香椿不同部位藥理作用研究

趙天會

香椿(Toona sinensis),別名椿樹, 屬于特有珍貴速生樹種，具有很高的經(jīng)濟(jì)價值，包括食用價值、藥用價值等[1]，香椿的葉、果實、皮、芽、根均可作為中藥材[2]，現(xiàn)代藥理學(xué)表明[3]，香椿葉具有抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、降血糖、抗癌、降血壓、抗氧化、抗凝血、增強(qiáng)免疫等作用，本文分別對香椿不同藥用部位的提取液進(jìn)行了抗炎、鎮(zhèn)痛研究。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥品與實驗動物 香椿葉、子、皮干燥產(chǎn)物購置于藥店，產(chǎn)地中國安徽亳州，為秋季產(chǎn)物。鹽酸地塞米松(批號20170442)、二甲苯、70%乙醇、阿司匹林(批號20161028)、冰醋酸、蒸餾水；雙人雙面操作臺、濾紙片、紗布、6 mm打孔器、提取瓶、冷凝管、提取管、500 ml燒杯，量筒、50 ml容量瓶。

小鼠，體重20±2 g，雌雄混搭，購自吉林大學(xué)實驗動物中心。

1.1.2 器材 電子天平(AL204-IC，美特勒-托利)；八兩裝中藥粉碎機(jī)(LG08A，瑞安市百姓藥機(jī)械廠)；循環(huán)水式多用真空泵(SHB-III,鄭州長城科工貿(mào)有限公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(R1001-VN,州長城科工貿(mào)有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 香椿不同藥用部位有效成分的提取 (1)香椿葉有效成分的提?。合愦蝗~預(yù)處理：把購買得到的香椿葉檢出其中腐爛發(fā)黃的葉片，用清水沖洗晾干。采用醇提法提取有效成分：將預(yù)處理成功后的香椿葉精密取200 g，用剪刀剪碎，加入索氏提取器中，加入濃度為70%的乙醇600 mL，回流提取3次，采用循環(huán)水式多用真空泵抽濾，收集濾液。減壓蒸餾：用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)香椿葉提取液中的乙醇，設(shè)置水的溫度為40 ℃，待乙醇不再蒸發(fā)時，停止蒸發(fā)，倒出旋轉(zhuǎn)瓶內(nèi)剩余的濃縮香椿葉提取液，冷藏備用。(2)香椿子、皮有效成分的提?。禾崛》椒▍⒖?.2.1.1。

1.2.2 抗炎作用試驗 (1)動物分組：小鼠40只(20±2.0 g)，雌雄混搭隨機(jī)分成5組，自由采食飲水，分別為空白對照組，陽性對照組(注射用地塞米松)，香椿葉實驗組，香椿子實驗組，香椿皮實驗組，每組8只。(2)二甲苯致小鼠耳廓腫脹法：采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法[4-5]，將分組后的小鼠自由采食飲水適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d ，空白對照組灌胃生理鹽水0.2 mL/10 g，實驗組分別灌胃香椿葉，香椿子，香椿皮的提取液，0.2 mL/10 g，陽性對照組腹腔注射地塞米松 1 mL。每日早晚灌胃2次，連續(xù)灌胃3 d，末次給藥30 min后，用微量進(jìn)樣器抽取二甲苯0.03 mL，在小鼠右耳前后兩面分別涂抹，每面各0.015 mL，左耳不做任何處理。(3)統(tǒng)計方法：1 h后觀察小鼠右耳腫脹變化，脫臼處死，延耳廓基線剪下兩耳，用6 mm直徑打孔器在左右耳對稱部位打下圓耳片，稱量各鼠耳，并記錄質(zhì)量，按照公式計算香椿葉、子、皮提取物實驗組和地塞米松藥物對照組腫脹度和腫脹抑制率[左右耳片重量差值為腫脹度，腫脹率=(右耳重量-左耳重量)/左耳質(zhì)量*100%，腫脹抑制率=(空白對照組腫脹度-試驗組腫脹度)/空白對照組腫脹度]。

1.2.3 香椿不同藥用部位提取物鎮(zhèn)痛作用試驗 動物分組：分組方法同1.2.2.1。(2)冰醋酸致小鼠扭體試驗法：采用冰醋酸致小鼠扭體試驗法[6]，將分組后的小鼠自由采食飲水適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d之后,空白對照組灌胃生理鹽水0.2 mL/10 g，實驗組灌胃香椿葉，香椿子，香椿皮的提取液，0.2 mL/10 g，藥物對照組腹腔注射1 mL阿司匹林，每日2次，連續(xù)3 d，末次給藥30 min后，各組腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.1 mL/10 g。(3)統(tǒng)計方法：灌胃結(jié)束后，記錄各小鼠第一次出現(xiàn)扭體反應(yīng)的時間及30 min后，記錄各組小鼠在15 min內(nèi)的扭體次數(shù)，得到各組小鼠的平均扭體次數(shù)，按照公式計算實驗組和對照組的鎮(zhèn)痛抑制率。(鎮(zhèn)痛抑制率=(對照組扭體次數(shù) - 給藥組扭體次數(shù))/對照組扭體次數(shù))。

2 結(jié)果與分析

2.1香椿不同藥用部位提取物對二甲苯所致小鼠耳腫脹模型的影響

表1 不同實驗組對小鼠耳廓腫脹度的影響

注：*表示與空白對照組相比差異顯著(P<0.05)，#表示與陽性對照組相比

差異顯著(P<0.05)

香椿不同藥用部位提取物對二甲苯所致小鼠耳腫脹模型的影響結(jié)果見表1。從表1中看出，藥物對照組、香椿葉實驗組、香椿子實驗組、香椿皮實驗組腫脹度抑制率為別為36.41%，35.17%，34.94%，25.49%，香椿葉實驗組平均腫脹度為2.30±0.81，顯著低于空白對照組，與藥物對照組相比差異不顯著；香椿子實驗組平均腫脹度為2.31±0.64，顯著低于空白對照組，與藥物對照組相比差異不顯著；香椿皮實驗組平均腫脹度為2.66±0.86，顯著低于空白對照組，顯著高于藥物對照組；香椿子實驗組，香椿皮實驗組，香椿葉實驗組與空白對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。由此可見，香椿不同部位對小鼠耳廓腫脹度和腫脹率均具有一定的作用，香椿葉與香椿子的抗炎作用明顯高于香椿皮的抗炎作用，三者的抗炎作用均弱于地塞米松的抗炎效果。

2.2香椿不同藥用部位提取物對冰醋酸所致小鼠疼痛的影響

香椿不同藥用部位提取物對冰醋酸所致小鼠疼痛的影響結(jié)果見表2。

表2 不同試驗組對小鼠扭體的影響

注：*表示與空白對照組相比差異顯著(P<0.05)，#表示與陽性對照組相比差異顯著(P<0.05)

從表2中看出，香椿葉實驗組、香椿子實驗組、香椿皮實驗組、藥物對照組鎮(zhèn)痛率為別為53.83%，21.13%，51.94%，57.82%，香椿葉實驗組第一次扭體反應(yīng)出現(xiàn)的時間為6.5±2.8；在15 min內(nèi)的扭體次數(shù)為14.70±10.17，與空白對照組相比差異顯著；與藥物對照組相比差異不顯著；香椿子實驗組第一次扭體反應(yīng)出現(xiàn)的時間為5.8±2.3；在15 min內(nèi)的扭體次數(shù)為27.11±14.11，與空白對照組相比差異不顯著，與藥物對照組相比差異顯著(P<0.05)；香椿皮實驗組第一次扭體反應(yīng)出現(xiàn)的時間為6.7±2.1；在15 min內(nèi)的扭體次數(shù)為15.30±11.96，與空白對照組相比差異顯著，與藥物對照組相比差異不顯著；香椿葉實驗組、香椿皮實驗組與空白對照組比較差異顯著(P<0.05)，香椿葉、香椿皮、香椿子實驗組進(jìn)行比較，第一次出現(xiàn)扭體反應(yīng)的分別是香椿子實驗組、香椿皮實驗組、香椿葉實驗組；從在15 min內(nèi)總的扭體次數(shù)來看，香椿子實驗組的扭體次數(shù)最多，與香椿皮實驗組、香椿葉實驗組相比差異顯著(P<0.05)。

3 討 論

3.1由試驗數(shù)據(jù)可得，香椿不同部位的抗炎作用順序為香椿葉、香椿子、香椿皮，但是香椿葉與香椿子的抗炎作用明顯高于香椿皮的抗炎作用，三者的抗炎作用均弱于地塞米松的抗炎效果，根據(jù)香椿葉、子、皮的

成分來看，抗炎作用可能與各部位中存在的黃酮化合物、萜類化合物有關(guān)[7]。

3.2香椿不同藥用部位提取物對冰醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的抑制作用來確定香椿不同藥用部位的鎮(zhèn)痛作用。以第一次出現(xiàn)扭體時間和在15 min總共扭體次數(shù)來評價香椿不同藥用部位提取物的鎮(zhèn)痛作用，結(jié)果得出：香椿葉與香椿皮的鎮(zhèn)痛效果高于香椿子的鎮(zhèn)痛效果，三者的鎮(zhèn)痛作用均弱于阿司匹林鎮(zhèn)痛作用，鎮(zhèn)痛作用可能與香椿不同藥用部位中存在的黃酮類化合物有關(guān)[8]。

3.3在試驗中驗證了香椿不同藥用部位的抗炎鎮(zhèn)痛作用；中藥的抗炎機(jī)制十分復(fù)雜，具有多途徑多環(huán)節(jié)的特點，在本次試驗中由于對不同藥用部位的提取物沒有進(jìn)行分離單獨測其抗炎鎮(zhèn)痛作用，不能確定是其中某個單體發(fā)揮抗炎鎮(zhèn)痛作用，同時香椿不同藥用部位抗炎鎮(zhèn)痛機(jī)制尚不明確，可能與清熱散血消腫等功效有關(guān)，尚待進(jìn)一步研究闡明，因此應(yīng)該加強(qiáng)多學(xué)科交叉研究，更深更全面的研究香椿抗炎鎮(zhèn)痛的作用機(jī)制。