不同AM菌劑配比對(duì)萬壽菊幼苗生長(zhǎng)特性的影響

賀丹丹 周建

摘要 ? ?為了解AM菌劑對(duì)萬壽菊幼苗生長(zhǎng)的調(diào)控效果，在育苗基質(zhì)中分別加入3種不同配比的AM菌劑配制成菌肥基質(zhì)，研究不同菌肥基質(zhì)對(duì)萬壽菊栽培苗生長(zhǎng)性狀、始花期及葉綠素含量等的影響。結(jié)果表明，添加AM菌劑后，萬壽菊幼苗的苗高、地徑、鮮重、干重、葉綠素含量等指標(biāo)得到一定提高。幼套球囊霉（Glomus etunicatum）和摩西球囊霉（Glomus mossea）混施處理效果最好，其幼苗鮮重與干重的冠根比降低，根系發(fā)育良好，始花期提前，在生產(chǎn)中可作為有效的萬壽菊育苗菌劑配方。

關(guān)鍵詞 ? ?萬壽菊;AM菌劑;幼苗;生長(zhǎng)特性

中圖分類號(hào) ? ?S681.9 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 ? ?A

文章編號(hào) ? 1007-5739（2019）23-0124-02 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）

Abstract ? ?In order to know the regulation of arbuscular mycorrhizal（AM）fungi on growth characteristics of Tagetes erecta seedlings，3 ratios of AM fungi were added into the materials to make up fungal fertilizer matrix，the effects of fungal fertilizer matrix on growth status，first flowering-date and chlorophyll content of Tagetes erecta were reseached.The results showed that after the addition of AM fungi，the seedling height，stem diameter，fresh weight，dry weight and chlorophyll content increased to a certain extend.The mixed utilization of Glomus etunicatum and Glomus mossea had the best regulation effect on Tagetes erecta seedlings among the all treatments，the cord-root ratio of the fresh and dry weight of the seedlings decreased，the roots developed well and the first flowering-date advanced，so mixture of this two fungi could be used as an effective formulation in the production of Tagetes erecta seedlings.

Key words ? ?Tagetes erecta;AM fungi;seedling;growth characteristic

隨著經(jīng)濟(jì)與工業(yè)的發(fā)展，自然生態(tài)環(huán)境遭受到不同程度的污染和破壞，土壤狀況不斷惡化，土壤有機(jī)質(zhì)含量和土壤肥力逐步降低，直接影響了植物的育苗質(zhì)量。但是，土壤中部分微生物可以活化土壤、提高土壤肥力、改善土壤環(huán)境及提高植物體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)元素的吸收能力與水平[1]，進(jìn)而有利于植物生長(zhǎng)發(fā)育。這些微生物從土壤中分離和選育后，經(jīng)過培養(yǎng)、繁殖后制成生物菌劑，并應(yīng)用到生產(chǎn)中，明顯提高了園藝苗木的產(chǎn)量與質(zhì)量[2]。微生物菌肥的使用在國(guó)內(nèi)外已經(jīng)有了廣泛的應(yīng)用研究，其中我國(guó)菌肥的應(yīng)用研究始于20世紀(jì)中期，已有逾60年的發(fā)展歷程。目前，我國(guó)微生物肥料發(fā)展產(chǎn)業(yè)已初具規(guī)模，并躋身世界先進(jìn)行列。由于微生物肥料和基質(zhì)育苗產(chǎn)業(yè)的長(zhǎng)足發(fā)展，明顯提高了我國(guó)育苗質(zhì)量與效率[3]，縮短了與西方園藝發(fā)達(dá)國(guó)家之間的差距。

叢枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi，簡(jiǎn)稱AM菌）是土壤中最重要的一種有益微生物，是自然界里廣泛存在的真菌，具有較強(qiáng)的解磷能力[4]。AM菌能與絕大部分高等植物根系形成共生體系[5]，進(jìn)而改善植物體營(yíng)養(yǎng)，提高植物抗逆性[5-6]，促進(jìn)植物的生長(zhǎng)。Allen[7]研究發(fā)現(xiàn)，AM菌通過菌絲能加速寄主的水分吸收和運(yùn)輸過程，從而提高共生植株對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性與抗逆能力。

萬壽菊（Tagetes erecta L.）又名臭芙蓉，為菊科萬壽菊屬一年生草本植物，花大、開花早、花期長(zhǎng)、花型緊湊，觀賞價(jià)值高[8]，常用來點(diǎn)綴花壇、廣場(chǎng)，布置花叢、花境和培植花籬，可作盆栽，也可作為背景材料或鮮切花[9]。國(guó)際上對(duì)萬壽菊的需求量不斷增加，同時(shí)對(duì)新品種更新、花徑尺寸、觀賞價(jià)值及栽培周期提出了更高的要求[9]。目前，萬壽菊大部分采用輕型基質(zhì)育苗，而國(guó)產(chǎn)苗質(zhì)量與進(jìn)口苗之間存在一定距離，例如生長(zhǎng)發(fā)育、觀賞性狀等[10]。因此，優(yōu)化萬壽菊的基質(zhì)育苗條件，提高幼苗質(zhì)量有重要的實(shí)踐價(jià)值。

本試驗(yàn)以萬壽菊為研究材料，通過在輕型基質(zhì)中添加不同配比的AM菌劑，分析萬壽菊幼苗生長(zhǎng)、始花期和葉綠素含量等特性，篩選出效果最優(yōu)的菌劑配方，以期為進(jìn)一步優(yōu)化萬壽菊的育苗技術(shù)體系，從而培育出高質(zhì)量的萬壽菊幼苗提供參考。

1 ? ?材料與方法

1.1 ? ?試驗(yàn)材料

供試驗(yàn)的植物材料為皇室萬壽菊。AM菌劑選用幼套球囊霉（Glomus etunicatum，HB07A）、摩西球囊霉（Glomus mossea，NM03D），菌劑均購(gòu)于北京市農(nóng)林科學(xué)院。

1.2 ? ?試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理，即在混合基質(zhì)中添加不同配比AM菌劑：40 g/kg幼套球囊霉（A）、40 g/kg摩西球囊霉（B）、40 g/kg幼套球囊霉+40 g/kg摩西球囊霉（C），以進(jìn)口品氏基質(zhì)作為正對(duì)照（CK1），以不添加菌劑的混合基質(zhì)為負(fù)對(duì)照（CK2）。每個(gè)處理6盆，每盆150 g基質(zhì)，每盆基質(zhì)播種5粒。育苗基質(zhì)是由花生殼、草炭土、蛭石按照體積體比1∶1∶1混合而成。

1.3 ? ?試驗(yàn)方法

將萬壽菊種子在40 ℃溫水中浸泡3～4 h后播種。出苗后，在溫室中正常養(yǎng)護(hù)管理，現(xiàn)蕾期開始測(cè)定幼苗生長(zhǎng)性狀、葉綠素含量等指標(biāo)，并精確測(cè)定始花期。在育苗過程中，注意觀察萬壽菊植株的物候期，將每個(gè)處理中第一朵花開的時(shí)間定為該處理萬壽菊的始花期。根冠比直接用地上部分質(zhì)量平均值與地上部分質(zhì)量平均值的比值。

1.4 ? ?指標(biāo)測(cè)定

1.4.1 ? ?生長(zhǎng)指標(biāo)。測(cè)定時(shí)，從每個(gè)處理選擇有代表性萬壽菊植株，用千分之一游標(biāo)卡尺測(cè)出地徑粗度，用直尺測(cè)定株高。取出樣品植株，在清水下慢慢沖洗根系基質(zhì)，減少根系損傷，保持植株完整;沖洗完畢后，用濾紙吸出葉片表面多余的水分，用千分之一電子天平測(cè)量植株鮮重;隨后將植株放至烘箱內(nèi)（80 ℃），8 h烘干至恒重，測(cè)定植株干重。重復(fù)3次。

1.4.2 ? ?葉綠素含量。采用取丙酮、乙醇混合提取法測(cè)定葉綠素含量[11]，并有略微改動(dòng)。取1～2片成熟度一致的葉片洗凈晾干，剪成2 mm的碎條，在室溫下用丙酮、95%乙醇（2∶1）混合液浸提葉綠素。每支試管中加入浸提液10 mL，將葉片置入浸提液，于黑暗中浸提12 h，直至葉片變白。將浸提液定容至25 mL，分別在645 nm和663 nm處測(cè)定吸光值，以丙酮與乙醇（2∶1）混合液為對(duì)照。葉綠素a、葉綠素b及葉綠素總含量計(jì)算公式如下：

葉綠素a含量=（12.7×A663-2.697×A645）×V/（1 000 W）;

葉綠素b含量=（22.77×A645-4.687×A663）×V/（1 000 W）;

葉綠素總含量=葉綠素a含量+葉綠素b含量。

公式中，V為提取液體積（mL），W為所取葉片質(zhì)量（g）。

1.5 ? ?數(shù)據(jù)處理

在本試驗(yàn)中，用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，利用SPSS 21.0進(jìn)行方差分析，并在α=0.05水平上進(jìn)行鄧肯多重比較。

2 ? ?結(jié)果與分析

2.1 ? ?不同菌劑配比處理的萬壽菊生長(zhǎng)性狀

由表1可知，不同配比菌劑處理對(duì)萬壽菊幼苗生長(zhǎng)具有一定促進(jìn)作用。就地徑而言，處理C（摩西球囊霉+幼套球囊霉混合）效果最好，而處理B（單施摩西球囊霉）效果次之，處理A（單施幼套球囊霉）效果最差，前兩者植株地徑分別高于CK2（負(fù)對(duì)照）6.79%、4.22%。然而，處理B、處理A對(duì)地徑的促進(jìn)效果略差于處理CK1（進(jìn)口品氏基質(zhì)），其幼苗地徑分別比處理CK1幼苗低2.84%、9.61%。

與地徑表現(xiàn)相似，處理C對(duì)萬壽菊的調(diào)節(jié)效果最佳，處理B效果次之，其植株苗高分別高于CK2 11.40%、8.95%;二者對(duì)苗高的促進(jìn)效果略差于CK1，其苗高分別比CK1幼苗苗高低5.67%、3.55%。而處理A對(duì)萬壽菊苗高的調(diào)節(jié)效果最差，僅高于CK2 1.45%。

對(duì)萬壽菊生物量累計(jì)而言，菌劑配方對(duì)鮮重、干重的影響比較相似。處理C對(duì)萬壽菊鮮重、干重的調(diào)控效果最顯著，分別高于CK2 27.47%、35.09%，而達(dá)到CK1的95.30%、96.25%。而處理A對(duì)萬壽菊生物量累計(jì)的效果最差，其幼苗干重僅高于CK2 1.75%，而鮮重則低于CK2 3.95%。

質(zhì)量反映了生物量積累情況，而冠根比則體現(xiàn)了植株生物量的分配，反映出植株或幼苗的質(zhì)量[12]。由表1可知，在基質(zhì)中添加菌劑對(duì)植株生物量分配形成了一定的影響。在本試驗(yàn)中，CK1幼苗的鮮重、干重冠根比值最低，生物量分布偏向根部，根系發(fā)育良好。在所有菌劑配比中，處理C植株的鮮重冠根比值最低，比CK1高19.51%;處理A的植株干重的冠根比值最低，比CK1高9.33%;處理B植株的冠根比值最大，其中鮮重比值比CK2高19.82%，而干重比值與CK2接近。

2.2 ? ?不同菌劑配比處理的萬壽菊葉片葉綠素含量

由表2可知，添加菌劑對(duì)萬壽菊葉綠素含量產(chǎn)生一定影響，添加混合菌劑的效果最為顯著，優(yōu)于單施菌劑處理。處理C（幼套球囊霉+摩西球囊霉）的萬壽菊葉綠素a、葉綠素b及葉綠素總量分別顯著比CK2（負(fù)對(duì)照）高34.78%、37.50%、35.90%（P<0.05）;處理C與CK1（品氏基質(zhì)）葉綠素含量相近，其中處理C的葉綠素a、葉綠素總量分別比CK1高21.57%、3.92%，而葉綠素b含量則比CK1低13.73%。

在單施菌劑處理中，處理B（摩西球囊霉）對(duì)萬壽菊葉綠素含量的調(diào)控效果要優(yōu)于處理A（幼套球囊霉）（表2）。處理B的植株葉綠素a、葉綠素總量比CK2高36.96%、20.51%，而葉綠素b含量比CK2低3.13%，但差異不顯著（P>0.05）;處理B葉綠素總量比CK1低7.84%，差異不顯著（P>0.05）。處理A植株的葉綠素含量較低，其葉綠素a、葉綠素b及葉綠素總量分別比CK2低10.87%、25.00%、16.67%

2.3 ? ?不同菌劑配比處理的萬壽菊始花期

添加菌劑對(duì)萬壽菊的始花期產(chǎn)生了一定的影響，其中處理B（單施摩西球囊霉）對(duì)萬壽菊始花期促進(jìn)效果最明顯，其植株于2月28日開花，始花期比品氏基質(zhì)苗、不添加菌劑的混合基質(zhì)苗提前了3 d;處理C（摩西球囊霉+幼套球囊霉）對(duì)萬壽菊始花期的調(diào)節(jié)效果次之，植株于3月1日開花，始花期比在品氏基質(zhì)苗和不添加菌劑的混合基質(zhì)苗提前了2 d;處理A（單施幼套球囊霉）對(duì)萬壽菊始花期沒有影響，其與CK1（品氏基質(zhì)苗）、CK2（不添加菌劑的混合基質(zhì)苗）均于3月3日開花。

3 ? ?結(jié)論與討論

AM菌能與絕大多數(shù)植物形成共生體系[5]，擴(kuò)大植株根系的吸收面積，更有利于植物養(yǎng)分的吸收，促進(jìn)植物生長(zhǎng)[13]。在本試驗(yàn)中，摩西球囊霉和幼套球囊霉混施顯著促進(jìn)萬壽菊基質(zhì)苗生長(zhǎng)，尤其是生物量積累，這與番茄[14]、垂穗披堿草[15]的表現(xiàn)相類似;且其育苗效果優(yōu)于菌劑單施處理，與進(jìn)口品氏基質(zhì)相近。此外，在萬壽菊生物累計(jì)過程中，不同菌劑混施處理植株的冠根比較低，表明植株生物量分配偏向于地下部分，可能是由真菌間與植株親和程度不同造成的[16]，進(jìn)而促進(jìn)地下根系生的發(fā)展，有利于形成優(yōu)質(zhì)的幼苗。因此，摩西球囊霉和幼套球囊霉混施可以作為萬壽菊基質(zhì)育苗的有效菌劑配方。

在本試驗(yàn)中，施用AM菌劑，尤其是菌劑混施與摩西球囊霉單施對(duì)萬壽菊葉綠素調(diào)控效果較好，可顯著提高葉綠素含量，這與濱梅[17]、海濱錦葵[18]表現(xiàn)一致，可進(jìn)一步增強(qiáng)植株光合系統(tǒng)功能[14-15，17]，促進(jìn)光合有機(jī)質(zhì)累積，進(jìn)而促進(jìn)萬壽菊植株的生長(zhǎng)。此外，AM菌劑可增強(qiáng)土壤磷酸酶活性[19]，其解磷效果較明顯[4]，并通過共體系加強(qiáng)對(duì)基質(zhì)或土壤中磷元素的吸收[20]。在本試驗(yàn)中，單獨(dú)施用摩西球囊霉以及摩西球囊霉和幼套球囊霉混施均明顯促進(jìn)了萬壽菊植株的發(fā)育，其始花期分別比不添加菌劑的混合基質(zhì)苗、進(jìn)口品氏基質(zhì)苗提前3、2 d，表現(xiàn)出了較好的育苗效果。

4 ? ?參考文獻(xiàn)

[1] 耿春秋，李培軍，張海榮，等.不同從枝菌根真菌對(duì)萬壽菊生長(zhǎng)及柴油降解率的影響[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2003（10）：14-17.

[2] 夏覓真，馬忠友，曹媛媛，等.棉花根際固氮、解磷菌及解鉀菌的相互作用[J].中國(guó)微生態(tài)雜志，2010，22（2）：102-105.

[3] 周建，郝峰鴿，李保印.工廠化育苗基質(zhì)的研究進(jìn)展[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016（6）：224-226.

[4] 彭靜靜，張高遠(yuǎn).解磷菌的研究進(jìn)展與展望[J].泰山學(xué)院學(xué)報(bào)，2016，38（6）：95-99.

[5] 賀學(xué)禮，高露，趙麗莉，等.水分脅迫下叢生菌根AM真菌對(duì)民勤絹蒿生長(zhǎng)與抗旱性的影響[J].生態(tài)學(xué)報(bào)，2011，31（4）：1029-1037.

[6] 馮希環(huán)，劉維信，李敏.鹽脅迫下叢枝菌根真菌對(duì)生菜生長(zhǎng)和生理特性的影響[J].青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2016，33（4）：242-246.

[7] ALLEN M F.Influence of vesicular-arbuscular mycorrhizae on water mo-vement through Bouteloua gracilis（H.B.K.）Lag ex Steud[J].New Phytol，1982，91（2）：191-196.

[8] 張繼沖，續(xù)九如，李福榮，等.萬壽菊的研究進(jìn)展[J].西南園藝摘，2005（9）：17-20.

[9] VASUDEVAN P，KASHYAP S，SHARMA S.Tagetes：a multipurpose plant[J].Bioresource Technology，1997，62（1/2）：29-35.

[10] 周建，楊立峰.不同配比基質(zhì)的特性及其對(duì)萬壽菊的影響[J].河南科技學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2016，44（1）：5-9.

[11] 徐芬芬，葉利民，徐衛(wèi)紅.小白菜葉綠素含量的測(cè)定方法比較[J].北方園藝，2010（23）：32-34.

[12] 李曉玲.不同基質(zhì)處理的育苗塊對(duì)黃瓜幼苗生長(zhǎng)發(fā)育及其質(zhì)量的影響[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37（7）：34-36.

[13] 江龍，李竹枚，黃建國(guó).AM真菌對(duì)煙苗生長(zhǎng)及某些生理指標(biāo)的影響[J].植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，2008，15（1）：156-160.

[14] 劉歡，姚拓，李建宏，等.叢枝菌根真菌對(duì)番茄生長(zhǎng)的影[J].甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，52（4）：78-51.

[15] 王茜，王強(qiáng)，王曉娟，等.不同叢枝菌根真菌對(duì)青藏高原高寒草原優(yōu)良牧草垂穗披堿草生長(zhǎng)的促生效應(yīng)[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，29（6）：840-846.

[16] 孫超，賀超興，于賢昌，等.摩西球囊霉對(duì)蘆筍幼苗生長(zhǎng)和礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)吸收的影響[J].中國(guó)蔬菜，2012（6）：41-47.

[17] ZAI X M，ZHU S N，QIN P，et al.Effect of Glomus mosseae on chloroph-yll content，chlorophyll fluorescence parameters，and chloroplast ultras-tructure of beach plum（Prunus maritima）under NaCl stress[J].Photosy-nthetica，2012，50（3）：323-328.

[18] 秦超琦，吳向華，鄭琨，等.解磷菌劑對(duì)海濱鹽土有效磷含量及耐鹽油料植物生長(zhǎng)的影響[J].生態(tài)學(xué)雜志，2009，28（9）：1835-1841.

[19] 邢禮軍，王幼珊，張美慶.VA真菌與解磷細(xì)菌雙接種促進(jìn)植物對(duì)磷素吸收作用[J].北京農(nóng)業(yè)科學(xué)，1998，16（3）：33-34.

[20] 簡(jiǎn)宜裕，吳繼光.溶磷菌于土壤中之存活對(duì)土壤有效磷影響的研究[J].土壤肥料報(bào)告，1995，8（3）：313-319.