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    桑椹品質(zhì)評(píng)價(jià)因子的分析研究

    2019-05-28 01:59:54趙珮黃傳書唐小平何佳洋張明海
    蠶學(xué)通訊 2019年1期
    關(guān)鍵詞:果桑糖酸桑椹

    趙珮 黃傳書 唐小平 劉 艷 雷 霆 何佳洋 張明海

    (1.重慶市蠶業(yè)科學(xué)技術(shù)研究院,重慶 400700;2.重慶市農(nóng)技推廣站,重慶 400020;3.重慶三峽農(nóng)科院,重慶 404155)

    近年來(lái),“立桑為業(yè),綜合發(fā)展”成為蠶桑產(chǎn)業(yè)供給結(jié)構(gòu)調(diào)整的趨勢(shì),其中果桑產(chǎn)業(yè)發(fā)展尤為迅速[1]。目前為止,中國(guó)已有10多個(gè)省、區(qū)(市)廣泛引種栽培果桑[2],果桑栽植面積已達(dá)1.5萬(wàn)hm2,其中具有較大利用價(jià)值的果桑資源有60余份[3]。因此,系統(tǒng)地開展桑椹品質(zhì)特性分析和綜合評(píng)價(jià),建立桑椹品質(zhì)評(píng)價(jià)體系對(duì)于果桑優(yōu)良品種選育、桑椹食品保健品的開發(fā)及果桑產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義[4]。有關(guān)桑椹品質(zhì)指標(biāo)的研究已有較多報(bào)道,但涉及的品種都較少[4-6],基于較大樣本量的概率統(tǒng)計(jì)的指標(biāo)研究尚未見報(bào)道。因子分析方法主要是減少變量個(gè)數(shù),即將多個(gè)指標(biāo)化為少數(shù)幾個(gè)綜合指標(biāo),聚類分析則將一批樣品或變量按其在性質(zhì)上的親疏程度進(jìn)行分類[7],這些方法已成為果品品質(zhì)評(píng)價(jià)研究的重要手段[7-14]。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)桑椹10個(gè)綜合測(cè)定指標(biāo)的水平分析、因子分析及聚類分析,研究桑椹指標(biāo)之間的關(guān)系,分析影響桑椹品質(zhì)的指標(biāo)及其權(quán)重,為果桑評(píng)價(jià)體系的科學(xué)分級(jí)及桑椹品質(zhì)綜合評(píng)價(jià)體系的建立提供基礎(chǔ)研究。

    1 材料與方法

    1.1 樣品材料

    1.1.1 樣品桑園條件

    樣品全部采自重慶市蠶科院果桑品種比較試驗(yàn)園,按照株距×行距為2.00m×1.33m栽植,每667m2留條數(shù)5500條左右,肥水及病蟲害防控等管理全部一致,桑園較平整,光照充足、強(qiáng)度一致。

    1.1.2 樣品采摘

    2017年從重慶市蠶科院果桑品種比較試驗(yàn)園采摘果桑品種38個(gè)(表1),每個(gè)品種分別采5株,每株從四周到中間采摘位于枝條中段的桑椹,成熟度參照《CBT 29572-2013桑椹(桑果)》標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行,采摘后立即用保鮮冰盒分裝。

    1.1.3 樣品保存

    將所采摘樣品及時(shí)送回實(shí)驗(yàn)室,根據(jù)測(cè)定內(nèi)容分別保存,用于測(cè)定可溶性固形物、還原糖、總酸、果膠、多酚和花色苷含量的桑椹,于-40℃冷凍保存;用于測(cè)定粗蛋白、灰分、多糖和黃酮含量的桑椹,在50℃烘干、粉碎過(guò)60 篩目后于4℃貯存。

    1.2 儀器與設(shè)備

    K9860型全自動(dòng)凱氏定氮儀(海能儀器生產(chǎn))、UV1800型紫外可見分光光度計(jì)[翱藝儀器(上海)有限公司]、PAL-1型手持便攜式折光儀(日本愛(ài)宕)、TG16-WS臺(tái)式離心機(jī)(湖南湘儀)、KU-20-B型超純水機(jī)(重慶潤(rùn)達(dá)康健)。

    1.3 測(cè)定方法

    1.3.1 品質(zhì)因子測(cè)定

    (1)常規(guī)物質(zhì)測(cè)定:可溶性固形物測(cè)定按NY/T2637-2014《水果和蔬菜可溶性固形物含量的測(cè)定-折射儀法》[15],還原糖含量測(cè)定按NY/T2742-2015《水果及制品可溶性糖的測(cè)定3,5-二硝基水楊酸比色法》[16],總酸測(cè)定按GB/T 12456-2008《食品中總酸的測(cè)定》[17],粗蛋白含量測(cè)定按GB 5009.5-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》[18],灰分含量測(cè)定按GB 5009.4-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中灰分的測(cè)定》[19],多酚含量測(cè)定按李巨秀的福林—酚比色法[20]。

    糖酸比=還原糖/總酸。

    固酸比=可溶性固形物/總酸。

    (2)黃酮含量測(cè)定

    參考孔美蘭[21]的響應(yīng)面優(yōu)化超聲波提取桑椹酒渣總黃酮方法。

    稱取2g的桑椹粉置于100mL錐形瓶中,加入50.00%乙醇溶液30mL搖勻,在80℃下超聲波提取40min,離心后用50.00%乙醇定容至50mL,作為待測(cè)液。準(zhǔn)確吸待測(cè)液1mL于25mL的容量瓶中,按照蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線方法測(cè)定吸光度,計(jì)算樣品總黃酮的量。

    (3)花色苷含量測(cè)定

    參考楊兆艷[22]的pH示差法測(cè)定桑椹紅色素中花青素含量方法。

    稱取10g鮮桑果,研磨成勻漿,按物料比1.0∶9.8加入酸化甲醇,41℃超聲100W提取39min。真空抽濾(250mL抽濾瓶+100mm漏斗),定容于100mL。移取2份花色苷提取液(每份2.5mL),分別用pH1.0和pH4.5的緩沖液定容至25mL,60min后均在520nm和700nm處測(cè)定吸光值。

    1.4 統(tǒng)計(jì)分析

    用DPS 17.10統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 測(cè)定指標(biāo)的水平分析

    2.1.1 測(cè)定指標(biāo)的變異性分析

    供試果桑品種的測(cè)定指標(biāo)數(shù)據(jù),詳見表2。

    對(duì)表2資料進(jìn)行水平分析, 其中變異系數(shù)越大,表明桑椹品種間此指標(biāo)的差異越大。結(jié)果,糖酸比、固酸比、總酸、花色苷和還原糖的變異系數(shù)接近甚至超過(guò)50%,其最大值與最小值分別相差20.19倍、13.20倍、5.17倍、17.58倍和7.38倍;蛋白質(zhì)、多酚、黃酮和可溶性固形物的變異系數(shù)均在30%左右,其最大值與最小值分別相差3.87倍、2.53倍、2.55倍和3.16倍;灰分的變異系數(shù)在20.00%左右,其最大值與最小值相差2.71倍,詳見表3。

    表1 供試果桑品種名稱和引種(原產(chǎn))地

    續(xù)表2 38個(gè)供試果桑品種指標(biāo)測(cè)定表

    表3 10項(xiàng)桑椹測(cè)定指標(biāo)的變異情況

    將表2各測(cè)定指標(biāo)由小到大等間距分組(軟件默認(rèn)),采用DPS軟件對(duì)各指標(biāo)數(shù)據(jù)擬合進(jìn)行頻次分析。結(jié)果表明,所有分析數(shù)據(jù)均符合農(nóng)業(yè)研究中常見的抽樣分布,概率值P≥0.05,其中,可溶性固形物、多酚和灰分含量符合正態(tài)分布,糖酸比含量符合對(duì)數(shù)正態(tài)分布,總酸、黃酮和蛋白質(zhì)含量符合韋布分布,花色苷含量符合伽馬分布,還原糖、固酸比含量符合貝塔分布,詳見圖1。

    2.1.2 桑椹各測(cè)定指標(biāo)間的相關(guān)性

    對(duì)表2資料進(jìn)行相關(guān)性分析,固酸比、糖酸比、可溶性固形物和還原糖含量?jī)蓛芍g呈極顯著正相關(guān),其中固酸比和糖酸比的相關(guān)系數(shù)最高R=0.9007,還原糖和可溶性固形物的相關(guān)系數(shù)為0.8207,糖酸比與還原糖、可溶性固形物的相關(guān)系數(shù)均較高,R分別為0.8110、0.7176;固酸比與可溶性固形物、還原糖的相關(guān)系數(shù)分別為0.7476和0.5996。除還原糖和蛋白質(zhì),總酸含量與其余指標(biāo)均呈顯著或極顯著正相關(guān)。多酚、黃酮和花色苷含量?jī)蓛芍g呈極顯著正相關(guān),多酚和花色苷、黃酮的R分別為0.6678、0.5959,黃酮和花色苷的相關(guān)系數(shù)為0.5293?;曳趾瓦€原糖、可溶性固形物、糖酸比和固酸比均呈極顯著負(fù)相關(guān),R分別為-0.7604、-0.7028、-0.7358和-0.6165,詳見表4。

    2.2 測(cè)定指標(biāo)的因子分析

    因子分析,主要是根據(jù)變量相關(guān)性的大小分組,使得同組內(nèi)的變量之間相關(guān)性(共性)較高,不同組的變量相關(guān)性較低,且要求變量間的關(guān)系是線性相關(guān)的,主要目的是減少變量個(gè)數(shù),統(tǒng)計(jì)學(xué)上稱為降維;并為綜合指標(biāo)提供可供參考的變量的權(quán)重[23]。

    圖1 桑椹測(cè)定指標(biāo)的分布頻次圖

    變 量可溶性固形物還原糖糖酸比固酸比總酸多酚黃酮花色苷蛋白質(zhì)還原糖0.8207??糖酸比0.7176??0.8110??固酸比0.7476??0.5996??0.9007??總 酸-0.3989?-0.2421-0.6146??-0.7650??多 酚0.26270.3818?0.14960.00710.3304?黃 酮-0.1255-0.0534-0.2130-0.29480.6386??0.5959??花色苷0.24500.3293?0.0803-0.04690.4147??0.6678??0.5293??蛋白質(zhì)-0.3330?-0.3541?-0.1839-0.1141-0.11760.0939-0.12570.0042灰 分-0.7028??-0.7604??-0.7358??-0.6165??0.3499?-0.12830.1627-0.17600.2434

    按因子分析要求,對(duì)桑椹的10個(gè)測(cè)定指標(biāo)(變量)進(jìn)行相關(guān)性分析,所有變量都至少與一個(gè)其他變量線性相關(guān),說(shuō)明這些變量適合進(jìn)行因子分析。對(duì)桑椹的10項(xiàng)測(cè)定指標(biāo)進(jìn)行因子分析(因子估計(jì)方法采用主成分法,旋轉(zhuǎn)方法采用不旋轉(zhuǎn))。結(jié)果表明,總方差的83.27%貢獻(xiàn)來(lái)自于前3個(gè)因子,即前3個(gè)因子所包含的信息占總體信息量的83.27%,且每個(gè)因子的方差貢獻(xiàn)率均大于5.00%,其中,因子1的方差貢獻(xiàn)率44.83%,代表性指標(biāo)糖酸比、固酸比、可溶性固形物、還原糖;其次是灰分,可定義為綜合風(fēng)味因子;因子2的方差貢獻(xiàn)率為27.13%,主要指標(biāo)是花色苷、多酚、黃酮,可定義為功能因子;第3因子的方差貢獻(xiàn)率為11.32%,代表性指標(biāo)為蛋白質(zhì),可定義為營(yíng)養(yǎng)因子,詳見表5。

    在因子1中,糖酸比的權(quán)重最大,即糖酸比作為綜合風(fēng)味因子代表性最好,故剔除同等意義的固酸比。綜合風(fēng)味因子與灰分含量呈負(fù)相關(guān),這與相關(guān)性分析中灰分與還原糖、糖酸比、可溶性固形物和固酸比極顯著負(fù)相關(guān)的結(jié)果一致(見表4),同時(shí)灰分含量的權(quán)重遠(yuǎn)沒(méi)有糖酸比權(quán)重大,故剔除灰分指標(biāo)。

    綜上,綜合風(fēng)味因子簡(jiǎn)化為糖酸比、可溶性固形物和還原糖,功能因子簡(jiǎn)化為花色苷、多酚和黃酮,營(yíng)養(yǎng)因子為蛋白質(zhì)。

    2.3 測(cè)定指標(biāo)的聚類分析

    由桑椹測(cè)定指標(biāo)的因子分析可知,綜合風(fēng)味因子和功能因子所包含信息占總信息的71.96%,

    表5 桑椹測(cè)定指標(biāo)的因子分析結(jié)果

    因此,以這兩個(gè)因子的指標(biāo)(糖酸比、可溶性固形物、還原糖、多酚、黃酮、花色苷)及總酸為參數(shù),采用K-均值法進(jìn)行動(dòng)態(tài)聚類,將38個(gè)樣品可聚為5類,詳見表6。

    表6 桑椹品質(zhì)聚類分析

    聚類分析結(jié)果表明,第一類和第二類分別有15個(gè)和8個(gè)品種,這兩類的可溶性固形物相差不大,第一類桑椹的還原糖含量較第二類高25.38%,但是總酸含量是第二類桑椹的2.07倍,因此糖酸比較第二類稍低;另外,第一類桑椹的多酚、黃酮和花色苷較第二類桑椹分別高49.97%、42.85%和81.74%。綜合比較,第一類桑椹品種顏色較深,功能成分較豐富,糖酸比接近1,口感酸甜適中,適用于鮮食,代表品種為大十、嘉陵30、倫敦109、苗61和2000-3等。第二類桑椹顏色較淺,功能成分含量較低,糖酸比稍高,口感較甜,考慮鮮食或加工,代表品種為紅果1號(hào)、嘉陵40號(hào)、和陜西甜桑等。第三類共有9個(gè)品種,其可溶性固形物含量、還原糖含量和糖酸比最高,分別為13.43%、9.21%和3.11,干物質(zhì)較多、且口感偏甜,可考慮干制或鮮食,代表品種為德果一號(hào)、保坎61和中桑5801等。第四類共5個(gè)品種,可溶性固形物、還原糖、糖酸比均較低,多酚、黃酮和花色苷的含量也較低,顏色偏紅,風(fēng)味不佳且功能物質(zhì)含量較少,考慮加工用,如陜西抗寒、四季果桑等。第五類只有1個(gè)品種,即紫金6號(hào),其花色苷、黃酮和多酚的含量最高,分別為3.29mg·g-1、22.25mg·g-1、20.19mg·g-1;可溶性固形物含量(5.00%)和糖酸比(0.29)較測(cè)定的所有桑椹品種低,屬深色品種、功能物質(zhì)最豐富,但口感酸,適合釀酒、果醋的加工,同時(shí)考慮藥用和功能食品的開發(fā)。

    3 結(jié)論與討論

    3.1 結(jié)論

    通過(guò)分析,各指標(biāo)均服從農(nóng)業(yè)研究中常見的抽樣分布,且概率值P≥0.05表明抽樣的合理性。分析結(jié)果:(1)桑椹花色苷、糖酸比、固酸比、總酸和還原糖的變異系數(shù)較大,接近甚至超過(guò)50.00%;蛋白質(zhì)、多酚、黃酮和可溶性固形物的變異系數(shù)均在30.00%左右;灰分的變異系數(shù)最小。(2)固酸比、糖酸比、可溶性固形物和還原糖含量?jī)蓛芍g均呈極顯著正相關(guān),多酚、黃酮和花色苷含量?jī)蓛芍g呈極顯著正相關(guān);除還原糖和蛋白質(zhì),總酸含量與其余指標(biāo)均呈顯著或極顯著正相關(guān);灰分和還原糖、可溶性固形物、糖酸比和固酸比均呈極顯著負(fù)相關(guān)。(3)綜合風(fēng)味因子的方差貢獻(xiàn)率最高,其次是功能因子,最后是營(yíng)養(yǎng)因子。通過(guò)綜合分析果桑品質(zhì)評(píng)價(jià)指標(biāo)簡(jiǎn)化為8個(gè)即可溶性固形物、還原糖、總酸、糖酸比、花色苷、多酚、黃酮和蛋白質(zhì)。(4) 以綜合風(fēng)味因子、功能因子和總酸為參數(shù),將所測(cè)的38個(gè)果桑品種進(jìn)行聚類分析,分為5類。綜合比較,第一類果桑品種糖酸比接近1.00,酸甜適中,適合鮮食或加工,代表品種為大十和嘉陵30號(hào);第二類果桑品種糖酸比為1.79,口感較甜,適合鮮食或加工,代表品種為嘉陵40號(hào)和陜西甜桑;第三類果桑品種可溶性固形物、糖酸比均最高,干物質(zhì)含量高且口感偏甜,適合鮮食、干制,代表品種為德果一號(hào)和中桑5801;第四類各指標(biāo)表現(xiàn)均較低,風(fēng)味不佳且功能物質(zhì)含量較少,考慮加工用,代表品種為陜西抗寒和四季果桑。第五類1個(gè)品種,即紫金6號(hào),雖然可溶性固形物和糖酸比最低,但是功能物質(zhì)含量突出,適合釀酒、果醋的加工,同時(shí)考慮藥用和功能食品的開發(fā)。

    3.2 討論

    (1)變異分析表明,反應(yīng)桑椹外觀顏色的花色苷和與風(fēng)味口感密切相關(guān)的糖酸比、固酸比、總酸和還原糖變異幅度較大,接近或超過(guò)50.00%,這有利于桑椹指標(biāo)分級(jí)研究的開展,且應(yīng)首先進(jìn)行桑椹風(fēng)味指標(biāo)的分級(jí)評(píng)價(jià);這在因子分析和聚類分析結(jié)果中也得到印證,因子分析中表明綜合風(fēng)味因子的權(quán)重最大,而聚類分析中每類桑椹的糖酸比差別較為明顯。

    (2)聚類分析表明果桑品質(zhì)評(píng)價(jià)指標(biāo)分級(jí)的必要性,但由于本實(shí)驗(yàn)研究選取的參數(shù)較多,聚類分析中果桑品種分類較為籠統(tǒng),尤其是風(fēng)味評(píng)價(jià)上不夠具體,有待今后研究完善。

    (3)本研究指標(biāo)還不夠全面系統(tǒng),如對(duì)加工性狀、栽培性狀、理化指標(biāo)(如色澤、出汁率和VC等)等缺乏調(diào)查測(cè)定,后續(xù)有待進(jìn)一步擴(kuò)展深入,盡可能建立更加合理、客觀、全面的果桑栽培、桑椹品質(zhì)及加工等綜合評(píng)價(jià)體系,為果桑產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展提供更加科學(xué)的理論依據(jù)。

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