脊柱結(jié)核不同技術(shù)與病理標本結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)及藥敏試驗對比

梁利斌

[摘要] 目的 比較研究脊柱結(jié)核BacT/ALERT3D法、改良羅氏培養(yǎng)法等不同技術(shù)與病理標本膿液、病灶壁等結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)及藥敏試驗結(jié)果，探討應用價值較高的技術(shù)和標本。 方法 2016年2月—2018年2月期間，方便選擇該院脊柱結(jié)核患者的病理標本作為資料，共96例，包含膿液、病灶壁，并進行結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)，分別采用BacT/ALERT3D法、改良羅氏培養(yǎng)法，并針對培養(yǎng)陽性細菌進行藥敏試驗，分析不同培養(yǎng)方法、不同病理組織標本的陽性率，并進行比較。結(jié)果 在BacT/ALERT3D法中，病理標本病灶壁培養(yǎng)結(jié)果陽性率45.09%顯著高于膿液陽性率28.98%（χ2=16.41，P<0.05），在改良羅氏培養(yǎng)法中，病理標本病灶壁培養(yǎng)結(jié)果陽性率31.27%顯著高于膿液陽性率16.24%（χ2=18.55，P<0.05），即不同病理標本培養(yǎng)結(jié)果均存在差異，且均以病灶壁陽性率最高（P<0.05）。 結(jié)論 與改良羅氏培養(yǎng)法相比，BacT/ALERT3D法檢出率更高，利于結(jié)核病的早期診治，其中病灶壁標本培養(yǎng)陽性率更高，應用價值相對更高，值得推廣應用。

[關(guān)鍵詞] 脊柱結(jié)核;病理標本;結(jié)核分枝桿菌;BacT/ALERT3D法、改良羅氏培養(yǎng)法

[中圖分類號] R5? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-0742（2019）01（a）-0026-03

當前對結(jié)核病診斷以結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)為主，但脊柱結(jié)核病理標本行結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)陽性率存在差異，因此需加強對最佳結(jié)果脊柱結(jié)核病理標本的研究，常見的脊柱結(jié)核病理標本包含膿液、肉芽組織及病灶壁[1]。此外不同結(jié)合桿菌培養(yǎng)方法也屬于影響陽性率的因素，如BacT/ALERT3D法、改良羅氏培養(yǎng)法的結(jié)果存在一定的差異，也需進行比較研究[2]。為此，該次研究對脊柱結(jié)核不同技術(shù)與病理標本結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)及藥敏試驗結(jié)果進行了探討，以2016年2月—2018年2月期間收治的96例為對象，報道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選擇該院行不同手術(shù)方式獲取的脊柱結(jié)核患者的病理標本作為資料，共96例，均經(jīng)臨床、影像學、組織病理學及實驗室相關(guān)檢查確診。96例患者中男性52例，女性44例，年齡在15～72歲之間，平均年齡為（38.61±2.45）歲，包含頸椎結(jié)核3例，胸椎結(jié)核34例，胸腰段結(jié)核26例，腰椎結(jié)核17例，腰骶部結(jié)核16例?；颊呔榍彝?，研究經(jīng)過倫理委員會批準。

1.2? 方法

96例患者采用不同手術(shù)方式獲取標本，采用無菌注射液吸取膿液，骨刀切取骨病灶，置于無菌平皿密封。

BacT/ALERT3D法：采用油酸、甘油、紫色燃料及1%牛血清蛋白組成10 mL復合溶液，在處理培養(yǎng)瓶中加入0.5 mL抗生素，接種經(jīng)中和或離心沉淀后標本0.5 mL，經(jīng)掃描確認后，置入BacT/ALERT3D全自動分支桿菌培養(yǎng)儀中，由儀器自動監(jiān)測，提示陽性后取出，陰性在儀器報告陰性后取出。改良羅氏培養(yǎng)法嚴格依據(jù)《結(jié)核病診斷細菌學檢驗規(guī)程》[3]操作。

將培養(yǎng)結(jié)果陽性的病灶組織依據(jù)《結(jié)核分枝桿菌藥物敏感試驗標準化操作程序及質(zhì)量保證手冊》[4]進行操作。

1.3? 統(tǒng)計方法

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)處理分析，計量數(shù)據(jù)采用平均數(shù)±標準差（x±s）表示，進行t檢驗，計數(shù)資料采用[n（%）]表示，進行χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2? 結(jié)果

2.1? 不同培養(yǎng)方法檢出陽性率比較

BacT/ALERT3D法檢出陽性率36.50%顯著高于改良羅氏培養(yǎng)法23.26%（χ2=24.67，P<0.05）。

2.2? 不同病理標本培養(yǎng)結(jié)果分析

在BacT/ALERT3D法中，病理標本病灶壁培養(yǎng)結(jié)果陽性率45.09%顯著高于膿液陽性率28.98%，在改良羅氏培養(yǎng)法中，病理標本病灶壁培養(yǎng)結(jié)果陽性率31.27%顯著高于膿液陽性率16.24%，即不同病理標本培養(yǎng)結(jié)果均存在差異，且均以病灶壁陽性率最高（P<0.05）。

3? 討論

目前在脊柱結(jié)核診斷中可采用BacT/ALERT3D法和改良羅氏培養(yǎng)法進行結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)，其中羅氏培養(yǎng)法培養(yǎng)基含有谷氨酸鈉，可為細菌提供多種營養(yǎng)物質(zhì)，且具有毒性低，補充無機鹽等優(yōu)勢，利于細菌的生長，可為大多數(shù)分支桿菌提供良好的環(huán)境[5-6]。改良羅氏培養(yǎng)法將丙酮酸鈉代替丙三醇，進一步促進牛分至桿菌和非洲分至桿菌的生長，利于進一步提高標本陽性率[7]。BacT/ALERT3D法屬于全自動非放射性的快速細菌培養(yǎng)系統(tǒng)，培養(yǎng)基中含有肉湯、油酸、甘油等成分，且其將牛血清代謝結(jié)合游離脂肪酸，起到保護結(jié)核分至桿菌的作用[8]。BacT/ALERT3D法主要是利用二氧化碳比色對結(jié)核分枝桿菌的生長情況進行顯示，當分支桿菌生長時，二氧化碳滲透至感應器，并改變感應器的酸堿度值，顏色會由深綠色變?yōu)辄S色，且可實現(xiàn)自動連續(xù)檢測[9]。該次研究結(jié)果顯示BacT/ALERT3D法檢出陽性率36.50%顯著高于改良羅氏培養(yǎng)法23.26%（P<0.05）;表明BacT/ALERT3D法檢出檢出價值更高，與改良羅氏培養(yǎng)法易受到標本采集、保存條件及實驗操作等因素影響相比，其具有操作簡單、結(jié)果準確等優(yōu)勢，利于為結(jié)核病的早期診治提供可靠依據(jù)。脊柱結(jié)核存在菌量多、毒力強等特征，會表現(xiàn)出漿液性或漿液纖維蛋白性炎，并經(jīng)過一系列病理變化形成結(jié)核性肉芽及干酪樣壞死物，伴隨大量的結(jié)核桿菌。該次研究結(jié)果顯示在BacT/ALERT3D法中，病理標該病灶壁培養(yǎng)結(jié)果陽性率45.09%顯著高于膿液陽性率28.98%（χ2=16.41，P<0.05），在改良羅氏培養(yǎng)法中，病理標本病灶壁培養(yǎng)結(jié)果陽性率31.27%顯著高于膿液陽性率16.24%（χ2=18.55， P<0.05），即不同病理標本培養(yǎng)結(jié)果均存在差異，且均以病灶壁陽性率最高（P<0.05），表明膿液是壞死組織，里面的結(jié)核桿菌較少，而病灶壁則具有一定的優(yōu)勢。與孫宇航等[12]《脊柱結(jié)核不同技術(shù)與病理標本結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)及藥敏試驗的比較》結(jié)果，Bac T/ALERT 3D法和改良羅氏培養(yǎng)法培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌的陽性率分別為32.82%和20.99%。兩者比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;Bac T/ALERT3D法中膿液、肉芽組織、病灶壁3種標本的陽性率分別為34.17%、23.08%、15.58%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;改良羅氏培養(yǎng)法中上述3種標本的陽性率分別為26.13%、12.43%、5.84%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）”基本一致。

綜上所述，為實現(xiàn)結(jié)核病的早期應選擇病灶壁標本培養(yǎng)，并采用BacT/ALERT3D法，具有陽性率高的優(yōu)勢，值得推廣。

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（收稿日期：2018-10-13）