乳腺癌患者D-雙功能蛋白表達(dá)與腫瘤標(biāo)志物CEA和CA153關(guān)系的臨床研究

路欣，孔令玉，邱寧

乳腺癌是常見的惡性腫瘤，在婦科系統(tǒng)腫瘤中長期居于首位。乳腺癌早期的癥狀不易發(fā)現(xiàn)，很多患者就診時已經(jīng)到中晚期。術(shù)后轉(zhuǎn)移是造成乳腺癌患者死亡的重要原因，對婦女的健康構(gòu)成了極大的威脅，如果能發(fā)現(xiàn)乳腺癌更好的早期預(yù)警手段，提高早期診斷水平，就可以降低乳腺癌患者的致死風(fēng)險(xiǎn)，提高生存周期[1-2]。D-雙功能蛋白(D-bifunctional protein，DBP)，也稱為17β-雌二醇脫氫酶IV(17β-hydroxysteroid dehydrogenase IV, HSD17B4)，是一種過氧化物的酶蛋白，在類固醇激素的代謝中發(fā)揮著重要作用。最近的研究報(bào)道DBP在前列腺癌、肝癌等腫瘤中表達(dá)水平明顯升高[3]。筆者在前期基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)和臨床研究結(jié)果顯示，DBP在肝癌細(xì)胞、動物組織以及肝癌患者的腫瘤組織中高表達(dá)，通過誘導(dǎo)雌二醇(estradiol, E2)脫氫失活機(jī)制，因而促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖[4]。所以考慮DBP水平升高也可能和某些與雌激素相關(guān)腫瘤有很大的關(guān)系。本課題對乳腺癌腫瘤組織DBP水平進(jìn)行檢測，同時觀察乳腺癌患者和健康女性外周血癌胚抗原(CEA)以及糖類抗原153(CA153)的表達(dá)，探討研究DBP在乳腺癌中的表達(dá)水平及其與發(fā)病的關(guān)系，以及早期診斷的臨床相關(guān)性，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2012年1月—2015年12月在唐山市婦幼保健院施行乳腺癌手術(shù)的20例女性患者為試驗(yàn)組，年齡35～65(38.5±4.9)歲；隨機(jī)抽選同期進(jìn)行健康查體的20例正常女性為健康對照組，年齡27～65(43.0±6.5)歲。乳腺癌患者全部經(jīng)病理和臨床證實(shí)，手術(shù)前未經(jīng)過放化療等治療，無其他特殊病史。20例乳腺癌女性患者術(shù)后的腫瘤組織和距離腫瘤邊緣1 cm以上的癌旁正常組織留取病理標(biāo)本。并且經(jīng)2名資深的病理科醫(yī)師確認(rèn)病理結(jié)果。2組年齡等差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過，全部受試者知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測指標(biāo)與方法 2組試驗(yàn)對象晨起空腹采取靜脈血液，在離心機(jī)上離心分離血清后用DX-800i化學(xué)發(fā)光儀，采用化學(xué)發(fā)光免疫法測量CEA 和CA153的表達(dá)水平，所用試劑購買自美國貝克曼公司；癌組織和癌旁正常組織標(biāo)本石蠟包埋后用萊卡組織切片機(jī)切片，組織切片后先用HE染色進(jìn)行初步確認(rèn)對比后，然后應(yīng)用免疫組織化學(xué)檢測試劑盒(北京中杉金橋生物公司)檢測DBP表達(dá)水平，DBP表達(dá)水平用積分光密度(IOD)表示。

2 結(jié) 果

2.1 試驗(yàn)組與健康對照組血清CEA和CA153水平比較 試驗(yàn)組血清腫瘤標(biāo)志物 CEA、CA153水平顯著高于健康對照組，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

表1 試驗(yàn)組與健康對照組血清CEA、

2.2 乳腺癌腫瘤組織和癌旁正常組織DBP表達(dá)水平比較 免疫組化染色結(jié)果顯示癌組織DBP表達(dá)水平顯著高于癌旁組織。進(jìn)一步通過灰度值分析，乳腺癌組織DBP表達(dá)的灰度值為(96.3±11.4)，癌旁組織為 (29.8±5.7)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.301,P<0.05)。

2.3 試驗(yàn)組CEA、CA153與DBP表達(dá)水平的相關(guān)性 對試驗(yàn)組CEA和CA153表達(dá)水平與DBP表達(dá)水平進(jìn)行了相關(guān)性分析, 結(jié)果顯示，DBP與CEA和CA153的表達(dá)量均呈正相關(guān)(r=0.800,P<0.01；r=0.709,P<0.01)，見圖1。

圖1 CEA、CA153與DBP表達(dá)水平的相關(guān)性

3 討 論

乳腺癌是門診和住院中常見的婦科惡性腫瘤，目前仍沒有敏感性特別好的非創(chuàng)傷性檢測方法，除了影像學(xué)診斷和病理診斷，血清腫瘤標(biāo)志物檢測是臨床最為常用的腫瘤診斷方法之一，但與影像學(xué)診斷和病理相比血清腫瘤標(biāo)志物檢測簡單快捷，因此有較好的臨床實(shí)用意義[5]。CA153是乳腺癌診斷應(yīng)用較為普遍的監(jiān)測因素，有研究顯示大約有1/3的乳腺癌患者血清CA153水平升高，并且升高和變化與乳腺癌的好轉(zhuǎn)或惡化有關(guān)，本研究也表明乳腺癌患者的CA153水平較健康對照組有顯著升高。CEA常作為腺癌的非特異性診斷標(biāo)記物，在其他惡性腫瘤的鑒別診斷、療效監(jiān)測中有重要的臨床意義, 但是由于CA153為非特異性指標(biāo), 常與其他指標(biāo)聯(lián)合檢測[6]。雖然乳腺癌的血清學(xué)檢測方法較為簡便快捷, 但是血清腫瘤標(biāo)志物檢測的敏感性和特異性并不高，況且血清學(xué)檢測也受到外部和體內(nèi)諸多環(huán)境的影響，因此如果血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物檢測聯(lián)合應(yīng)該能夠更好地提升乳腺癌檢出準(zhǔn)確率。

DBP基因是一種與炎性反應(yīng)、脂肪酸代謝、性類固醇代謝密切相關(guān)的酶蛋白分子。最近研究顯示，DBP與腫瘤有密切關(guān)系，DBP在前列腺癌組織比癌旁正常組織高表達(dá)，并可以作為前列腺癌預(yù)后差獨(dú)立標(biāo)記物[7]。另外其他腫瘤組織如肝細(xì)胞肝癌、直腸癌中都高度表達(dá)，DBP在卵巢高表達(dá)和通過對雌激素失活的作用防止E2在卵巢積聚，為卵巢癌的預(yù)防和治療提供了新靶點(diǎn)[8-13]。

本課題在前期研究基礎(chǔ)上，率先以DBP為切入點(diǎn)，探索和揭示了乳腺癌DBP與CEA、CA153的關(guān)系，與前期肝細(xì)胞肝癌、子宮內(nèi)膜癌的研究結(jié)果表現(xiàn)出一致性，研究結(jié)果不僅證實(shí)乳腺癌腫瘤組織DBP的表達(dá)顯著升高，并且顯著高于癌旁正常組織，乳腺癌的血清CEA和CA153水平表達(dá)顯著高于正常女性 (P<0.01)，進(jìn)一步研究顯示，試驗(yàn)組腫瘤組織DBP的表達(dá)水平與患者血清CEA、CA153水平呈正相關(guān)。由于DBP在血液中幾乎不表達(dá)，能夠作為良好的基因檢測和治療觀察靶點(diǎn)，這恰恰補(bǔ)充了血清腫瘤標(biāo)志物檢測的不足，結(jié)果清晰地表明乳腺癌患者DBP聯(lián)合血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物CEA和CA153的檢測能夠更好地提高乳腺癌早期的診斷率， 此外DBP還可以作為乳腺癌術(shù)后觀察和病情監(jiān)測的新基因靶點(diǎn)。

利益沖突：無

作者貢獻(xiàn)聲明

路欣：設(shè)計(jì)研究方案，實(shí)施研究過程，論文撰寫，論文修改；孔令玉：設(shè)計(jì)研究思路，分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)，論文審核；邱寧：實(shí)施研究過程，資料搜集整理