腫瘤及腫瘤基質(zhì)細胞釋放的外泌體對腫瘤耐藥產(chǎn)生的影響

劉丹丹 許爾屹 趙偉華

惡性腫瘤疾病對人類健康有高度威脅，其患者存活時間較短，經(jīng)常發(fā)生死亡事件。伴隨臨床醫(yī)學技術(shù)的不斷進步，惡性腫瘤疾病的治療手段逐漸增多，其中大部分患者均會接受化療治療方案，通過治療來延緩生存時間并改善預后狀況。化療藥物耐藥是惡性腫瘤疾病治療過程中的主要難點之一，發(fā)生藥物耐藥后容易促進腫瘤細胞的復發(fā)及轉(zhuǎn)移，進而危及其生命安全[1]。目前，部分國外研究提出外泌體在腫瘤耐藥中發(fā)揮著重要作用，對外泌體實施處理或有助于改善耐藥問題，但國內(nèi)臨床尚缺乏此方面的試驗分析。文章通過整合國內(nèi)外相關(guān)報道，對其研究現(xiàn)狀進行綜合分析，旨在進一步認識其影響作用。

1 外泌體概述

外泌體主要是指人體多類型細胞所分泌的囊泡，其直徑多趨于40～130 nm，內(nèi)含胞質(zhì)生物活性物質(zhì)豐富，主要包括蛋白質(zhì)、DNA、mRNA等，而表面多為脂質(zhì)物質(zhì)。上世界80年代，國外研究學者首次發(fā)現(xiàn)該物質(zhì)，并將其歸為外排轉(zhuǎn)鐵蛋白受體范圍，通過不斷研究在首次發(fā)現(xiàn)4年后將其命名為外泌體。在研究初期，人們普遍認為該物質(zhì)為清除胞內(nèi)廢物，但持續(xù)研究表現(xiàn)出其轉(zhuǎn)運功能在人體生物學方面可起到重要作用。在釋放外泌體的細胞中，腫瘤及腫瘤基質(zhì)細胞也較為常見，其釋放的外泌體可直接控制疾病的發(fā)生與進展，通過檢測外泌體能夠輔助惡性腫瘤的診斷及預后評估[2]。李棟等[3]研究分析了 TWEAK 刺激后巨噬細胞外泌體中miRNA-7的表達水平，試驗結(jié)果表示miRNA-7 在 TWEAK 刺激巨噬細胞分泌的外泌體中發(fā)揮重要作用，可通過抑制上皮性卵巢癌細胞中EGFR信號通路抑制其侵襲和遷移。顏曉慧等[4]報道分別收集26例健康成人、29例肺結(jié)核患者與94例肺癌患者為試驗對象，提取其血清外泌體miRNA并開展臨床檢驗，研究結(jié)果顯示出血清外泌體miR-21有助于肺癌的臨床檢出，并提出將其作為診斷標志物可積極改善肺癌的診斷效果。吳凡等[5]報道評價了三陰乳腺癌細胞受脂肪干細胞來源外泌體的影響情況，試驗分析表現(xiàn)脂肪干細胞來源外泌體能夠?qū)θ幦橄侔┘毎w移形成明顯促進作用，但并未影響其細胞增殖，并且在阿霉素耐藥方面無顯著作用。近年來，部分國外研究表示腫瘤及腫瘤基質(zhì)細胞所釋放外泌體與腫瘤化療藥物耐藥有一定程度相關(guān)性，并認為開展此項研究有助于改善腫瘤耐藥問題，但國內(nèi)研究在此方面仍較為鮮見。許乘鳳等[6]研究中分析了外泌體在乳腺癌細胞間耐藥信息的傳遞作用，分別選擇了MCF-7/ADR與MCF-7細胞株，觀察阿奇霉素藥物在腫瘤細胞中的濃度變化，并記錄培養(yǎng)后P-gp與MDR1基因等表達情況，研究結(jié)果表現(xiàn)外泌體對乳腺癌細胞有確切的耐藥信息傳遞作用，可促使敏感細胞獲得耐藥性，并不斷傳遞P-gp，主要通過mRNA與蛋白形式完成傳遞。

2 腫瘤細胞釋放外泌體對腫瘤耐藥的影響

2.1 腫瘤細胞釋放外泌體對腫瘤耐藥的參與作用

腫瘤細胞自身所釋放外泌體可將miRNAs轉(zhuǎn)運至受體敏感細胞中，因其轉(zhuǎn)運可對腫瘤耐藥形成誘導作用或增強作用，并且在此過程中外泌體也對miRNAs形成了保護性作用。有報道表示肺腺癌耐藥細胞中的外泌體表達增強，而其中miR-21、miR-33水平明顯上升，將此外泌體作用于藥物敏感細胞后會明顯誘導細胞耐藥[7]。

2.2 TD-exosomes運轉(zhuǎn)對腫瘤耐藥的參與作用

TD-exosomes對多藥耐藥蛋白質(zhì)進行轉(zhuǎn)運后，使敏感腫瘤細胞出現(xiàn)耐藥表現(xiàn)，影響藥物外排進而不斷抑制藥物作用，在依靠外泌體轉(zhuǎn)運時便會直接形成降敏效果，形成腫瘤耐藥誘導或增強作用[8]。通常情況下，惡性腫瘤進展時可形成不同的轉(zhuǎn)運系統(tǒng)，將介導藥物自胞內(nèi)排向胞外，該種轉(zhuǎn)運體主要為胞內(nèi)轉(zhuǎn)運蛋白，處于細胞內(nèi)體、多囊泡小體界膜中。當前研究已證實該轉(zhuǎn)運系統(tǒng)對常用化療藥物作用均有影響作用，在乳腺癌細胞、前列腺細胞等試驗中均有證實。另外，TD-exosomes對腫瘤細胞同抗癌靶向藥物的結(jié)合作用也有影響，此類影響也會形成腫瘤耐藥情況[9]。例如，在血液系統(tǒng)腫瘤中經(jīng)常應用的化療藥物利妥昔單抗，主要通過細胞表面CD20通氣藥物Fc段相結(jié)合來形成毒性細胞清除作用，但惡性腫瘤釋放外泌體中存在較多CD20，在用藥過程中不斷形成競爭性結(jié)合作用，進而減輕藥物作用效果[10]。

3 腫瘤基質(zhì)細胞中外泌體對腫瘤耐藥的影響

3.1 腫瘤及腫瘤基質(zhì)細胞相互作用對腫瘤耐藥的影響

現(xiàn)階段臨床已證實評估患者預后狀況過程中腫瘤微環(huán)境是必不可少的影響因素之一，其含有細胞種類較多，包括上皮細胞、免疫細胞、纖維細胞等等。研究報道證實食管癌細胞耐藥可受到其miR27纖維細胞的影響，非小細胞肺癌患者在其EGFR突變影響下導致吉非替尼藥物耐藥狀況不同，而吉非替尼耐藥者的CAF平足蛋白表達顯著較高[11]。

3.2 腫瘤基質(zhì)細胞釋放外泌體對腫瘤耐藥的影響

腫瘤基質(zhì)細胞所釋放外泌體也會誘導或增加腫瘤耐藥，現(xiàn)階段國外研究已發(fā)現(xiàn)了多種基質(zhì)細胞釋放外泌體對腫瘤耐藥形成的影響作用。人間充質(zhì)干細胞釋放外泌體對多種通路產(chǎn)生活化作用，從而影響到5-氟尿嘧啶用藥，誘導胃癌腫瘤細胞耐藥而降低藥用效果。成神經(jīng)細胞瘤可收到單核細胞來源外泌體的影響，導致順鉑藥物耐藥性形成或增加。有研究認為，腫瘤基質(zhì)細胞釋放外泌體不僅對其腫瘤耐藥形成影響，通過抑制其活性可積極避免耐藥問題，增強細胞對藥物的敏感性，而改善患者預后效果[12]。

4 外泌體與逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥的研究分析

化療藥物耐藥一直是惡性腫瘤疾病治療的難點之一，發(fā)生藥物耐藥后容易促進腫瘤細胞的復發(fā)及轉(zhuǎn)移，進而危及其生命安全。近年研究提出外泌體在腫瘤耐藥中發(fā)揮著重要作用，對外泌體實施處理或有助于改善耐藥問題?，F(xiàn)階段研究中外泌體對惡性腫瘤耐藥的影響分子較多，而此類報道均認為通過對外泌體進行抑制處置可逆轉(zhuǎn)其耐藥問題。有研究對乳腺癌細胞應用貝沙羅汀與沒藥甾酮進行處理，明顯抑制了乳腺癌耐藥蛋白表達，從而影響其耐藥轉(zhuǎn)運，阻滯外泌體釋放，進而提升藥物作用。間充質(zhì)干細胞釋放外泌體實施轉(zhuǎn)染法處理以提高其anti-miR9表達，經(jīng)處理后提高多形性成膠質(zhì)細胞瘤細胞中miR9水平，從而影響到替莫唑胺對腫瘤的耐藥性。

5 結(jié)論

惡性腫瘤疾病對人類健康有高度威脅，其患者存活時間較短，經(jīng)常發(fā)生死亡事件。伴隨臨床醫(yī)學技術(shù)的不斷進步，惡性腫瘤疾病的治療方法逐漸增多，其中大部分患者均會接受化療治療方案，通過治療來延緩生存時間并改善預后狀況?；熕幬锬退幨菒盒阅[瘤疾病治療過程中的主要難點之一，發(fā)生藥物耐藥后容易促進腫瘤細胞的復發(fā)及轉(zhuǎn)移，進而危及其生命安全。獲得性耐藥一直是惡性腫瘤中的重點研究課題，其發(fā)生機制極為復雜，腫瘤及腫瘤基質(zhì)細胞來源外泌體對其有重要影響作用，不僅能夠?qū)δ退幏肿有纬蛇\轉(zhuǎn)傳遞，也直接參與到腫瘤耐藥中，通過對此類外泌體形成抑制作用，必然能夠逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥問題，更有效的發(fā)揮靶向治療效果?，F(xiàn)階段，國內(nèi)臨床尚較缺乏此類試驗研究，腫瘤醫(yī)師在日后工作中還需加強對其研究深度，為克服腫瘤耐藥形成有利支持。