吳思捷 李增順 康 凱 姚文生 張 媛 李 寧 王團結(jié) 張一幟 萬建青* 王利永,2*
(1中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所,北京 100081;2新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院,新疆烏魯木齊 830091)
當(dāng)前,獸醫(yī)生物安全實驗室,尤其是高等級獸醫(yī)生物安全實驗室個體防護的核心問題是實驗人員由于經(jīng)常暴露于風(fēng)險因子中而發(fā)生感染的危險較大。根據(jù)我國《病原微生物實驗室生物安全管理條例》 (中華人民共和國國務(wù)院令第424號)[1]、《實驗室生物安全通用要求》 (GB 19489-2008)[2]和世界衛(wèi)生組織 (WHO)《實驗室生物安全手冊》 (第三版)[3]相關(guān)規(guī)定,操作能夠引起人類或動物嚴重或非常嚴重疾病,比較容易直接或者間接造成人與人之間感染、動物界感染以及人獸共患的一類、二類病原微生物時,必須在具有生物安全防護三級或四級水平的實驗室進行。一、二類病原微生物對人員身體任何部位的暴露,包括皮膚、眼睛、體液和呼吸系統(tǒng)都具有潛在的高感染風(fēng)險,而個體防護裝備(personal protective equipment,PPE)是將實驗人員與病原微生物隔離的最后一道防線。
在開展相關(guān)實驗室操作過程中,實驗人員應(yīng)根據(jù)風(fēng)險評估選擇適合的個體防護裝備進行個人防護,如果防護不到位,易出現(xiàn)感染事故,而過度防護則會造成舒適度差、行動不便、動作變形從而導(dǎo)致操作失誤,影響實驗的正常開展??茖W(xué)合理、適度的個人防護,對避免實驗室感染至關(guān)重要。
實驗室應(yīng)按照分區(qū)實施相應(yīng)等級的個人防護,實驗操作必須嚴格遵守個人防護要求;個人防護的內(nèi)容包括防護用品和防護操作程序。所有實驗室人員必須經(jīng)過個人防護的必要培訓(xùn),考核合格獲得相應(yīng)資質(zhì),熟悉所從事工作的風(fēng)險和相應(yīng)防護要求后方可進入實驗室工作。在進入實驗室時必須使用個體防護裝備;離開實驗室時必須脫下,不得穿著個體防護裝備離開實驗室;可重復(fù)使用的個體防護裝備必須先消毒后清洗;一次性個體防護裝備必須先消毒再丟棄,不得清洗和重復(fù)利用。
不同防護級別的生物安全實驗室或同一實驗室內(nèi)不同等級的防護區(qū)域,應(yīng)根據(jù)病原微生物種類及操作內(nèi)容,按照《病原微生物實驗室生物安全管理條例》 《實驗室生物安全通用要求》和《實驗室生物安全手冊》等我國法規(guī)、標(biāo)準及國際通用指導(dǎo)意見的要求,選擇符合規(guī)定的個體防護裝備。
實驗人員選擇個體防護裝備前,應(yīng)對所要開展實驗活動面臨的暴露和感染風(fēng)險有詳細的了解,包括是否直接接觸病原樣本,是否近距離接觸感染人員,是否直接接觸感染實驗動物及其血液、體液、嘔吐物、排泄物或其他污染物,是否從事實驗動物解剖、組織活檢和尸體處理等實驗活動。不同暴露風(fēng)險等級所需要選擇的個體防護裝備防護等級不同。
實驗室應(yīng)根據(jù)風(fēng)險評估選擇配備各類個體防護裝備,不同實驗條件下應(yīng)選擇不同的防護性能的個體防護裝備,同時對個體防護裝備進行實驗匹配性和舒適性的驗證,確保個體防護裝備的物理隔離、過濾等措施能夠有效隔離或過濾危險因子,同時穿戴在實驗人員身上具有一定舒適性、不干擾其他防護用品的使用、不影響實驗操作。
在開展有潛在眼部受損危害的感染性污染物濺出實驗或有化學(xué)腐蝕危害的實驗操作時,為了避免除具有傳染性物質(zhì)可能飛濺、噴濺、滴落或產(chǎn)生氣溶膠時對眼部造成危害,應(yīng)佩戴防護眼罩[4]。如在進行試驗動物氣管切開、尸體剖檢和組織活檢等操作時,在沒有正壓防護服或電動正壓呼吸器的條件下,應(yīng)在佩戴防護眼罩的基礎(chǔ)上加戴防護面罩,防止感染性物質(zhì)從頭頂部、臉側(cè)面及底部進入。
防護眼罩應(yīng)采用防霧鏡片,眼罩大小應(yīng)適合使用者面部。在佩戴前應(yīng)做適配性驗證,使眼罩能嚴密貼合眼部外周區(qū)域,從而在做好防護的同時還可以防止呼吸產(chǎn)生的水汽進入眼罩。在試驗操作過程中,不能對眼罩或面罩隨意進行調(diào)整,如必須調(diào)整,必須首先對手套進行消毒。
常用的呼吸防護裝備包括一次性外科口罩、N95/N99防護口罩、過濾式呼吸器和正壓呼吸器,各類口罩是實驗室生物安全最基礎(chǔ)的防護裝備之一。對于不直接進入實驗室核心工作間的輔助人員、保障人員以及參與試驗但不會接觸患病動物、血液、體液和其他污染物的操作人員,其風(fēng)險暴露等級相對較低,佩戴一次性外科口罩即能滿足防護需要。
實驗人員在操作過程中可能直接接觸少量感染性病原,如采樣、進行動物試驗時接觸動物血液、體液和其他污染物等,風(fēng)險暴露等級提高,一次性外科口罩不能滿足防護要求,應(yīng)佩戴N95/N99等型號的防護口罩。防護口罩通常具有良好的表面防水、抗?jié)窦胺酪后w穿透性能,能夠有效降低液體噴濺、氣溶膠產(chǎn)生導(dǎo)致的感染性微生物穿透口罩的能力。如開展離心操作、實驗動物氣管切開、組織活檢、尸體解剖和尸體處理等可能接觸大量感染性病原的實驗操作時,風(fēng)險暴露等級較高,應(yīng)佩戴裝有可更換高效過濾器的自吸過濾式呼吸器,若條件許可,建議佩戴電動正壓呼吸器。正壓呼吸器采用電機驅(qū)動,能夠?qū)⒏咝н^濾器凈化后的空氣通過管道輸送至頭罩內(nèi),除提供呼吸防護外,同時還能保護眼睛、面部和頭部。
呼吸防護裝備在佩戴前均應(yīng)檢查有無破損,并針對使用人員做密合度測試。除此之外防護口罩還應(yīng)檢查是否處于有效期內(nèi),自吸過濾式呼吸器和電動正壓呼吸器應(yīng)檢查濾器的過濾效果。
實驗室所有操作都需要依靠操作者的雙手來完成,因此手部是接觸感染物質(zhì)最頻繁的部位,必須佩戴防護手套。針對實驗室常見溢灑、噴濺和氣溶膠造成的感染性物質(zhì)擴散,防護手套能夠?qū)κ植考巴蟛刻峁┯行У奈锢矸雷o。除一般防護手套外,還有絕緣手套和防切割手套等特殊防護手套,可以為操作高溫、低溫等物質(zhì)和開展尸體解剖工作的實驗人員提供更加有效的手部防護。
實驗人員應(yīng)選擇類型和尺碼正確的防護手套,從而避免妨礙動作或影響手感。在佩戴手套前需檢查手套是否老化、損壞和泄露,佩戴時應(yīng)將防護服袖口扎進手套口。由于在試驗過程中,防護手套是受污染最嚴重的防護裝備,因此在試驗操作中要避免手套觸摸鼻子、面部,禁止帶手套調(diào)整防護眼鏡、口罩和其他防護裝備,盡量減少帶手套觸摸實驗室內(nèi)如各種開關(guān)和門把手等。在試驗操作結(jié)束后離開生物安全柜時,接觸污染物品后以及離開實驗室時必須先消毒并更換防護手套。
軀體防護裝備一般包括分體工作服、連體式防護服、正壓防護服和背開式隔離服。分體服防護性較低,因此除實驗室外圍工作人員及技術(shù)保障人員外,通常不能單獨用來進行軀體防護,僅作為貼身內(nèi)層防護服,配合連體防護服使用。連體式防護服在高等級生物安全實驗室中使用頻繁,是軀體防護的主要裝備,對防護性能要求較高,應(yīng)具備良好的防水、抗液體穿透性,在絕大多數(shù)場合下需選擇前開拉鏈的款式,袖口、腳踝處應(yīng)為彈性收口。當(dāng)實驗人員所從事實驗活動風(fēng)險較高時,還應(yīng)在連體式防護服外加穿一次性背開系帶式隔離衣,確保不發(fā)生滲透污染。如果實驗室開展涉及一類病原微生物或某些人畜共患病的實驗操作時,應(yīng)裝備配有生命支持系統(tǒng)的正壓防護服,為實驗人員提供呼吸和全身的高等級防護。
分體服由于需貼身穿戴,因此不建議使用一次性材料,應(yīng)選用吸汗、透氣的棉質(zhì)分體服,確保舒適。連體防護服和隔離衣在穿著時要保證頸部和腕部扎緊,在脫下防護服時必須遵循“由上至下”的原則,在脫下后的放置方面遵循“由內(nèi)向外”的原則,即從頭頸部向足部方向脫下防護服/隔離衣,在脫下過程中要不斷將防護服(隔離衣)內(nèi)面向外翻卷,始終保持清潔面包裹污染面,盡可能降低污染風(fēng)險。正壓防護服的使用環(huán)境由于接觸病原微生物等級最高,因此在實驗結(jié)束后必須先對正壓防護服進行化學(xué)噴霧(淋浴消毒)才可脫下。
實驗操作人員從事實驗活動時,必須穿具有防水、防滲透和防滑功能的防護鞋并在外穿戴長筒鞋套,為足部提供充分的防護,使其免受損傷。當(dāng)實驗室內(nèi)出現(xiàn)大量感染性液體泄露、處理大量實驗動物排泄物和尸體時建議穿戴長筒防護膠靴。
離開實驗室核心工作間之前消毒并更換外層防護手套,降低感染性物質(zhì)通過手套帶出風(fēng)險。在核心工作間、緩沖間脫去防護眼罩、呼吸器、防護面罩、隔離衣、鞋套、外層防護手套和外層的連體防護服。在第二更衣室脫去內(nèi)層防護手套、防護口罩和分體工作服;經(jīng)淋浴后在第一更衣室換回自身衣服。具體應(yīng)根據(jù)現(xiàn)場條件、布局和具體活動風(fēng)險評估后做適當(dāng)調(diào)整。
先脫污染重和體積大的、后脫呼吸和眼部等關(guān)鍵部位個體防護裝備,脫除過程中注意避免將污染的手套、防護服等接觸皮膚和粘膜,穿脫順序不顛倒、脫防護服時切忌抖動。
一次性個體防護裝備(如手套、口罩、連體防護服、鞋套等)應(yīng)在離開特定區(qū)域前脫下并放入專用密封容器中,經(jīng)全面消毒后進行無害化處理。可重復(fù)使用個體防護裝備(如防護眼鏡、防護面罩、電動送風(fēng)呼吸器等)應(yīng)進行浸泡、擦拭或噴霧消毒后放置在該區(qū)域。所有個體防護裝備均嚴禁穿戴離開實驗室特定區(qū)域。個體防護裝備被培養(yǎng)物、血液、體液或污物等污染時,應(yīng)立即更換。
任何物理防護設(shè)備的保護功能都是有限度的,并且在長期運轉(zhuǎn)的情況下難免會由于消耗、損壞和陳舊等原因出現(xiàn)故障,因此相關(guān)設(shè)施設(shè)備的日常運行、維護、保養(yǎng)、檢定、校準、效果驗證及安全檢查等是實驗室生物安全管理中非常重要的工作內(nèi)容。除此之外,生物安全防護是一項繁雜、受制于多因素的系統(tǒng)工程,不能單純依靠某一項或某幾項措施,而是必須注重全面建設(shè)包括風(fēng)險評估、風(fēng)險控制、體系文件的編制和控制、人員培訓(xùn)、安全計劃、安全檢查、不符合工作的預(yù)防識別和糾正、體系評審和持續(xù)改進等工作在內(nèi)的生物安全防護體系,從硬件、軟件和人員三方面做好生物安全工作,以確保實驗室安全、有效運行,保證人員安全、環(huán)境安全和設(shè)施安全。