氣滯血瘀型慢性輸卵管炎癥大鼠模型的建立與評(píng)價(jià)

鄭 躍，劉 麗，劉建秋

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)， 哈爾濱 150040)

中醫(yī)對(duì)于疾病的診斷基礎(chǔ)是證候，不同的證候表現(xiàn)為人體對(duì)于疾病的全身整體反應(yīng)，是辨證的結(jié)果，同時(shí)更是論治的依據(jù)。傳統(tǒng)的中醫(yī)建立在醫(yī)家的思辨基礎(chǔ)上，由于目前病證模型相結(jié)合的方法較少，單一從病上論治其有效性，而忽視辨證，并不能完整的體現(xiàn)中藥治療的價(jià)值，而一直以來(lái)，將復(fù)雜的中醫(yī)辨證理論轉(zhuǎn)化為臨床上更直觀的指標(biāo)數(shù)據(jù)都是中醫(yī)藥發(fā)展的瓶頸所在[1]。為了更好地研究輸卵管炎的發(fā)病機(jī)制和其分型的病癥表現(xiàn)，本實(shí)驗(yàn)將病與證的模型相結(jié)合，通過(guò)對(duì)大鼠模型的標(biāo)準(zhǔn)化、客觀化、計(jì)量化的采集和分析，從而建立與臨床表現(xiàn)相類似的氣滯血瘀型慢性輸卵管炎癥模型大鼠，進(jìn)而加深中醫(yī)藥對(duì)輸卵管炎等婦科疾病的探索，為治療該領(lǐng)域疾病提供科學(xué)理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

雌性SPF級(jí)SD大鼠52只，8～12周，體重(200±20)g，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，生產(chǎn)許可證編號(hào)[SCXK(黑) 2015-004]，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)[SYXK(黑)2013-012]。經(jīng)黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理和使用委員會(huì)審核，符合科技部《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見(jiàn)》和《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使管理和使用委員會(huì)章程》 的相關(guān)規(guī)定，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理審查批準(zhǔn)編號(hào) DWLL20151108001。保持飼養(yǎng)環(huán)境溫度22℃，相對(duì)濕度40%左右，每日早8:00到晚8:00人工燈光照明，飼養(yǎng)密度為每盒5只，籠具交換1周1次，每3 d全部作業(yè)結(jié)束后，由動(dòng)物室人員進(jìn)行清掃并擦拭消毒，并更換鼠盒及墊料。標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料喂養(yǎng)，自由飲水，適應(yīng)環(huán)境一周之后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。

1.2 主要試劑與儀器

電子天平(北京賽多利儀器有限公司)、HNY-2102C恒溫培養(yǎng)振蕩器(天津歐諾儀器儀表有限公司)、EG1160 石蠟包埋機(jī)(德國(guó) LEICA 技術(shù)公司)、BM-2135石蠟切片機(jī)(德國(guó) LEICA 技術(shù)公司)、CS Ⅲ生物組織攤片機(jī)(湖北省醫(yī)用電子儀器廠)、CX41光學(xué)顯微鏡(日本 OLYMPUS 公司)、JEM-1220型透射電鏡(日本電子有限公司)、HPIAS-1000 高清晰度彩色病理圖文分析系統(tǒng)(武漢同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)千屏影像工程公司)。GRT-6008全自動(dòng)血液分析儀器(濟(jì)南格利特科技有限公司)、LBY-N6 Compact全自動(dòng)血液流變儀(北京普利生儀器有限公司)、LBY-BX型紅細(xì)胞變形聚集儀(北京普利生儀器有限公司)。

金黃色葡萄球菌(菌號(hào)ATCC29213)FSCC225002(購(gòu)自北京東方賽瑞生物技術(shù)有限公司)、二甲苯(天津市永大化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)160107)、伊紅(天津科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心，批號(hào)150927)、蘇木素(上海山浦化工有限公司，批號(hào)150424)、純凈水(廣州屈臣氏食品飲料公司)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 菌種培養(yǎng)與菌液配制

將35 g牛肉湯培養(yǎng)基，加入到1000 mL的蒸餾水中溶解， 121℃滅菌20 min，放冷，取斜面保存的金黃色葡萄球菌菌種，用無(wú)菌蒸餾水溶解，在超凈工作臺(tái)下接種至新配制的液體培養(yǎng)基中，于28℃，110 r/min，搖床培養(yǎng)24～48 h，得到菌液即可使用。

1.3.2 分組與模型構(gòu)建[2-3]

雌性SD大鼠52只，隨機(jī)分為4組，分別為空白組(K)、手術(shù)組(S)、模型組(M)、復(fù)合模型組(F)，每組13只。于實(shí)驗(yàn)第1天，除K組外，其余各組麻醉后，將大鼠側(cè)臥式平放，剃毛并用碘伏進(jìn)行消毒，取肋緣過(guò)腎區(qū)0.5 cm近脊柱側(cè)旁開(kāi)1 cm長(zhǎng)的橫切口，打開(kāi)腹腔，撥開(kāi)其他組織，暴露一側(cè)卵巢、輸卵管及部分子宮，M組、F組均向輸卵管方向注入已配好的4×109/mL金黃色葡萄球菌懸液0.1 mL，后逐層縫合腹壁肌層、皮膚，再以75%的酒精消毒切口，另一側(cè)輸卵管同樣方法操作，S組只手術(shù)不注菌，注入等劑量生理鹽水(見(jiàn)表1)。

于實(shí)驗(yàn)第8天，復(fù)合模型組(F)給予大鼠不可預(yù)知的慢性長(zhǎng)期刺激，包括大鼠足底25～35 V的電擊刺激，每隔8～15 min進(jìn)行一次，每次60～120 s，持續(xù)10～12 h；頻率為5～15 KHz的噪聲刺激(等級(jí)為3級(jí))，每隔8～15 min進(jìn)行一次，每次60～120 s，持續(xù)10～12 h；頻率為1～3 KHz強(qiáng)度的閃爍光刺激，每隔8～15 min進(jìn)行一次，每次60～120 s，持續(xù)10～12 h；夾尾每小時(shí)1次，每次4 min，每天8次；45°傾斜鼠籠兩小時(shí)，每日1次；連續(xù)21 d。

1.3.3 大鼠體重、攝食量

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中各組大鼠每7 d分別測(cè)量一次體重與飲食量。

1.3.4 大鼠一般行為學(xué)觀察

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中各組大鼠每7 d分別進(jìn)行一般行為學(xué)記錄，包括活動(dòng)量、精神、舌色、爪色、耳色。

1.3.5 大鼠癥候積分

根據(jù)表2 氣滯血瘀模型大鼠的癥候積分評(píng)價(jià)量表評(píng)價(jià)大鼠證候積分。此價(jià)量表是查閱文獻(xiàn)中做過(guò)類似模型的文章中記載的，分評(píng)價(jià)量表最早用在格拉斯昏迷評(píng)分量表(Glasgow Coma Scale， GCS)中，它是醫(yī)學(xué)上評(píng)估病人昏迷程度的方法，是由英國(guó)格拉斯哥大學(xué)的兩位神經(jīng)外科教授Graham Teasdale與Bryan J. Jennett在1974年發(fā)明的測(cè)評(píng)昏迷的方法?；杳猿潭纫匀叻?jǐn)?shù)相加來(lái)評(píng)估，得分值越高，提示意識(shí)狀態(tài)越好，比較客觀，現(xiàn)今分評(píng)價(jià)量表越來(lái)越多用在模型評(píng)價(jià)研究中。

1.3.6 肉眼觀察輸卵管形態(tài)

于實(shí)驗(yàn)給藥28 d后，禁食不禁水12 h，用20%烏拉坦0.1 mL/kg腹腔麻醉，無(wú)菌條件下解剖大鼠，取雙側(cè)輸卵管，肉眼觀察輸卵管組織形態(tài)，并進(jìn)行評(píng)分。

表1 各組實(shí)驗(yàn)大鼠處理方法一覽表Table 1 List of the treatment methods for each group of experimental rats

表2 氣滯血瘀模型大鼠的癥候積分評(píng)價(jià)量表Table 2 Symptom score scale for evaluation of qi stagnation and blood stasis in the model

表3 肉眼觀察輸卵管組織形態(tài)學(xué)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)Table 3 Evaluation scores of gross appearance of the inducts

1.3.7 HE染色病理切片觀察

于實(shí)驗(yàn)給藥21 d后，禁食不禁水12 h，用20%烏拉坦0.1 mL/kg腹腔麻醉，無(wú)菌條件下解剖大鼠，取雙側(cè)輸卵管，進(jìn)行HE染色制成病理切片。

切取厚度為3 μm的大鼠輸卵管組織切片，放置于烤箱中2 h，溫度設(shè)定為65℃。使用二甲苯脫蠟，每次15 min，脫蠟兩次后進(jìn)行脫水1 min，用蘇木素染色5 min，流水沖洗2～3 min， 1%鹽酸酒精分化2 s，溫水水沖15 min(返藍(lán))，再用伊紅染色1 min，采用梯度脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片后在光鏡下觀察各組大鼠子宮組織形態(tài)學(xué)變化。

1.3.8 血流變學(xué)檢測(cè)

于給藥后21 d，禁食不禁水12 h，用20%烏拉坦0.1 mL/kg腹腔麻醉，無(wú)菌條件下腹主動(dòng)脈取血測(cè)定血漿黏度、全血黏度3.0/s、30/s、50/s、100/s、180/s，還原黏度3.0/s、30/s、50/s、100/s、180/s，紅細(xì)胞剛性指數(shù)、聚集指數(shù)、電泳時(shí)間、變形指數(shù)，血沉方程K值。取肝素鈉抗凝血1 mL，3000 r/min離心10 min，吸取0.25 mL血漿，測(cè)定血漿黏度。取肝素鈉抗凝血1 mL，用血液粘度儀測(cè)定全血黏度。取400 μL抗凝血，用紅細(xì)胞變形聚集儀測(cè)紅細(xì)胞聚集指數(shù)。取20 μL抗凝血，加入15%PVP懸浮液1 mL中混勻，吸取50 μL用紅細(xì)胞變形聚集儀測(cè)紅細(xì)胞變形指數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果

2.1 大鼠體重和攝食量變化

除空白組(K)外，手術(shù)組(S)、模型組(M)、復(fù)合模型組(F)體重和飲食量均降低，其中復(fù)合模型組減低更為明顯(見(jiàn)表4、5)，從第2周起復(fù)合模型組大鼠開(kāi)始出現(xiàn)對(duì)于刺激的不適應(yīng)性，攝食量減少明顯。

表4 大鼠體重變化(g)Table 4 Weight changes in the rats

表5 大鼠攝食量變化(g)Table 5 Changes in food intake in the rats

2.2 一般行為學(xué)觀察結(jié)果

造成氣滯血瘀型慢性輸卵管炎的復(fù)合模型大鼠在活動(dòng)量、精神、舌色、爪色、耳色等方面有很明顯的區(qū)別(見(jiàn)圖1、表6)，空白組大鼠以上行為學(xué)形態(tài)均正常，復(fù)合模型組活動(dòng)量方面表現(xiàn)出行動(dòng)遲緩，蜷縮少動(dòng)，并伴有精神上萎靡，基本生活狀態(tài)不旺盛的現(xiàn)象；同時(shí)復(fù)合模型組的舌色發(fā)紫紅，爪色也與正常大鼠有明顯區(qū)別，顏色近乎于紫紅，耳色由白粉色色變?yōu)榧t色并帶有斑點(diǎn)出現(xiàn)，說(shuō)明模型構(gòu)建后大鼠表征狀態(tài)與一般行為學(xué)等各個(gè)方面均出現(xiàn)明顯差異。此外，模型組、復(fù)合模型組均在造模時(shí)出現(xiàn)1只死亡，對(duì)死亡大鼠進(jìn)行解剖，考慮主要因急性感染導(dǎo)致死亡。

2.3 癥候積分評(píng)價(jià)結(jié)果

由表7可知，與空白組(K)比較，手術(shù)組(S)、模型組(M)、復(fù)合模型組(F)的癥候總積分顯著升高(P<0.01)；與模型組相比較，復(fù)合模型組癥候總積分亦有顯著上升(P<0.01)，提示氣滯血瘀加炎癥的復(fù)合模型構(gòu)建成功，且與單獨(dú)注菌的炎癥模型組有明顯差異。

2.4 肉眼觀察輸卵管形態(tài)結(jié)果

由表8可知，與空白組(K)比較，復(fù)合模型組輸卵管80%出現(xiàn)嚴(yán)重血管腫脹，60%出現(xiàn)嚴(yán)重管壁增厚，50%出現(xiàn)嚴(yán)重盆腔粘連。

表6 大鼠一般行為狀況的觀察Table 6 Observation of general behavior in the rats

注：A:空白組大鼠舌色；B:復(fù)合模型組大鼠舌色；C:空白組大鼠耳色；D:復(fù)合模型組大鼠耳色；E:空白組爪色；F.復(fù)合模型組爪色。圖1 空白組(K)與復(fù)合模型組(F)大鼠舌色、耳色與爪色對(duì)比圖Note. A. Tongue, Blank group. B. Tongue, Compound model group. C. Ear, Blank group. D. Ear, Compound model group. E. Claw, Blank group. F . Claw, Compound model group. Figure 1 Comparison of the color of tongue, ear and claw between the rats of the blank group(K) and conpound model group(F)

2.5 病理學(xué)改變

由圖2可見(jiàn)，空白組輸卵管結(jié)構(gòu)良好，粘膜清晰，無(wú)炎細(xì)胞浸潤(rùn)、充血、水腫。手術(shù)組輸卵管周圍少量炎細(xì)胞，輸卵管結(jié)構(gòu)尚完整。模型組輸卵管周圍組織淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)、疏松、水腫。復(fù)合模型組輸卵管管腔內(nèi)較多炎細(xì)胞浸潤(rùn)，粘膜上皮細(xì)胞脫落，并伴有輸卵管周圍大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，其中以淋巴細(xì)胞為主，部分區(qū)域疏松、水腫，輸卵管外膜血管擴(kuò)張，充血，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。

2.6 血流變學(xué)檢測(cè)結(jié)果

2.6.1 對(duì)大鼠的血漿黏度、全血黏度在切變率3.0/s、30/s、50/s、100/s、180/s下的影響

由表9、10可知，與空白組比較，模型組的血漿黏度有顯著上升(P<0.05)，其全血黏度3.0/s與全血黏度30/s均有極顯著的上升(P<0.01)，復(fù)合模型組的血漿黏度、全血黏度3.0/s及30/s均有極顯著升高(P<0.01)，說(shuō)明大鼠慢性輸卵管炎模型構(gòu)建成功；與模型組比較，復(fù)合模型組血漿黏度、全血黏度3.0/s、全血黏度30/s升高極為顯著(P<0.01)，說(shuō)明氣滯血瘀伴炎癥反應(yīng)的復(fù)合模型與單獨(dú)注菌造成的炎癥模型有明顯差異。

表7 癥候總積分統(tǒng)計(jì)表Table 7 Symptom statistics

注：與空白組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與模型組比較，▲P<0.05，▲▲P<0.01。下表同。

Note. Compared with the blank group,△P< 0.05,△△P< 0.01.Compared with the model group,▲P< 0.05,▲▲P< 0.01. The same in the flowing tables.

表8 肉眼觀察輸卵管形態(tài)結(jié)果Table 8 Visual observation of the fallopian tube morphology

注：K.空白組；S.手術(shù)組；M.模型組；F.復(fù)合模型組。圖2 各組大鼠輸卵管HE染色圖(×100)Note. K. Blank group；S. Surgery group；M. Model group；F. Combined group.Figure 2 Histology of the rat fallopian tubes in the different groups (HE staining)

組別Groups血漿黏度Plasma viscocity全血黏度3.0/sBlood viscocity 3.0/s全血黏度30/sBlood viscocity 30/s空白組Blank group0.85±0.1119.97±2.208.06±1.18手術(shù)組Surgery group0.87±0.1222.64±2.359.49±1.24模型組Model group0.97±0.11△25.21±2.28△△10.61±1.48△△復(fù)合模型組Combined group1.39±0.19▲▲△△27.95±3.15▲▲△△13.86±1.76▲▲△△

2.6.2 對(duì)大鼠的還原黏度3.0/s、30/s、50/s、100/s、180/s的影響

由表11、12可知，與空白組比較，模型組、復(fù)合模型組的還原黏度3.0/s、還原黏度30/s有極顯著的上升(P<0.01)，模型組還原黏度50/s有顯著的上升趨勢(shì)(P<0.05)，復(fù)合模型組還原黏度50/s有極顯著的上升趨勢(shì)(P<0.01)，提示大鼠慢性輸卵管炎模型血流變學(xué)指標(biāo)差異較為顯著；與模型組比較，復(fù)合模型組還原黏度3.0/s、還原黏度30/s、還原黏度50/s均顯著性增加(P<0.01)，提示氣滯血瘀加炎癥的復(fù)合模型與單獨(dú)注菌的炎癥有明顯差異，病證結(jié)合模型構(gòu)建成功。

2.6.3 對(duì)大鼠的紅細(xì)胞剛性指數(shù)、聚集指數(shù)、電泳時(shí)間、變形指數(shù)，血沉方程K值的影響

由表13、14可知，與空白組比較，模型組中紅細(xì)胞剛性指數(shù)有顯著性升高(P<0.05)，紅細(xì)胞聚集指數(shù)有極為顯著的上升(P<0.01)；復(fù)合模型組的紅細(xì)胞剛性指數(shù)、紅細(xì)胞聚集指數(shù)有極顯著的增加(P<0.01)，提示大鼠慢性輸卵管炎模型構(gòu)建成功；與模型組比較，復(fù)合模型組紅細(xì)胞剛性指數(shù)、紅細(xì)胞聚集指數(shù)有極顯著性升高(P<0.01)，有顯著性升高(P<0.05)，提示氣滯血瘀加炎癥的復(fù)合模型與單獨(dú)注菌造成的炎癥模型有明顯差異。

表10 對(duì)全血黏度在切變率50/s、100/s、180/s的影響Table 10 Effects on whole blood viscosity under shear rates 50/s, 100/s, and 180/s

表11 對(duì)還原黏度3.0/s、30/s、50/s的影響Table 11 Effect on reducing viscosity under shear rates 3.0/s, 30/s, and 50/s

表12 對(duì)還原黏度100/s、180/s比較表Table 12 Comparison for reduced viscosity under shear rates 100/s and 180/s

表13 對(duì)紅細(xì)胞剛性指數(shù)、紅細(xì)胞聚集指數(shù)的影響Table 13 Influence on the red cell rigidity index and erythrocyte aggregation index

表14 對(duì)血沉方程K值，紅細(xì)胞電泳時(shí)間、變形指數(shù)的影響Table 14 Effect of K value on erythrocyte sedimentation rate, erythrocyte electrophoresis time, and deformation index

3 討論

慢性輸卵管炎是導(dǎo)致輸卵管性不孕癥和異位妊娠的重要原因，嚴(yán)重影響女性的生殖健康。目前西醫(yī)治療方法主要為抗生素，在慢性期和后遺癥期效果不佳，中藥在慢性轉(zhuǎn)歸方面療效顯著，具有活血、化瘀、止痛、抗菌、消炎、提高免疫力、改善微循環(huán)的作用，有利于局部炎癥的瘢痕軟化、松解，微循環(huán)的改善。然而慢性輸卵管炎容易反復(fù)發(fā)作，需要長(zhǎng)期按療程治療，為了更好地研究輸卵管炎的發(fā)病機(jī)制和尋找更有效的治療方法，建立最接近人類發(fā)病的理想動(dòng)物模型，是不可或缺的堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

病證結(jié)合模型是中西醫(yī)相結(jié)合的連接橋梁[4-7]，現(xiàn)代的病證結(jié)合模型，多數(shù)為西醫(yī)的病加中醫(yī)的證，這種病證結(jié)合模型的優(yōu)勢(shì)在于既有西醫(yī)中明確的病理組織、器官、血液的評(píng)價(jià)支持，又引入中醫(yī)的辨證思想，可以動(dòng)態(tài)觀察宏觀指標(biāo)和微觀指標(biāo)，這更符合臨床診治的情況，先辨病，再辨證，辨證論治，更有利于探討疾病的病理變化在中醫(yī)特定證型中的表現(xiàn)。

目前建立符合氣滯血瘀型慢性輸卵管炎的病證結(jié)合模型是非常困難的，本實(shí)驗(yàn)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中也進(jìn)行了長(zhǎng)期的摸索，最終確定了現(xiàn)行病證結(jié)合模型。在氣滯血瘀模型方面經(jīng)過(guò)反復(fù)的預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇了與人類發(fā)病機(jī)理最類似的方法進(jìn)行模型構(gòu)建，在炎癥模型方面摸索了不同的菌種，菌濃度，接種方法，接種劑量。在保證模型成功同時(shí)，兼顧大鼠的帶病生存，以備實(shí)驗(yàn)用。并且通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察，研究人員發(fā)現(xiàn)在整個(gè)過(guò)程中，復(fù)合模型組大鼠(病證結(jié)合模型大鼠)從行為學(xué)的一般特征和癥候總積分都符合氣滯血瘀模型的改變，與模型組大鼠(單純慢性輸卵管炎癥模型)存在顯著的差異，說(shuō)明病證結(jié)合模型的結(jié)果和單純慢性輸卵炎模型的結(jié)果是存在差異的。對(duì)氣滯血瘀型模型大鼠的血流變學(xué)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)氣滯血瘀型慢性輸卵管炎模型大鼠與慢性輸卵管炎模型大鼠在血液粘度、還原粘度、紅細(xì)胞剛性指數(shù)、聚集指數(shù)等方面存在差異性，這也為相關(guān)人員對(duì)中醫(yī)藥的進(jìn)一步研究提供了新思路，更加證明了病證結(jié)合模型大鼠建立的意義。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，復(fù)合模型組大鼠存在氣滯血瘀的改變，具有慢性輸卵管炎癥的表現(xiàn)，從而印證了病證模型的成功。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)常將中醫(yī)瘀證解釋為機(jī)體的心血管在特定的內(nèi)因和外因共同的作用下[8]，導(dǎo)致的一系列生理、病理改變，從而影響血液流變，表現(xiàn)為血液流動(dòng)緩慢，嚴(yán)重者可導(dǎo)致阻滯，由動(dòng)態(tài)，變成為靜態(tài)，血液循環(huán)障礙和受累的組織，發(fā)生炎癥、水腫、腐爛、壞死、增生等一系列變化。血瘀證包括一系列的生理、病理改變，與微循環(huán)、血液循環(huán)密切相關(guān)，與炎癥反應(yīng)、代謝障礙、免疫功能、組織增生都有一定關(guān)系[9-12]。因此常用血流變學(xué)檢測(cè)指標(biāo)對(duì)血瘀程度進(jìn)行評(píng)估。而炎癥是機(jī)體對(duì)損傷的一種反應(yīng)，包括血液和結(jié)締組織的變化、微循環(huán)的障礙等。機(jī)體受到致炎因子的刺激后，會(huì)引起一系列的變化，以助于清除有害物質(zhì)、修復(fù)受損組織。表現(xiàn)為血管通透性增加、白細(xì)胞游走和增值期等，這些變化會(huì)導(dǎo)致血流變學(xué)指標(biāo)出現(xiàn)相應(yīng)的改變。

本實(shí)驗(yàn)研究中，從宏觀到微觀多層次選擇觀察指標(biāo)，從癥候評(píng)分、病因病機(jī)變化以及血液流變學(xué)指標(biāo)改變來(lái)多角度界定，成功建立了大鼠氣滯血瘀型慢性輸卵管炎模型，并以臨床中西醫(yī)結(jié)合理論為基礎(chǔ)，通過(guò)聲、光、電、夾尾刺激造成大鼠氣滯血瘀，客觀分析該模型的可行性，并用于模型的系統(tǒng)評(píng)價(jià)，造模方法可行，成功率較高，較符合常見(jiàn)氣滯血瘀型慢性輸卵管炎的病癥臨床表現(xiàn)，為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究提供堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。