過氧乙酸對神仙魚小瓜蟲病的治療實(shí)驗(yàn)

區(qū)超華 鐘楚俊 賀順連

摘?要：為了減輕小瓜蟲病對觀賞魚養(yǎng)殖的嚴(yán)重危害，試驗(yàn)選擇過氧乙酸對七彩神仙魚進(jìn)行殺滅小瓜蟲的有效性試驗(yàn)，在此基礎(chǔ)上再進(jìn)行過氧乙酸對神仙魚急性毒性試驗(yàn)，并在安全濃度下對患有小瓜蟲病的神仙魚進(jìn)行治療試驗(yàn)。結(jié)果顯示：過氧乙酸對七彩神仙魚的安全濃度為8.55 mg/L，過氧乙酸在神仙魚安全濃度內(nèi)對小瓜蟲的幼蟲和包囊都具有較好的殺滅效果，過氧乙酸濃度在4.26～8.55 mg/L的治愈率達(dá)70%。

關(guān)鍵詞：七彩神仙魚;小瓜蟲病;過氧乙酸;有效性;急性毒性;治療試驗(yàn)

多子小瓜蟲（Ichthyophthirius marinus）屬原生動物門，小瓜蟲屬，主要寄生在體表和鰓，形成肉眼可見的白色小點(diǎn)狀胞囊[1]。小瓜蟲廣泛分布各大水域，感染淡水魚類、海水魚類和兩棲動物，感染力強(qiáng)，病程急，容易在春末夏初和夏秋交替季節(jié)突發(fā)，造成繼發(fā)感染和交叉感染，對養(yǎng)殖業(yè)尤其是觀賞魚養(yǎng)殖帶來嚴(yán)重的危害[2-7]。

被稱之為“熱帶魚之后”的神仙魚[8]，是熱帶觀賞魚家族的主要成員之一，深受廣大觀賞魚愛好者喜歡。但神仙魚經(jīng)常受到小瓜蟲病的危害，給養(yǎng)殖生產(chǎn)造成了較大的經(jīng)濟(jì)損失。目前有些藥物對殺滅離體的小瓜蟲取得了較好的療效[9-15]，但對于小瓜蟲病的防治仍以化學(xué)藥物防治為主[2-7、16]，能殺滅神仙魚身上的小瓜蟲的藥物和試驗(yàn)暫未見報道。

過氧乙酸對不同發(fā)育時期的離體小瓜蟲及包囊都有一定的殺滅作用[17]。而過氧乙酸既是良好氧化劑，又是廣譜、高效、速效、廉價的滅菌劑，具備增氧、殺菌、殺蟲、抑藻、改善水質(zhì)等多種作用，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中已有一定應(yīng)用[18]。因此我們選擇了過氧乙酸對神仙魚進(jìn)行殺滅小瓜蟲的有效性試驗(yàn)，在此基礎(chǔ)上再進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)，并在安全濃度下對患有小瓜蟲病的神仙魚進(jìn)行治療試驗(yàn)。

1?材料

1.1?實(shí)驗(yàn)材料

試驗(yàn)藥劑：天津福晨化學(xué)試劑廠生產(chǎn)的過氧乙酸，按照說明書A液和B液（1：1）混合均勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。試驗(yàn)魚為七彩神仙魚，購自廣州芳村花鳥蟲魚市場，平均體重為1.7 g，全長約為4～5 cm，試驗(yàn)魚暫養(yǎng)7 d，待適應(yīng)環(huán)境且確認(rèn)健康無疾病后用于試驗(yàn)。

1.2?實(shí)驗(yàn)用具

塑料方形桶（長59 cm，寬49 cm，高40 cm），增氧機(jī)，過濾泵，溫度計(jì)、飼料、25目撈網(wǎng)，燒杯，量筒、廣口瓶、注射器等。

2?實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1?過氧乙酸對小瓜蟲有效性預(yù)試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)殖的的5 cm左右的金魚魚體和鰓部均有白點(diǎn)，病魚食欲減退，活動能力較弱，相繼出現(xiàn)死亡，鏡檢后發(fā)現(xiàn)符合小瓜蟲形態(tài)特征。取10尾已感染小瓜蟲的金魚和250尾健康神仙魚混養(yǎng)?；祓B(yǎng)7 d后，可觀察到所有魚的魚鰓、體表皆有白點(diǎn)，同時分泌大量黏液，活動能力減弱，攝食量減少，符合小瓜蟲病的特征，并隨機(jī)取樣進(jìn)行鏡檢，可見小瓜蟲活蟲蟲體，表明所有試驗(yàn)魚均感染小瓜蟲病，且原用作感染用的病魚已經(jīng)死亡。

將感染了小瓜蟲的七彩神仙魚放入待試藥液中，藥液濃度參考趙飛等[17]所使用劑量，按等對數(shù)間距設(shè)計(jì)5個梯度濃度。試驗(yàn)魚飼養(yǎng)在塑料方形桶，每桶放曝氣自來水50 L，每桶隨機(jī)放入30尾已感染小瓜蟲的七彩神仙魚，試驗(yàn)期間水溫20.5～23℃，曝氣自來水pH值7.4，溶解氧4～5 mg/L。記錄觀察各組試驗(yàn)魚的行為及死亡等效應(yīng)。試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。

2.2?過氧乙酸對神仙魚的急性毒性試驗(yàn)

制定過氧乙酸對七彩神仙魚的急性毒性試驗(yàn)濃度梯度，根據(jù)預(yù)試驗(yàn)初步確定七彩神仙魚全死和全活的濃度范圍，按等對數(shù)間距設(shè)計(jì)5個梯度濃度試驗(yàn)組和一個空白對照組[19]。隨機(jī)取200尾七彩神仙魚，每個處理隨機(jī)放20尾七彩神仙魚，實(shí)驗(yàn)條件為曝氣自來水pH值7.2～7.4，水溫控制在23～24 ℃，溶解氧4～5 mg/L，采用半靜態(tài)喂食試驗(yàn)法，每24 h更換一次藥液，觀察記錄各組試驗(yàn)魚的中毒行為、癥狀及死亡率，試驗(yàn)時間96 h，試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。計(jì)算過氧乙酸對神仙魚的半致死濃度LC50和安全濃度SC：實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示。

TLm（LC50）的求算用改良寇氏法又稱Krber 法。

Xm：最大劑量組劑量的對數(shù)值。i：相鄰兩組劑量（d）對數(shù)值之差，或相鄰兩組高劑量與低劑量之比的對數(shù)。P：各組動物的死亡率，用小數(shù)表示。ΣP：為各組動物死亡率的總和。n：每組動物數(shù)。Sx50：logLC50的標(biāo)準(zhǔn)誤。SC50：安全濃度。

2.3?過氧乙酸對神仙魚小瓜蟲病治療試驗(yàn)

用25目自制手抄網(wǎng)從水中采取蟲體，或魚體表病灶上采取病原體，在顯微鏡下進(jìn)行觀察，根據(jù)觀察結(jié)果確定小瓜蟲的發(fā)育階段和感染強(qiáng)度。實(shí)驗(yàn)條件;曝氣自來水pH值7.2～7.4，水溫控制在23～24℃，溶解氧4～5 mg/L。試驗(yàn)結(jié)果如下表4所示。

3?結(jié)論和分析

3.1?過氧乙酸對小瓜蟲有效性預(yù)試驗(yàn)

根據(jù)表1可知，空白對照組的試驗(yàn)魚在24 h內(nèi)就全部死亡，而其他不同過氧乙酸濃度組在96 h內(nèi)都還有部分試驗(yàn)魚存活，除藥液濃度為1.6 mg/L組，其他高濃度組的在2個月后仍有部分試驗(yàn)魚存活，且死亡數(shù)并沒有出現(xiàn)明顯增加，表明過氧乙酸對治療小瓜蟲是有效果的，也保證后面的試驗(yàn)是有意義的。

3.2?過氧乙酸對神仙魚的急性毒性試驗(yàn)

根據(jù)表3可知，過氧乙酸對七彩神仙魚的安全濃度為8.55 mg/L，用過氧乙酸治療患病的七彩神仙魚時，藥液濃度不可大于安全濃度8.55 mg/L，否則會危害到魚也會影響水環(huán)境。

3.3?過氧乙酸對神仙魚小瓜蟲病治療試驗(yàn)

根據(jù)表4，試驗(yàn)開始12 h后，1組（8.55 mg/L）、2組（4.26 mg/L）、3組（2.14 mg/L）中可用肉眼觀察到實(shí)驗(yàn)魚體表白點(diǎn)變淡。24 h后1組（8.55 mg/L）、2組（4.26 mg/L）、3組（2.14 mg/L）實(shí)驗(yàn)魚體表白點(diǎn)消失，4組（1.07 mg/L）實(shí)驗(yàn)魚體表白點(diǎn)變淡。5組（0.55 mg/L）一尾魚出現(xiàn)死亡，對照組兩尾魚出現(xiàn)死亡。36 h后1組（8.55 mg/L）、2組（4.26 mg/L）、3組（2.14 mg/L）、4組（1.07 mg/L）均無異?，F(xiàn)象，5組（0.55 mg/L）及對照組，實(shí)驗(yàn)魚全部死亡，鏡檢后1.2.3.4.組雖觀察到小瓜蟲蟲體，但纖毛不動，確認(rèn)已死亡。在5組及對照組中，發(fā)現(xiàn)大量游動小瓜蟲。在安全濃度下，治療效果與藥液濃度呈正比。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，過氧乙酸在神仙魚安全濃度內(nèi)對小瓜蟲的幼蟲和包囊都具有較好的殺滅效果，治愈率達(dá)70%。

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