健康體檢婦女子宮頸人乳頭瘤病毒感染情況分析

郭金鳳 王春霞 孟茜 徐燦

宮頸癌屬于比較常見的一種惡性腫瘤疾病，對婦女生命安全會造成嚴重威脅，需加強重視。從相關研究報道中看出，近幾年我國宮頸癌及其癌前病變發(fā)生率有所升高，且呈現(xiàn)年輕化趨勢，其中高危型子宮頸人乳頭瘤病毒（HPV）感染且持續(xù)反復發(fā)作，當屬造成婦女宮頸癌與子宮頸上皮內(nèi)瘤樣變的主要因素[1]?；诖?，針對健康體檢婦女積極做好HPV感染篩查十分關鍵，一旦檢出HPV感染陽性者，應進一步明確診斷，積極處理，避免病情惡化，進展為子宮頸癌[2]。宮頸癌初篩在婦科健康管理工作中成為重點，盡早發(fā)現(xiàn)與治療癌前病變，對于避免宮頸癌發(fā)生十分關鍵[3]。為了進一步探討健康體檢婦女子宮頸人乳頭瘤病毒感染情況，以便為臨床診治提供依據(jù)，濟寧醫(yī)學院附屬醫(yī)院就2015年1月—2017年12月健康體檢婦女檢出的80例HPV感染患者進行了回顧性分析，將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2015年1月—2017年12月健康體檢婦女1 000多例，共計檢出子宮頸人乳頭瘤病毒感染80例，將這80例作為研究對象，入組對象有完整資料，年齡18～60歲，愿意配合研究，且均有性生活史1年以上，近期3個月無宮頸細胞學檢查與陰道鏡檢查，也無全宮切除術史或?qū)m頸錐切史，近期3個月未應用性激素，同時排除妊娠期或哺乳期、不愿意配合研究、近期應用性激素及影響相關結果的檢查患者。80例患者中年齡最小18歲、最大60歲，均值（38.1±2.2）歲；未婚19例、已婚61例。

1.2 方法

所有對象均接受宮頸細胞學檢查，嚴格按照HPV21分型檢測標準操作執(zhí)行，具體如下：

1.2.1 樣本采集 收集女性宮頸脫落細胞，宮頸刷伸入宮頸口，順時針旋轉3～5圈，慢慢取出宮頸刷，放入有細胞保存液的樣本管，刷頭留于樣本管，取樣后將蓋子蓋上。

1.2.2 擴增試劑準備 從保存在-20℃試劑盒中取出PCR 預混液（Power SYBR Green PCR MasterMix），置于4℃避光緩慢解凍，顛倒混合均勻，經(jīng)離心處理。把Taq酶加入PCR 預混液中，潤洗2次，確保Taq酶盡量多的進入PCR 預混液。充分震蕩混勻，經(jīng)離心處理后備用。

1.2.3 提取宮頸脫落細胞DNA 按試劑說明書進行宮頸脫落細胞DNA提取。提取的DNA純度（A260/280）應達到1.7～2.0，且DNA的濃度≥3 ng/μL。

1.2.4 PCR擴增 將雜交檢測試劑溫度平衡至室溫，雜交液預熱45℃，觀察NBT/BCIP當中有無存在紫色或者藍色沉淀，若出現(xiàn)沉淀需更換并準備新鮮的NBT/BCIP溶液；同時觀察溶液B當中是否存在沉淀，若存在沉淀則加熱至45 ℃將沉淀溶解后平衡溫度至室溫，擴增儀器升溫至45 ℃；反應室內(nèi)充滿蒸餾水，置入金屬多孔板并排除板上面水分，排空氣體并檢查多孔板和反應室是否保持聯(lián)通；雜交膜置于塑料膜對應孔，PCR擴增操作按儀器說明書進行。

1.2.5 雜交 將PCR產(chǎn)物預熱后，立即進行冰水浴2 min，確保PCR產(chǎn)物保持單鏈結構。將雜交液加入到雜交孔中，進行預熱處理至45℃，再泵出，保證孔內(nèi)無氣泡；雜交后應用45℃的雜交液沖洗塑料膜3次，保證將未雜交的部分標本排出。清洗過程保證將多余的酶標液以及顯色液清洗干凈，以避免檢測結果出現(xiàn)假陽性。

1.3 統(tǒng)計學處理

本研究應用SPSS 22.0處理數(shù)據(jù)，采取百分比（%）表示計數(shù)資料，實施χ2檢驗， P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 對不同年齡段婦女HPV檢出情況比較分析

從年齡段HPV感染檢出率來看，80例患者中25～34歲最多，其次為35～44歲、＞44歲、＜25歲，且25～34歲檢出率明顯高于＜25歲，數(shù)據(jù)見表1。

2.2 對不同HPV感染分型陽性率結果分析

從HPV感染分型陽性率結果分析來看，HR型有48例（以HR16、33、52、58型為主）、LR型有22例（以LR6、11、42型為主）、其他10例，數(shù)據(jù)見表2。

表1 比較分析不同年齡段婦女HPV檢出率情況

表2 本組不同HPV感染分型陽性率結果情況

表3 不同年齡段HPV感染分型結果對比分析

2.3 不同年齡段HPV感染分型結果比較分析

從不同年齡段HPV感染分型檢出結果來看，不同年齡段檢出分型結果差異無統(tǒng)計學意義（ P＞0.05），數(shù)據(jù)見表3。

3 討論

宮頸癌作為婦科最為常見的一種惡性腫瘤疾病，其發(fā)病率在婦科惡性腫瘤疾病中僅次于乳腺癌，高居第二位[4]。據(jù)不完全統(tǒng)計顯示，全球每年新發(fā)宮頸癌病例接近50萬，而死亡例數(shù)則高達27萬[5]。我國作為人口大國，每年因?qū)m頸癌死亡的病例在全球占了10%，而且呈現(xiàn)逐年升高趨勢[6]，需加強重視。隨著相關研究增多，在一些研究中證實宮頸癌主要的高危因素之一為子宮頸人乳頭瘤病毒感染，大約有90%以上宮頸癌患者出現(xiàn)HPV感染情況[7]。HPV類型較多，目前已知的亞型高達120種，而且16、18、31等亞型在50%以上宮頸癌患者中能檢出，成為宮頸癌發(fā)病最為主要的亞型因子[8-12]。此外，不同的地區(qū)，HPV感染類型也可能不同[13-15]，這就需要具體地區(qū)具體對待。

為了進一步探討健康體檢婦女子宮頸人乳頭瘤病毒感染的情況，以便為臨床提供依據(jù)[16-18]，我院就2015—2017年間檢出的80例子宮頸人乳頭瘤病毒感染患者實施了回顧性分析。在本次研究中所有入選對象最終明確診斷，從年齡段HPV感染檢出率來看，80例患者中25～34歲最多，其次為35～44歲、＞44歲、＜25歲，且25-34歲檢出率明顯高于＜25歲；從HPV感染分型陽性率結果分析來看，HR型有48例（以HR16、33、52、58型為主）、LR型有22例（以LR6、11、42型為主）、其他10例；從不同年齡段HPV感染分型檢出結果來看，不同年齡段檢出分型結果差異無統(tǒng)計學意義（ P＞0.05）。盡管宮頸癌組織中99.7%可能檢出高危型HPV，但并非所有HPV亞型都可能造成宮頸癌發(fā)生，而6型與11型通常被認為是誘發(fā)生殖器尖銳濕疣主要危險因素，傳染性高，但極少會誘發(fā)癌變。結合相關文獻及臨床實踐，一般情況下HPV高危亞型16、33、58、52、31、35等可能和宮頸癌密切相關，在本次研究中也有驗證。此外，在本次研究中看出，HPV感染有一個高發(fā)年齡段，在年齡段之外的發(fā)病率不高，但依舊不容忽視[19-21]。25-34歲在本次研究中屬于高發(fā)年齡段之首，其次為35～44歲，為此應做好育齡期女性的健康體檢，積極做好HPV感染檢查，盡早檢出HPV感染相關疾病，針對性治療。

綜上所述，健康體檢婦女子宮頸人乳頭瘤病毒感染較多，且年齡25～34歲中檢出率較高，常見類型為高危型HPV-16、33、52、58型，為此應重點加強30歲左右婦女特異性高危HPV DNA檢測，及時篩查出HPV感染病例，并積極處理，才能更好地預防子宮頸癌發(fā)生。