腸道菌群與子宮肌瘤的相關(guān)性分析

張亞芳，吳青京，王青慧，陳芬

0 引言

子宮肌瘤是女性常見的生殖系統(tǒng)良性腫瘤，但發(fā)病原因并不是很明確，有可能是受到體內(nèi)外多種因素相互作用的生理結(jié)果，涉及到子宮正常肌層細(xì)胞的過度增殖生長(zhǎng)。近些年流行病學(xué)的研究已證實(shí)，子宮肌瘤的生長(zhǎng)和瘤體的維持有賴于女性體內(nèi)性激素，尤其是雌激素、孕激素的水平[1]，而雌激素的合成及分泌又受到多種體內(nèi)外因素相互影響。隨著現(xiàn)代生活環(huán)境改變、抗生素及生物制劑的應(yīng)用，人體腸道菌群成分和數(shù)量的改變，對(duì)人體運(yùn)動(dòng)、免疫、內(nèi)分泌及性激素水平狀態(tài)均存在重要影響[2-4]。而雌激素水平的改變是女性子宮肌瘤發(fā)病的一個(gè)獨(dú)立影響因素。相關(guān)研究也已經(jīng)證實(shí)，除了雌激素、孕激素對(duì)子宮肌瘤有影響外，體內(nèi)微量元素、生長(zhǎng)因子、免疫細(xì)胞等與子宮肌瘤同樣具有密切的關(guān)系。人體腸道菌群數(shù)量龐大，時(shí)刻影響著人體生理功能，對(duì)機(jī)體激素合成與分泌、微量元素、生長(zhǎng)因子、免疫系統(tǒng)等影響深遠(yuǎn)。本研究分析育齡女性腸道菌群情況及部分菌群種類的水平，為腸道菌群情況與子宮肌瘤發(fā)病的相關(guān)性提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 收集2015年6月至2017年7月海南省婦幼保健院收治的育齡女性子宮肌瘤患者70例作為研究對(duì)象，年齡為25～45歲，平均年齡（36.6±3.3）歲；將同期來我院行健康體檢女性70例，設(shè)為對(duì)照組，年齡為23～46歲，平均年齡（35.8±4.5）歲。兩組就診者的年齡分析比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) （1）觀察組所有子宮肌瘤患者均符合臨床及B型超聲診斷的標(biāo)準(zhǔn)；（2）兩組受檢對(duì)象均屬育齡女性，未絕經(jīng)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）受檢者患有明顯消化道急、慢性疾??；（2）排除既往有胃腸道手術(shù)史者；（3）排除1月內(nèi)服用外源性雌孕激素、抗生素及對(duì)消化道有刺激作用的生物、化學(xué)制劑；（4）排除妊娠和哺乳期女性；（5）排除患有重要臟器病變和精神障礙者；（6）排除對(duì)本研究的知情同意書不認(rèn)可者。

1.1.3 標(biāo)本采集 收集兩組受檢者新鮮大便，取大便中段約5 g于無菌干燥試管內(nèi)，保存于-80℃冰箱中。

1.2 標(biāo)本DNA的提取和檢測(cè)

按照實(shí)驗(yàn)室無菌操作要求，根據(jù)DNA提取操作步驟進(jìn)行糞便DNA的提取，并進(jìn)行DNA聚合酶鏈反應(yīng)—梯度凝膠電泳，用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)腸道菌群中細(xì)菌總數(shù)、雙歧桿菌、糞腸球菌、大腸桿菌、擬桿菌、梭桿菌、變形桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量，以（拷貝數(shù)/克濕糞）表示。檢測(cè)詳細(xì)步驟按試劑盒說明。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0軟件系統(tǒng)對(duì)標(biāo)本數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量數(shù)據(jù)以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)；進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受檢對(duì)象各腸道菌群狀況比較

子宮肌瘤組患者腸道的細(xì)菌總數(shù)、乳酸桿菌水平均明顯高于對(duì)照組，兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)（P＜0.05）。子宮肌瘤組糞腸球菌、大腸桿菌水平高于對(duì)照組，但兩者相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。其中子宮肌瘤組的雙歧桿菌、擬桿菌、梭桿菌和變形桿菌水平均明顯低于對(duì)照組，兩者對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表 1。

2.2 腸道菌群與子宮肌瘤發(fā)病的相關(guān)性分析

經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，子宮肌瘤組腸道細(xì)菌總數(shù)、雙歧桿菌和乳酸桿菌水平與子宮肌瘤發(fā)病呈正相關(guān)（P＜0.05）；擬桿菌、梭桿菌、變形桿菌與子宮肌瘤發(fā)病呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）；其中糞腸球菌、大腸桿菌與子宮肌瘤的發(fā)病相關(guān)性不顯著（P＞0.05），見表2。

3 討論

子宮肌瘤是女性生殖系統(tǒng)中最常見的良性腫瘤，在育齡女性群體中發(fā)病率約為23%[5]，是引起子宮紅色變性、子宮蒂扭轉(zhuǎn)和生殖器炎性反應(yīng)的主要因素，甚至引起女性不孕癥。相關(guān)報(bào)道指出[6]，無排卵的不孕女性容易發(fā)生子宮肌瘤，體內(nèi)的雌激素水平較正常女性體內(nèi)的高。隨著飲食結(jié)構(gòu)改變、抗生素和免疫抑制劑的使用，人體腸道菌群的組成和數(shù)量發(fā)生改變，在對(duì)人體腸道菌群關(guān)注度的提高發(fā)現(xiàn)，腸道菌群與人體心血管疾病、內(nèi)分泌疾病、免疫系統(tǒng)及激素水平的代謝密切相關(guān)[2-4]。對(duì)子宮肌瘤的深入研究已證實(shí)，子宮肌瘤的發(fā)病及形態(tài)的維持依賴于體內(nèi)雌激素水平，雌激素的合成和分泌受到維生素D、維生素E和碘、硒等微量元素影響[7-9]。再者，相關(guān)研究報(bào)道，體內(nèi)免疫細(xì)胞、生長(zhǎng)因子及微量元素的異常與子宮肌瘤的發(fā)生有關(guān)[10-11]。腸道菌群的狀態(tài)直接或間接的影響著人體生理功能，對(duì)胃腸道內(nèi)食物的發(fā)酵提供了多種生物活性和通路，同時(shí)對(duì)維生素D、維生素E和碘、硒等微量元素的代謝吸收具有重要的調(diào)節(jié)作用[8-9]，而微量元素參與機(jī)體生理功能，并參與女性生殖激素分泌功能。

表1 兩組受檢者各腸道菌群水平比較 (±s, n=70)Table1 Comparison of intestinal flora levels between two groups (±s, n=70)

表1 兩組受檢者各腸道菌群水平比較 (±s, n=70)Table1 Comparison of intestinal flora levels between two groups (±s, n=70)

Groups Total number of bacteria Bifidobacterium Enterococcus faecalis Escherichia coli BacteroidetesFusobacteriumProteus speciesLactobacillus Observation 9.67±0.15 8.33±0.38 7.35±0.38 7.32±0.48 5.67±0.43 4.36±0.49 4.73±0.25 6.72±0.34 Control 8.73±0.62 9.57±0.30 7.17±0.20 7.20±0.13 7.52±0.51 8.42±0.61 7.82±0.36 3.40±0.37 P 0.045 0.016 0.312 0.778 0.007 0.000 0.000 0.000

表2 腸道菌群水平與子宮肌瘤發(fā)病的相關(guān)性分析Table2 Correlation between intestinal flora and pathogenesis of uterine leiomyoma

人體的免疫系統(tǒng)能夠發(fā)現(xiàn)、識(shí)別及清除對(duì)機(jī)體有損害的損傷因子，并能維持身體內(nèi)、外環(huán)境的平衡與穩(wěn)定狀態(tài)，同時(shí)能促進(jìn)吞噬細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α，使損傷的平滑肌細(xì)胞發(fā)生增生性病變。有研究報(bào)道[10]，TNF-α與子宮肌瘤的發(fā)生具有相關(guān)性，其機(jī)制可能是抑制了機(jī)體的免疫狀態(tài)。而研究也證實(shí)，腸道菌群的狀態(tài)對(duì)機(jī)體的免疫系統(tǒng)具有重要影響[12]，最終導(dǎo)致免疫系統(tǒng)的平衡打破，免疫因子激活，引發(fā)子宮肌瘤。

近些年研究發(fā)現(xiàn)，子宮肌瘤是一種高度依賴體內(nèi)雌、孕激素的良性腫瘤。在子宮肌瘤體內(nèi)，雌激素受體（ER）和孕激素受體（PR）水平高于正常的子宮肌層。再者，子宮肌瘤主要高發(fā)于育齡期女性，而在此年齡段的女性雌、孕激素水平較其他年齡段高。長(zhǎng)期服用雌激素的女性，子宮肌瘤的發(fā)生率較未服用的高，在停用雌激素或絕經(jīng)期后，瘤體將逐漸縮小[13]。身體內(nèi)微量元素和電解質(zhì)參與性激素的合成，而腸道菌群的失調(diào)對(duì)維生素及碘、硒等微量元素的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)均具有重要的調(diào)節(jié)作用[8-9]，這可能是導(dǎo)致子宮肌瘤發(fā)生的原因。

相關(guān)的研究表明[13-14]，機(jī)體內(nèi)的生長(zhǎng)因子與子宮肌瘤的發(fā)生具有相關(guān)性，尤其是與表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）關(guān)系最為密切，研究發(fā)現(xiàn)其促進(jìn)子宮肌瘤的生長(zhǎng)機(jī)制可能與促進(jìn)子宮平滑肌細(xì)胞的分裂、增殖和與瘤體血管的生成有關(guān)。雌激素相關(guān)的研究發(fā)現(xiàn)[15]，在子宮肌瘤瘤體內(nèi)EGF受體、VEGF受體、TGF受體水平較正常子宮肌層高，生長(zhǎng)因子受到雌激素的影響作用于內(nèi)分泌系統(tǒng)，也使子宮肌瘤細(xì)胞增殖和分裂加強(qiáng)。而腸道菌群的水平狀態(tài)對(duì)生長(zhǎng)因子也起到調(diào)節(jié)作用[16]。

綜上所述，子宮肌瘤的發(fā)生是一個(gè)多因素相互作用的結(jié)果。腸道菌群不但對(duì)人體內(nèi)微量元素、免疫系統(tǒng)、生殖性激素及生長(zhǎng)因子產(chǎn)生影響，從而與子宮肌瘤形成密切的相關(guān)性；還與人體的骨代謝、甲狀腺、精神、腸道屏障和腫瘤病變等有緊密聯(lián)系[17]。由于本研究樣本量相對(duì)較少，加之在觀察菌群種類上選擇最常見的幾種，觀察指標(biāo)相對(duì)欠缺，將在后期加大患者數(shù)量，增加觀察菌群種類，以完善其他菌群種類對(duì)子宮肌瘤的發(fā)生乃至人體疾病的相關(guān)性進(jìn)一步分析。