常規(guī)生化檢驗項目參考區(qū)間適用性驗證

索朗卓嘎，周 琪，許建成△

(吉林大學第一醫(yī)院：1.檢驗科；2.兒科，吉林長春 130021)

常規(guī)生化檢驗是實驗診斷學的重要組成部分，為臨床診斷、病情監(jiān)測、判斷預后和指導治療提供了可靠依據。參考區(qū)間是解釋檢驗結果、分析檢驗信息的基本尺度和依據。原衛(wèi)生部自2012年12月25日以來陸續(xù)頒布了國家衛(wèi)生行業(yè)標準《臨床常用生化檢驗項目參考區(qū)間》[1]，對中國成年人臨床常用生化檢驗項目參考區(qū)間進行了調整，這些標準的發(fā)布實施對相應項目參考區(qū)間的建立和應用具有重要指導意義。然而，原衛(wèi)生部發(fā)布的行業(yè)標準WS/T 402-2012[2]及美國臨床實驗室標準化協(xié)會(CLSI)文件C28-A3[3]均提出醫(yī)學實驗室在引用新的參考區(qū)間前，有必要進行適用性驗證。為了保證臨床生化檢驗項目的真實可靠性，此次研究采用相關文件[2-3]的推薦要求以驗證原衛(wèi)生部發(fā)布的參考區(qū)間是否適用于吉林地區(qū)。

1 資料與方法

1.1研究對象 按WS/T 402-2012[2]的要求，選擇2016年7-10月吉林大學第一醫(yī)院體檢中心健康體檢人群，通過檢體診斷、實驗診斷、影像診斷確認符合要求的驗證個體。本研究篩選出男性驗證個體250人，其中20～<30歲、30～<40歲、40～<50歲、50～<60歲、60～<70歲、70～<80歲人數為30人、59人、44人、54人、31人、32人；女性驗證個體287人，其中20～<30歲、30～<40歲、40～<50歲、50～<60歲、60～<70歲、70～<80歲人數分別為30人、81人、79人、37人、30人、30人。

1.2儀器與試劑 所有生化項目均在日立7600-210全自動生化分析儀上檢測，試劑與標準品均為上?？迫A生物工程股份有限公司生產，室內質控品為美國伯樂公司參考物質。

1.3方法

1.3.1標本采集 采血前3 d正常飲食、活動。體檢者禁食8 h后于清晨7:30-9:30取坐位，于肘前靜脈采集2 mL靜脈血，紅色頭蓋分離膠-促凝采血管由廣州陽普醫(yī)療科技股份有限公司生產。

1.3.2標本檢測 排除溶血、脂血、高膽紅素等不合格標本后上機測定血清丙氨酸氨基轉移酶(AST)、天門冬氨酸氨基轉移酶(ALT)、γ-谷氨?；D移酶(GGT)、堿性磷酸酶(ALP)、總蛋白、血清清蛋白(ALB)、尿素、肌酐。標本均在4 h內完成測定。

1.3.3質量控制 日立7600-210全自動生化分析儀由廠家每12個月校準1次。每個工作日常規(guī)樣品開始測試前至少檢測低、中、高3個水平的質控品，當變異系數在允許范圍內時方可進行常規(guī)樣品檢測。每年對系統(tǒng)進行精密度、正確度、分析測量范圍、臨床可報告范圍、攜帶污染等性能驗證。

1.4統(tǒng)計學處理 使用SPSS21.0統(tǒng)計軟件分析。按WS/T 405-2012規(guī)定，采用Dixon方法剔除離群值。參考區(qū)間驗證：從20～<80歲，每10歲男性、女性各募集驗證個體20人以上，各個亞組的測定值與頒布的行業(yè)標準進行比較，若落在參考區(qū)間內的值不低于90%，則驗證通過。單樣本K-S檢驗判定數據是否呈正態(tài)分布。采用兩獨立樣本t檢驗行兩組間比較，采用單因素方差分析行多組間比較。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1常規(guī)生化檢驗項目參數均值 除總蛋白無性別差異外，男性AST、ALT、GGT、ALP、ALB、尿素、肌酐均值都高于女性。男性ALT、GGT及女性ALT水平在20～<60歲隨年齡上升，但60～<80歲后隨年齡下降。男性AST、女性ALP水平隨年齡增長呈逐漸上升趨勢，男性ALB水平則隨年齡逐漸下降。長春地區(qū)漢族健康人群常規(guī)生化檢驗項目均值見表1。

表1 長春地區(qū)漢族健康人群常規(guī)生化檢驗項目參數±s)

表2 長春地區(qū)漢族健康人群常規(guī)生化檢驗項目驗證結果(%)

2.2常規(guī)生化檢驗項目參考區(qū)間驗證 男性、女性各6個亞組8個常用生化檢驗項目均值94%～100%落在參考區(qū)間內，通過驗證。長春地區(qū)漢族健康人群常規(guī)生化檢驗項目的驗證結果見表2。

3 討 論

臨床生化檢驗是利用化學發(fā)光、化學比色、電泳或免疫比濁、離子選擇性電極電位等技術，測定血液中的糖、脂、蛋白質、電解質、酶、激素及藥物等的濃度，為準確診斷、病情分析、療效監(jiān)測、預后觀察和疾病預防等方面提供依據的一類檢查。參考區(qū)間是臨床判斷受試者健康與否的依據，實驗室應給臨床提供合適的參考區(qū)間，否則會導致漏診、誤診。2012年12月25日以來原衛(wèi)生部先后發(fā)布了衛(wèi)生行業(yè)標準《臨床常用生化檢驗項目參考區(qū)間》[1]，使我國有了全國性的臨床常用生化檢驗項目參考區(qū)間。各實驗室使用前應驗證參考區(qū)間的可靠性和適用性，以確認該參考區(qū)間是否適用于本地區(qū)人群。但外部參考區(qū)間的適用性取決于實驗室檢驗結果與建立參考區(qū)間時結果的可比性和服務人群的適用性[4]。本課題組首先確認本年度全自動生化分析儀的正確度、臨床可報告范圍、分析測量范圍、攜帶污染等性能驗證均符合CNAS-CL02《醫(yī)學實驗室質量和能力認可準則》要求。本課題組此前的研究結果表明，兒童ALP、膽紅素、總蛋白、ALB等的參考區(qū)間與成人有較大差別，成人衛(wèi)生行業(yè)標準并不適用于兒童[5-8]。

衛(wèi)生行業(yè)標準《臨床常用生化檢驗項目參考區(qū)間》建立時的年齡范圍20～<80歲，男女比例1∶1，每10歲年齡段參考個體數至少120人。本驗證選取年齡20～<80歲人群，男女每10歲均至少選取30例以上至吉林大學第一醫(yī)院的健康體檢者，總計537人、12個組分組驗證。本研究結果顯示，除總蛋白無性別差異外，男性AST、ALT、GGT、ALP、ALB、尿素、肌酐均值均高于女性。本研究結果發(fā)現(xiàn)，多個生化參數在不同年齡段有差異。男性AST及女性ALP水平隨年齡增長呈逐漸上升趨勢、男性ALB水平相反隨年齡增長呈下降趨勢。男性ALT、GGT及女性ALT 20～<60歲隨年齡增長逐漸上升， 60～<80歲卻隨年齡增長逐漸下降。但男女所有年齡段均值均在參考區(qū)間內。本研究分組驗證結果顯示，94%以上落在行業(yè)標準提供參考區(qū)間內，故原衛(wèi)生部發(fā)布的臨床常規(guī)生化檢驗項目參考區(qū)間適用于吉林地區(qū)。這與云南[4]、山西[9]、安徽[10]、北京[11]等的報道相似。

4 結 論

由于原衛(wèi)生部發(fā)布的臨床常用生化檢驗項目參考區(qū)間與此前的教材、說明書及《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[12]等不同，而醫(yī)學學科教材并未隨之更改，故在低蛋白評估、腎臟功能衰退評判、肝臟功能受損評估等臨床應用中是否需要修改仍需探討。本課題組得出的經驗是，通過實驗室驗證后召開臨床聯(lián)席會，給臨床提供相應項目新的參考區(qū)間及制訂過程，再經過臨床驗證后才能得到較好地實施。