北京市順義區(qū)兒童呼吸道感染病原體檢測(cè)及流行特征分析

張微 劉宗文 李旭峰 黃艷華 唐浩勛 李波 耿榮

急性呼吸道感染（acute respiratory tract infection，ARTI）是兒童時(shí)期的常見(jiàn)病和多發(fā)病，可引發(fā)急性上呼吸道感染、支氣管炎和肺炎等病癥。肺炎是5 歲以下兒童死亡的主要原因[1]，嚴(yán)重威脅兒童健康。呼吸道病毒、肺炎支原體及肺炎衣原體是引起兒童ARTI 的重要病原體。為了解北京市順義區(qū)兒童呼吸道感染的病原學(xué)特點(diǎn)，本研究對(duì)2018年8月～2019年8月我院收治的1 730 例患兒呼吸道標(biāo)本進(jìn)行7 種常見(jiàn)病原體檢測(cè)，結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料選取2018年8月～2019年8月我院呼吸道感染住院患兒1 730 例，其中男994 例，女736 例，年齡0 天～16 歲。其中，上呼吸道感染137例，支氣管炎134 例，肺炎1 335 例，其他疾病124例。診斷標(biāo)準(zhǔn)參照第八版《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》[2]。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 1 730 例患兒入院的當(dāng)天或次日，由專職醫(yī)護(hù)人員用一次性咽拭子迅速擦拭患者兩側(cè)腭弓、咽及扁桃體。其中73 例重癥肺炎行纖支鏡灌洗患兒留取肺泡灌洗液，將拭子插入裝有1ml 1×PBS 緩沖液或生理鹽水的采集管中，折斷并棄去咽拭子尾部，旋緊管蓋，注明標(biāo)本采集時(shí)間并及時(shí)處理送檢。未檢測(cè)樣本可在4℃存放72h。

1.2.2 檢測(cè)方法 采用雙擴(kuò)增技術(shù)（DAT）檢測(cè)咽拭子采集的脫落細(xì)胞中的七種呼吸道病原體RNA，包括甲型流感病毒（FluA）、乙型流感病毒（FluB）、呼吸道合胞病毒（RSV）、人副流感病毒（PIV）、腺病毒（ADV）、肺炎支原體（MP）和肺炎衣原體（CP）。具體操作按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，試劑由武漢中幟生物科技股份有限公司提供。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料用百分比表示，采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行比較分析，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病原體檢出情況1 730 例送檢標(biāo)本進(jìn)行七項(xiàng)呼吸道病原體RNA 檢測(cè)示陽(yáng)性標(biāo)本777 例，總陽(yáng)性率44.91%。其中MP 陽(yáng)性率最高，為22.37%（387/ 1730），其次為RSV，陽(yáng)性率為9.08%（157/1730），F(xiàn)luA、FluB、PIV、ADV、CP 陽(yáng)性率分別為4.45%、1.50%、6.36%、3.76%和0.40%。病毒感染率25.14% （435/1730），非典型性病原體感染率22.77%（394/ 1730），混合感染率2.95%（51/1730），其中病毒混合感染25 例（1.45%，25/1730），病毒和非典型性病原體混合感染26 例（1.50%，26/1730）。見(jiàn)表1、2。

2.2 病原體感染與性別的關(guān)系男性患兒病原體陽(yáng)性率為45.98%（457/994），女性患兒病原體陽(yáng)性率為43.48%（320/736），兩者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2= 1.07，P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表 1 呼吸道病原體混合感染情況

表2 不同性別呼吸道病原體RNA 檢出情況[n（%）]

2.3 病原體感染與年齡的關(guān)系將送檢標(biāo)本分為＜1 歲、 1～3 歲、4～6 歲、7～16 歲四個(gè)年齡組，病原體檢出率分別為40.19%（86/214）、40.65%（365/898）、48.98%（192/392）和59.29%（134/226），不同年齡組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=30.05，P＜0.05）。RSV和PIV 感染率隨患兒年齡增長(zhǎng)而下降，在＜1 歲組檢出率最高。肺炎支原體檢出率隨患兒年齡增長(zhǎng)呈升高趨勢(shì)，7～16 歲組檢出率最高。見(jiàn)表3。

2.4 病原體感染與季節(jié)的關(guān)系春、夏、秋、冬四季病原體檢出率分別為35.58%（137/385）、44.21%（214/484）、54.32%（220/405）和45.18%（206/456），四季間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=28.14，P＜0.05）。FluA、FluB、RSV、PIV、MP 四季間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，ADV 和CP 四季間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MP全年均可發(fā)生，夏秋季節(jié)發(fā)病率顯著高于冬春季，F(xiàn)luB 在今年春季有一定流行。見(jiàn)表4。

表3 不同年齡呼吸道病原體 RNA 檢出情況[n（%）]

表4 不同季節(jié)呼吸道病原體 RNA 檢出情況[n（%）]

2.5 病原體感染與疾病的關(guān)系1 730 例患兒中，肺炎患兒占比高達(dá)77.17%（1335/1730），上呼吸道感染和支氣管炎患兒占比相當(dāng)，分別為7.92%（137/1730）和7.75%（134/1730）。七種病原體在肺炎中檢出率最高為49.66%（663/1335），其次為支氣管炎32.09%（43/134）、其他疾病30.65%（38/124），均高于上呼吸道感染24.09%（33/137）。七種病原體在不同疾病中的檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=55.30，P＜0.05）。

2.6 不同樣本類型的病原體檢出情況1 730 例患兒中，樣本類型為肺泡灌洗液（BALF）的檢出率為 80.82%（59/73）且均為MP 陽(yáng)性，顯著高于樣本類型為咽拭子（Oropharyngeal swab，OPS） 的檢出率 41.50%（718/1730），（χ2=44.16，P＜0.05）。

3 討論

病原體可引起多種臨床表現(xiàn)，同一臨床表現(xiàn)可由多種病原體引起，全面、早期、精準(zhǔn)的病原學(xué)診斷對(duì)于臨床及時(shí)合理用藥有重要意義。

本研究顯示，七項(xiàng)病原體總陽(yáng)性率為44.91%，MP 是引起患兒呼吸道感染的最主要病原體，與北京[3]、武漢[4]、湖南[5]、安徽[6]、亞洲地區(qū)[7]的報(bào)道一致，感染率居首，本研究MP 的檢出率為22.37%，與安徽、亞洲地區(qū)報(bào)道相近（21.3%～23.5%），低于北京、武漢、湖南等地（39.0%～56.78%）。這可能與檢測(cè)使用的方法相關(guān)，北京近郊區(qū)等地區(qū)采用血清學(xué)方法檢測(cè)IgM 抗體，IgM 抗體一般在初次感染1 周內(nèi)開(kāi)始升高，2～3 周達(dá)到高峰，4 周下降，2～3月降至最低[8]，在體內(nèi)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，檢測(cè)無(wú)法有效區(qū)分是近期感染還是現(xiàn)癥感染的陽(yáng)性結(jié)果，導(dǎo)致陽(yáng)性率偏高。本研究檢測(cè)MP RNA，RNA 隨病原體死亡而降解，檢測(cè)結(jié)果與MP 感染嚴(yán)重程度相關(guān)性好，陽(yáng)性結(jié)果可確診早期現(xiàn)癥感染[9]，對(duì)于感染轉(zhuǎn)歸和藥物療效的評(píng)價(jià)更有指導(dǎo)意義。

本研究中病毒以RSV 檢出率最高（9.08%），其次分別為PIV、FluA、ADV、FluB，排序與謝正德等[10]、李權(quán)恒等[11]研究一致。其中RSV 和PIV 在3歲以下嬰幼兒中多見(jiàn)，感染率隨患兒年齡增長(zhǎng)而下降，在＜1 歲組檢出率最高，分別為16.82%、12.62%，病毒檢出率在6 歲以上兒童中顯著下降，與既往研究一致[4，6，10]。肺炎支原體檢出率隨患兒年齡增長(zhǎng)呈升高趨勢(shì)，不同年齡組間有顯著差異，＜1 歲嬰兒組最低（5.14%），7～16 歲學(xué)齡兒童組最高（53.98%），與郭文卉等[3～5]報(bào)道一致。ADV 和FluB 在不同年齡組中檢出率無(wú)顯著差異。

本研究中FluA 在冬春季節(jié)高發(fā)，F(xiàn)luB 在今年春季流行，4月達(dá)到發(fā)病高峰，檢出超過(guò)FluA 和RSV。以往報(bào)道[10，12]中RSV 主要在冬春季流行，本研究則發(fā)現(xiàn)RSV 以秋冬季流行為主，主要流行于10月至次年3月，也有國(guó)內(nèi)外研究李權(quán)恒等[11]、Finianos 等[13]與本研究結(jié)果一致，可能是由于RSV亞型更替對(duì)流行造成的顯著影響，Yu 等[14]發(fā)現(xiàn)北京地區(qū)兒童RSV 感染具有鮮明的季節(jié)性流行特征，RSV 季節(jié)通常開(kāi)始于每年10月中旬，結(jié)束于次年五月中旬，A、B 亞型交替流行，每隔兩年轉(zhuǎn)換一次，A 亞型高流行的年份RSV 季節(jié)會(huì)提前3～5 周，推測(cè)與RSV 亞型更替密切相關(guān)，F(xiàn)luB 的暴發(fā)流行也有一定影響。MP 全年散發(fā)流行，夏秋季節(jié)感染率顯著高于冬春季，與上海[15]的研究一致，MP 感染一年四季均可發(fā)生，每3～7年有一次流行高峰[16]，掌握病原體的流行特征可為臨床診療和疾病防控提供依據(jù)。

本研究中肺炎患兒的病原體檢出率最高為49.66%，其次為支氣管炎32.09%，明顯高于上呼吸道感染。在不同樣本類型的病原體檢測(cè)中，BALF檢出率為80.82%且均為MP 陽(yáng)性，僅有1 例為MP和FluA 混合感染，顯著高于OPS，OPS 的病毒檢出率28.12%、MP 檢出率19.79%。張新星等[17]研究顯示，上呼吸道樣本的病毒檢出率高于BALF，BALF 的MP 檢出率明顯高于上呼吸道樣本，聯(lián)合檢測(cè)可提高病原檢出率。本研究結(jié)果與此一致，但由于BALF 組和OPS 組入組患兒不同，推測(cè)可能是采集BALF 的患兒均屬病情較重的下呼吸道感染而導(dǎo)致MP 檢出率高，或者BALF 中的MP 拷貝數(shù)更高，OPS 的病毒檢出率高可能是感染的主要靶部位在鼻咽部，或者呼吸道感染早期以病毒感染為主，為細(xì)菌定植提供條件，進(jìn)而引起下呼吸道的嚴(yán)重繼發(fā)感染，這時(shí)以細(xì)菌和非典型性病原體為主，有待于進(jìn)一步研究證實(shí)。

綜上所述，本研究通過(guò)對(duì)2018年8月～2019年8月我院呼吸道感染患兒的病原體檢測(cè)，對(duì)本地區(qū)呼吸道病原體流行特征有一定認(rèn)識(shí)，為疾病的臨床診斷和治療提供可靠的依據(jù)，可有效防止醫(yī)院感染及抗菌藥物的濫用。