西伯利亞蓼化學(xué)成分的研究（Ⅱ）

王洪玲，董芳妮，鐘國躍，梁 健

（江西中醫(yī)藥大學(xué)中藥資源與民族藥研究中心，江西 南昌 330004）

西伯利亞蓼Polygonum sibiricumLaxm.為蓼科蓼屬多年生草本植物，主要分布于西南、西北、東北、華北等地區(qū)，具有清胃腸積熱、瀉下功效［1-2］，但目前未見其化學(xué)成分和藥理作用報(bào)道。課題組前期發(fā)現(xiàn)，西伯利亞蓼70% 乙醇提取物具有降尿酸作用，并從90%乙醇部位中分離得到8 個化合物［3-4］。為了進(jìn)一步研究其化學(xué)成分，本實(shí)驗(yàn)從中分離得到9 個化合物，包括3 個黃酮類、3 個紫羅蘭類、6 個其他類，均為首次從該植物中分離得到。

1 材料

柱色譜硅膠（200～300 目）、薄層色譜硅膠GF254（煙臺江友有限公司）；反相C18硅膠材料（日 本 Fuji 公 司）；Sephadex LH-20（瑞 士Pharmacia 公司）；DRX-500、AV-600 型超導(dǎo)核磁共振波譜儀（德國Bruker 公司）；API Qstar Pulsar液相四極桿飛行時間質(zhì)譜（美國AB 公司）；安捷倫1260 半制備色譜儀（美國安捷倫公司）；ZORBAXSB-C18半制備柱（9.4 mm×250 mm，5 μm，美國安捷倫公司）。二氯甲烷、丙酮、甲醇（分析純，西隴化學(xué)有限公司）；甲醇（色譜純，美國天地有限公司）；純凈水為實(shí)驗(yàn)室自制的二次蒸餾水；顯色劑為10%H2SO4乙醇溶液。

西伯利亞蓼于2013 年10 月采自西藏昌都，經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)鐘國躍研究員鑒定為西伯利亞蓼Polygonum sibiricumLaxm.干燥全草。

2 提取與分離

西伯利亞蓼藥材用70%乙醇提取，過D101 大孔樹脂梯度洗脫，得4 個部位［4］。50% 乙醇部分（Fr.3 45.0 g）用二氯甲烷-甲醇溶解，過硅膠柱，以二氯甲烷-甲醇-水（100∶5∶0、90∶10∶0、90∶10∶1、80∶20∶2、70∶30∶3、60∶40∶4）梯度洗脫，得Fr.3-1～Fr.3-6 共6 個 組 分。Fr.3-2（0.68 g）過Sephadex LH-20 以甲醇洗脫，再過Rp-18 中壓制備，以甲醇-水（40∶ 60～0∶100）梯度洗脫，得化合物4（15 mg）、8（9 mg）；Fr.3-3（3.19 g）過Sephadex LH-20 以二氯甲烷-甲醇（1∶1）洗脫，再經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇-水（90∶10∶1、80∶20∶2）梯度洗脫，得化合物1（22 mg）、2（17 mg）、3（6 mg）；Fr.3-4（5.88 g）過Rp-18 中壓制備，以甲醇-水（40∶60～0∶100）梯度洗脫，得Fr.3-4-1～Fr.3-4-4。Fr.3-4-1（64 mg）過半制備液相，甲醇-水（48∶52）洗脫得化合物5（11 mg）、6（7 mg）；Fr.3-4-2（431 mg）經(jīng)硅膠柱層析，以二氯甲烷-丙酮（6∶4、5∶5、4∶6、7∶3）梯度洗脫，得化合物7（14 mg）、9（19 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：淡黃色粉末。ESI-MSm／z：471.3［M+Na］+。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：12.85（1H，s，5-OH），7.58（2H，d，J=8.4 Hz，H-2′，6′），6.84（2H，d，J=8.4 Hz，H-3′，5′），6.39（1H，brs，H-8），6.14（1H，brs，H-6），5.46（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″）；13C-NMR（150 MHz，DMSOd6）δ：156.7（C-2），133.3（C-3），177.5（C-4），161.4（C-5），99.2（C-6），165.6（C-7），94.0（C-8），156.3（C-9），103.8（C-10），121.3（C-1′），131.1（C-2′，6′），116.3（C-3′，5′），160.2（C-4′），101.1（C-1″），74.4（C-2″），76.6（C-3″），70.1（C-4″），77.7（C-5″），61.0（C-6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［5］基本一致，故鑒定為紫云英苷。

化合物2：淡黃色粉末。ESI-MSm／z：487.4［M+Na］+。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：12.55（1H，s，5-OH），7.98（2H，overlapped，H-2′，6′），6.87（1H，d，J=9.0 Hz，H-5′），6.44（1H，d，J=1.8 Hz，H-8），6.20（1H，d，J=1.8 Hz，H-6），5.40（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″）；13CNMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：156.3（C-2），133.5（C-3），177.6（C-4），161.4（C-5），99.0（C-6），164.6（C-7），93.8（C-8），156.6（C-9），104.0（C-10），121.8（C-1′），115.4（C-2′），145.0（C-3′），148.8（C-4′），116.4（C-5′），121.3（C-6′），100.5（C-1″），74.3（C-2″），76.7（C-3″），70.1（C-4″），77.8（C-5″），61.2（C-6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］基本一致，故鑒定為異槲皮苷。

化合物3：淡黃色粉末。ESI-MSm／z：433.4［M+H］+。1H-NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：7.76（2H，d，J=8.4 Hz，H-2′，6′），6.81（2H，d，J=8.4 Hz，H-3′，5′），6.45（1H，s，H-3），6.35（1H，s，H-8），4.82（1H，d，J=9.8 Hz，H-1″）；13C-NMR（125 MHz，DMSO-d6）δ：163.8（C-2），102.5（C-3），182.1（C-4），160.8（C-5），108.3（C-6），163.5（C-7），94.0（C-8），157.0（C-9），103.9（C-10），121.8（C-1′），128.3（C-2′），115.8（C-3′），161.4（C-4′），115.8（C-5′），128.3（C-6′），74.0（C-1″），71.3（C-2″），78.8（C-3″），70.6（C-4″），81.3（C-5″），61.6（C-6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］基本一致，故鑒定為異牡荊苷。

化合物4：白色粉末。ESI-MSm／z：239.1［M-H］-。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.16（1H，d，J=15.6 Hz，H-7），6.18（1H，d，J=15.6 Hz，H-7），3.55（1H，m，H-3），3.08（1H，d，J=10.2 Hz，H-2），2.38（1H，dd，14.5，5.4，H-4a），2.30（3H，s，C-10），1.79（1H，dd，J=14.5，9.6，H-4b），2.30（3H，s，C-10），1.24（3H，s，C-13），1.17（3H，s，C-12），0.99（3H，s，C-11）；13CNMR（150 MHz，CD3OD）δ：40.8（C-1），80.4（C-2），67.8（C-3），40.0（C-4），67.2（C-5），71.1（C-6），145.0（C-7），133.5（C-8），200.2（C-9），27.3（C-10），26.8（C-11），19.6（C-12），17.6（C-13），ROESY 圖譜未見H-2 和H-3 有相關(guān)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］基本一致，故鑒定為毛果南燭素甲苷元。

化合物5：白色粉末。ESI-MSm／z：387.2［M+H］+。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ：5.86（1H，s，H-4），5.85（1H，m，H-7），5.84（1H，m，H-8），4.41（1H，m，H-9），4.33（1H，d，J=7.8 Hz，H-1′），1.91（3H，s，H-13），1.28（1H，d，J=6.4 Hz，H-10），1.03（3H，s，H-11），1.02（3H，s，H-12）；13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ：42.4（C-1），50.7（C-2），201.2（C-3），127.2（C-4），167.3（C-5），80.0（C-6），135.3（C-7），131.5（C-8），77.3（C-9），21.2（C-10），24.7（C-11），23.4（C-12），19.5（C-13），102.7（C-1′），75.2（C-2′），78.1（C-3′），71.6（C-4′），78.0（C-5′），62.8（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］基本一致，故鑒定為（6S，9R）-長壽花糖苷。

化合物6：白色粉末。ESI-MSm／z：387.2［M+H］+。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ：5.99（1H，d，J=15.6 Hz，H-7），5.89（1H，s，H-4），5.75（1H，dd，J=15.6，7.2 Hz，H-8），4.29（1H，d，J=7.8 Hz，H-1′），1.96（3H，s，H-13），1.31（1H，d，J=6.4 Hz，H-10），1.06（3H，s，H-11），1.03（3H，s，H-12）；13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ：42.4（C-1），50.7（C-2），201.3（C-3），133.8（C-4），167.2（C-5），80.0（C-6），133.7（C-7），127.1（C-8），74.6（C-9），22.2（C-10），24.7（C-11），23.4（C-12），19.6（C-13），101.2（C-1′），74.9（C-2′），78.2（C-3′），71.7（C-4′），78.0（C-5′），62.8（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］基本一致，故鑒定為corchoionoside C。

化合物7：無色結(jié)晶。ESI-MSm／z：193.2［M-H］-。1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.58（1H，d，J=15.8 Hz，H-7），7.17（1H，d，J=1.8 Hz，H-2），7.05（1H，dd，J=8.2，1.8 Hz，H-6），6.80（1H，d，J=8.2 Hz，H-5），6.30（1H，d，J=15.8 Hz，H-8），3.89（3H，s，-OCH3）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：127.8（C-1），116.0（C-2），150.5（C-3），149.4（C-4），116.5（C-5），124.0（C-6），146.9（C-7），115.8（C-8），171.0（C-9），56.5（-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］基本一致，故鑒定為阿魏酸。

化合物8：黃色粉末。ESI-MSm／z：109.1［M-H］-。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：6.79（2H，brd，J=8.7 Hz，H-4，5），6.68（2H，brd，J=8.7 Hz，H-3，6）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：146.5（C-1，2），121.0（C-2，4），116.2（C-3，6）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］基本一致，故鑒定為鄰苯二酚。

化合物9：白色粉末。ESI-MSm／z：367.6［M-H］-。1H-NMR（CDCl3，600 MHz）δ：2.37（2H，t，J=7.9 Hz，H-2），0.91（3H，t，J=6.9 Hz，H-24）；13C-NMR（CDCl3，150 MHz）δ：178.6（C-1），34.1（C-2），32.3（C-3），29.3～30.8（C-4～21），25.0（C-22），22.9（C-23），14.3（C-24）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］基本一致，故鑒定為二十四烷酸。

4 討論

蓼屬植物的化學(xué)成分主要有黃酮類、蒽醌類、苯丙素類、萜類等［13-14］，本研究從西伯利亞蓼50%乙醇部位中分離得到9 個化合物，包括3 個黃酮類，3 個紫羅蘭類，以及6 個其他類，這與蓼屬植物相似。課題組前期查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，多種黃酮化合物（桑色素、葛根素、水飛薊素、槲皮素）具有抑制黃嘌呤氧化酶、調(diào)控尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體的作用［15-18］，因此推測其可能為西伯利亞蓼抗痛風(fēng)的活性成分。今后，將繼續(xù)對分離得到的單體化合物進(jìn)行抗痛風(fēng)活性篩選，以期為西伯利亞蓼的開發(fā)利用提供參考。