析 g/L

注：1)血漿與組內(nèi)紅細胞懸液中含量比較，P<0.05；2)白蛋白與組內(nèi)球蛋白水平比較，P<0.05

3 討論

ABO血型中的O型是指紅細胞表面上既不含A抗原，也不含B抗原的血型，即人們所說的“萬能血型”，被大量用于緊急情況下的匹配血液。但O型血者血漿中仍存在抗A、B、AB的抗體，若對患者進行大量輸血時，其上清液中的抗A、抗B輸送進入其他血型患者體內(nèi)后會引發(fā)不同程度的輸血不良反應(yīng)，因此大量輸血仍需要進行交叉配血試驗[6]。一般情況下，正常血液不存在不規(guī)則抗體，但由于一些特殊情況如妊娠、輸血、特殊免疫等則有可能產(chǎn)生不規(guī)則抗體，因此，目前國家在《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》中已明確規(guī)定，輸入全血、濃縮血紅細胞、紅細胞懸濁液、洗滌紅細胞等患者均需進行交叉配血；無要求進行血漿輸注的進行交叉配血實驗。我國已經(jīng)明確規(guī)定，對于血漿含量很少或者不含的紅細胞懸液必須經(jīng)過主側(cè)配血后方可使用，而免疫蛋白的含量也對排斥反應(yīng)有重要影響，因此，評價血漿與紅細胞懸液上清液中抗體的效價以及測定蛋白含量有利于判斷是否需進行主側(cè)和次側(cè)配血。本研究結(jié)果顯示，各血型的獻血者的血漿抗體效價明顯高于紅細胞懸液中抗體效價。同時，B型組獻血者血漿和紅細胞懸液中抗體效價均顯著低于A型組和O型組獻血者，另外，三種血型的獻血者血漿中球蛋白、白蛋白的含量均顯著高于紅細胞懸液中的蛋白含量，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)?？梢娤鄬τ谘獫{，紅細胞懸浮液更適合作為主側(cè)配血，這與趙敏[7]的研究成果一致。目前我國要求根據(jù)同型血輸注ABO型血液，血小板按照ABO同型輸注；對于單采血小板則不需考慮血型而優(yōu)先考慮是否與受血者紅細胞血型相和；而與之相反的冷沉淀則對ABO血型適合。對需要進行洗滌紅細胞和冰凍紅細胞的則不需要進行次側(cè)配血，這主要是由于在反復(fù)洗滌過程中，所有血漿蛋白和保存液均會被去除。這不僅能夠運用于緊急情況，更能夠在確保短時間完成作業(yè)的前提下有效節(jié)約資源。另外，還能考慮在進行全血和血小板進行交叉配血時進行主側(cè)及次側(cè)配血。

綜上所述，血漿紅細胞懸浮液的抗體效價明顯低于血漿，且蛋白含量較少，臨床交叉配血試驗中可作為主側(cè)配血。