嵌合抗原受體T細(xì)胞免疫治療在自身免疫病的研究進(jìn)展

王鵬程 綜述 劉志紅 審校

隨著對(duì)自身免疫病發(fā)生、發(fā)展機(jī)制的認(rèn)識(shí)不斷加深，人們對(duì)于自身免疫病的治療方式已不僅僅局限于傳統(tǒng)的激素及廣譜免疫抑制劑。各種針對(duì)自身免疫病致病細(xì)胞及細(xì)胞因子的大分子靶向藥物及生物制劑也在臨床逐漸得到廣泛的應(yīng)用，例如靶向腫瘤壞死因子α(TNF-α)、CD19及白細(xì)胞介素6受體(IL-6R)的單克隆抗體能夠通過(guò)與其靶抗原特異性結(jié)合起到選擇性抑制免疫的作用。相比于激素及廣譜免疫抑制劑，大分子靶向藥物的靶向性更強(qiáng)且副作用更小，但其依然無(wú)法促成免疫平衡永久性恢復(fù)，患者往往需要終身用藥。因此，尋找能夠永久恢復(fù)免疫平衡的全新治療方法至關(guān)重要。

嵌合抗原受體T細(xì)胞(CAR-T)免疫治療，是一種新型的精準(zhǔn)靶向細(xì)胞免疫療法，其主要通過(guò)基因編輯技術(shù)使T細(xì)胞表達(dá)嵌合抗原受體從而特異性識(shí)別并殺傷表達(dá)相應(yīng)抗原的靶細(xì)胞進(jìn)而治療疾病。該療法已經(jīng)在急性B淋巴母細(xì)胞白血病等血液系統(tǒng)腫瘤的臨床試驗(yàn)中取得了非常好的治療效果。CAR-T治療具有高度特異性及持續(xù)恢復(fù)免疫平衡的潛能，因此該療法也在逐漸拓展應(yīng)用于自身免疫病中[1]。臨床前研究的初步結(jié)果支持CAR-T治療在自身免疫病中的應(yīng)用。本文將結(jié)合CAR-T治療在自身免疫病中的最新研究成果，闡述該療法的免疫機(jī)制、應(yīng)用策略及發(fā)展趨勢(shì)，為后續(xù)臨床研究拓展思路。

CAR-T治療的免疫機(jī)制

CAR-T治療的流程主要包括：(1)從外周血收集患者的T淋巴細(xì)胞；(2)體外活化T細(xì)胞后使其表達(dá)嵌合抗原受體并擴(kuò)增；(3)將改造后的CAR-T細(xì)胞回輸至患者體內(nèi)。在回輸至患者體內(nèi)后，CAR-T細(xì)胞表達(dá)的嵌合抗原受體通過(guò)識(shí)別并結(jié)合相應(yīng)抗原使CAR-T細(xì)胞活化增殖，進(jìn)而特異性殺傷靶細(xì)胞。

T細(xì)胞活化

抗原特異性T細(xì)胞的活化是CAR結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)的關(guān)鍵及CAR-T細(xì)胞發(fā)揮效應(yīng)的基礎(chǔ)。未被活化的T細(xì)胞處于相對(duì)靜止?fàn)顟B(tài)，增殖能力很弱且不具備效應(yīng)功能，被稱(chēng)為初始T細(xì)胞；而活化后T細(xì)胞則迅速克隆擴(kuò)增并發(fā)揮效應(yīng)，被稱(chēng)為效應(yīng)T細(xì)胞。T細(xì)胞的活化主要依賴(lài)兩種信號(hào)的協(xié)同作用：第一信號(hào)由T細(xì)胞受體(TCR)與抗原肽-主要組織相容性復(fù)合物(p-MHC)的結(jié)合介導(dǎo)，導(dǎo)致CD3分子上的免疫受體酪氨酸激活基序(ITAMs)的磷酸化及下游一系列信號(hào)通路的激活[2]；而第二信號(hào)則依賴(lài)于共刺激分子CD28與其配體CD80/86的結(jié)合，其主要作用是提高免疫應(yīng)答的持久性及擴(kuò)增強(qiáng)度[3]。TCR-p-MHC的結(jié)合所形成的免疫突觸決定了T細(xì)胞免疫應(yīng)答的抗原特異性，而共刺激分子與其配體的結(jié)合則決定了T細(xì)胞免疫應(yīng)答的強(qiáng)度，缺乏任一信號(hào)均不能使T細(xì)胞充分活化(圖1A)。

圖1 TCR、抗體及CAR結(jié)構(gòu)[2-6]TCR：T細(xì)胞受體；CAR：嵌合抗原受體；scFv:單鏈抗體可變區(qū)；H:重鏈；L：輕鏈；V：可變區(qū)；C：恒定區(qū)；VH：重鏈可變區(qū)；VL：輕鏈可變區(qū)；CAR結(jié)構(gòu)主要由TCR及共刺激分子的胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域以及抗體的可變區(qū)組成;A:TCR及共刺激分子結(jié)構(gòu)，其第一信號(hào)和第二信號(hào)分別由CD3分子和CD28共刺激分子介導(dǎo)，兩者獨(dú)立向胞內(nèi)傳遞活化信號(hào)，T細(xì)胞缺失任一信號(hào)均無(wú)法充分活化；B:抗體結(jié)構(gòu)，包含兩條輕鏈和兩條重鏈，其中輕鏈及重鏈的可變區(qū)(v)是與靶抗原特異性結(jié)合的區(qū)域，CAR結(jié)構(gòu)胞外的scFv片段即來(lái)源于自該部分；C:CAR結(jié)構(gòu)，其第一信號(hào)和第二信號(hào)位于同一條鏈，胞外scFv片段與靶抗原的結(jié)合即可使T細(xì)胞充分活化

CAR結(jié)構(gòu)組成

CAR結(jié)構(gòu)由胞外至胞內(nèi)主要包含抗原識(shí)別區(qū)、鉸鏈區(qū)、跨膜區(qū)以及胞內(nèi)活化信號(hào)區(qū)四個(gè)部分。 抗原識(shí)別區(qū)位于細(xì)胞的最外側(cè)，其作用是識(shí)別特定抗原，主要結(jié)構(gòu)為由抗體的重鏈可變區(qū)(VH)以及輕鏈可變區(qū)(VL)連接而成的單鏈抗體可變區(qū)(scFv)[4](圖1B)。鉸鏈區(qū)連接于scFv與跨膜區(qū)之間，負(fù)責(zé)為scFv提供一定的柔韌性，其結(jié)構(gòu)主要來(lái)自于CD8α，IgG1或IgG4的氨基酸片段。跨膜區(qū)負(fù)責(zé)胞連接胞外的鉸鏈區(qū)和胞內(nèi)活化信號(hào)區(qū)，對(duì)于維持CAR結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性非常重要，其結(jié)構(gòu)主要來(lái)源于CD3ζ，CD28以及CD8α的跨膜區(qū)片段[5]。胞內(nèi)活化信號(hào)區(qū)主要包含CD28、4-1BB等共刺激結(jié)構(gòu)域以及CD3ζ鏈的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，其作用則是傳遞第一信號(hào)及第二信號(hào)促進(jìn)CAR-T細(xì)胞的活化增殖[6](圖1C)。CAR結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)來(lái)源于TCR，因此兩者在生物學(xué)功能上很相似，均能在識(shí)別抗原后介導(dǎo)T細(xì)胞的活化。然而CAR與TCR在抗原的識(shí)別上存在顯著的差異：CAR結(jié)構(gòu)的抗體識(shí)別區(qū)為來(lái)源于抗體的scFv片段，因此類(lèi)似于抗體能夠識(shí)別靶細(xì)胞表面直接暴露的抗原；而TCR則識(shí)別靶細(xì)胞表面的p-MHC分子復(fù)合物，不能直接識(shí)別靶細(xì)胞表面直接暴露的抗原，具有MHC限制性[7]。CAR結(jié)構(gòu)一方面結(jié)合了抗體的抗原特異性與T細(xì)胞高效的殺傷能力，另一方面解除了普通T細(xì)胞對(duì)抗原識(shí)別的MHC限制性，極大地提高了CAR-T細(xì)胞的效能。

CAR-T細(xì)胞的沿革

隨著對(duì)CAR胞內(nèi)活化信號(hào)區(qū)信號(hào)傳導(dǎo)及T細(xì)胞效應(yīng)機(jī)制的認(rèn)識(shí)不斷加深，CAR結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)經(jīng)歷了第一代至第四代的發(fā)展。第一代CAR結(jié)構(gòu)的胞內(nèi)區(qū)只包含CD3ζ結(jié)構(gòu)域，僅能引起較低程度的T細(xì)胞活化及擴(kuò)增[4]。第二代CAR結(jié)構(gòu)在胞內(nèi)區(qū)除了包含CD3ζ結(jié)構(gòu)域以外還添加了一種共刺激結(jié)構(gòu)域(CD28或4-1BB)，使得CAR-T細(xì)胞的殺傷能力及持久性顯著增強(qiáng)[8]。第三代CAR結(jié)構(gòu)的胞內(nèi)區(qū)則除CD3ζ外還包含兩種或多種共刺激結(jié)構(gòu)域(如CD28和4-1BB)[9]。一些研究提示第三代CAR結(jié)構(gòu)較第二代CAR結(jié)構(gòu)的殺傷能力更強(qiáng)，而另外一些研究卻得到相反的結(jié)論，因此目前臨床上使用的CAR-T治療仍然主要采用第二代CAR結(jié)構(gòu)。除此以外，一些研究提出了第四代CAR結(jié)構(gòu)的概念，即在常規(guī)CAR結(jié)構(gòu)外還添加了促炎性細(xì)胞因子或共刺激因子配體的表達(dá)，進(jìn)一步增強(qiáng)了CAR-T細(xì)胞的活化從而產(chǎn)生比前三代CAR-T更強(qiáng)的殺傷效果(圖2)[10]。

圖2 第一代至第四代CAR結(jié)構(gòu)[4，8-10]scFv:單鏈抗體可變區(qū)；VH：重鏈可變區(qū)；VL：輕鏈可變區(qū)；第一代CAR胞內(nèi)部分僅包含CD3ζ結(jié)構(gòu)域；第二代CAR胞內(nèi)部分在第一代的基礎(chǔ)上添加了一種共刺激結(jié)構(gòu)域；第三代CAR胞內(nèi)部分在第一代的基礎(chǔ)上添加了兩種不同的共刺激結(jié)構(gòu)域；第四代CAR除了本身CAR結(jié)構(gòu)外還額外表達(dá)細(xì)胞因子或共刺激分子配體

CAR-T治療在自身免疫病的應(yīng)用策略

目前臨床上CAR-T治療主要應(yīng)用于B細(xì)胞來(lái)源的造血系統(tǒng)腫瘤，而在自身免疫病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，自身抗原特異性B細(xì)胞及其他免疫細(xì)胞也起著重要的促進(jìn)作用。不僅如此，造血系統(tǒng)腫瘤和自身免疫病在病理生理特征上的相似性也支持了CAR-T治療自身免疫病的巨大潛力，具體表現(xiàn)為：(1) 造血系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞及自身抗原特異性免疫細(xì)胞均在循環(huán)中散在分布，CAR-T細(xì)胞與其靶細(xì)胞可充分接觸；(2) 造血系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞及自身抗原特異性免疫細(xì)胞均來(lái)源于骨髓造血干細(xì)胞，表達(dá)特定的免疫細(xì)胞相關(guān)抗原,可作為CAR-T治療的靶點(diǎn)。因此，自身免疫病的病理生理特點(diǎn)提示CAR-T治療在自身免疫病中具有很大潛力。若能夠通過(guò)CAR-T治療完全清除自身抗原特異性免疫細(xì)胞或持久抑制其活性，則可能使自身免疫病得到完全治愈或維持在不發(fā)病狀態(tài)[1]。

通常CAR-T細(xì)胞是指CAR-CD8+T細(xì)胞，其效應(yīng)機(jī)制是通過(guò)分泌穿孔素和顆粒酶殺傷靶細(xì)胞。而更廣義的CAR-T細(xì)胞還包含CAR-CD4+T細(xì)胞，按功能又可進(jìn)一步將其分為輔助性CAR-Th細(xì)胞以及調(diào)節(jié)性CAR-Treg細(xì)胞，分別發(fā)揮輔助免疫應(yīng)答及負(fù)向調(diào)控免疫應(yīng)答的作用。在腫瘤的CAR-T治療中，腫瘤細(xì)胞是唯一的目標(biāo)，因此腫瘤的CAR-T治療主要依賴(lài)CAR-CD8+T細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的特異性殺傷以及CAR-Th細(xì)胞對(duì)免疫應(yīng)答的輔助。然而，自身免疫病往往涉及多種免疫細(xì)胞針對(duì)自身抗原的異?；罨?。因此在自身免疫病的CAR-T治療策略上與腫瘤有所不同：一方面可以使用多種CAR-T細(xì)胞靶向多個(gè)不同免疫環(huán)節(jié)；另一方面可以充分利用自身抗原與相應(yīng)受體的特異性結(jié)合設(shè)計(jì)CAR結(jié)構(gòu)使CAR-T細(xì)胞選擇性殺傷或抑制自身抗原特異性免疫細(xì)胞。在目前的研究中，CAR-T治療在自身免疫病中的應(yīng)用策略主要包括兩類(lèi)：靶向自身抗原特異性免疫細(xì)胞的CAR-CD8+T細(xì)胞治療以及靶向組織特異性抗原的CAR-Treg細(xì)胞治療。前者能夠直接殺傷自身抗原特異性免疫細(xì)胞，而后者則能夠在組織局部抑制多種免疫細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。

CAR-CD8+T細(xì)胞治療

靶向CD19+B細(xì)胞B細(xì)胞及其分泌的自身抗體在多種自身免疫病的發(fā)生發(fā)展中均起著重要的促進(jìn)作用，因此在B細(xì)胞表面普遍表達(dá)的CD19是自身免疫病中CAR-T細(xì)胞的候選靶點(diǎn)之一[11]。在近期的一項(xiàng)臨床前研究中，Rita[12]等發(fā)現(xiàn)使用CD19靶向的CAR-T細(xì)胞能持續(xù)清除狼瘡模型小鼠脾臟及外周血中的CD19+B細(xì)胞、降低自身免疫性抗體產(chǎn)生、逆轉(zhuǎn)疾病相關(guān)靶器官的損害并延長(zhǎng)小鼠的存活時(shí)間。該研究揭示了CAR-T治療在系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫病中的治療潛能，值得在臨床研究中進(jìn)一步探索(圖3A)。

靶向自身抗原特異性B細(xì)胞雖然靶向CD19+B細(xì)胞的CAR-T治療研究在小鼠模型中取得了不錯(cuò)的治療效果，但是該策略存在的重要缺陷是CAR-T細(xì)胞會(huì)清除包括正常B細(xì)胞在內(nèi)的所有CD19+B細(xì)胞。這使得患者面臨極大的感染風(fēng)險(xiǎn)，并可能導(dǎo)致體液免疫記憶的消失(記憶性B細(xì)胞也被清除)。在自身免疫病中，并非所有B細(xì)胞均參與疾病發(fā)生，只有自身抗原特異性的B細(xì)胞才會(huì)在識(shí)別自身抗原后增殖并產(chǎn)生大量自身抗體。因此，使用CAR-T細(xì)胞選擇性殺傷自身抗原特異性B細(xì)胞則可能有效避免清除正常B細(xì)胞從而減少感染等副作用的發(fā)生。在一項(xiàng)臨床前研究中Christoph[13]等巧妙地將CAR結(jié)構(gòu)的胞外抗原識(shí)別區(qū)設(shè)計(jì)為自身抗原肽并將其命名為嵌合自身抗體受體(chimeric autoantibody receptor,CAAR)。該研究發(fā)現(xiàn)在小鼠的尋常型天皰瘡模型中，表達(dá)該病自身抗原Dsg3肽段的CAAR-T細(xì)胞能夠選擇性結(jié)合并殺傷Dsg3特異性的自身免疫性B細(xì)胞而不會(huì)殺傷正常B細(xì)胞(圖3B)。

圖3 自身免疫病CAR-T治療策略[12-18]CAR-T：嵌合抗原受體T細(xì)胞；MHC：主要組織相容性復(fù)合物；TCR：T細(xì)胞受體；APC：抗原遞呈細(xì)胞；自身免疫病的CAR-T治療策略主要包含CAR-CD8+T細(xì)胞治療(A～D)及CAR-Treg細(xì)胞治療(E,F)；A：靶向CD19+B細(xì)胞的CAR-CD8+T治療；B：靶向自身抗原特異性B細(xì)胞的CAR-CD8+T治療；C：靶向自身抗原特異性輔助性CD4+T細(xì)胞的CAR-CD8+T治療；D：靶向遞呈自身抗原細(xì)胞的CAR-CD8+T治療；E：靶向自身抗原特異性輔助性CD4+T細(xì)胞的CAR-Treg治療；F：靶向組織特異性抗原的CAR-Treg治療

靶向自身抗原特異性輔助性CD4+T細(xì)胞除了B細(xì)胞以外，自身抗原特異性輔助性CD4+T細(xì)胞也參與了許多自身免疫病的發(fā)生發(fā)展[19]。自身抗原特異性輔助性CD4+T細(xì)胞在受到抗原遞呈細(xì)胞(antigen presenting cell,APC)遞呈的抗原肽-MHC-II復(fù)合物后一方面能夠分泌大量促炎性細(xì)胞因子，另一方面能促進(jìn)生發(fā)中心反應(yīng)及自身抗體的產(chǎn)生，因此選擇性靶向這群細(xì)胞或許能夠在治療疾病的同時(shí)減少副作用的發(fā)生。Moisini等[14]設(shè)計(jì)了包含小鼠實(shí)驗(yàn)性過(guò)敏性腦脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)特異性抗原髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)片段、MHC-II分子以及TCRζ鏈的嵌合受體以模擬APC的抗原遞呈作用。該研究結(jié)果顯示在小鼠EAE疾病模型中過(guò)繼回輸表達(dá)嵌合受體T細(xì)胞能夠有效殺傷自身抗原特異性的輔助性CD4+T細(xì)胞并治療疾病。相較于對(duì)照組小鼠，治療組小鼠的疾病嚴(yán)重程度更低并且存活時(shí)間更長(zhǎng)(圖3C)。

靶向自身抗原遞呈細(xì)胞APC對(duì)自身抗原的遞呈也是自身免疫病的重要環(huán)節(jié)，因此在自身免疫病的CAR-T治療中，遞呈自身抗原的APC也可以作為CAR-T細(xì)胞的靶細(xì)胞。在一項(xiàng)臨床前研究中，Zhang等[15]在NOD小鼠I型糖尿病模型中利用能夠識(shí)別胰島素B鏈9-23肽-MHCII復(fù)合物的單克隆抗體片段設(shè)計(jì)了針對(duì)遞呈自身抗原APC的CAR-T細(xì)胞。該研究發(fā)現(xiàn)該CAR-T能夠特異性識(shí)別并殺傷遞呈自身抗原的APC，并且過(guò)繼回輸該CAR-T細(xì)胞能夠延緩NOD小鼠糖尿病的發(fā)生(圖3D)。

CAR-Treg細(xì)胞治療

Treg細(xì)胞是一群以免疫抑制及維持免疫耐受為特征的CD4+T細(xì)胞亞群，通常穩(wěn)定表達(dá)CD25及轉(zhuǎn)錄因子Foxp3以行使其免疫抑制功能。既往研究表明Foxp3基因的突變會(huì)使Treg細(xì)胞功能缺陷并導(dǎo)致嚴(yán)重的自身免疫病[20]。Treg細(xì)胞發(fā)揮免疫調(diào)控作用的機(jī)制主要包括釋放抑制性細(xì)胞因子，破壞效應(yīng)T細(xì)胞代謝通路，抑制抗原遞呈細(xì)胞以及細(xì)胞毒性作用等等。

自身免疫病的發(fā)生發(fā)展往往伴隨著致病性效應(yīng)性免疫細(xì)胞(包括自身抗原特異性DC、效應(yīng)性T細(xì)胞以及B細(xì)胞等)與Treg細(xì)胞免疫平衡的破壞。例如在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中，DC分泌的大量IL-6以及IFN-a會(huì)抑制Treg細(xì)胞的抑制功能，而輔助性CD4+T細(xì)胞分泌的IL-21亦會(huì)影響Treg細(xì)胞的存活及功能。不僅如此，系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者體內(nèi)強(qiáng)烈的促炎環(huán)境還會(huì)轉(zhuǎn)變Treg細(xì)胞使其分泌IL-17等炎性細(xì)胞因子。這些因素最終導(dǎo)致Treg細(xì)胞的數(shù)量和抑制功能顯著降低，不足以維持免疫穩(wěn)態(tài)[21]。因此，增強(qiáng)Treg細(xì)胞的數(shù)量及抑制功能使免疫平衡得到恢復(fù)或許是自身免疫病治療的關(guān)鍵。

既往研究發(fā)現(xiàn)過(guò)繼回輸多克隆Treg細(xì)胞能夠抑制或預(yù)防自身免疫病的發(fā)生[22]。但多克隆Treg細(xì)胞中抗原特異性細(xì)胞極低的比例可能影響治療效果，且大量多克隆Treg細(xì)胞回輸可能會(huì)造成系統(tǒng)性免疫抑制。事實(shí)上，的確有研究發(fā)現(xiàn)在輸入多克隆Treg細(xì)胞后體內(nèi)病毒再次活化[23]。而使用抗原特異性的Treg細(xì)胞則可能會(huì)避免這些缺點(diǎn)。與多克隆Treg細(xì)胞相比，抗原特異性Treg細(xì)胞回輸所需細(xì)胞數(shù)量更少，而且能富集于炎癥局部減輕周?chē)庖呒?xì)胞對(duì)組織的損傷。不僅如此，一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明抗原特異性的Treg細(xì)胞在抑制功能上亦強(qiáng)于多克隆Treg細(xì)胞[24]。

體外制備抗原特異性Treg細(xì)胞的經(jīng)典方法主要包括多克隆Treg細(xì)胞與APC和特定抗原共孵育或者設(shè)計(jì)能夠靶向特定抗原的TCR-Treg細(xì)胞。使用APC擴(kuò)增抗原特異性Treg細(xì)胞效率非常低，而TCR-Treg細(xì)胞識(shí)別抗原的MHC限制性使其在大量患者中難以廣泛應(yīng)用。與以上兩種方法相比，抗原特異性的CAR-Treg細(xì)胞則既可以較好地?cái)U(kuò)增而又不存在MHC限制性。因此，CAR-Treg細(xì)胞治療或許是增強(qiáng)抗原特異性Treg細(xì)胞量能的最佳選擇[22]。在2005年，Divya等[16]設(shè)計(jì)了了包含MBP抗原、MHC-II及TCRζ鏈的受體修飾Treg細(xì)胞(receptor-modified T cell,RMTC)。該研究發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)過(guò)繼回輸RMTC能夠預(yù)防并治療小鼠EAE疾病模型，證實(shí)通過(guò)使Treg細(xì)胞特異性抑制自身抗原特異性CD4+T細(xì)胞可以有效抑制小鼠自身免疫病的發(fā)生發(fā)展(圖 3E)。不僅如此，通過(guò)編輯Treg細(xì)胞使其表達(dá)靶向組織特異性抗原的CAR片段同樣能增強(qiáng)其抑制自身免疫病的效果。在既往臨床前研究中，Moa等[17]通過(guò)向CD4+T細(xì)胞導(dǎo)入靶向小鼠髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)的CAR序列并使其過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子Foxp3設(shè)計(jì)了MOG特異性的CAR-Treg細(xì)胞。該研究發(fā)現(xiàn)靶向MOG的CAR-Treg細(xì)胞具有良好的免疫抑制功能且經(jīng)鼻黏膜給藥后能夠定位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)并有效抑制EAE的進(jìn)展。與之相似，Dan等[18]在癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)轉(zhuǎn)基因小鼠中發(fā)現(xiàn)靶向CEA的CAR-Treg細(xì)胞在回輸后能夠定位于結(jié)腸并降低T細(xì)胞轉(zhuǎn)移性結(jié)腸炎的嚴(yán)重程度(圖3F)。以上兩項(xiàng)研究證實(shí)靶向組織特異性抗原的CAR-Treg細(xì)胞能夠定位至相應(yīng)組織并在局部抑制多種免疫細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。

在CAR-CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)的殺傷與CAR-Treg細(xì)胞介導(dǎo)的免疫抑制兩種策略中，CAR-Treg細(xì)胞或許是更好的選擇。一方面，在自身免疫病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，多種免疫細(xì)胞均參與致病，而CAR-CD8+T細(xì)胞僅能殺傷某一種免疫細(xì)胞，對(duì)其他類(lèi)型的自身免疫細(xì)胞沒(méi)有殺傷作用；而CAR-Treg細(xì)胞能通過(guò)細(xì)胞-細(xì)胞間相互作用及分泌多種抑制性細(xì)胞因子抑制多種自身免疫細(xì)胞的活性。另一方面，CAR-CD8+T細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞時(shí)釋放的大量炎性細(xì)胞因子可能會(huì)進(jìn)一步加重自身免疫病患者的組織損傷；而CAR-Treg細(xì)胞能夠抑制局部炎癥反應(yīng)，可能有助于緩解組織損害。

小結(jié)：CAR-T治療作為一種全新的細(xì)胞免疫療法，已經(jīng)在造血系統(tǒng)腫瘤中展現(xiàn)出強(qiáng)大的治療潛力，而其在自身免疫病以及其他類(lèi)型疾病中的應(yīng)用研究才剛剛起步。CAR-T治療的研究重點(diǎn)及未來(lái)的發(fā)展方向主要聚焦于異體或通用型CAR-T細(xì)胞治療、多靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞治療、擴(kuò)展CAR-T治療適應(yīng)證、提高CAR-T治療安全性及CAR-T聯(lián)合其他藥物治療等方向。另外，噬菌體展示技術(shù)、轉(zhuǎn)座酶系統(tǒng)及基因編輯等技術(shù)的不斷進(jìn)步也將有助于提高CAR-T治療的安全性及有效性。期待在不遠(yuǎn)的將來(lái)，CAR-T治療能夠作為常規(guī)一線療法廣泛應(yīng)用于腫瘤、自身免疫病等目前尚無(wú)法根治的疾病，為患者帶來(lái)治愈的希望。