呂臣浩,鄧小芳,陳友恩,陳家偉,趙竹青,劉新偉*
(1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)微量元素研究中心,湖北 武漢 430070;2.建始縣富硒大姜種植專業(yè)合作社,湖北 建始 445300;3.湖北省建始縣土壤肥料工作站,湖北 建始 445300)
硒是人體必不可少的微量營(yíng)養(yǎng)元素[1],具有抗氧化和抗癌等作用[2]。植物性硒是人體硒營(yíng)養(yǎng)的主要來(lái)源[3],因此植物硒代謝倍受關(guān)注[4]。對(duì)人和動(dòng)物而言缺硒和硒中毒的范圍很窄[5],因此科學(xué)補(bǔ)硒尤為重要。生姜是宿根性草本植物,廣泛種植于熱帶和亞熱帶地區(qū),在我國(guó)已經(jīng)有兩千多年的栽培歷史。作為世界上生姜栽培面積最大的國(guó)家之一,我國(guó)生姜常年栽種面積達(dá)630×103hm2,種植面積位居世界第二[6]。因此,研究生姜硒營(yíng)養(yǎng)特性,為其生產(chǎn)提供依據(jù)有重要意義。
土壤的硒濃度范圍在0.01~2.0 mg·kg-1之間,平均約為0.4 mg·kg-1。中國(guó)有三分之二以上的土壤硒含量不足,土壤硒缺乏則直接導(dǎo)致作物硒含量水平偏低[7]。廖青等[8]研究表明,對(duì)甘薯地土施10 L·hm-2的液體硒肥(含硒量>0.88%)并未提高薯塊硒含量,采用葉面噴施方式甘薯硒含量卻顯著提高,這可能是由于土施硒被固定導(dǎo)致。研究表明土壤中鐵、鋁等金屬礦物將硒固定在土壤固相從而降低土壤硒的有效性[9],土壤施硒只有5%~30%能被植物吸收利用,70%~90%的硒被固定在土壤固相[10]。植物葉片可通過(guò)角質(zhì)層和氣孔吸收微量元素進(jìn)而向其他部位轉(zhuǎn)移[11],故葉面噴硒可提高植物組織中硒含量[12],因此可通過(guò)葉面噴硒來(lái)加強(qiáng)生姜硒營(yíng)養(yǎng)。
不同硒源和噴施時(shí)期對(duì)植物體內(nèi)各部位硒的累積分配影響很大。李鳴鳳等[13]的研究結(jié)果表明,小麥對(duì)硒酸鹽的吸收效果是亞硒酸鹽的6.5倍;Mélanie等[14]的研究表明,玉米對(duì)亞硒酸鹽的利用率高于硒酸鹽。Deng等[15]的研究結(jié)果表明,對(duì)水稻噴施亞硒酸鹽和硒酸鹽在抽穗期的吸收效果分別是分蘗期的2.9和3.5倍;劉慶等[16]的研究表明,對(duì)藍(lán)莓葉面噴施亞硒酸鈉在開(kāi)花期的吸收效果要優(yōu)于坐果期。關(guān)于生姜硒營(yíng)養(yǎng)特性的研究鮮見(jiàn)報(bào)道,本試驗(yàn)?zāi)康脑谟诿鞔_不同硒源和噴施時(shí)期對(duì)生姜品質(zhì)、各部位硒含量和累積分配的影響,以期為富硒生姜的生產(chǎn)提供技術(shù)支持。
供試作物為山農(nóng)一號(hào)大姜,硒源為亞硒酸鈉和硒酸鈉[文中分別用Se(Ⅳ)和Se(Ⅵ)表示]。試驗(yàn)地土壤類型為黃棕壤,其基本理化性質(zhì)為pH 值 5.60,有機(jī)質(zhì) 31.57 g·kg-1,堿解氮 114.45 mg·kg-1,有效磷 46.03 mg·kg-1,速效鉀 312.96 mg·kg-1,土壤總硒 0.23 mg·kg-1。
試驗(yàn)于2017年在湖北省建始縣三里鄉(xiāng)進(jìn)行。小區(qū)面積 4 m×5 m,每公頃定植 105 000 株,行距50 cm,株距20 cm。分別在三叉期(7月18日)和膨大期(9月3日),葉面噴施80 mg·L-1亞硒酸鈉和硒酸鈉,噴施量均為80 g·hm-2,另噴施等量清水為對(duì)照,使用噴霧器均勻噴灑。試驗(yàn)共設(shè)6個(gè)處理,重復(fù)3次,隨機(jī)區(qū)組排列。根據(jù)土壤墑情和天氣情況適時(shí)澆水灌溉,其他田間管理與當(dāng)?shù)匾恢隆?/p>
在生姜成熟期,按5點(diǎn)取樣法,每小區(qū)選取5株生姜,分為葉片、莖稈、塊莖、須根,用自來(lái)水沖洗3遍,再用去離子水沖洗3遍,晾干水分。在105 ℃殺青30 min,于65 ℃烘干至恒重,稱重,磨碎存于自封袋密封待用。
植物總硒:準(zhǔn)確稱取適量樣品(精確到0.000 1 g)于50 mL錐形瓶中,加HNO3-HClO4混合酸(體積比為4∶1)10 mL,搖勻后放置過(guò)夜。用電熱板180℃加熱并及時(shí)補(bǔ)加混合酸,至溶液清亮無(wú)色并伴有白煙出現(xiàn)時(shí),繼續(xù)加熱至溶液剩余體積2 mL左右,從電熱板上取下冷卻,加入6 mol·L-1的鹽酸10 mL,再次加熱至溶液變?yōu)榍辶敛橛邪谉煶霈F(xiàn)時(shí)取下。冷卻并轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中,定容,原子熒光光譜法(HG-AFS-8220)測(cè)定。
土壤總硒:采用HNO3-HClO4(3∶2)消解,后續(xù)步驟同植物總硒測(cè)定。
有機(jī)硒測(cè)定:生姜有機(jī)硒測(cè)定采用差減法進(jìn)行。具體步驟為:稱取干樣1 g左右,置于50 mL離心管中,加入30 mL超純水,室溫下超聲振蕩30 min,于 5 000 r·min-1離心 10 min,倒出上清液,殘?jiān)貜?fù)提取一次。上清液收集后,倒入分液漏斗中,加入5 mL環(huán)己烷萃取,收集水相于燒杯中,電熱板上加熱蒸發(fā)掉大部分水分后,后續(xù)消化測(cè)定方法和總硒測(cè)定相同。原子熒光光譜儀測(cè)定溶液中無(wú)機(jī)硒含量。利用已測(cè)得的總硒含量減去無(wú)機(jī)硒含量,即得有機(jī)硒含量。
采用2,6-二氯靛酚滴定法測(cè)定Vc含量;還原糖用銅還原-直接滴定法測(cè)定;硝酸鹽采用酚二磺酸比色法測(cè)定;凱氏定氮法測(cè)全氮,粗蛋白=全氮×6.25[17]。姜辣素含量測(cè)定根據(jù)張維勤[18]、張明昶等[19]的方法改進(jìn)而成。
采用SPSS 20.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,使用Excel 2016進(jìn)行制表繪圖。
從表1可以看出,與CK相比,無(wú)論在三叉期還是膨大期噴硒對(duì)生姜的產(chǎn)量均有促進(jìn)作用,增幅3.6%~5.0%。同一硒源,在三叉期噴施的增產(chǎn)作用要高于膨大期噴施;同一時(shí)期,噴施硒酸鹽的增產(chǎn)效果均高于噴施亞硒酸鹽處理。綜上,葉面噴施硒對(duì)生姜產(chǎn)量有促進(jìn)作用,具體增幅因噴施時(shí)期和硒源而異。
表1 不同時(shí)期噴施不同硒源對(duì)生姜產(chǎn)量的影響
由表2可以看出,與CK相比,噴硒顯著提高了生姜各部位的硒含量。無(wú)論何時(shí)噴硒,同一時(shí)期硒酸鹽處理的生姜葉片、莖稈、姜肉的硒含量均高于亞硒酸處理的植株;三叉期噴硒,硒酸鹽處理的生姜各部位硒含量為亞硒酸鹽處理的5.5~8.2倍;膨大期噴硒,硒酸鹽處理的各部位硒含量為亞硒酸鹽處理的2.8~4.1倍。姜皮中硒含量,在三叉期,噴施硒酸鹽低于噴施亞硒酸鹽,降幅47.3%;在膨大期,噴施硒酸鹽處理高于噴施亞硒酸鹽,增幅16.2%。無(wú)論在何時(shí)噴施硒酸鹽,硒含量順序均為葉片>莖稈>姜肉>姜皮。
表2 不同時(shí)期噴施不同硒源對(duì)生姜各部位硒含量的影響 (mg·kg-1)
由于對(duì)照處理的生姜根莖硒含量很低,分析其有機(jī)硒比例沒(méi)有意義,故在此不予列出。由圖1可知,不同時(shí)期噴施亞硒酸鹽和硒酸鹽,生姜根莖有機(jī)硒比例有顯著差異。無(wú)論何時(shí)噴施何種硒源,生姜硒的有機(jī)轉(zhuǎn)化率均可達(dá)到57%以上。在三叉期和膨大期,噴施亞硒酸鹽處理的有機(jī)硒比例均高于噴施硒酸鹽,分別高21.8%和25.2%;同一硒源,噴施時(shí)期后移,生姜根莖中有機(jī)硒比例顯著增高,噴施亞硒酸鹽和硒酸鹽分別提高7.3%和4.0%。綜上,外源噴硒可以顯著提高生姜根莖中有機(jī)硒的比例,具體增幅因不同硒源和噴施時(shí)期而異。
圖1 不同時(shí)期噴施不同硒源對(duì)生姜根莖有機(jī)硒比例的影響
從表3可以看出,與CK相比,噴硒后生姜根莖中Vc含量、還原糖含量和姜辣素含量均有一定程度的提高,分別達(dá)到CK的1.03~1.06、1.13~1.17和1.04~1.07倍。與CK相比,施硒處理顯著降低了生姜中粗蛋白質(zhì)的含量,降幅為11.5%~16.0%。與CK相比,噴硒處理的生姜中硝酸鹽含量有一定的下降,降幅為1.6%~8.2%。無(wú)論在三叉期還是膨大期,噴施硒酸鹽的生姜硝酸鹽含量均低于噴施亞硒酸鹽。綜上,施硒對(duì)生姜的品質(zhì)有一定影響。
表3 不同時(shí)期噴施不同硒源對(duì)生姜品質(zhì)的影響
關(guān)于外源施硒對(duì)作物產(chǎn)量的影響已有諸多研究,但在不同作物上結(jié)論不一。王永勤等[20]研究表明,硒對(duì)于植物生物量表現(xiàn)為低濃度促進(jìn),高濃度抑制。Hao等[21]通過(guò)盆栽試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),亞硒酸鹽濃度低于10 mg·kg-1時(shí)可以顯著增加玉米生物量和籽粒產(chǎn)量,當(dāng)亞硒酸鹽濃度高于25 mg·kg-1時(shí)明顯降低了玉米生物量和籽粒產(chǎn)量。張妮等[22]的研究表明,當(dāng)施硒量高于1.2 kg·hm-2時(shí),小麥的產(chǎn)量有下降趨勢(shì)。李鳴鳳等[13]的研究結(jié)果表明,施硒后小麥的產(chǎn)量和成穗數(shù)均無(wú)明顯變化。在本研究中噴硒對(duì)生姜的產(chǎn)量有一定促進(jìn),增幅為3.6%~5.0%。
有研究表明,植物對(duì)硒的吸收利用和轉(zhuǎn)移分配因硒源而異[4]。Ducsay等[23]在小麥上的噴硒試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),籽粒對(duì)亞硒酸鹽和硒酸鹽的吸收能力分別為1.4% ~ 1.5%和13.2% ~ 15.1%。Kikkert 等[24]研究表明,小麥對(duì)亞硒酸鹽的吸收速率約高于硒酸鹽100倍。在本研究中,噴施硒酸鹽的吸收效果同樣高于噴施亞硒酸鹽,各部位含硒量分別是亞硒酸鹽處理的2.8~8.2倍。噴施時(shí)期對(duì)植物硒的吸收利用效率存在顯著差異。劉慶等[25]的研究結(jié)果表明,小麥噴硒以灌漿前期效果優(yōu)于孕穗期效果,這與Deng等[15]的研究結(jié)果一致。在本研究中,無(wú)論何種硒源,膨大期的噴施效果均優(yōu)于三叉期。
植物可食部分總硒含量?jī)H能代表植物對(duì)硒富集能力的差異,不足以評(píng)價(jià)其生物利用度[26]。相比無(wú)機(jī)硒,有機(jī)硒對(duì)人體而言更為安全有效[27]。Pedrero等[26]對(duì)蘿卜的培養(yǎng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),亞硒酸鹽處理的有機(jī)硒轉(zhuǎn)化率為95%以上,而硒酸鹽處理僅為38%。這可能與硒在植物體內(nèi)的同化機(jī)制有關(guān),研究表明,植物吸收硒酸鹽后首先還原為亞硒酸鹽,然后才能進(jìn)行有機(jī)化反應(yīng)[28]。在本試驗(yàn)中,生姜對(duì)硒酸鹽的吸收能力顯著高于亞硒酸鹽,而硒的有機(jī)轉(zhuǎn)化率顯著低于亞硒酸鹽,因此從安全角度來(lái)講,噴施亞硒酸鹽更為合理。
一些研究表明,作物吸收的無(wú)機(jī)硒在體內(nèi)不同部位轉(zhuǎn)運(yùn)之前,就已在吸收部位實(shí)現(xiàn)了無(wú)機(jī)硒向有機(jī)硒的轉(zhuǎn)化,僅有少部分以無(wú)機(jī)離子形態(tài)運(yùn)輸,因此植物體內(nèi)硒的轉(zhuǎn)移機(jī)制就影響了有機(jī)硒的比例。寧嬋娟等[29]研究表明,蘋(píng)果在花期和幼果期葉面施硒效果較為穩(wěn)定,硒的有機(jī)化程度較高。在果實(shí)著色期施硒,雖然果實(shí)中總硒較高,但硒的有機(jī)化程度較低。劉慶等[25]對(duì)小麥的噴硒試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),不同時(shí)期噴施,籽粒中有機(jī)硒含量及其占總硒的比例沒(méi)有顯著差異。在本研究中,同一硒源,膨大期噴施硒的有機(jī)轉(zhuǎn)化率分別比三叉期提高7.3%和4.0%,可能是由于生姜膨大期代謝較旺盛,能夠充分的將無(wú)機(jī)硒進(jìn)行有機(jī)化,并且膨大期離收獲期還有足夠長(zhǎng)的時(shí)間供生姜進(jìn)行有機(jī)化反應(yīng),更深層次的原因則有待于進(jìn)一步探究。
硒作為人體必需而植物的非必需營(yíng)養(yǎng)元素,對(duì)植物的生長(zhǎng)和品質(zhì)具有雙重作用。Zhao 等[30]對(duì)大棗研究發(fā)現(xiàn),噴施適量硒果實(shí)硬度、維生素和可溶性糖含量增加,果實(shí)品質(zhì)有一定的改善。硝酸鹽含量作為評(píng)價(jià)食品安全的重要標(biāo)準(zhǔn),對(duì)生姜的品質(zhì)也有重要影響。在本研究中,噴硒后生姜根莖中Vc含量、還原糖含量和姜辣素含量均有提高,硝酸鹽含量有所下降。高貞攀等[31]和方勇等[32]的研究表明,施硒可有效提高谷子和水稻籽粒中粗蛋白的含量,但是在本研究中,生姜粗蛋白的含量反而有所降低,原因可能是不同作物的硒營(yíng)養(yǎng)特性存在差異,具體原因有待探究。
外源噴硒可以顯著提高生姜各部位的硒含量,從而進(jìn)行生姜硒含量的調(diào)控。
同一時(shí)期,噴施硒酸鹽生姜根莖硒含量是亞硒酸鹽的3.5~5.5倍;同一硒源,膨大期噴硒生姜根莖硒含量是三叉期的1.6~2.5倍。
同一時(shí)期,噴施亞硒酸鹽生姜有機(jī)硒比例高于噴施硒酸鹽;同一硒源,膨大期噴施生姜有機(jī)硒比例高于三叉期。