淺析獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)

鄭教雀

（寧德市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,福建 寧德 352100）

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室作為獸醫(yī)工作的基礎(chǔ)，是動(dòng)物疫病防控機(jī)構(gòu)的根基，承擔(dān)著動(dòng)物疫病診斷、檢測(cè)、動(dòng)物免疫狀況監(jiān)測(cè)等工作，為動(dòng)物疫病防控部門提供技術(shù)保障，因此加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)非常重要。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作在加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)中有著重要作用，它不僅能加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制、提高實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力，同時(shí)還能提高專業(yè)技術(shù)人員的業(yè)務(wù)水平，進(jìn)而提高實(shí)驗(yàn)室的綜合能力。

目前，我國(guó)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室采用的比對(duì)方案多為：將若干個(gè)已知結(jié)果或數(shù)值（真實(shí)值）的樣品作為盲樣分發(fā)給各實(shí)驗(yàn)室；之后收集各實(shí)驗(yàn)室的比對(duì)試驗(yàn)結(jié)果，與真實(shí)值比較；通過結(jié)果符合數(shù)量與比對(duì)總數(shù)，計(jì)算出符合率；最后以符合率評(píng)價(jià)各參與比對(duì)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力。此次我中心組織的比對(duì)試驗(yàn)所采用的比對(duì)方案與以往相比有所不同，本文將此次比對(duì)的其中一個(gè)項(xiàng)目做如下分析，以供同行參考。

1 比對(duì)范圍及項(xiàng)目

本次實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)試驗(yàn)共8個(gè)縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室參與；檢測(cè)項(xiàng)目為豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體（PRRSX3 Ab）檢測(cè)ELISA試驗(yàn)。

2 材料與方法

2.1 儀器與耗材

試驗(yàn)所需要的儀器及設(shè)備由參與比對(duì)的實(shí)驗(yàn)室各自準(zhǔn)備，耗材（含緩沖液）由組織方統(tǒng)一準(zhǔn)備。

2.2 試劑

豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測(cè)試劑盒（PRRS X3 Ab）由北京愛德士元亨生物科技有限公司提供。

2.3 樣品

2.3.1 制備。樣品由北京愛德士元亨生物科技有限公司制備、分裝、編號(hào)。做到各盲樣的血清量相同、保證可進(jìn)行重復(fù)性檢測(cè)，盲樣外觀顏色無明顯差異，并標(biāo)定各樣品的參考值。為保證比對(duì)的科學(xué)性，組織方對(duì)比對(duì)樣品再次統(tǒng)一編號(hào)后，作為盲樣發(fā)放使用。

2.3.2 保存與發(fā)放。在比對(duì)試驗(yàn)開始前，盲樣由組織方密閉、低溫保存。待各參比實(shí)驗(yàn)室人員、儀器設(shè)備到位后，統(tǒng)一發(fā)放。

2.4 試驗(yàn)方法

比對(duì)試驗(yàn)所采用的方法為依據(jù)《豬繁殖與呼吸綜合診斷方法》（GB/T 18090-2008），并參照試劑盒使用說明書進(jìn)行。8份盲樣具體布局，按下表進(jìn)行。

表1 口蹄疫O型抗體ELISA比對(duì)試驗(yàn)布局表

依據(jù)上表，要求各參比實(shí)驗(yàn)室，對(duì)提供的8份盲樣進(jìn)行3次重復(fù)試驗(yàn)，設(shè)置內(nèi)部質(zhì)控品4份，同時(shí)設(shè)立陰、陽(yáng)性對(duì)照各2份；具體試驗(yàn)方法按照試劑盒使用說明書操作。完成試驗(yàn)后，立即出具、提交正式檢測(cè)報(bào)告。

2.5 評(píng)判（分）標(biāo)準(zhǔn)

2.5.1 試驗(yàn)結(jié)果

雄安“新”區(qū)，“新”在創(chuàng)新。它著眼于培養(yǎng)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)，發(fā)展前沿科技，打造京津冀協(xié)同化創(chuàng)新發(fā)展平臺(tái)。首先，新取得建設(shè)規(guī)劃吸引了一批來自北京的高校、科研機(jī)構(gòu)以及醫(yī)療機(jī)構(gòu)等創(chuàng)新引擎，有利于雄安新區(qū)多元化科技城的打造。其次，雄安新區(qū)致力于發(fā)展包括如3D打印、機(jī)器人、芯片、高端裝備、生物、新材料、新能源、航空、航天、交通、電子等在內(nèi)的新興產(chǎn)業(yè)，打造新的經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)極。除此之外，雄安新區(qū)的建設(shè)也體現(xiàn)著可持續(xù)發(fā)展的新思維，其通過加強(qiáng)資源節(jié)約與環(huán)境保護(hù)，來促進(jìn)區(qū)域的持續(xù)發(fā)展。雄安新區(qū)的創(chuàng)新不只局限于科技產(chǎn)業(yè)，它在教育、政府職能、機(jī)制體制方面的創(chuàng)新也在推動(dòng)著京津冀地區(qū)的進(jìn)一步發(fā)展[4]。

2.5.1.1 樣品檢測(cè)值。查看盲樣豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測(cè)值是否在給定的參考值區(qū)間內(nèi)，落在參考值區(qū)間內(nèi)，判為結(jié)果準(zhǔn)確并得分；檢測(cè)值落在參考值區(qū)間外，則判為結(jié)果存在較大偏差，不得分。

2.5.1.2 樣本重復(fù)性。根據(jù)3次重復(fù)試驗(yàn)檢測(cè)值，計(jì)算出變異系數(shù)，查看變異系數(shù)的大小。如果變異系數(shù)≤10%，則判定為樣本重復(fù)性好，得分；如果變異系數(shù)＞10%，則判定為樣本重復(fù)性較差，不得分。

2.5.1.3 內(nèi)部質(zhì)控品。查看4個(gè)質(zhì)控樣品檢測(cè)值是否滿足限定區(qū)間。如果滿足限定區(qū)間，得分；否則不得分。

2.5.1.4 陰陽(yáng)性對(duì)照。陰陽(yáng)性對(duì)照OD值在確保試驗(yàn)成立后，再驗(yàn)證其是否滿足參考標(biāo)準(zhǔn)要求。如果滿足要求，得分；否則不得分。

2.5.2 檢測(cè)報(bào)告。查看各參比實(shí)驗(yàn)室所出具的正式檢測(cè)報(bào)告。報(bào)告中每出現(xiàn)1個(gè)錯(cuò)誤，扣除一定分?jǐn)?shù)。比對(duì)試驗(yàn)具體分?jǐn)?shù)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，詳見下表。

表2 口蹄疫O型抗體ELISA比對(duì)試驗(yàn)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

3 結(jié)果分析

3.1 總體結(jié)果

參與此次比對(duì)的8個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室都能在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè)并提交正式報(bào)告。根據(jù)比對(duì)結(jié)果評(píng)判（分）標(biāo)準(zhǔn)，7個(gè)實(shí)驗(yàn)室的所有OD值在區(qū)間范圍內(nèi)，正確率為87.5%；6個(gè)實(shí)驗(yàn)室的所有變異系數(shù)（CV%）都小于10%，比例為75%。這說明大部分獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室具備相應(yīng)的檢測(cè)能力，且技術(shù)操作穩(wěn)定、重復(fù)性好、水平較高。

3.2 具體結(jié)果

8個(gè)實(shí)驗(yàn)室共檢測(cè)樣品192份·次，獲得192個(gè)OD值，其中189個(gè)OD值處于給定的參考區(qū)間范圍內(nèi)，合格率達(dá)98.4%；樣本重復(fù)性試驗(yàn)，共計(jì)獲得64個(gè)變異系數(shù)（CV%），其中61個(gè)CV%值小于10%，重復(fù)性良好率達(dá)95.3%；陽(yáng)性對(duì)照均合格。此外，3個(gè)實(shí)驗(yàn)室的4個(gè)質(zhì)控樣品檢測(cè)值不在限定區(qū)間內(nèi)、3個(gè)實(shí)驗(yàn)室的3個(gè)陰性對(duì)照未達(dá)參考標(biāo)準(zhǔn)。

3.3 檢測(cè)報(bào)告

收到檢測(cè)報(bào)告8份，每份報(bào)告均存在或大或小的問題。主要問題有：簽、蓋章不夠規(guī)范，報(bào)告內(nèi)容存在對(duì)應(yīng)英文翻譯錯(cuò)誤，診斷試劑未寫明具體廠家，未實(shí)行2級(jí)簽字等。

具體得分結(jié)果詳見表3。

表3 口蹄疫O型抗體ELISA比對(duì)試驗(yàn)得分統(tǒng)計(jì)表

4 討論

血清學(xué)檢測(cè)是目前基層獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室的基本檢測(cè)手段，本次比對(duì)的豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測(cè)項(xiàng)目采用了ELISA檢測(cè)方法，能客觀的反應(yīng)基層獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)水平；且此次比對(duì)試驗(yàn)采用統(tǒng)一的試劑、樣品及標(biāo)準(zhǔn)，并現(xiàn)場(chǎng)立即收回檢測(cè)結(jié)果，加以統(tǒng)計(jì)分析，更能真實(shí)地反映出各實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力水平。

試驗(yàn)結(jié)果顯示，7個(gè)實(shí)驗(yàn)室的合格率為100%，1個(gè)實(shí)驗(yàn)室的合格率為87.5%，說明該市獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)人員的實(shí)際操作技能較強(qiáng)，整體檢測(cè)能力較高。但通過此次比對(duì)試驗(yàn)的評(píng)比，也發(fā)現(xiàn)了各實(shí)驗(yàn)室存在的一些問題。

4.1 未嚴(yán)格按照規(guī)程操作。D實(shí)驗(yàn)室在收到樣品后，未及時(shí)對(duì)樣品進(jìn)行編號(hào)登記，使得在后續(xù)試驗(yàn)過程中將樣品弄混，是導(dǎo)致其出現(xiàn)檢測(cè)不合格的主要原因。

4.2 檢測(cè)報(bào)告不規(guī)范。各實(shí)驗(yàn)室出具的檢測(cè)報(bào)告，存在格式不規(guī)范，內(nèi)容存在瑕疵，表述不準(zhǔn)確、審核程序不夠健全等問題。

4.3 實(shí)驗(yàn)記錄不規(guī)范。個(gè)別實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)報(bào)告所附的原始實(shí)驗(yàn)記錄信息不完整，存在未使用正規(guī)試驗(yàn)表格，試驗(yàn)記錄涂改、未實(shí)行二級(jí)簽字等情況。

5 小結(jié)

檢測(cè)能力比對(duì)工作具有極其重要的意義，因?yàn)闄z測(cè)能力不僅是動(dòng)物防控部門建設(shè)的基礎(chǔ)、更是獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生存之基，而且出具的檢測(cè)報(bào)告是作為政府相關(guān)部門制定政策、執(zhí)行決策的依據(jù)。各動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)要不斷提高檢測(cè)人員的技術(shù)水平，使得實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)更加科學(xué)、準(zhǔn)確、規(guī)范，為重大動(dòng)物疫病防控和食品衛(wèi)生安全提供有力的技術(shù)支持。