新生兒血液白細(xì)胞參考區(qū)間的建立與驗證

618000德陽市第二人民醫(yī)院，四川 德陽

通過血液白細(xì)胞檢測來輔助診斷臨床患者的疾病狀況，是臨床最常用的診治技術(shù)手段之一。在新生兒這個特殊年齡段，白細(xì)胞水平變化巨大，需建立詳細(xì)參考區(qū)間。我們按照國際化學(xué)委員會提出的實驗室生物參考區(qū)間的建立方法和要求[1]，組織實施了新生兒白細(xì)胞正常參考值的調(diào)查和驗證分析，通過2011年-2017年收集的大量正常新生兒靜脈血樣白細(xì)胞(WBC)數(shù)據(jù)，建立新生兒本地區(qū)-各日齡段的WBC參考區(qū)間，并驗證評價其診斷效率。

資料與方法

檢測硬件體系：檢測設(shè)備包含SYSMEX XN-B1、 SYSMEX XN-1000、SYSMEX XN-350、SYSMEX 1800全自動血細(xì)胞分析儀。

質(zhì)量保證體系：采用設(shè)備生產(chǎn)商配套檢測試劑組成完整的檢測體系，Bio-Rad三水平質(zhì)控物進(jìn)行日常質(zhì)量控制[2]，并用EP9-A2規(guī)范進(jìn)行設(shè)備間的檢測一致性控制。

數(shù)據(jù)來源：①正常新生兒血樣本的選取：2011年10月-2017年10月收治出生時Apgar評分[3]的新生兒、28 d內(nèi)自愿參調(diào)新生兒，均無感染、無過敏、無血液系統(tǒng)相關(guān)疾病等顯著影響血細(xì)胞成分與形態(tài)的其他疾病，動員其監(jiān)護(hù)人同意并簽署血樣采集知情告知書；在其監(jiān)護(hù)人的允許下采集其靜脈血樣或末梢血樣，立即免費(fèi)送檢且60 min內(nèi)完成檢測。②正常新生兒白細(xì)胞數(shù)據(jù)選取：對上述樣本的檢測結(jié)果，經(jīng)數(shù)據(jù)質(zhì)量審核符合后，向醫(yī)生和參與者發(fā)送檢測報告，并按靜脈血和末梢血分類匯總整理。

驗證數(shù)據(jù)：2017年10月-2018年1月收治就診的新生兒血液白細(xì)胞數(shù)據(jù)。參照WS/T405-2012行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)完成參考區(qū)間的效能驗證。

結(jié) 果

將有效靜脈血樣數(shù)據(jù)4 106例繪制成直方圖，按正態(tài)分布數(shù)據(jù)的參考區(qū)間估計方案，得到新生兒白細(xì)胞參考值區(qū)間(4.57～17.8)×109/L。

整理后的數(shù)據(jù)導(dǎo)入SPSS 19.0軟件做Kolmogorov-Smirnov統(tǒng)計分析，其漸進(jìn)顯著性sig.=0.00(P＜0.01)，提示該數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布，上述正態(tài)分布數(shù)據(jù)法評估的參考區(qū)間結(jié)果應(yīng)被質(zhì)疑，須采用百分位數(shù)法估計其參考區(qū)間[3]。利用SPSS 19.0的百分位數(shù)法分析功能，得到P5=6.28和P95=17.4，即0～28 d新生兒白細(xì)胞參考值區(qū)間為(6.28～17.4)×109/L，見表1。

診斷效率驗證：①參考區(qū)間確定方法的符合性：隨訪30位兒科醫(yī)生對百分位數(shù)法所得的白細(xì)胞參考區(qū)間的接受率為96.7%，初步確認(rèn)百分位數(shù)法評估的新生兒WBC參考區(qū)間具有合理性。即上述分析結(jié)果(6.28～17.4)×109/L可作為0～28 d新生兒白細(xì)胞正常參考值。②參考區(qū)間的診斷效率：隨機(jī)選擇臨床病例，將其臨床診斷結(jié)論與依據(jù)該參考區(qū)間的判定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析，結(jié)果該新生兒WBC參考區(qū)間的診斷敏感度85.1%，診斷特異性85.4%，臨床診斷符合率可達(dá)到85.2%，滿足臨床檢驗輔助診斷指標(biāo)工作效率要求。

數(shù)據(jù)價值的再利用：①數(shù)據(jù)的分組分析：將收集到的數(shù)據(jù)按照新生兒日齡做多層分組統(tǒng)計，以找到比0～28 d新生兒組更有診斷效率的WBC參考區(qū)間。其分組信息和統(tǒng)計分析結(jié)果匯總，見表2。

由表2可見：0～28 d新生兒WBC數(shù)據(jù)應(yīng)細(xì)分為(0，3)d和(3，21)d等數(shù)據(jù)組進(jìn)行進(jìn)一步分析，分別計算其參考區(qū)間。同時加入性別因素對參考區(qū)間的影響，見表3。

分組參考區(qū)間的診斷效率驗證：隨機(jī)選擇新生兒WBC檢測值并參照臨床診斷結(jié)論，對上述WBC的參考區(qū)間進(jìn)行驗證分析。結(jié)果顯示：相較0～28 d數(shù)據(jù)組，各分組參考區(qū)間的診斷效率均有一定程度的提高，見表4。

表2 0～28 d新生兒WBC數(shù)據(jù)分組統(tǒng)計分析匯總表

表3 新生兒0～28 d白細(xì)胞數(shù)據(jù)的分組參考區(qū)間統(tǒng)計

表4 分組新生兒白細(xì)胞參考值區(qū)間的診斷效能統(tǒng)計表

討 論

通過對正常新生兒白細(xì)胞數(shù)值的調(diào)查分析，和對分組正常參考區(qū)間的臨床診斷效率驗證，得到(0，28)d新生兒組白細(xì)胞正常參考值(6.28～17.4)×109/L。其中，(0，3)d新生兒組白細(xì)胞正常參考值(6.67～19.0)×109/L；(3，21)d男性新生兒組白細(xì)胞正常參考值(5.59～12.4)×109/L，(3，21)d女性新生兒組白細(xì)胞正常參考值(6.47，16.7)×109/L。各參考區(qū)間的臨床診斷效率均＞85%。

對新生兒這個特殊年齡段的白細(xì)胞參考值進(jìn)行研究，以更多地為臨床醫(yī)生和患者提供有效的輔助診斷依據(jù)。本研究將0～28 d日齡的無感染疾病和無血液疾病的新生兒作為調(diào)查對象。并通過數(shù)據(jù)的分組分析，得到新生兒(0，3)、(3，21)和(21，28)d WBC數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學(xué)意義。出生≤6 h組和出生≤24 h組的新生兒白細(xì)胞數(shù)據(jù)差異未檢出顯著性。(21，28)d新生兒白細(xì)胞數(shù)據(jù)較其他日齡組有顯著性降低，是否該年齡段的新生兒白細(xì)胞水平已接近幼兒年齡段，或是因為地域性差異所致，需進(jìn)一步擴(kuò)充數(shù)據(jù)探究。該調(diào)查所選擇的檢測體系和量值溯源體系，保證了異常血細(xì)胞能被正確識別和白細(xì)胞計數(shù)偏差能得到有效糾正[3]。