亞熱帶地區(qū)桑樹病原菌的采集鑒定及分離純化工作進展

廣東、廣西、海南和云南作為全國最主要的蠶桑生產(chǎn)地區(qū)，其桑樹病害具有典型性、范圍廣、危害嚴重等特點。為了探明桑樹病害種類及病害的發(fā)生情況和趨勢，為建立桑樹主要病原的分子快速診斷技術(shù)以及綠色生態(tài)桑病防控技術(shù)提供依據(jù)，在上述地區(qū)的主要蠶區(qū)開展調(diào)研和病樣收集，并對病樣材料進行了顯微觀察、PCR檢測鑒定及病原的分離純化，結(jié)果如下。

①在華南農(nóng)業(yè)大學(xué)桑園和廣東省英德蠶種場分別收集47份和16份皺縮和花葉狀桑葉樣品，檢測出其中20份(42.55%)樣品中存在植原體(Phytoplasma)，21份(44.68%)樣品存在桑脈帶相關(guān)病毒(Mulberryveinbandingassociatedvirus)，23份(48.93%)樣品中?；ㄈ~型萎縮相關(guān)病毒(mulberrymosaicdwarfassociatedvirus)，且6份(12.76%)樣品中同時存在三種病原，說明三種病原同時感染桑樹，但導(dǎo)致的癥狀還難以辨認；

②從云南省楚雄州大姚縣和四川省宜賓市興文縣采集的疑似紫紋羽病根部樣本，顯微觀察發(fā)現(xiàn)紫紋羽病根部表皮存在密集大量的紫色顆粒(疑似真菌孢子)，高通量測序分析發(fā)現(xiàn)含量最高的為叢枝菌根glomeraceous，屬球囊霉科(Glomeraceae)和假單胞菌屬的細菌，但據(jù)報道該屬真菌和細菌為無致病性且為有益菌，猜測表面紫色顆粒并非桑樹紫紋羽病病原，還需進一步檢測分離；

③從廣西區(qū)融水縣采集的桑輪紋病病葉，顯微觀察發(fā)現(xiàn)病葉表面存在明顯的菌絲和子囊殼，ITS未檢測到相關(guān)病原菌，有待進一步研究；

④從廣西區(qū)忻城板江、廣西區(qū)宜州區(qū)慶遠鎮(zhèn)、華南農(nóng)業(yè)大學(xué)桑園和云南省永仁縣等地收集到4份桑樹根結(jié)線蟲樣品，顯微觀察發(fā)現(xiàn)線蟲在桑樹根結(jié)中的病灶，病灶中存在大量線蟲蟲卵和成蟲，并嘗試通過種植土豆活體繁殖線蟲。

病原的檢測和分離為適應(yīng)蠶桑多元化發(fā)展的桑園高產(chǎn)防病栽培管理技術(shù)的研究奠定了基礎(chǔ)。下一步需活體純化繁殖桑白粉病、污葉病、赤銹病和線蟲病病原；鑒定桑輪紋病、紫紋羽病和?；ㄈ~病病原；建立病原的快速分子檢測手段。