不同類型煙草種子蛋白質(zhì)、脂肪及其主要活性成分分析

楊瓊 侯小東 劉艷華 張懷寶 付秋娟 張富軍 杜詠梅

摘 ?要：為探索不同類型煙草種子開發(fā)利用的方向，以6份黃花煙草與31份紅花煙草為材料，應(yīng)用方差分析，比較了不同類型煙草種子粗蛋白、脂肪以及種子油脂肪酸、植物甾醇、角鯊烯的含量和組成差異。結(jié)果表明，相對于紅花煙草，黃花煙草種子含有較高的粗蛋白以及較低的脂肪，不同類型紅花煙草種子粗蛋白、脂肪含量也存在顯著差異;黃花煙草種子蛋白質(zhì)含有較高的蛋氨酸、賴氨酸及總必需氨基酸，其必需氨基酸與非必需氨基酸比值、氨基酸比值系數(shù)分值均較高，氨基酸組成模式與FAO/WHO推薦值及與FAO雞蛋蛋白貼近度也較高。黃花煙草種子油亞油酸、菜油甾醇、β-谷甾醇含量較高，而紅花煙草種子角鯊烯、膽甾醇、4-甲基-7-烯膽甾烷醇、豆甾醇、α-谷甾醇含量較高;黃花煙草與紅花煙草種子油總不飽和脂肪酸、總植物甾醇含量差異不顯著。綜合分析，黃花煙草種子飼用價(jià)值相對較高，而紅花煙草種子油用價(jià)值相對較高。

關(guān)鍵詞：煙草種子;蛋白質(zhì);脂肪;活性成分

中圖分類號：TS41⁺1 ?????????文章編號：1007-5119（2019）06-0095-08 ?????DOI：10.13496/j.issn.1007-5119.2019.06.014

Analyses of Protein， Fat and Main Active Components in the Seeds of Tobacco （Nicotianaspp.） Types

YANG Qiong^1，2， HOU Xiaodong¹， LIU Yanhua¹， ZHANG Huaibao¹， FU Qiujuan¹，

ZHANG Fujun³， DU Yongmei^1*

（1.Tobacco Research Institute of Chinese Agricultural Science， Qingdao 266101， China; 2.Graduate School of Chinese Academy of Agricultural Science， Beijing 100081， China; Tobacco Company， Linyi， Shandong 276000， China）

Abstract：In order to investigate?the utilization potentials of tobacco （Nicotianaspp.） seeds， the seeds of 6?varieties ofN.rusticaL.and 31 varieties ofN. tabacumL. were collected to study the difference in the composition and contents of crude protein， fat， fatty acid， phytosterol and squalene?among varieties with an?one-way analysis of variance （ANOVA） method.?The seeds ofN.rusticavarieties contain higher crude protein and lower fat?comparing to those ofN.tabacumvarieties. The contents of crude protein and fat?were significantly different among?the?seeds?ofN.tabacumvarieties. The seeds ofN. rusticavarieties have higher?content of Met， Lys and total essential amino acids?than those ofN.tabacum， and also have a higher ratio of essential amino acid to non-essential amino acid as well as a?higher ratio coef?cient of amino acids. The amino acid pattern inN. rusticavarieties is close to the FAO/WHO recommendation and has a high closeness coefficient with eggs protein?recommended by FAO. The?contents?of?linoleic acid， campesterol and β-sitosterol were obviously higher?in the seeds ofN. rusticavarieties than in those ofN.tabacumvarieties， which showed an opposite pattern to?the?contents?of squalene， cholesterol， 4-methyl-7-encholestyl alcohol， stigmasterol and α-sitosterol. There was no significant difference in the contents of total unsaturated fatty acid and sterol between the seeds ofN. tabacumvarieties andN. rusticavarieties.?In conclusion， the seeds ofN. rusticahave a?higher feed value while the seeds?ofN. tabacumhave a?higher fat?value.

Keywords：tobacco seeds; protein; fat; active components

煙草屬于茄科（Solanaceae）煙草屬（Nicotiana），草本植物，目前煙草屬主要栽培種為紅花（普通）煙草和黃花煙草。根據(jù)品質(zhì)特點(diǎn)、生物學(xué)性狀、調(diào)制措施的差異，紅花煙草又分為烤煙、晾曬煙、雪茄煙、香料煙以及白肋煙^[1]。煙草不僅可以作為卷煙原料，其在醫(yī)藥、食品、植物源農(nóng)藥等方向也具有獨(dú)特的利用價(jià)值^[2-3]。因此，在世界控?zé)熯\(yùn)動(dòng)壓力下，尋找煙草替代用途是煙草科研工作者研究的熱點(diǎn)^[4]。

煙草種子含有豐富的脂肪及蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)且不含煙堿^[5]，其精煉油的理化性質(zhì)接近大部分食用油，但營養(yǎng)品質(zhì)很高，甚至優(yōu)于花生油及棉籽油等常見食用油，且國外有將精煉煙草種子油作為食用沙拉油的報(bào)道^[6-7]。侯小東等^[8]研究表明，煙草種子油具有降脂、降血糖、保護(hù)肝臟等功能，并且沒有毒性及致突變作用;ROSSI等^[9]研究發(fā)現(xiàn)煙草種子蛋白質(zhì)可用作斷奶期豬仔的口服疫苗，將其以4%的比例添加到豬仔飼料中，可滿足斷奶期豬仔營養(yǎng)需求且不會(huì)影響豬仔的適口性及健康狀況;POPOVA等^[10]研究發(fā)現(xiàn)，花煙草、紅花煙草及黃花煙草種子中含有豐富的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、纖維素、礦物質(zhì)及脂肪酸、生育酚、甾醇，且含量在不同種之間存在顯著差異;XIE等^[11]分析了7份馬里蘭煙栽培品種種子化學(xué)組成、抗氧化性及抑制腫瘤細(xì)胞增殖活性，發(fā)現(xiàn)煙草種子在開發(fā)天然抗氧化食品、抗腫瘤增殖劑方面具有重要價(jià)值;歐陽文等^[12]研究了香料煙種子氨基酸含量、脂肪含量及脂肪酸組成，發(fā)現(xiàn)香料煙種子作為油料、食品或飼料資源，都有較好的應(yīng)用前景。除此之外，煙草種子油在開發(fā)生物柴油^[13]、清漆和涂料^[14]等方面也有較多報(bào)道。

我國煙草種質(zhì)資源豐富，有關(guān)不同類型煙草種子主要化學(xué)成分組成的研究還未見報(bào)道。本研究系統(tǒng)分析了不同類型煙草種子蛋白質(zhì)、脂肪酸組成及角鯊烯、甾醇的含量特點(diǎn)，可為不同類型煙草種子資源的開發(fā)利用提供研究基礎(chǔ)。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料與試劑

1.1.1 ?煙草材料的選擇及種子收獲??不同類型煙草材料由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院煙草研究所中國煙草種質(zhì)資源平臺提供，共37份。其中，黃花煙草6份;紅花煙草31份（包括烤煙6份，曬煙7份，香料煙7份，白肋煙6份，雪茄煙5份）。所有煙草材料于2015—2016年種植在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院煙草研究所青島即墨試驗(yàn)農(nóng)場，按當(dāng)?shù)乜緹熢耘喾绞椒N植，每材料設(shè)置3次重復(fù)，每重復(fù)種植2行，每行25株，隨機(jī)區(qū)組排列。煙草種子成熟時(shí)收獲，自然晾干，除去果皮，0～4 ℃冰箱保存，待用。

1.1.2 ?試劑??氫氧化鈉、氯化鈉、甲醇、檸檬酸鈉、鹽酸、異辛烷、正己烷、氫氧化鉀、乙醇均為分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)。

1.1.3 ?主要儀器與設(shè)備??Biochrom 30⁺氨基酸分析儀，英國柏楉有限公司;7890A-5975C氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀，安捷倫公司;TDZ5-WS離心機(jī)，湖南湘儀公司;FDV-SS超微粉碎機(jī)，北京開創(chuàng)同和科技發(fā)展有限公司;索氏提取裝置，上海雙捷實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。

1.2 ?試驗(yàn)方法

1.2.1 ?煙草種子蛋白質(zhì)測定 ?依據(jù)GB/T 5009.5—2010食品中蛋白質(zhì)的測定，用凱氏定氮法測定粉碎后種子總氮含量，以6.25為換算系數(shù)，計(jì)算煙草種子粗蛋白質(zhì)含量。

1.2.2 ?煙草種子氨基酸測定及評價(jià)??依據(jù)GB/T 5009.124—2016食品中氨基酸的測定，用茚三酮柱后衍生氨基酸分析儀法測定煙草種子氨基酸含量。依據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織（Food and Agriculture Organization/World Health Organization， FAO/WHO）蛋白模式和FAO雞蛋蛋白模式為標(biāo)準(zhǔn)^[15-16]，分別采用氨基酸比值系數(shù)法和模糊識別法評價(jià)煙草種子蛋白質(zhì)氨基酸品質(zhì)^[17-18]。

1.2.3 ?煙草種子含油量測定??依據(jù)GB/T 14488.1—2008植物油料含油量測定，索氏提取器提取，重量法測定。獲得的煙草種子油于氮?dú)獗Ｗo(hù)下置于0～4 ℃冰箱保存，進(jìn)一步用于脂肪酸、角鯊烯及甾醇的測定。

1.2.4 ?煙草種子油脂肪酸組成測定??依據(jù)GB/T 17376—2016動(dòng)植物油脂、脂肪酸甲酯的制備，對煙草種子油進(jìn)行甲酯化，氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行測定。儀器條件為：色譜柱Agilent 19091F-413FFAP，30?m×

320 μm×0.25 μm，載氣為氦氣，流速1.5 mL/min，

進(jìn)樣口溫度220 ℃，進(jìn)樣量1 μL，分流比20∶1，色譜柱起始溫度140 ℃，保持1 min，然后以8 ℃/min升至200 ℃，保持4 min，離子源能量70 eV，溫度230 ℃，四級桿溫度150 ℃。根據(jù)NIST譜庫檢索結(jié)果進(jìn)行脂肪酸組成定性，面積歸一化法計(jì)算不同脂肪酸的相對含量（%）。

1.2.5 ?種子油角鯊烯、甾醇的測定??依據(jù)GB/T 5535.2—2008動(dòng)植物油脂不皂化物測定，對煙草種子油進(jìn)行皂化，皂化完成后，氣質(zhì)聯(lián)用儀測定。儀器條件為：色譜柱HP-MS，30 m×250 μm×0.25 μm，載氣為氦氣，流速1.0 mL/min，進(jìn)樣口溫度280 ℃，進(jìn)樣量1 μL，分流比10∶1，色譜柱起始溫度210 ℃，保持3 min，然后以15 ℃/min升至280 ℃，保持20 min，離子源能量70 eV，溫度230 ℃，四級桿溫度150 ℃。根據(jù)NIST譜庫檢索結(jié)果結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間定性，用膽甾烷醇作內(nèi)標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。

1.3 ?數(shù)據(jù)處理

采用SAS 9.4進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，用Duncan新復(fù)極差法進(jìn)行差異顯著性分析（p<0.05），用Origin 8.0作圖并進(jìn)行分析。

2 ?結(jié) ?果

2.1 ?不同類型煙草種子粗蛋白、脂肪含量分析

不同類型煙草種子粗蛋白、脂肪含量差異比較結(jié)果見于表1。煙草種子粗蛋白、脂肪平均含量分別在24.6%～26.6%、37.9%～40.9%范圍內(nèi)。黃花煙草種子粗蛋白含量相對較高，油脂含量相對較低;雪茄煙種子粗蛋白含量顯著高于其他紅花煙草類型，但與黃花煙草差異不顯著。白肋煙和曬煙種子油含量顯著高于其他紅花煙草類型和黃花煙草。

2.2 ?不同類型煙草種子蛋白質(zhì)氨基酸組成及營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)

2.2.1 ?不同類型煙草種子蛋白質(zhì)氨基酸組成分析 ?不同類型煙草種子蛋白質(zhì)18種氨基酸的組成及分析結(jié)果見表2，結(jié)果表明，不同類型煙草種子蛋白質(zhì)總必需氨基酸（essential amino acid，?EAA）平均含量范圍為246.6～262.3 mg/g，總必需氨基酸和總氨基酸比值（essential amino acid/total amino acid， EAA/TAA）平均值范圍為0.31～0.33，必需氨基酸和非必需氨基酸比值（essential amino acid/non-essential amino acid， EAA/NEAA）在0.45～0.49范圍內(nèi)。除色氨酸外，不同類型煙草種子蛋白質(zhì)氨基酸含量差異顯著，其中黃花煙草種子蛋氨酸、賴氨酸含量顯著高于紅花煙草。黃花煙草種子總必需氨基酸、必需氨基酸與非必需氨基酸的比例較紅花煙草更高。

2.2.2 ?不同類型煙草種子蛋白質(zhì)氨基酸的品質(zhì)評價(jià)??表3以FAO/WHO蛋白質(zhì)氨基酸模式為標(biāo)準(zhǔn)，依據(jù)氨基酸比值系數(shù)法^[17]得出不同類型煙草種子的氨基酸比值系數(shù)（ratio coefficient of amino acid，RCAA）。RCAA值越接近1，說明該食品蛋白質(zhì)氨基酸組成比例越接近FAO/WHO蛋白質(zhì)氨基酸模式，RCAA值最小者為該蛋白的第一限制性氨基酸。由表3可知，不同類型煙草種子必需氨基酸組成及含量較為相似，第一限制性氨基酸均為賴氨酸，其次為含硫氨基酸（蛋氨酸和半胱氨酸）;芳香氨基酸（苯丙氨酸和酪氨酸）含量高于模式氨基酸;異亮氨酸、亮氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、色氨酸含量接近模式氨基酸。由RCAA值進(jìn)一步計(jì)算得到的氨基酸比值系數(shù)分（score of ratio coef?cient of amino acid，SRCAA）可直接反映蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價(jià)值，SRCAA值越接近100，營養(yǎng)價(jià)值越高。黃花煙草種子蛋白質(zhì)的SRCAA值最大（81.28），說明黃花煙種子蛋白營養(yǎng)價(jià)值高且均衡，其他類型煙草種子SRCAA值均在75.11～78.26之間，差異不大。依據(jù)模糊識別法得出不同類型煙草種子蛋白質(zhì)氨基酸組成與FAO/WHO蛋白模式和FAO雞蛋蛋白模式的貼近度，貼近度值越接近于1，蛋白質(zhì)營養(yǎng)價(jià)值相對越高^[17-18]。兩種蛋白質(zhì)評價(jià)模式的貼近度基本一致，黃花煙種子蛋白質(zhì)與FAO雞蛋蛋白質(zhì)貼近度（μ_j）最高，其次為白肋煙、香料煙。不同類型煙草種子蛋白質(zhì)與FAO/WHO標(biāo)準(zhǔn)蛋白貼近度（μ_i）均很高，在0.90～0.93范圍內(nèi)。

2.3 ?煙草種子油脂肪酸組成及含量

對不同類型煙草種子油脂肪酸組成及含量進(jìn)行分析可知（表4），煙草種子油中主要飽和脂肪酸為棕櫚酸、硬脂酸，不飽和脂肪酸為油酸、亞油酸及亞麻酸。不同類型煙草種子油中飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸平均含量范圍分別為10.3%～11.7%和87.8%～89.0%。不飽和脂肪酸中，亞油酸含量最高（74.5%～76.9%），其次是油酸（11.4%～13.1%），亞麻酸含量最低（0.3%～1.0%）。不同類型煙草種子油中脂肪酸的組成和比例差別不大，飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸的比例為1∶1∶（6.5～7.5）。

2.4 ?煙草種子油角鯊烯含量

如表5所示，不同類型煙草種子油角鯊烯平均含量范圍為15.5～26.6 mg/100 g，黃花煙草種子油角鯊烯含量顯著低于紅花煙草。紅花煙草中，香料煙種子中角鯊烯含量最高，顯著高于曬煙、烤煙，但與雪茄煙、白肋煙含量差異不顯著。

2.5 ?煙草種子油植物甾醇含量

對不同類型煙草種子油甾醇組成及含量進(jìn)行分析可知（表6），煙草種子油總甾醇平均含量范圍為1214～1376 mg/100 g。不同類型煙草種子油植物總甾醇及巖藻甾醇、環(huán)阿屯醇含量差異不顯著，其他植物甾醇含量存在顯著差異。黃花煙草種子油膽甾醇、4-甲基-7-烯膽甾烷醇、豆甾醇、α-谷甾醇含量顯著低于其他類型煙草，菜油甾醇、β-谷甾醇含量顯著高于其他類型煙草。紅花煙草種子油中，膽甾醇、β-谷甾醇、α-谷甾醇含量也存在顯著差異，雪茄煙種子油膽甾醇含量較高，白肋煙、香料煙種子油β-谷甾醇含量較高，白肋煙、雪茄煙種子油α-谷甾醇含量較高。

3 ?討 ?論

煙草種子中含有較高的粗蛋白（26.7%），與文獻(xiàn)報(bào)道的飼用紅花種子（20.1%～25.1%）、向日葵種子（29.3%～33.1%），棉籽（27.2%～35.7%）^[19-20]的蛋白質(zhì)含量接近。食品中蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價(jià)值主要取決于必需氨基酸含量及組成比例，其組成比例越接近人體必需氨基酸模式，說明其質(zhì)量越優(yōu)良^[16]。煙草種子蛋白質(zhì)必需氨基酸與總必需氨基酸的比值、必需氨基酸與非必需氨基酸的比值較高，均接近FAO/WHO推薦值（40%、60%）^[15] 。相對于紅花煙草，黃花煙草種子的氨基酸比值系數(shù)分值最大（81.28），與FAO/WHO推薦的模式蛋白質(zhì)貼近度最高（0.93），其貼近度大于大豆蛋白（0.89）^[21]、馬鈴薯蛋白（0.88）^[22]、小麥面粉蛋白（0.83）^[23]。因此，煙草種子尤其是黃花煙草種子在家畜飼料原料、新型植物蛋白開發(fā)等方面存在較大潛力。但煙草種子蛋白質(zhì)中賴氨酸、蛋氨酸和胱氨酸含量較低，可根據(jù)蛋白質(zhì)互補(bǔ)理論^[21]，將煙草種子蛋白質(zhì)與其他家畜飼料結(jié)合使用。

煙草種子中油脂含量豐富，平均含量在37.9%～40.9%范圍內(nèi)，與POPOVA等^[12]、XIE等^[13]、歐陽文等^[14]測定結(jié)果基本一致。食用油脂中脂肪酸的組成和比例是衡量油脂營養(yǎng)價(jià)值的重要指標(biāo)，不飽和脂肪酸含量越高，且含有一定比例的亞油酸和亞麻酸，營養(yǎng)價(jià)值越高^[24]。煙草種子油中含有較高的不飽和脂肪酸（87.8%～89.0%），尤其含有豐富的亞油酸，高于亞麻籽油^[25]等常見食用植物油。不同類型煙草種子油飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸比例基本一致，為1∶1∶（6.5～7.5），與報(bào)道的葡萄籽油的脂肪酸組成最接近^[26]。近代醫(yī)學(xué)研究表明^[27]，當(dāng)不飽和脂肪酸與飽和脂肪酸的比值大于2時(shí)，植物油具有降血脂的功效，而且比值越大，降血脂的作用越明顯，因此蘇彬等^[28]推測煙草種子油的降脂功能與其含有豐富的亞油酸有關(guān)。

角鯊烯具有保肝、保護(hù)腎上腺皮質(zhì)、降血脂及抗腫瘤等功能，可用于各種缺氧性疾病、肝炎和癌癥的防治^[29]。紅花煙草種子油角鯊烯含量顯著高于黃花煙草，其中紅花煙草中角鯊烯含量最高可達(dá)26.6 mg/100 g，與葡萄籽油（27.2 mg/100 g）^[26]相當(dāng)，雖遠(yuǎn)低于莧菜油（5000 mg/100 g）^[30]及橄欖油（70 mg/100 g）^[31]，但高于花生油（22 mg/100 g）^[32]等常見食用植物油。

植物甾醇是農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)的新型功能性飼料添加劑，具有降低膽固醇、抗氧化等多種生理功能^[33]。煙草種子油總甾醇含量與目前報(bào)道的植物甾醇含量最高的植物油——米糠油（1.1%）相當(dāng)^[34]，且高于植物甾醇提取主要原料——玉米油（1.0%）^[35]。

綜合以上分析，黃花煙草種子蛋白質(zhì)含量較高，蛋白質(zhì)氨基酸組成模式較優(yōu)，其飼用價(jià)值相對較高，紅花煙草種子含油量較高，且種子油富含不飽和脂肪酸、植物甾醇和角鯊烯，其油用價(jià)值相對較高，因此煙草種子具有較高的利用價(jià)值。

目前，關(guān)于以收獲煙草種子為目的的品種選育及栽培技術(shù)研究還較少，煙草種子的產(chǎn)量較低，這可能成為限制其開發(fā)利用的主要因素之一。2007年，意大利農(nóng)業(yè)部注冊了一項(xiàng)專門用于提取煙草種子油的高能煙草品種Solaris，并在美國、南非、亞歐等32個(gè)國家推廣，此品種可使煙草種子的產(chǎn)量高達(dá)5 t/hm^2[36]。因此，隨著人們對煙草種子利用價(jià)值認(rèn)識的提高，通過生物技術(shù)及栽培技術(shù)提高煙草種子產(chǎn)量，開發(fā)其飼用及油用價(jià)值，可能會(huì)逐漸成為煙草的主要利用新途徑之一。

4 ?結(jié) ?論

不同類型煙草種子中粗蛋白、脂肪以及種子油脂肪酸、植物甾醇、角鯊烯等主要活性成分的含量和組成存在一定差異。相對于紅花煙草種子，黃花煙草種子蛋白質(zhì)含量豐富，氨基酸組成模式與FAO/WHO推薦值及與FAO全雞蛋蛋白貼近度高，是一種較為優(yōu)質(zhì)的植物蛋白資源，可作為家畜飼料原料。而紅花煙草種子油不飽和脂肪酸含量豐富，高于多種常見植物油，脂肪酸組成與葡萄籽油最接近，且富含植物甾醇及角鯊烯，在開發(fā)新型植物油方面具有良好的前景。

參考文獻(xiàn)

[1]?中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院煙草研究所. 中國煙草栽培學(xué)[M]. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2005：6-7.

Tobacco Research Institute?of China?Academy of Agricultural Sciences. Chinese tobacco cultivation[M]. Shanghai：?Shanghai Scientical & Technological Publisher， 2005： 6-7.

[2]?毛新新，侯小東，杜詠梅，等. 煙草α-西柏三烯二醇的分離及抑制HepG2細(xì)胞活性研究[J]. 中國煙草科學(xué)，2017，38（3）：80-85.

MAO X X， HOU X D， DU Y M， et al. Isolation and anti-HepG2 activity?study of α-cetotrienediol from tobacco[J]. Chinese Tobacco Science， 2017， 38（3）： 80-85.

[3]?段蘇珍，杜詠梅，侯小東，等. 煙草提取物對十一種植物病原真菌的抑制作用[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2015，27（3）：470-474，484.

DUAN S Z， DU Y?M， HOU X D， et al. Inhibitory effects of tobacco extracts on eleven phytopathogenic?fungi[J]. Natural Product Research and Development， 2015， 27（3）： 470-474， 484.

[4]?黃衛(wèi)挺. 控?zé)煂?dǎo)向下煙草產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型探析[J]. 宏觀經(jīng)濟(jì)管理，2013（4）：59-60.

HUANG W T. Analysis on the transformation of tobacco industry under the guidance of tobacco control[J]. Macroeconomic Management， 2013（4）： 59-60.

[5]?STANISAVLJEVI? I T， LAZI? M L， VELJKOVI? V B. Ultrasonic extraction of oil from tobacco （Nicotiana tabacum?L.） seeds[J]. Ultrasonics Sonochemistry， 2006， 14（5）： 646-652.

[6]?THAKUR L S， PAREKH L J， PATEL B K. Evaluation of nutritional quality of?tobacco seed oil[J]. Tobacco Research， 1998， 2（11）： 70-75.

[7]?SIMONE G， RACHELE P， PASQUALE R， et al. Alternative use of tobacco as a sustainable crop for seed oil， biofuel， and biomass[J]. Agronomy for Sustainable Development， 2016， 36（4）： 55-60.

[8]?蘇彬，傅泳，侯小東，等. 煙草種子油的毒理學(xué)評價(jià)[J]. 癌變·畸變·突變，2016，28（1）：60-65.

SU B， FU Y， HOU X D， et al. Toxicity?evaluation of tobacco seed oil[J]. Carcinogenesis， Distortion and Mutation， 2016， 28（1）： 60-65.

[9]?ROSSI L， FUSI E， BALDI G， et al. Tobacco seeds by-product as protein source for piglets[J]. Open Journal of Veterinary Medicine， 2013， 3（1）： 73-78.

[10]?POPOVA V， PETKOVA Z， IVANOVA T， et al. Biologically active components in seeds of three Nicotiana?species[J]. Industrial Crops and Products， 2018， 117： 375-381.

[11]?XIE Z， WHENT M， LUTTERODT H， et al. Phytochemical，?antioxidant， and antiproliferative properties of seed oil and flour extracts of maryland-grown tobacco cultivars[J].?Journal of Agricultural and Food Chemistry， 2011， 59（18）： 9877-9884.

[12]?歐陽文，徐若飛，杜紹明. 香料煙煙籽的分析與應(yīng)用研究[J]. 煙草科技，2003（12）：20-23.

OUYANG W， XU R F， DU S M. Analysis and application of oriental tobacco seeds[J]. Tobacco Science?&?Technology， 2003（12）： 20-23.

[13]?PARLAK A， KARABAS H， OZSERT I， et al. Effects of tobacco seed oil methyl ester on performance and exhaust emissions of dieselengine[J]. Journal of the Energy Institute， 2013， 86（3）： 147-152.

[14]?PATEL K I， PARMAR R J， PARMAR J S. Novel binder system for ultraviolet-curable coatings based on tobacco seed （Nicotiana rustica） oil derivatives as a renewable resource[J]. Journal of Applied Polymer Science， 2010， 107（1）： 71-81.

[15]?CONSULTATION J W E. Protein and amino acid requirements in human nutrition[M]. World Health Organization Technical Report， 2007.

[16]?王芳，喬璐，張慶慶，等. 桑葉蛋白氨基酸組成分析及營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)[J]. 食品科學(xué)，2015，36（1）：225-228.

WANG F， QIAO W， ZHANG Q Q， et al.?Amino acid composition and nutritional evaluation of mulbery vegtable oils[J]. Food Science， 2012， 33（16）：?188-193.

[17]?楊永濤，潘思源，靳欣欣，等. 不同品種核桃的氨基酸?價(jià)值評價(jià)[J]. 食品科學(xué)，2017（13）：213-218.

YANG Y T， PAN S Y， YAN X X， et al.?Amino acid composition and nutritional evaluation of different variaties of walnut[J]. Food Science， 2017（13）： 213-218.

[18]?郭剛軍，胡小靜，徐榮，等. 干燥方式對辣木葉營養(yǎng)功能成分及氨基酸組成的影響[J]. 食品科學(xué)，2018，39（11）：39-45.

GUO G J， HU X J， XU R， et al. Effects of different drying methods on nutritional functional components and amino acid composition of Moringa oleifera?leaves[J]. Food Science， 2018， 39（11）： 39-45.

[19]?ZHELJAZKOV V D， VICK B， EBELHAR M W， et al. Nitrogen applications modify seed and oil yields and fatty acid composition of winter mustard[J]. Industrial Crops and Products， 2012， 6（1）： 28-32.

[20]?ZHELJAZKOV V D， VICK B， EBELHAR M W， et al.?Effect of N on yield and chemical profile of winter canola in mississippi[J]. Journal of oleo science， 2013， 62（7）： 453-458.

[21]?朱怡霖，張海生，楊淑芳，等. 18種大豆種子蛋白質(zhì)、氨基酸和脂肪酸的組成成分分析[J]. 中國油脂，2017，42（1）：144-148.

ZHU Y L， ZHANG H S， YANG S F， et al. Analysis of protein?content， compositions of amino acid and fatty acid in 18 kinds of soybean seeds[J]. China Oils and Fats， 2017（1）： 144-148.

[22]?趙鳳敏，李樹君，張小燕，等. 不同品種馬鈴薯的氨基酸營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)[J]. 中國糧油學(xué)報(bào)，2014，29（9）：13-18.

ZHAO F M， LI S J， ZHANG X Y， et al. Evaluation of amino acid nutritional value in?different potato varieties[J]. Journal of the Chinese Cereals and Oils Association， 2014， 29（9）： 13-18.

[23]?周丹蓉，廖汝玉，方智振，等. 李果實(shí)蛋白質(zhì)的營養(yǎng)評價(jià)與聚類分析[J]. 東南園藝，2012（4）：1-6.

ZHOU D R， LIAO R Y， FANG Z Z， et al. Nutritiona?assessment of plums?protein[J]. Southeast Horticulture， 2012（4）： 1-6.

[24]?魏永生，鄭敏燕，耿薇，等. 常用動(dòng)、植物食用油中脂肪酸組成的分析[J]. 食品科學(xué)，2012，33（16）：188-193.

WEI Y S， ZHENG M Y， YAN W， et al.?Fatty acid composition analysis of common?animal fats and?vegtable?oils[J]. Food Science， 2012， 33（16）： 188-193.

[25]?侯小東，張懷寶，張忠鋒，等. 煙籽油成分分析及體內(nèi)抗氧化作用研究[J]. 中國煙草科學(xué)，2016，37（4）：80-84.

HOU X D， ZHANG H B， ZHANG Z F， et al. Analysis of tobacco seed oil and its antioxidant activities in vivo[J]. Tobacco Science of China， 2016， 37（4）： 80-84.

[26]?SABIR A， UNVER A， KARA Z. The fatty acid and?tocopherol constituents of the seed oil extracted from 21 grape varieties （Vitis spp.）[J]. Journal of the Science of Food &?Agriculture， 2012， 92（9）： 1982-1987.

[27]?楊水艷，邵志凌，聶緒恒. 10種云南植物油脂肪酸組成比較分析與評價(jià)[J]. 中國油脂，2018，43（1）：144-146.

YANG S Y， SHAO Z L， NIE X H. Comparative?and evaluation of fatty acid composition of ten plant oils in Yunnan[J]. Chinese Fat， 2018， 43（1）： 144-146.

[28]?蘇彬. 煙草種子油的毒理學(xué)評價(jià)及降脂功能研究[D]. 青島：青島大學(xué)，2016.

SU B. Toxicity?evaluation and lipid-lowering function of tobacco seed oil[D]. Qingdao： Qingdao University， 2016.

[29]?SALVO A， LA TORRE G L， ROTONDO A， et al. Determination of squalene in organic extra virgin olive oils （EVOOs） by UPLC/PDA using a single-step spe sample preparation[J]. Food Analytical Methods， 2017， 10（5）： 1377-1385.

[30]?CZAPLICKI S， OGRODOWSKA D， ZADERNOWSKI R， et al. Characteristics of biologically-active substances of amaranth oil obtained by various techniques[J]. Journal of Food and Nutrition Sciences， 2012， 62（4）： 235-239.

[31]?GHANBARI R， ANWAR F， ALKHARFY K M， et al. Valuable nutrients and functional bioactives in different parts of oive （Olea europaea?L.）—a?review[J]. International Journal of Molecular Sciences， 2012， 13（3）： 3291-3340.

[32]?朱琳，薛雅琳，劉曉輝，等. 氣相色譜內(nèi)標(biāo)法測定植物油中角鯊烯含量[J]. 中國糧油學(xué)報(bào)，2017，32（12）：117-120.

ZHU L， XUE Y L， LIU X H， et al. Determination of squalene in vegetable oil by gas chromatography with an internal standard[J]. Journal of the Chinese Cereals and Oils Association， 2017， 32（12）： 117-120.

[33]?ZHAO Y， YANG B， XU T， et al. Photooxidation of phytosterols in oil matrix： effects of the light， photosensitizers and unsaturation degree of the lipids[J]. Food Chemistry， 2019， 288： 162-169.

[34]?ADHIKARI P， HU P. Enzymatic and chemical interesterification of rice bran oil， sheaolein， and palm stearin and comparative study of their physicochemical properties[J]. Journal of Food Science， 2012， 77（12）： 8.

[35]?房濤，杜雁冰，劉紀(jì)湘，等. 玉米油中植物甾醇的檢測方法研究[J]. 糧食與食品工業(yè)，2015，22（2）：90-93.

FANG T， DU Y B， LIU J X， et al. Study of the?detection method of phytosterol in corn oil[J]. Grain and Food Industry， 2015， 22（2）： 90-93.

CORRADO?F. Mutagenized tobacoo plant as seed culture for the production of oil for energetic industrial and alimentary uses， Wo 2008110876， 2008.