九江地區(qū)835例遺傳咨詢患者外周染色體核型分析

柯買春

(九江市婦幼保健院，江西 九江332000)

閉經(jīng)、習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、停育、生育畸形兒或智力低下兒等異常史是育齡男女常見的病理現(xiàn)象，這些病理現(xiàn)象可造成育齡男女的生育障礙[1-3]。它可由多種原因造成：環(huán)境因素、遺傳因素、免疫生殖因素和內(nèi)分泌異常等等。染色體是人類細(xì)胞遺傳學(xué)研究的主要對(duì)象，所以對(duì)有閉經(jīng)、習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、停育及生育畸形兒或智力低下兒等異常史的育齡男女進(jìn)行染色體檢查十分必要。本文對(duì)2016年3月-2017年2月就診于九江市婦幼保健院門診婦產(chǎn)生殖科的835例遺傳咨詢患者進(jìn)行染色體分析，探尋染色體異常與生育障礙的關(guān)系，為臨床診斷、遺傳咨詢和生育指導(dǎo)提供參考性依據(jù)，并將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2016年3月-2017年2月來(lái)自我院九江市婦幼保健院門診婦產(chǎn)生殖科835例遺傳咨詢就診患者，其中男401例，年齡21~47歲；女434例，年齡16~41歲。就診原因包括閉經(jīng)、習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、死胎停育、生育畸形兒或智力低下兒史及婚檢等。

1.2 方法 對(duì)受檢者抽取肝素抗凝外周血2~3ml接種于含25%小牛血清的1640養(yǎng)基中恒溫?zé)o菌培養(yǎng)72h，收獲前2~4h秋水仙素處理，再用0.4%kcl低滲液孵育細(xì)胞30min，使細(xì)胞分散開來(lái)。然后用甲醇：冰醋酸（3：1）混合液固定細(xì)胞，冰凍懸液滴片，80℃烤片3h，常規(guī)Try-Giemsa制備G帶，在顯微鏡高倍鏡鏡下計(jì)數(shù)30個(gè)分裂相，并對(duì)其中3個(gè)核型進(jìn)行分析，對(duì)嵌合體要加大計(jì)數(shù)到100個(gè)，100個(gè)核型中有2個(gè)或以上多一條染色體以及3個(gè)或以上少一條染色體就應(yīng)該報(bào)為嵌合體。結(jié)果按人類細(xì)胞遺傳學(xué)國(guó)際命名體制（ISCN.1995）的標(biāo)準(zhǔn)命名。

2 結(jié)果

2.1 遺傳咨詢患者異常核型檢測(cè)結(jié)果分析 835例遺傳咨詢患者，其中異常核型99例，占比11.9%，包括男性48例，女性51例，其中常染色體異常核型23例、性染色體異常核型11例、多態(tài)性65例。

2.2 常染色體異常核型患者的具體情況分析 23例常染色體異常核型包括倒位11例、易位8例、21號(hào)染色體的衍生體4例，結(jié)果見表1。

2.3 性染色體異常核型患者的具體情況分析 11例性染色體異常核型包括特納綜合征4例、克氏綜合征4例、超Y2例、Y染色體的臂間倒位1例，結(jié)果見表2。

2.4 多態(tài)性異常核型患者的情況分析 見表3。

3 討論

常染色體異常與生育障礙 本文結(jié)果顯示染色體異常是導(dǎo)致患者習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、停胎停育及生育異常兒的重要原因。本文835例遺傳咨詢患者中異常者99例，常染色體異常者23例，占2.7%，其中5例平衡易位、3例羅伯遜易位、11例倒位以及4例衍生體，臨床表現(xiàn)均為不同程度的死胎、流產(chǎn)、不孕及無(wú)精少精癥。

表1 常染色體異常核型患者的具體情況分析

表2 性染色體異常核型患者的具體情況分析

表3 多態(tài)性類型及臨床表現(xiàn)[n（%）]

平衡易位 平衡易位在染色體結(jié)構(gòu)異常中較為常見，因其沒(méi)有遺傳物質(zhì)的丟失，表型一般正常，在減數(shù)分裂過(guò)程中，易位染色體將形成易位型的四射體，可形成18種子，其中1/18可生育正常兒，1/18可生育表型正常的攜帶者，其余16/18都因部分三體或單體而導(dǎo)致流產(chǎn)或死胎[4]，本文5例平衡易位均有習(xí)慣性流產(chǎn)或不孕史。

羅伯遜易位 羅伯遜易位是近端著絲粒染色體間的整臂易位，包括同源羅伯遜易位和非同源羅伯遜易位，因丟失的小染色體幾乎全是異染色質(zhì)，遺傳物質(zhì)幾乎沒(méi)有丟失，所以表型一般正常。同源羅伯遜易位不能產(chǎn)生正常配子，不能生育正常兒，而非同源羅伯遜易位在產(chǎn)生的配子1/4是正常的，1/4的可能是攜帶者，其余1/2是單體或三體，會(huì)造成胎兒流產(chǎn)或死胎[5]。

倒位 染色體倒位由于只是染色體基因順序的重新組合，遺傳物質(zhì)沒(méi)有丟失，故表型正常。但在減數(shù)分裂過(guò)程中同源染色體之間進(jìn)行交換，可形成4種配子，1種正常、1種為倒位攜帶者、另外2種為部分重復(fù)和丟失的重組型，將導(dǎo)致死胎、流產(chǎn)或畸形兒出生[6]。

性染色體異常與生育障礙 性染色體異常主要表現(xiàn)為X和Y染色體的異常，特納綜合征和克氏綜合征為兩種主要類型。本文835例受檢者中查出特納綜合癥患者4例（患者主要表現(xiàn)為不孕、閉經(jīng)和流產(chǎn)）、克氏綜合征4例、2例超Y嵌合體患者 （主要臨床表現(xiàn)為不孕）和1例Y染色體倒位（患者多次停胎）。目前認(rèn)為，正常情況下，卵母細(xì)胞有2條完整的X染色體，如果X染色體缺少一條或部分缺失或細(xì)胞系中比例減少都將影響性腺功能發(fā)育，導(dǎo)致青春前期卵巢的發(fā)育缺陷和卵巢激素缺乏，青春期時(shí)，卵巢功能容易衰竭，產(chǎn)生的卵泡數(shù)將變少或缺失，第二性征也不明顯[7，8]。X染色體異常為單體或部分單體或嵌合體，都沒(méi)有2條完整的X染色體，影響性腺的發(fā)育，所以臨床表現(xiàn)為不孕、流產(chǎn)和閉經(jīng)等；而Y染色體上的基因參與生殖功能的調(diào)節(jié)，據(jù)報(bào)道14%的無(wú)精子癥患者和5%少弱精子癥患者都有染色體的異常[9，10]。所以性染色體異常是生殖異常的重要因素。

染色體多態(tài)性 染色體多態(tài)性是含有高度重復(fù)DNA的異染色質(zhì)，主要存在于D、G組染色體隨體，1號(hào)、9號(hào)、16號(hào)染色體的次縊痕和Y染色體中。過(guò)去曾認(rèn)為，染色體多態(tài)性沒(méi)有臨床意義，但近年不斷有報(bào)道染色體多態(tài)性會(huì)導(dǎo)致患者流產(chǎn)、不孕、死胎和無(wú)精子癥等[11，12]。本文835例受檢者中有65例為染色體多態(tài)性，常染色體多態(tài)性56例，主要導(dǎo)致患者流產(chǎn)、死胎、停胎和不孕等；Y染色體多態(tài)性9例，主要引起患者無(wú)精少精和不孕。常染色體多態(tài)性可能由于異染色質(zhì)中高度重復(fù)的DNA在減數(shù)分裂過(guò)程出現(xiàn)重組異常進(jìn)而影響基因調(diào)節(jié)和細(xì)胞分化從而使胚胎發(fā)育障礙而致死胎、流產(chǎn)等，而Y染色體多態(tài)性主要表現(xiàn)為大Y、小Y。有學(xué)者認(rèn)為大Y染色體過(guò)多重復(fù)的染色質(zhì)可影響精子生成與發(fā)育相關(guān)基因的正常發(fā)揮，妨礙精子生成[13]。而小Y染色體可造成高度重復(fù)的DNA或AZF區(qū)基因的缺失，從而導(dǎo)致性腺發(fā)育或精子形成的異常。

本研究顯示，染色體異?？梢詫?dǎo)致育齡男女不孕、閉經(jīng)、停胎停育、流產(chǎn)以及生出畸形兒等異?，F(xiàn)象，也證實(shí)了細(xì)胞染色體檢查的重要性。希望本文的研究結(jié)果能為產(chǎn)前診斷，臨床咨詢及生殖工作提供參考性意見。