周氏燒燙傷膏對SD大鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面的修復(fù)作用研究*

袁宙新 張曉芹 劉忠達(dá)

浙江省麗水市中醫(yī)院 浙江 麗水 323000

燒燙傷是指因沸水、油、光、烈火、電、放射線或化學(xué)物質(zhì)作用于人體而引起的損傷，是臨床常見病和多發(fā)病，也是人們生活和工作中最常見的意外傷害之一[1]。臨床上常采用抗生素和手術(shù)治療燒燙傷，雖有一定的療效，但患者常常出現(xiàn)創(chuàng)面收斂緩慢、耐藥菌產(chǎn)生、肝腎功能損傷以及機體免疫功能降低等不良反應(yīng)。由于燒燙傷破壞了皮膚的防御功能，并且大量的壞死組織和細(xì)胞在創(chuàng)面生成，容易滋生細(xì)菌，造成感染[2,3]。因此，能否及時有效的促進(jìn)燙傷創(chuàng)面的修復(fù)，對于燒燙傷病人的恢復(fù)、避免傷口感染具有重要意義。周氏燒燙傷膏由雞油、冬青葉、蜂蠟等藥物組成，是民間中醫(yī)祖?zhèn)髅胤剑哂谢?、抗菌、消炎、止痛、促進(jìn)皮膚表皮細(xì)胞再生的功效。本研究采用大鼠深Ⅱ度燙傷模型，觀察周氏燒燙傷膏對大鼠深Ⅱ度皮膚燙傷的皮膚修復(fù)作用，為促進(jìn)周氏燒燙傷膏在臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物：SD大鼠，雄性，SPF級，昭衍（蘇州）新藥研究中心有限公司提供，實驗動物生產(chǎn)許可證：SCXK（蘇）2013-0003；實驗動物合格證編號：NO.201721832。

1.2 實驗試劑：周氏燒燙傷膏，棕黑色軟膏，有芳香氣味，白色軟殼塑料管裝，由麗水市中醫(yī)院提供；濕潤燒傷膏，淺棕色軟膏，有麻油香氣味，淺棕色軟殼塑料管裝，批號1702803A，汕頭市美寶制藥有限公司；0.9%氯化鈉注射液，批號D17080204，貴州科倫藥業(yè)有限公司；硫化鈉，批號20110624，成都市科龍化工試劑廠；水合氯醛，批號20130513，成都市科龍化工試劑廠；透明硫酸紙，華東醫(yī)藥股份有限公司器材化劑分公司。

1.3 實驗儀器：Sartorius BS100S型電子分析天平，北京賽多利斯天平有限公司產(chǎn)品；XK3124型電子秤；CAMRY EK 3252型電子秤，廣東香山衡器集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)；Canon 1XUS照相機；Motic顯微數(shù)碼攝像系統(tǒng)，廈門麥克澳迪實業(yè)有限公司產(chǎn)品。

1.4 模型的制備：SPF級SD大鼠45只，雄性，體重430～585g，適應(yīng)性飼養(yǎng)后，背部脊柱兩側(cè)用10%硫化鈉脫毛約6cm×8cm。第2天10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，將預(yù)先放入沸水中預(yù)熱的50g砝碼（直徑2.0cm）壓放在背部脫毛區(qū)8sec，每側(cè)2個傷口，每只大鼠4個燙傷傷口，造模后大鼠單籠飼養(yǎng)。燙傷后2d，稱體重，傷口拍照（置標(biāo)尺），用于圖像分析軟件分析傷口面積，并用透明硫酸紙畫出傷口創(chuàng)面，采用稱重計算傷口面積（每只大鼠4個燙傷口數(shù)據(jù)合并計算，作為一個動物的數(shù)據(jù)）。

1.5 實驗分組與給藥：分組：根據(jù)體重和傷口面積大小，將燙傷大鼠分成3組，每組15只，分別為模型對照、陽性對照、周氏燒燙傷膏組（傷膏組）。給藥：模型對照、陽性對照、傷膏組分別涂抹生理鹽水、濕潤燒傷膏、周氏燒燙傷膏；每天給藥2次，間隔6h，給藥前用生理鹽水洗去殘留藥物，多少時間后再給藥，連續(xù)13d。

1.6 大鼠燙傷組織創(chuàng)面愈合率：給藥前和給藥期間每3～4d，對傷口創(chuàng)面攝影，并用透明硫酸紙描記傷口創(chuàng)面輪廓，掃描，Motic軟件下測量輪廓面積，透明硫酸紙稱量紙裁剪后稱重，采用稱重計算傷口面積，計算傷口愈合率，傷口愈合率=(1-給藥組傷口面積/模型組傷口面積)×100%。

1.7 HE染色：最后一次給藥后第2天，麻醉處死大鼠，取傷口部位皮膚置福爾馬林中固定，每組隨機取2只大鼠傷口皮膚制作切片，HE染色，觀察皮膚變化。

1.8 統(tǒng)計學(xué)方法：采用Excel軟件進(jìn)行處理，所有計量數(shù)據(jù)以-x±s表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 周氏燒燙傷膏對大鼠外觀、行為活動、死亡數(shù)量的影響：各組大鼠燙傷后的連續(xù)4d，行為活動減弱，食欲下降，給藥后期各組大鼠食欲逐漸恢復(fù)正常。各組在給藥期間有大鼠死亡，見表1。

表1 各組連續(xù)給藥大鼠死亡數(shù)量（只）

表2 周氏燒燙傷膏對大鼠體重的影響（-x±s，g)

2.2 周氏燒燙傷膏對大鼠體重的影響：大鼠造模后至連續(xù)給藥3d，體重略有下降。3d后體重逐漸增加。與模型組比較，周氏燒燙傷膏組在給藥的13d體重的明顯增重（P＜0.05），其余各組大鼠體重未見明顯差異。具體數(shù)據(jù)見表2。

2.3 周氏燒燙傷膏對大鼠傷口面積及愈合率的影響：大鼠皮膚燙傷后1d顏色灰白，腫脹，與正常皮膚分界清楚，之后壞死皮膚逐漸發(fā)黑，失水干燥、發(fā)硬，表面凹凸不平，壞死皮膚邊緣翹起。實驗過程中對翹起的死皮做清創(chuàng)處理，見創(chuàng)面呈粉紅色，邊緣有菲薄的新生上皮形成。同時傷口周圍正常皮膚收縮，使傷口總面積逐漸縮小，各組創(chuàng)面表現(xiàn)基本類似。與模型組比較，周氏燒燙傷膏組創(chuàng)面有一定縮小趨勢，愈合率增加，于連續(xù)給藥10d時有統(tǒng)計意義。陽性對照組在給藥10d和13d傷口面積也明顯降低，愈合率明顯提高，但無統(tǒng)計學(xué)意義。具體結(jié)果見表3～4、圖1。

2.4 周氏燒燙傷膏對大鼠傷口輪廓面積的影響：對描記傷口輪廓的半透明稱量紙進(jìn)行掃描，Motic軟件下測量輪廓面積，和模型組相比，連續(xù)給藥時間10天，周氏燒燙傷膏組面積明顯減小。具體數(shù)據(jù)見表5。

表3 周氏燒燙傷膏對大鼠傷口面積的影響(-x±s，cm2)

表4 周氏燒燙傷膏對大鼠傷口愈合率的影響（-x±s，%）

表5 周氏燒燙傷膏對大鼠傷口輪廓面積的影響（-x±s，cm2）

圖1 各組大鼠燙傷創(chuàng)面給藥前后創(chuàng)面圖

2.4 周氏燒燙傷膏對大鼠皮膚組織病理學(xué)的的影響：連續(xù)給藥13d，燙傷大鼠模型對照組鏡下檢查發(fā)現(xiàn)上皮細(xì)胞缺失，表皮及真皮大量細(xì)胞變性、壞死，炎癥細(xì)胞浸潤，細(xì)胞間出現(xiàn)空泡，未見毛囊、皮脂腺等附屬結(jié)構(gòu)；周氏燒燙傷膏組上皮細(xì)胞基本分化完全，細(xì)胞層次清晰，炎癥細(xì)胞浸潤顯著減輕，可見附屬結(jié)構(gòu)和肉芽組織，可見新生血管，大量纖維增生；陽性組炎癥細(xì)胞浸潤顯著減輕，增生的纖維組織，排列整齊（圖2）。

圖2 連續(xù)給藥13天的大鼠燙傷創(chuàng)面病理圖

3 討論

周氏燒燙傷膏的組成，主要有雞油、冬青葉、蜂蠟等成分，其中雞油由雞腹內(nèi)的脂肪煉制而成，其營養(yǎng)物質(zhì)主要為蛋白質(zhì)和脂肪，缺乏鈣、鐵、胡蘿卜素等微量元素，雞油有良好的潤滑、保濕、保護(hù)皮膚黏膜的作用，因此在周氏燒燙傷膏中雞油為主要成分；冬青葉又名四季青葉，《本草圖經(jīng)》載：“燒灰，面膏涂之，治皸瘃殊效，兼滅瘢疵?！彼幚硌芯勘砻?，其主要含有原兒茶酸、揮發(fā)油、黃酮類成分，對于燙傷和潰瘍久不愈合等疾病具有良好效果，故用在組方中可以協(xié)助增加皮膚的愈合。蜂蠟是由蜂群內(nèi)適齡工蜂腹部的4對蠟腺分泌出來的一種脂肪性物質(zhì)，含有豐富的游離脂肪酸和維生素A等成分，中醫(yī)學(xué)認(rèn)為其具有收澀斂瘡，生肌止痛的功效，對皮膚潰瘍有良好的治療作用，是廣泛應(yīng)用于化妝品中的基質(zhì)，在周氏燒燙傷膏既是良好的基質(zhì)，又是良好的皮膚保濕劑。本實驗結(jié)果表明，周氏燒燙傷膏具有較好的皮膚修復(fù)作用，可供臨床借鑒應(yīng)用。

4 參考文獻(xiàn)

[1]韋民,李凱敏.燙傷Ⅰ號方內(nèi)服聯(lián)合長春燙傷膏外用治療Ⅱ度燒燙傷療效觀察[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2018，27(10)：1109-1112.

[2]崔博慧,李龍,黃凌遠(yuǎn),等.迪康凝膠對大鼠燙傷創(chuàng)面的治療作用及可能機制研究[J].成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2017，12(6)：674-680.

[3]唐文玲.美寶燙傷膏結(jié)合抗菌藥物應(yīng)用在燒傷創(chuàng)面治療中的臨床療效分析[J].當(dāng)代護(hù)士(下旬刊),2017(9)：65-66.