糖尿病腎病患者血清胰島素抵抗指數(shù)、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1與炎性因子表達(dá)水平的相關(guān)性

魏靖 朱慧楠

(1中國(guó)科學(xué)院大學(xué)附屬北京懷柔醫(yī)院內(nèi)分泌科，北京 101400；2中國(guó)人民大學(xué)醫(yī)院)

糖尿病腎病(DN)是最常見(jiàn)的糖尿病(DM)微血管并發(fā)癥之一，是DM最嚴(yán)重和危害最大的并發(fā)癥之一〔1～4〕。有研究〔5～8〕表明胰島素抵抗(IR)、胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)-1及炎性因子〔白細(xì)胞介素(IL)-6和腫瘤壞死因子(TNF)-α〕參與DM發(fā)病機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)對(duì)比單純DM和DN患者胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)及IGF-1、IL-6、TNF-α的基因水平，探討阻斷DM并發(fā)癥進(jìn)程的可能性。

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象 選取北京懷柔醫(yī)院2017年1月至2018年5月收治的DM患者193例，其中單純DM患者84例〔平均年齡(52.9±6.1)歲〕作為實(shí)驗(yàn)1組，DN患者109例〔平均年齡(56.4±4.8)歲〕作為實(shí)驗(yàn)2組；同期體檢的健康者40例〔平均年齡(53.2±2.5)歲〕作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組病程2～9〔平均(6.46±1.03)年〕。入選的DM患者均符合《2013年版中國(guó)2型糖尿病防治指南》中的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)〔9〕，各組間一般資料具有可比性(P>0.05)，均為知情下自愿參與。

1.2實(shí)驗(yàn)試劑和儀器 IGF-1、IL-6和TNF-α酶聯(lián)免疫試劑盒購(gòu)于長(zhǎng)春鼎國(guó)生物有限公司；引物購(gòu)于上海生物工程有限公司；Trizol、反轉(zhuǎn)錄試劑盒、實(shí)時(shí)熒光定量試劑盒購(gòu)于TAKARA公司。實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(ABI7300)，Biometra PCR擴(kuò)增儀，Epoch酶標(biāo)儀(Biotek公司，美國(guó))。

1.3血清IGF-1、IL-6和TNF-α蛋白含量檢測(cè) 受試者清晨空腹抽取靜脈血5 ml，1 500 r/min離心10 min，留血清待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清IGF-1、IL-6和TNF-α蛋白含量，嚴(yán)格按照試劑盒方法逐步加樣，顯色后在Epoch酶標(biāo)儀450 nm處檢測(cè)。

1.4血清IGF-1、IL-6和TNF-α mRNA水平檢測(cè) 受試者清晨空腹抽取靜脈血5 ml，1 500 r/min離心10 min，留血清。Trizol 提取總RNA、反轉(zhuǎn)錄，每個(gè)樣本基因擴(kuò)增3次，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)IGF-1、IL-6和TNF-α mRNA水平，取Ct值均值，采用2-ΔΔCt表示目的基因相對(duì)表達(dá)水平。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS13.0軟件行t檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson分析。

2 結(jié) 果

2.1各組HOMA-IR、血清IGF-1、IL-6和TNF-α蛋白含量及mRNA水平比較 與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)1、2組HOMA-IR、血清IGF-1、IL-6及TNF-α蛋白含量及mRNA水平均顯著升高，且實(shí)驗(yàn)2組各指標(biāo)明顯高于實(shí)驗(yàn)1組，組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 各組HOMA-IR、血清IGF-1、IL-6和TNF-α蛋白及mRNA含量的比較

與對(duì)照組比較:1)P<0.05；與實(shí)驗(yàn)1組比較:2)P<0.05

2.2DN患者HOMA-IR、血清IGF-1水平與IL-6、 TNF-α水平的相關(guān)性 DN患者HOMA-IR、血清IGF-1水平與IL-6、 TNF-α水平呈正相關(guān)性，見(jiàn)表2。

表2 DN患者HOMA-IR、血清IGF-1水平和IL-6、TNF-α水平的相關(guān)性

3 討 論

DM患者的高血糖狀態(tài)不但影響患者生活質(zhì)量，還能誘發(fā)DM并發(fā)癥加重病情。DN長(zhǎng)期得不到控制就會(huì)出現(xiàn)腎小球硬化、腎小管重吸收功能喪失，伴隨死亡率上升〔4，6〕。因此，DM患者防治并發(fā)癥發(fā)生是治療關(guān)鍵。高血糖、高血脂能激活絲氨酸激酶應(yīng)激信號(hào)通路，誘發(fā)胰島素受體及受體底物中絲氨酸激酶不斷上升，減弱胰島素的作用，從而造成IR，也就是胰島素的生物學(xué)效應(yīng)低于正常水平〔6，10，11〕。IGF-1是單鏈顯性蛋白，在分子結(jié)構(gòu)上與胰島素家族非常類(lèi)似，與慢性腎臟病變呈正相關(guān)性，是評(píng)估慢性腎臟病的主要因素〔12,13〕。IL-6能夠激活肝細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌大量急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，降低胰島素受體的作用〔7，14〕。TNF-α能夠分泌促炎因子增加內(nèi)皮細(xì)胞合成并釋放細(xì)胞因子，通過(guò)減少胰島素介導(dǎo)的葡萄糖及脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)誘發(fā)IR〔15，16〕。以上幾種因子都與胰島素作用密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明HOMA-IR、IGF-1、IL-6、TNF-α參與糖尿病的發(fā)病進(jìn)程，可作為尋求阻斷DM進(jìn)程藥物的新靶點(diǎn)；調(diào)控DM患者HOMA-IR及血清IGF-1水平，能有效降低炎癥因子IL-6、TNF-α水平，減輕炎癥反應(yīng)，從而對(duì)DM并發(fā)癥防治具有指導(dǎo)意義。