藏藥八味沉香散的有效成分及藥理作用研究進(jìn)展

3

1.青海大學(xué)生態(tài)環(huán)境工程學(xué)院，青海 西寧 810016；2.青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院，青海 西寧 810001；3.三江源生態(tài)與高原農(nóng)牧業(yè)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，青海 西寧 810016

藏醫(yī)藥已有2000多年歷史，是在廣泛吸收、融合了中醫(yī)藥學(xué)、印度醫(yī)藥學(xué)和大食醫(yī)藥學(xué)等理論的基礎(chǔ)上，通過長期實(shí)踐所形成的獨(dú)特的醫(yī)藥體系，也是我國理論體系完整、使用地域廣泛、使用人群最多的代表性的民族醫(yī)藥學(xué)之一[1-3]。八味沉香散收載于《中國藥典》2015年版一部，本品系藏族驗(yàn)方。作為藏區(qū)臨床應(yīng)用廣泛的藏成藥之一八味沉香散氣芳香，味咸、澀、微苦，具有活血止痛，清心熱，養(yǎng)心，安神，開竅的功效，是治療熱病攻心，神昏譫語，冠心病，心絞痛的藏成藥[4]。近年來國內(nèi)學(xué)者不斷研究八味沉香散的心肌缺血等藥理作用并取得一定成果。

1 八味沉香散組成藥物的有效成分分析

八味沉香散作為傳統(tǒng)藏藥復(fù)方,由沉香、肉豆蔻、廣棗、木香、乳香、訶子、木棉花、石灰華等 8種單味藥組成,其有效成分將通過其單味藥的進(jìn)行分析。

1.1 沉香有效成分 沉香是傳統(tǒng)天然香料和名貴中藥材，也是八味沉香散的主要單味藥。熊禮燕等[5]發(fā)現(xiàn)，使用沉香揮發(fā)油預(yù)處理PC12細(xì)胞可以降低細(xì)胞內(nèi)活性氧水平，顯著增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶的活力，使脂質(zhì)過氧化標(biāo)記物MDA合成減少。有研究證實(shí)，沉香揮發(fā)油是通過增強(qiáng)細(xì)胞中抗氧化酶的活性來保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷，從而起到保護(hù)細(xì)胞的作用。如Dahham等[6]從沉香精油中提取出的β-石竹烯也具有抗氧化活性。Chen等[7]從沉香中分離鑒定了11個(gè)2-(2-苯乙基)色酮類化合物都具有一定的抗炎活性。Guo R等[8]研究表明，2-(2-苯乙基)色酮類化合物可以顯著抑制誘導(dǎo)型的一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)的基因轉(zhuǎn)錄、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF)α以及白細(xì)胞介素(interleukin，IL)6的分泌，顯著抑制核轉(zhuǎn)錄因子kappa B(nuclear transcription factor kappa B，NF-κB) p65的過度活化和STAT1/3的磷酸化。

1.2 肉豆蔻有效成分 肉豆蔻的主要成分為揮發(fā)油、木脂素和苯丙素等, 具有抗氧化、抗炎、促進(jìn)血液循環(huán)等作用；肉豆蔻中的欖香素、肉豆蔻醚可有效治療心臟病,蒙古族與藏族驗(yàn)方中經(jīng)?？梢娙舛罐碇委熜难芟到y(tǒng)疾病。研究發(fā)現(xiàn)連續(xù)給小鼠灌胃肉豆蔻揮發(fā)油10 d，能提高小鼠肝細(xì)胞中細(xì)胞色素P450含量，并且使得細(xì)胞色素B5及血清中GST的含量顯著增加[9]。MURAKAMI Y等[10]研究發(fā)現(xiàn)肉豆蔻中的木脂素類成分能夠強(qiáng)烈抑制環(huán)氧合酶(COX)-2的基因表達(dá)以及LPS刺激的核因子κB(NF-κB)活化，證明了其是抑制脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中炎癥因子的有效制劑。張子英等[11]研究發(fā)現(xiàn)肉豆蔻揮發(fā)油對心律失常也有一定的治療作用，肉豆蔻可以能減慢小鼠心率、延長Q-T間期。

1.3 木香有效成分 木香主要的活性成分是揮發(fā)油，其中的木香內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯等具有抗炎、降壓、擴(kuò)血管和抑制血小板聚集的作用；去氫木香內(nèi)酯能使核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)失活而抑制誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)基因的表達(dá)，進(jìn)而使NO產(chǎn)生減少，對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的TNF-α水平也有所降低[12]；木香烴內(nèi)酯既能抑制NO產(chǎn)生，還能降低AP-1蛋白的DNA 結(jié)合活性和MAPKs蛋白激酶的活化，從而抑制IL-1β基因的表達(dá)[13]。木香對心血管系統(tǒng)也有一定作用，其作用分為抗血液凝集和降血壓兩方面。木香提取物中還含有降壓和擴(kuò)張血管的成分，包括去內(nèi)酯油、總內(nèi)酯、生物堿、木香內(nèi)酯、二氫木香內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯和12-甲氧基二氫木香烴內(nèi)酯等[14]； 石小燕等[15]研究發(fā)現(xiàn)木香烴內(nèi)酯能夠抑制NF-κB蛋白和基因的表達(dá),激活Caspase-3蛋白和Caspase-9蛋白從而誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞的凋亡。

1.4 乳香有效成分 乳香的主要成分為萜類和揮發(fā)油，具有抗炎和抗氧化的作用。11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBK)是乳香中作用最強(qiáng)的單體之一，AKBA能夠抑制高血壓所致的TNF-α和MCP-1炎癥因子上調(diào)，從而恢復(fù)超氧化物岐化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)的生物活性,同時(shí)還能有效改善高血壓過程中NO和Ang II的異常分泌, 使其恢復(fù)到正常水平[16]。研究發(fā)現(xiàn)， AKBK與三氧化二砷配伍能抑制腫瘤壞死因子(TNF)-α和白介素18的分泌[17]。研究表明乳香提取物對佐劑誘導(dǎo)的大鼠關(guān)節(jié)炎有顯著療效，其抗炎作用機(jī)制可能是抑制促炎癥反應(yīng)細(xì)胞活素類的生成有關(guān)[18]。對乳香提取物臨床前的研究發(fā)現(xiàn)，其能減輕膝關(guān)節(jié)炎患者的疼痛，增強(qiáng)骨關(guān)節(jié)的屈伸[19]。

1.5 廣棗有效成分 廣棗的主要成分為酚酸類、黃酮類、小分子有機(jī)酸類和多糖等，其中黃酮、酚酸和小分子有機(jī)酸是廣棗抗心肌缺血再灌注損傷的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)；實(shí)驗(yàn)證實(shí)廣棗有機(jī)酸、酚酸和黃酮均可以通過激活蛋白激酶B的磷酸化而抑制心肌細(xì)胞的凋亡,對心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷和心肌缺血再灌注損傷有直接保護(hù)作用且可以縮小心肌梗死的范圍 , 減輕心肌缺血的損傷程度[20-22]。廣棗提取物能有效的清除和抑制氧自由基。實(shí)驗(yàn)證明廣棗總黃酮能對抗陰離子氧和羥自由基對血紅蛋白的氧化，此對抗程度呈現(xiàn)劑量依賴性[23]；且廣棗總黃酮可使缺氧的離體大鼠心肌收縮力增強(qiáng)并對缺氧所導(dǎo)致的心率減慢呈現(xiàn)明顯的對抗作用[24]。

1.6 訶子有效成分 訶子在我國民間用藥較廣泛，在藏藥中有“藥中之王”之稱。訶子化學(xué)成分豐富，主要含鞣質(zhì)類、酚酸類、三萜類、黃酮類、揮發(fā)油等。訶子醇提物、水提物、乙酸乙酯萃取物都具有比較強(qiáng)的抗氧化活性[25]。有研究表明，訶子的水-甲醇提取物能夠顯著增加草酸鈉誘導(dǎo)的大鼠腎氧化失衡模型體內(nèi)的SOD、總還原性谷胱甘肽(GSH) 、過氧化氫酶(CAT)含量，進(jìn)而降低草酸引起的脂質(zhì)過氧化[26]。訶子中的沒食子酸，可清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)自由基，具有一定抗氧化活性[27]。李建良等[28]通過推測訶子抗草烏心臟毒性的靶點(diǎn)通路, 發(fā)現(xiàn)訶子能夠多途徑、多通路緩解草烏造成的心律不齊和心臟毒性，調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞的舒張和收縮,從而進(jìn)一步保護(hù)心臟的正常功能。訶子醇提物對心房肌的作用類似于強(qiáng)心苷，可使竇房結(jié)心房肌肌收縮功能加強(qiáng)，頻率增快, 收縮幅度變大,顯示正性肌力作用[29]。

1.7 木棉花有效成分 木棉花的主要成分為多糖、花青素、黃酮及脂肪酸等。木棉花總黃酮能顯著降低高脂血癥大鼠血清中總膽固醇(TG)、甘油三酯(TC)、低密度脂蛋白(LDL)的含量，升高高密度脂蛋白(HDL)的含量[30]并且對小鼠免疫性肝損傷也具有保護(hù)作用[31]。劉金泳等[32]采用二甲苯和醋酸作為小鼠的致炎和致痛因子，觀察到木棉花水提取物對二甲苯致耳廓腫脹的抑制率呈現(xiàn)劑量依賴性；在醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響實(shí)驗(yàn)中，木棉花水提取物能有效地減少小鼠的扭體次數(shù)。證明了木棉花水提取液具有一定的抗炎鎮(zhèn)痛效果。

綜上，藏藥八味沉香散其單味藥的主要化學(xué)成分為黃酮類、脂肪酸類、酚酸類和萜類等，其中既含有揮發(fā)性成分，也含有非揮發(fā)性成分，大多具有一定抗氧化和抗炎作用。

2 八味沉香散的藥理作用

2.1 八味沉香散對高原低氧環(huán)境所致疾病的影響 高原具有低氧的環(huán)境特點(diǎn)，機(jī)體對低氧應(yīng)激反應(yīng)異常是導(dǎo)致各種高原適應(yīng)不全和急性高原疾病的重要原因。長期處于高原低氧環(huán)境中會(huì)引起嚴(yán)重疾病,其中包括心血管方面的疾病、腦缺氧等。

2.1.1 八味沉香散的抗心肌缺血作用和保護(hù)心功能作用 低氧環(huán)境引起的心血管疾病其中心肌缺血、缺氧是這些疾病中最嚴(yán)重的。李永芳等[33-34]研究發(fā)現(xiàn)八味沉香散能降低由異丙腎上腺素引起的乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)水平；而八味沉香散水提液可改善垂體后葉素致心肌缺血大鼠的心臟收縮及舒張功能。陳宏等[35]表明八味沉香散50%醇提液能明顯改善垂體后葉素致急性心率加快，對垂體后葉素所致大鼠急性心肌缺血具有一定的保護(hù)作用。推測藏藥八味沉香散可能通過以下幾種方式發(fā)揮作用：①藥物通過減慢心率來改善心肌缺血。②通過降低血清中CK和LDH水平，阻斷脂質(zhì)過氧化來改善心肌缺血。③改善心室舒縮性從而改善心肌缺血。④通過保護(hù)心臟超微結(jié)構(gòu)改善心肌缺血。

2.1.2 八味沉香散對低氧大鼠學(xué)習(xí)記憶的改善 張昱等[36]通過低氧大鼠MORRIS水迷宮測試及海馬CA3區(qū)測量，表明八味沉香散促進(jìn)了低氧大鼠海馬CA3區(qū)正常突觸形態(tài)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，對大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力有一定保護(hù)作用。研究表明八味沉香散可能通過對低氧環(huán)境下腦組織的抗缺氧作用來發(fā)揮保護(hù)學(xué)習(xí)記憶能力。

2.2 八味沉香散對心肌缺血再灌注損傷的影響 缺血再灌注所引起的組織損傷致死性疾病其主要原因，并不是缺血本身，當(dāng)恢復(fù)心肌血液供應(yīng)后，缺血心肌雖然得以恢復(fù)正常灌注，但過量的自由基沖擊重新獲得血液供應(yīng)的組織內(nèi)的細(xì)胞從而加重或造成心臟損傷。

2.2.1 八味沉香散對腦缺血再灌注的影響 楊春燕等[37]研究發(fā)現(xiàn)八味沉香散可以提高大鼠血清SOD水平，降低大鼠血清MDA水平；且可以使大鼠Caspase-3基因表達(dá)顯著減弱。表明八味沉香散對腦缺血再灌注損傷有一定保護(hù)作用。

2.2.2 八味沉香散對腎缺血再灌注的影響 腎缺血再灌注損傷是導(dǎo)致缺血性急性腎功能衰竭的主要原因之一，朱艷梅等[38]研究發(fā)現(xiàn)八味沉香散對SOD和谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)的活性有一定的保護(hù)作用，從而延長體內(nèi)NO的半衰期，有利于維持腎血流和腎氧供。表明八味沉香散在腎缺血再灌注損傷中具有抗氧化作用，此保護(hù)作用可能和其保護(hù)抗氧化酶的活性、提高機(jī)體的抗氧化能力以及抑制體內(nèi)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)有關(guān)。

3 小結(jié)與展望

藏藥作為我國傳統(tǒng)藥學(xué)的重要組成部分，有著較高的應(yīng)用基礎(chǔ)和悠久的歷史，并且對心絞痛、高血壓、腦溢血、萎縮性胃炎等疑難雜癥有獨(dú)特的療效。其中八味沉香散對于解決高原地區(qū)長期缺氧引起的心血管系統(tǒng)疾病有著重要的意義，同時(shí)也存在著需要進(jìn)一步研究與討論的問題。一是藏藥復(fù)方是藏藥用藥的主要形式, 藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制是藏藥復(fù)方研究的核心, 藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及機(jī)制不明確直接影響藏藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立，缺乏可靠的藥理學(xué)、毒理學(xué)研究數(shù)據(jù)，使藏藥的推廣應(yīng)用受到限制。二是八味沉香散作為一種藏藥復(fù)方，其抗缺血作用已從多個(gè)方面得到證實(shí)，該藥作為有效的抗缺血、缺氧的傳統(tǒng)藏藥，但其抗心肌缺血損傷的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制尚不清楚。三是八味沉香散的傳統(tǒng)使用說明中表明使用不同溶劑(牛奶、水、酒)溶解飲用后，所達(dá)到的藥理作用效果是不一樣的，但是關(guān)于溶劑與藥理作用之間的關(guān)系尚待商榷。四是八味沉香散對心肌缺血的保護(hù)作用已得到證實(shí)，但其是否對心肌缺血再灌注損傷也有保護(hù)作用尚不了解；如有保護(hù)作用，其作用是否是通過PI3K/Akt信號(hào)通路調(diào)控氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)和細(xì)胞調(diào)亡而發(fā)揮的。五是八味沉香散的研究熱點(diǎn)一直在心肌保護(hù)方面，但是藏藥的運(yùn)用過程中，很多傳統(tǒng)藏族遵循搭配用藥，這可以使得八味沉香散與其他藏藥的協(xié)同作用導(dǎo)致其作用于其他臟器，因此，八味沉香散在其他臟器所發(fā)揮的作用還有待進(jìn)一步研究。