Caspase-8、PCNA和nm23與子宮內(nèi)膜異位癥的相關(guān)性研究*

黃 建 郭金強(qiáng) 周偉新 馮春宇 凌學(xué)民

廣東省深圳市龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院 1 婦科 2 診斷科 3 病理科 518012

子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis,EMs)是指具有生長能力及功能的子宮內(nèi)膜組織(腺體或間質(zhì))出現(xiàn)在子宮腔被覆內(nèi)膜及宮體肌層以外的其他部位所致的疾病[1]。多發(fā)生于育齡女性，臨床表現(xiàn)主要為疼痛、不孕、盆腔粘連等，嚴(yán)重影響女性的身心健康。由于目前子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機(jī)制尚不明確，本文從分子水平研究Caspase-8、PCNA和nm23在子宮內(nèi)膜異位癥患者及正常子宮內(nèi)膜組織的表達(dá)情況，為子宮內(nèi)膜異位癥的早期診斷和治療提供理論依據(jù)和臨床參考指標(biāo)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2012年5月—2017年12月于我院婦科就診的患者為觀察對(duì)象，分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組為行開腹或者腹腔鏡手術(shù)進(jìn)行治療的子宮內(nèi)膜異位癥患者40例，對(duì)照組為同期因不孕癥(排除器質(zhì)性疾病及子宮內(nèi)膜異位癥)行子宮內(nèi)膜活檢正常子宮內(nèi)膜患者33例。所有病例都經(jīng)過了病理學(xué)診斷確診，排除子宮內(nèi)膜異位癥以外的內(nèi)膜病例。所有入組的患者月經(jīng)周期具有規(guī)律性，并且手術(shù)治療前3個(gè)月內(nèi)均未接受過激素治療，均未處于妊娠或哺乳狀態(tài)。排除其他需要依賴激素治療的疾病，如功能性子宮出血等。實(shí)驗(yàn)組平均年齡(33.38±6.02)歲，平均體重(52.48±6.28)kg；對(duì)照組平均年齡(32.94±5.59)歲，平均體重為(50.70±5.03)kg，所有患者在年齡、體重方面差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。所有入組患者均簽署知情同意書，且方案通過本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 檢測(cè)方法 所有標(biāo)本均用甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，分別用常規(guī)HE染色，免疫組織化學(xué)S-P方法檢測(cè)Caspase-8、PCNA和nm23蛋白的表達(dá)。陽性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：光鏡下每張切片選取5個(gè)有代表性高倍鏡視野，計(jì)數(shù)1 000個(gè)細(xì)胞，計(jì)算陽性細(xì)胞百分率。陰性：無陽性染色細(xì)胞或者陽性染色細(xì)胞數(shù)<5%；弱陽性，5%≤陽性染色細(xì)胞<25%；陽性：25%≤陽性染色細(xì)胞數(shù)≤50%；強(qiáng)陽性：陽性染色細(xì)胞>50%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)用等級(jí)資料的秩和檢驗(yàn)對(duì)相關(guān)組間進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)；采用Spearman相關(guān)分析法對(duì)Caspase-8、PCNA和nm23與子宮內(nèi)膜異位癥表達(dá)的關(guān)系進(jìn)行相關(guān)性分析。P<0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)組的Caspase-8表達(dá)以陰性和弱陽性為主，陰性率為60.00%；PCNA的表達(dá)以弱陽性及以上為主，總陽性率(弱陽性+陽性+強(qiáng)陽性)為90.00%；nm23的表達(dá)則以陰性和陽性為主，陰性率和陽性率均為32.50%，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的Caspase-8、PCNA和nm23中的表達(dá)在各自等級(jí)具有明顯差異，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。經(jīng)Spearman相關(guān)分析，子宮內(nèi)膜異位癥組患者Caspase-8和PCNA的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.730，P=0.000)，Caspase-8和nm23表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.798，P=0.000)。詳見表1。

3 討論

子宮內(nèi)膜異位癥是困擾女性健康的問題之一，給女性帶來巨大的身心壓力甚至影響生育[3]。據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，子宮內(nèi)膜異位癥在育齡婦女的發(fā)病率達(dá)6%～10%。然而子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病原因與發(fā)病機(jī)制尚不明確，存在多種假說，如子宮內(nèi)膜種植學(xué)說、遺傳學(xué)說、免疫學(xué)說機(jī)制等。近年來有不少學(xué)者從分子水平對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病原因及機(jī)制進(jìn)行了研究[4-6]，以尋求病因，希望根源入手為該病的診斷治療提供方法。

本文通過對(duì)以行開腹或者腹腔鏡手術(shù)治療的子宮內(nèi)膜異位癥患者和同期因不孕癥(排除器質(zhì)性疾病及子宮內(nèi)膜異位癥)行子宮內(nèi)膜活檢正常子宮內(nèi)膜患者的Caspase-8、PCNA和nm23蛋白表達(dá)水平進(jìn)行分析后，認(rèn)為兩組的Caspase-8、PCNA和nm23蛋白表達(dá)在各自等級(jí)具有明顯差異，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，并且經(jīng)Spearman相關(guān)分析，子宮內(nèi)膜異位癥患者Caspase-8和PCNA、nm23的表達(dá)水平均具有相關(guān)性(P<0.05)，其中Caspase-8與PCNA為負(fù)相關(guān)關(guān)系，與nm23為正相關(guān)關(guān)系。Caspase家族是一組蛋白酶，能夠介導(dǎo)即將死亡細(xì)胞的蛋白水解，對(duì)于細(xì)胞凋亡過程中的啟動(dòng)、完成中具有非常重要的作用，Caspase-8是關(guān)鍵的啟動(dòng)子。在本文中Caspase-8在實(shí)驗(yàn)組的陰性率高于對(duì)照組，可能是子宮內(nèi)膜細(xì)胞Caspase-8低表達(dá)，能夠逃脫免疫監(jiān)視、清除，抵制細(xì)胞凋亡，從而可以異位黏附種植[2]。PCNA參與DNA多聚酶活性作用，和細(xì)胞增長具有密切關(guān)系，在子宮內(nèi)膜異位癥中保持著內(nèi)膜細(xì)胞增殖的能力[4]。

表1 Caspase-8、PCNA和nm23蛋白在兩組中的表達(dá)

綜上所述，Caspase-8、PCNA和nm23蛋白表達(dá)水平在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的表達(dá)具有顯著差異性，可能與子宮內(nèi)膜異位癥分子學(xué)機(jī)制有關(guān)，為子宮內(nèi)膜異位癥在分子水平進(jìn)一步研究提供了理論依據(jù)。