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    高效液相色譜法測定林可霉素利多卡因凝膠中鹽酸利多卡因含量

    2019-03-26 04:21:36歐陽曉玫牟建平滕寶霞賀曉文
    分析測試技術(shù)與儀器 2019年1期
    關(guān)鍵詞:林可霉素硼砂利多卡因

    歐陽曉玫,牟建平,滕寶霞,賀曉文

    (甘肅省藥品檢驗研究院,甘肅 蘭州 730050)

    林可霉素利多卡因凝膠是由鹽酸林可霉素、鹽酸利多卡因組成的復(fù)方制劑,曾用名綠藥膏,主要用于外科燒傷及蚊蟲叮咬引起的各種皮膚感染,在我國廣泛使用. 2002年收載于《化學(xué)藥品地標(biāo)升國標(biāo)第2冊》,國外藥典無收載,現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中未對鹽酸利多卡因的含量進(jìn)行控制[1],因此,該制劑的質(zhì)量和療效無法得到有效保證. 本文參照相關(guān)文獻(xiàn)[2-5],采用高效液相色譜法測定凝膠中鹽酸利多卡因的含量,建立的方法操作簡單易行,符合《中國藥典》2015年版檢測要求,排除了樣品中凝膠基質(zhì)和其他雜質(zhì)干擾,并考察了全國10家生產(chǎn)企業(yè)214批次樣品中鹽酸利多卡因的含量.

    1 試驗部分

    1.1 儀器與試劑

    高效液相色譜儀(日立Chromaster5430型,帶DAD檢測器);酸度計(梅特勒,型號:FE28);電子天平(梅特勒精密電子天平,型號:DU205). 利多卡因?qū)φ掌?來源:中國食品藥品檢定研究院,批號:100342-201304,質(zhì)量分?jǐn)?shù):99.8%);甲醇(LiChrosolv,色譜純);乙腈(LiChrosolv,色譜純);四硼酸鈉(國藥集團(tuán),優(yōu)級純);磷酸(科密歐,分析純). 林可霉素利多卡因凝膠為國家評價性抽檢樣品.

    1.2 色譜條件

    色譜柱:Agilent 5 Tc-C18(2)柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動相:0.05 mol/L硼砂溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值至6.0)-甲醇-乙腈(體積比為68∶19∶13);流速:1.0 mL/min;檢測波長:214 nm;柱溫:30 ℃;進(jìn)樣量:20 μL.

    1.3 對照品溶液的配制

    準(zhǔn)確稱取利多卡因?qū)φ掌?.016 0 mg置100 mL容量瓶中,用0.05 mol/L硼砂溶液溶解并稀釋至刻度,搖勻備用.

    準(zhǔn)確稱取利多卡因?qū)φ掌?.024 06 g置100 mL量瓶中,用0.05 mol/L硼砂溶液溶解稀釋至刻度,搖勻,作為對照儲備液,該溶液質(zhì)量濃度為240.6 μg/mL. 取20 μL進(jìn)樣,所得色譜圖如圖1(a)所示.

    1.4 供試品溶液的配制

    稱取樣品4 g置于燒杯中,加入少量0.05 mol/L硼砂溶液,用玻璃棒充分?jǐn)嚢枋蛊浞稚⒕鶆虿⑷芙夂?,轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中,加0.05 mol/L硼砂溶液稀釋至刻度,搖勻備用. 該溶液過濾后取20 μL進(jìn)樣測定,所得色譜圖如圖1(b)所示.

    圖1 利多卡因液相色譜圖Fig. 1 Chromatogram of lidocaine liquid

    2 結(jié)果與討論

    2.1 流動相的選擇

    林可霉素利多卡因凝膠是水性凝膠劑,水性凝膠基質(zhì)大多在水中溶脹成水性凝膠而不溶解. 選用磷酸鹽緩沖液溶解樣品,結(jié)果林可霉素利多卡因凝膠樣品分散不均一、溶解較差. 選取0.05 mol/L硼砂溶液溶解樣品,結(jié)果林可霉素利多卡因凝膠樣品中凝膠基質(zhì)干擾小,樣品溶解性較好.

    2.2 系統(tǒng)適用性試驗

    色譜柱的理論板數(shù)、分離度、重復(fù)性符合“高效液相色譜法”(中國藥典2015年版四部通則0512)項下的要求. 理論板數(shù)按利多卡因峰計算不低于2 000,待測峰與其它峰的分離度應(yīng)不小于1.5.

    2.3 重復(fù)性

    分別精密吸取利多卡因?qū)φ掌啡芤?0 μL,按上述色譜條件測定,各進(jìn)樣6次,測定峰面積積分值,利多卡因?qū)φ掌啡芤旱腞SD為0.60%.

    2.4 線性關(guān)系

    分別量取對照儲備液適量,用0.05 mol/L硼砂溶液稀釋成質(zhì)量濃度為40.1、80.2、120.3、160.4、200.5、240.6 μg/mL的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液,按“1.2”節(jié)色譜條件進(jìn)樣測定,以質(zhì)量濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果如圖2所示. 曲線方程:y=62 964x+69 467,r=0.999 4. 結(jié)果表明,在40.1 ~240.6 μg/mL之間與峰面積呈良好線性關(guān)系.

    圖2 利多卡因標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig. 2 Standard curve of lidocaine

    2.5 精密度試驗

    取質(zhì)量濃度為160.4 μg/mL的對照溶液,按“1.2”節(jié)色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次,結(jié)果其峰面積的RSD為0.5%,表明本文所建立的方法具有較好的精密度.

    2.6 回收率試驗

    準(zhǔn)確吸取1.00 mL樣品各3份,分別置于50 mL量瓶中,加入質(zhì)量濃度為160.4 μg/mL的利多卡因?qū)φ諆湟?.4、0.5、0.6 mL,用0.05 mol/L硼砂溶液稀釋至刻度,搖勻,按“1.2”節(jié)色譜條件進(jìn)樣測定,計算回收率,結(jié)果如表1所列. 由表1可見,平均回收率為97.6%,表明加樣回收率良好.

    2.7 鹽酸利多卡因含量測定

    根據(jù)建立的含量測定方法,對我院承擔(dān)的國家評價性抽檢品種林可霉素利多卡因凝膠的214批次樣品中鹽酸利多卡因含量進(jìn)行測定,結(jié)果214批次樣品中鹽酸利多卡因含量分布在84.0%~101.5%之間,平均值93.9%(n=214),結(jié)果如圖3所示. 制劑中鹽酸利多卡因的含量基本呈正態(tài)分布,部分批次的含量較低,說明部分生產(chǎn)企業(yè)對鹽酸利多卡因投料及工藝控制不理想.

    圖3 214批次樣品鹽酸利多卡因含量的頻數(shù)分布圖Fig. 3 Frequency distribution of 214 batches of lidocaine hydrochloride

    3 結(jié)論

    本文采用高效液相色譜法測定林可霉素利多卡因凝膠中鹽酸利多卡因的含量,建立了鹽酸利多卡因的含量測定方法. 通過建立的方法對國家評價性抽檢的10家生產(chǎn)企業(yè)的214批次林可霉素利多卡因凝膠中鹽酸利多卡因的含量進(jìn)行測定,結(jié)果發(fā)現(xiàn)部分企業(yè)生產(chǎn)的制劑中鹽酸利多卡因的含量較低,制劑的質(zhì)量和療效未得到有效保證.

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