扁擔(dān)藤化學(xué)成分的研究

李 兵， 陳圣斌， 張 強(qiáng)， 韋建華， 朱小勇， 黃志其， 盧汝梅

（廣西中醫(yī)藥大學(xué)， 廣西 南寧 530001）

瑤藥扁擔(dān)藤為葡萄科崖爬藤屬植物扁擔(dān)藤Tetrastigma planule （Hook.） Gagnep， 全株入藥， 用于風(fēng)濕骨痛、 腰肌勞損、 跌打損傷、 半身不遂[1］。崖爬藤屬植物在生藥、 化學(xué)成分、 藥理學(xué)等方面均有報(bào)道， 主要分離得到黃酮碳苷類(lèi)成分， 藥理研究表明該屬植物具有抗腫瘤、 抗病毒、 抗肝癌、 保肝降酶、 抗肝纖維化等作用， 具有很好的藥用價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)深入的研究， 從中分離得到16 個(gè)化合物， 其中1～5、 8、 11～16 為首次從該植物中分離得到。

1 材料

Waters Autospec Premier P776 質(zhì)譜儀 （美國(guó)Waters 公司）； Avance Ⅲ600 MHz、 Avance Ⅲ-800 MHz 核磁共振儀 （瑞士布魯克公司）； PRACTUM224-KN SOP 電子分析天平[賽多利斯科學(xué)儀器（北京） 有限公司］。 扁擔(dān)藤購(gòu)于廣西玉林藥市， 經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)韋松基教授鑒定為正品。

2 提取與分離

扁擔(dān)藤粗粉20 kg 用10 倍量80%乙醇冷浸提取5 次， 每次24 h， 減壓回收溶劑， 得到乙醇總提取物1 385 g， 依次用石油醚（60～90 ℃）、 乙酸乙酯、 正丁醇進(jìn)行萃取分離， 減壓回收溶劑， 得到石油醚部位（82.5 g）、 乙酸乙酯部位（105.8 g）、正丁醇部位（170.3 g）。 65 g 石油醚部位經(jīng)反復(fù)硅膠柱分離、 重結(jié)晶， 得化合物1 （8 mg）、 2 （5 mg）、 3 （6.8 mg）、 4 （5.4 mg）； 80 g 乙酸乙酯部位經(jīng)硅膠柱、 Sephadex LH-20 柱， 得化合物5 （6 mg）、 6 （5 mg）、 7 （5.5 mg）、 8 （4.6 mg）、 9（5.6 mg）、 10 （15 mg）、 11 （3.4 mg）、 12 （3 mg）、 13 （5 mg）、 14 （5 mg）、 15 （15 mg）；145 g正丁醇部位經(jīng)AB-8 大孔吸附樹(shù)脂柱、 MCI柱， 得化合物16 （15 mg）、 17 （6 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1： 白色粉末， EI-MS m／z： 684 [M ＋H］＋； 分子式C42H85NO5。1H-NMR （800 MHz， DMSO-d6） δ： 5.35 （1H， t， J = 6.4 Hz， H-2′），3.88 （2H， m， H-3， 4）， 3.83 （1H， m， H-5），3.54 （1H， dd， J = 10.4， 5.6 Hz， H-1b）， 3.49（1H， dd， J=10.4， 4.8 Hz， H-1a）， 0.85 （6H，t， J= 6.8 Hz， H-18， 24′）；13C-NMR （200 MHz，DMSO-d6） δ： 60.7 （C-1）， 51.5 （C-2）， 71.3（C-3）， 74.6 （C-4）， 71.1 （C-5）， 32.0 （C-6），26.4 （ C-7）， 29.0 （ C8-C17）， 24.8 （ C-3′），28.7 （C-4′）， 28.9～29.0 （C-5′-C23′）， 14.3 （C-18， 24′）， 174.2 （C-1′）， 130.1 （C-2′）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[2］ 基本一致， 故鑒定為coelarthenol。

化合物2：黃色油狀物， EI-MS m／z： 430[M］＋； 分 子 式C28H46O3。1H-NMR （800 MHz，CDCl3） δ： 1.02 （3H， s， H-19）， 0.88 （3H， t，J=8.0 Hz， H-21）， 0.68 （3H， s， H-18）， 5.36（1H， m， H-6）， 4.12 （2H， q， J = 7.2 Hz， H-1′）， 1.28 （3H， t， J = 7.2 Hz， H-2′）， 3.35（1H， m， H-3）， 2.26 （2H， t， J = 8.0 Hz， H-25）；13C-NMR （200 MHz， CDCl3） δ： 37.1 （C-1）， 32.1 （C-2）， 73.6 （C-3）， 39.8 （C-4），139.8 （C-5）， 122.7 （C-6）， 31.9 （C-7）， 32.0（C-8）， 50.0 （C-9）， 36.7 （C-10）， 21.0 （C-11）， 24.2 （C-12）， 42.4 （C-13）， 56.7 （C-14），25.5 （C-15）， 28.3 （C-16）， 56.1 （C-17）， 12.0（C-18）， 19.0 （C-19）， 34.5 （C-20）， 19.2 （C-21）， 35.2 （C-22）， 25.7 （C-23）， 42.4 （C-24），34.8 （ C-25）， 173.4 （ C-26）， 60.2 （ C-1′），14.8 （C-2′）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[3］ 基本一致，故鑒定為ethyl 3β-hydroxy-5-cholen-26-oate。

化合物3： 白色顆粒狀結(jié)晶， EI-MS m／z： 424[M］＋； 分子式C30H48O。1H-NMR （800 MHz， Acetone-d6） δ： 1.14 （3H， s， H-27）， 1.09 （3H， s，H-23）， 1.08 （3H， s， H-26）， 1.06 （3H， s， H-25）， 0.95 （3H， s， H-24）， 0.91 （3H， s， H-29）， 0.90 （3H， s， H-30）， 0.83 （3H， s， H-28）， 5.56 （1H， dd， J = 8.2， 3.2 Hz， H-15），2.56 （2H， t， J=4.8 Hz， H-2）， 2.33 （2H， m，H-16）；13C-NMR （200 MHz， Acetone-d6） δ： 37.8（C-1）， 34.5 （C-2）， 217.7 （C-3）， 48.9 （C-4），56.0 （C-5）， 20.0 （C-6）， 35.8 （C-7）， 39.0（C-8）， 48.9 （C-9）， 38.4 （C-10）， 17.5 （C-11）， 35.8 （C-12）， 37.8 （C-13）， 157.7 （C-14）， 117.3 （C-15）， 36.7 （C-16）， 37.7 （C-17）， 47.7 （C-18）， 40.7 （C-19）， 28.9 （C-20），33.1 （C-21）， 33.5 （C-22）， 26.1 （C-23）， 21.5（C-24）， 14.9 （C-25）， 30.0 （C-26）， 25.6 （C-27）， 30.0 （C-28）， 33.5 （C-29）， 21.4 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4］ 基本一致， 故鑒定為蒲公英賽酮。

化合物4： 白色針狀結(jié)晶， EI-MS m／z： 205[M-1］＋； 分子式C11H10O4。1H-NMR （800 MHz，Acetone-d6） δ： 7.58 （1H， d， J=1.6 Hz， H-5），7.60 （1H， d， J=8.0 Hz， H-7）， 6.92 （1H， d，J=8.0 Hz， H-8）， 3.91 （3H， s， 6-OCH3）， 3.89（3H， s， 2-OCH3）；13C-NMR （200 MHz， Acetoned6） δ： 148.0 （C-2）， 108.1 （C-3）， 167.5 （C-4）， 121.4 （C-4a）， 113.4 （C-5）， 148.0 （C-6），124.8 （ C-7）， 115.5 （ C-8）， 152.0 （ C-8a），56.6 （6-OCH3）， 56.3 （2-OCH3）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5］ 基本一致， 故鑒定為dennettine。

化合物5： 白色粉末， EI-MS m／z： 691 [M-1］＋； 分 子 式 C48H84O2。1H-NMR （ 800 MHz，CDCl3） δ： 1.66 （2H， m， H-2）， 4.50 （1H，dd， J= 4.8， 6.4 Hz， H-3）， 1.86 （2H， m， H-11）， 5.18 （1H， t， J = 4.0 Hz， H-12）， 1.99（1H， m， H-18）， 0.88 （6H， s， H-23， 24），0.96 （3H， s， H-25）， 0.97 （3H， s， H-26），1.13 （3H， s， H-27）， 0.88 （3H， s， H-29），0.87 （3H， s， H-30）， 2.30 （2H， t， J=8.0 Hz，H-2′）， 1.66 （2H， m， H-3′）， 1.25 （2H， brs，H-4′）， 0.87 （3H， t， J = 4.8 Hz， H-18′）；13CNMR （200 MHz， CDCl3） δ： 38.2 （C-1）， 23.6（C-2）， 80.7 （C-3）， 37.7 （C-4）， 55.2 （C-5），18.3 （C-6）， 32.5 （C-7）， 39.8 （C-8）， 47.5（C-9）， 36.8 （C-10）， 23.5 （C-11）， 121.6 （C-12）， 145.2 （C-13）， 41.7 （C-14）， 26.1 （C-15）， 27 （C-16）， 32.5 （C-17）， 47.2 （C-18），46.8 （C-19）， 31.1 （C-20）， 34.9 （C-21）， 37.1（C-22）， 28 （C-23）， 16.8 （C-24）， 15.5 （C-25）， 16.8 （C-26）， 26 （C-27）， 28.3 （C-28），33.3 （ C-29）， 23.7 （ C-30）， 173.7 （ C-1′），34.7 （C-2′）， 25.2 （C-3′）， 29.2 （C-4′）， 29.3（C-5′）， 29.4 （C-6′）， 29.6 （C-7′）， 29.7 （C-8′）， 29.7 （ C-9′）， 29.7 （ C-10′）， 29.7 （ C-11′）， 29.7 （C-12′）， 29.7 （C-13′）， 29.6 （C-14′）， 29.5 （C-15′）， 31.9 （C-16′）， 22.7 （C-17′）， 14.1 （C-18′）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6］ 基本一致， 故鑒定為3-β （stearyolxy） olean-12-ene。

化合物6： 黃色片狀物， mp 59～61 ℃， EI-MS m／z： 256[M］＋； 分子式C16H32O2。1H-NMR （800 MHz， CDCl3） δ： 2.35 （2H， t， J = 7.5 Hz， H-2）， 1.63 （2H， m， H-3）， 1.25 （ 24H， brs，H-3～15）， 0.88 （3H， t， J = 7.1 Hz， H-16）；13C-NMR （200 MHz， CDCl3） δ： 180.0 （C-1），34.0 （C-2）， 31.9 （C-3）， 29.7 （C-4）， 29.7（C-5）， 29.7 （C-6）， 29.6 （C-7）， 29.6 （C-8），29.6 （C-9）， 29.4 （C-10）， 29.4 （C-11）， 29.2（C-12）， 29.1 （C-13）， 24.7 （C-14）， 22.7 （C-15）， 14.1 （C-16）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7］ 基本一致， 故鑒定為棕櫚酸。

化合物7： 白色細(xì)針狀結(jié)晶， EI-MS m／z： 138[M］＋； 分 子 式 C7H6O3。1H-NMR （ 800 MHz，CDCl3） δ： 7.02 （1H， d， J=8.0 Hz， H-3）， 7.53（1H， dd， J=8.0， 7.9 Hz， H-4）， 6.94 （1H， t，J= 8.0 Hz， H-5）， 7.93 （1H， dd， J= 8.0， 1.6 Hz， H-6）；13C-NMR （200 MHz， CDCl3） δ： 173.6（-COOH）， 112.3 （C-1）， 162.2 （C-2）， 117.8（C-3）， 137.0 （C-4）， 119.6 （C-5）， 130.9 （C-6）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8］ 基本一致， 故鑒定為水楊酸。

化合物8： 白色油膏狀物， EI-MS m／z： 678[M］＋， 663 [M-CH3］＋。 分子式為C47H82O2。1HNMR （800 MHz， CDCl3） δ： 5.34 （1H， t， J =4.8 Hz， H-6）， 4.68 （ 1H， m， H-9′）， 4.56（1H， m， H-10′）， 4.47 （1H， m， H-3）， 1.03（3H， s， H-19）， 0.94 （3H， d， J = 6.4 Hz， H-21）， 0.88 （3H， d， J = 8.0 Hz， H-26）， 0.85（3H， d， J=6.4 Hz， H-27）， 0.83 （3H， t， J=6.4 Hz， H-18′）， 0.78 （3H， t， J = 5.6 Hz， H-29），0.68 （ 3H， s， H-18 ）。13C-NMR （ 200 MHz，CDCl3） δ： 38.4 （C-1）， 34.9 （C-2）， 80.6 （C-3）， 42.8 （C-4）， 150.0 （C-5）， 109.3 （C-6），34.4 （C-7）， 35.6 （C-8）， 50.3 （C-9）， 37.8（C-10）， 20.9 （C-11）， 40.0 （C-12）， 43.0 （C-13）， 55.4 （C-14）， 25.1 （C-15）， 28.8 （C-16），55.3 （C-17）， 14.1 （C-18）， 18.0 （C-19）， 37.1（C-20）， 16.6 （C-21）， 29.2 （C-22）， 26.5 （C-23）， 48.0 （C-24）， 29.2 （C-25）， 18.3 （C-26），19.3 （ C-27）， 23.7 （ C-28）， 14.5 （ C-29），173.7 （C-1′）， 31.9 （C-2′）， 29.7 （C-3′）， 29.7（C-4′）， 29.7 （C-5′）， 29.6 （C-6′）， 29.3 （C-7′）， 29.2 （ C-8′）， 129.9 （ C-9′）， 129.9 （ C-10′）， 29.7 （C-11′）， 29.5 （C-12′）， 29.4 （C-13′）， 28.8 （C-14′）， 27.4 （C-15′）， 25.1 （C-16′）， 22.7 （C-17′）， 15.9 （C-18′）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9］ 基本一致， 故鑒定為β-谷甾醇油酸酯。

化合物9： 白色結(jié)晶， mp 203 ～206 ℃。 與香草酸對(duì)照品共薄層， 二者Rf值相同， 混合熔點(diǎn)不下降， 故鑒定為香草酸。

化合物10： 白色針狀結(jié)晶， mp 161 ～170 ℃。與豆甾醇對(duì)照品共薄層， 二者Rf值相同， 混合熔點(diǎn)不下降， 故鑒定為豆甾醇。

化合物11： 白色粉末， EI-MS m／z： 197 [MOH］＋； 分 子 式 C14H30O。1H-NMR （800 MHz，CDCl3） δ： 0.88 （6H， t， J = 8.0 Hz， H-13），3.64 （2H， t， J = 6.7 Hz， H-1）， 1.26 （16H，brs， H-3 ～10）， 1.55 （m， 2H， H-2）；13C-NMR（200 MHz， CDCl3） δ： 63.1 （C-1）， 32.8 （C-2），31.9 （C-3）， 29.7 （C-4）， 29.7 （C-5）， 29.7（C-6）， 29.6 （C-7）， 29.6 （C-8）， 29.4 （C-9），29.4 （C-10）， 33.2 （C-11）， 25.7 （C-12）， 14.0（C-13， C-14）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10］ 基本一致，故鑒定為12-methyltridecan-1-ol。

化合物12： 淺黃色針狀結(jié)晶， EI-MS m／z：192[M］＋； 分子式C10H8O4。1H-NMR （800 MHz，Acetone-d6） δ： 3.91 （ 3H， s， -OCH3）， 6.14（1H， d， J=9.4 Hz， H-3）， 7.80 （1H， d， J=9.4 Hz， H-4）， 6.80 （1H， s， H-5）， 7.13 （1H， s， H-8）；13C-NMR （200 MHz， Acetone-d6） δ： 161.2（C-2）， 112.9 （C-3）， 144.3 （C-4）， 103.4 （C-5）， 150.7 （C-6）， 151.4 （C-7）， 109.4 （C-8），145.5 （C-9）， 111.7 （C-10）， 56.5 （-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11］ 基本一致， 故鑒定為異東莨菪內(nèi)酯。

化合物13： 白色片狀結(jié)晶， EI-MS m／z： 428[M］＋； 分 子 式C29H48O2。1H-NMR （800 MHz，CDCl3） δ： 5.82 （1H， s， H-4）， 4.34 （1H， m，H-6）， 0.71 （3H， s， H-18）， 1.18 （3H， s， H-19），0.92 （3H， d， J=8.0 Hz， H-21）， 0.85 （3H， m，H-29）， 0.83 （3H， d， J = 8.0 Hz， H-26）， 0.81（3H， d， J=8.0 Hz， H-27）；13C-NMR （200 MHz，CDCl3） δ： 38.0 （C-1）， 34.3 （C-2）， 200.4 （C-3）， 126.3 （C-4）， 168.5 （C-5）， 73.3 （C-6），38.6 （C-7）， 29.7 （C-8）， 53.6 （C-9）， 38.0 （C-10）， 21.1 （C-11）， 39.6 （C-12）， 42.5 （C-13），55.9 （C-14）， 24.1 （C-15）， 28.1 （C-16）， 56.0（C-17）， 11.8 （C-18）， 19.5 （C-19）， 36.1 （C-20）， 18.7 （C-21）， 33.9 （C-22）， 26.0 （C-23），45.8 （C-24）， 29.1 （C-25）， 19.8 （C-26）， 19.0（C-27）， 23.0 （C-28）， 11.8 （C-29）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12］ 基本一致， 故鑒定為estigmast-4-en-6βol-3-one。

化合物14： 白色針狀結(jié)晶， EI-MS m／z： 410[M］＋， 分 子 式 C29H46O。1H-NMR （800 MHz，CDCl3） δ： 1.53 （1H， m， H-1a）， 2.02 （1H，m， H-1b）， 2.25 （1H， m， H-2a）， 2.37 （1H，m， H-2b）， 5.73 （1H， s， H-4）， 0.71 （3H， s，H-18）， 1.18 （3H， s， H-19）， 1.01 （3H， d， J=8.0 Hz， H-21）， 5.15 （1H， dd， J = 8.0， 16.0 Hz， H-22）， 5.03 （1H， dd， J=8.0， 16.0 Hz， H-23）， 0.81 （3H， d， J=8 Hz， H-26）， 0.91 （3H，d， J=8.0 Hz， H-27）， 0.85 （3H， m， H-29）；13CNMR （200 MHz， CDCl3） δ： 35.6 （C-1）， 33.0（C-2）， 200.0 （C-3）， 123.9 （C-4）， 172.1 （C-5）， 32.4 （C-6）， 32.1 （C-7）， 35.7 （C-8），53.8 （C-9）， 38.8 （C-10）， 20.0 （C-11）， 36.1（C-12）， 45.8 （C-13）， 55.9 （C-14）， 24.2 （C-15）， 29.1 （C-16）， 56.0 （C-17）， 12.2 （C-18），17.6 （ C-19）， 40.5 （ C-20）， 23.2 （ C-21），138.4 （C-22）， 129.6 （C-23）， 51.2 （C-24），31.9 （C-25）， 18.9 （C-26）， 21.3 （C-27）， 25.6（C-28）， 12.3 （C-29）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13］ 基本一致， 故鑒定為stigmast-4， 22-dien-3-one。

化合物15： 白色結(jié)晶， mp 164 ～165 ℃， α-萘酚濃硫酸反應(yīng)呈陽(yáng)性。 與D-葡萄糖對(duì)照品共薄層，在3 種不同的展開(kāi)系統(tǒng)中二者Rf值相同， 混合熔點(diǎn)不下降， 故鑒定為D-葡萄糖。

化合物16： 白色針狀結(jié)晶， mp 167 ～169 ℃，與D-甘露醇對(duì)照品共薄層， 在3 種不同的展開(kāi)系統(tǒng)中二者Rf值相同， 混合熔點(diǎn)不下降， 故鑒定為D-甘露醇。