持續(xù)性高耗氧量運動對大鼠全血粘度和生化指標的影響

袁 茵，鄧思瑤，黃雅晨，肖洪彬，牛雯穎

高脂血癥是一種脂代謝紊亂疾病，可以誘發(fā)高血壓、糖尿病和血栓疾病等并發(fā)癥。高脂血癥的年輕化、常態(tài)化已經(jīng)嚴重影響患者的生活質(zhì)量。合理的運動配合適當?shù)乃幬餆o疑成為最佳的治療方式。隨著人們運動意識的提高，伴隨著運動形式也多種多樣。其中，跑步運動是日常常見的運動形式之一。因此，為探究跑步運動對機體的影響，本實驗通過測量大鼠血液粘度和生化指標展開研究，具體情況如下。

1 實驗材料

1.1 動物

清潔級雄性SD大鼠12只，體重200-220g，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供，動物合格證號 SCXK(黑) 2013004。

1.2 主要儀器

ZH-PT動物實驗跑臺，安徽正華生物儀器設(shè)備有限公；LBY-N7500B型全自動血液流變儀，北京普利生儀器有限公司；Glamour2000 全自動生化儀，美國 MD 儀器公司；C2000-A全自動血凝儀，北京普利生儀器有限公司；LBY-NG4A型全自動血小板聚集儀，北京普利生儀器有限公司;BECKMAN 超速離心機，美國貝克曼庫爾特有限公司。

1.3 實驗試劑

TG 試劑盒 ( 批號: 167571) ， CHO 試劑盒( 批號: 161951) ， HDL-C 試劑盒 ( 批號:160631) ， LDL-C 試劑盒( 批號: 160681) ，均購于中生北控生物科技股份有限公司; FIB試劑盒(批號：1321071)，上海太陽生物技術(shù)有限公司。

2 實驗方法

2.1 分組與訓(xùn)練方法

12只大鼠隨機分為兩組，即正常組和跑步實驗組。正常組大鼠自由進食進水，正常飼養(yǎng)。跑步實驗組適應(yīng)性訓(xùn)練一周，令跑步實驗組大鼠的跑步速度可以達到30m/min。正式實驗每天以坡度0， 適應(yīng)性逐漸加速至30m/min跑步180min，同時開啟電刺激并伴有機械刺激，中間休息5min[3][4][5][6][7]。給予正常食量的1/3,自由飲水。于第20天訓(xùn)練后禁食不禁水12h，次日以烏拉坦 1 g·kg- 1麻醉，固定，取血進行血液流變學(xué)和生化等相關(guān)指標測定。

2.2 測定指標及方法

大鼠的體重測定 訓(xùn)練前、適應(yīng)性訓(xùn)練結(jié)束及最后1天分別測定體重一次。

全血粘度測定 取肝素鈉抗凝血1ml，用全自動血液流變儀測定全血粘度。

生化指標測定 取檸檬酸鈉抗凝血1ml，3000r/min離心10min，吸取上層血漿400ul，用全自動生化分析儀測定總膽固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。

纖維蛋白原測定 取檸檬酸鈉抗凝血1.5ml,3000r/min離心10min,吸取上層血漿,用全自動血凝儀測定。

血小板最大聚集率測定 取檸檬酸鈉抗凝血1.5ml, 1000r/min離心10min,制備富含血小板血漿(PRP),剩余部分3000r/min離心15min,制備乏血小板血漿(PPP),以ADP為誘導(dǎo)劑,測定1min最大聚集率。

2.3 統(tǒng)計處理

3 結(jié)果

3.1 訓(xùn)練前后大鼠體重的變化

與正常組比較，訓(xùn)練前兩組大鼠體重無明顯的差異性，訓(xùn)練后，跑步組大鼠體重明顯降低(p<0.01)，見表1。

表1 跑步組和正常大鼠的體重比較

注：與正常組比較*p<0.05，**p<0.01(下同)

3.2 全血粘度

與正常組比較，跑步組全血粘度無顯著性差異(p<0.05)。但是由表2可見，跑步組低切變率明顯低于正常組，中切變率和高切變率高于正常組，但是差別不大，見表2。

表2 跑步對正常大鼠全血粘度(mPa.s)的影響

3.3 生化指標

與正常組比較，跑步組總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白均顯著降低(p<0.05)，見表3。

表3 跑步對正常大鼠CHO、TG、HDL-C、LDL-C的影響

表4 跑步對正常大鼠Fib、PAg的影響

3.4 纖維蛋白原和血小板聚集

由表4可見，跑步組和正常組比較，纖維蛋白原(FIB)含量顯著降低(p<0.05)，血小板最大聚集率(PAGm)明顯下降。

4 討論

全血粘度是宏觀上反應(yīng)血液流變學(xué)的重要參數(shù)，通過不同的切變率表示血液流動的阻力大小[8]。全血粘度增高在臨床上客觀引起中風，心絞痛，急性心肌梗塞，高脂血癥，血栓閉塞性脈管炎等疾病。CHO、TG、HDL-C和LDL-C是檢測血脂的重要指標。其中，HDL-C、LDL-C是一種載脂蛋白，血漿中的膽固醇、甘油三酯具有疏水性，通過與載脂蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)運。HDL-C被稱為“血管清道夫”，是冠心病的保護因子。LDL-C是血漿中膽固醇含量最高的脂蛋白，載有血漿70%的膽固醇，所以，LDL-C的多少直接影響血液中膽固醇的含量[1]。血栓的形成與血小板活化和纖溶系統(tǒng)異常密切相關(guān)。正常情況下血小板不表達，受到外界刺激時被活化，從而發(fā)生粘附、聚集、釋放、吸附。ADP是引起血小板聚集最重要的物質(zhì)，所以可以通過測定ADP 誘導(dǎo)血小板最大聚集率來宏觀判斷血小板的凝血作用。纖維蛋白參與血栓形成的最后一步。Fib是纖維蛋白的前體物質(zhì)，在肝臟中合成游離于血漿的蛋白質(zhì)。所以 Fib在血栓和動脈粥樣硬化形成中起到重要作用[2]。本實驗研究結(jié)果顯示持續(xù)性高耗氧量運動可以顯著降低正常大鼠體重，對全血粘度和血小板聚集率的影響不大，但是低切率和血小板聚集率有降低的趨勢。說明持續(xù)性高耗氧量運動可能改變的是在紅細胞聚集的情況下的紅細胞變形能力和改變血小板聚集程度從而影響血液粘度。 CHO、TG、LDL-C和Fib顯著性降低，HDL-C顯著性升高。CHO、TG和LDL-C顯著性降低而HDL-C增高，提示持續(xù)性高耗氧量運動對大鼠血脂有明顯的改善作用，同時降低心血管疾病的發(fā)病風險。有臨床研究顯示，fib與總膽固醇濃度呈正相關(guān)。Fib的顯著性降低，提示此方法可以作為高脂血癥患者的輔助治療，且效果顯著。此方法對于血細胞和血小板的作用機制尚待進一步研究，從而為高脂血癥患者及亞健康人群提供運動依據(jù)。