藥食用真菌灰樹花防治腫瘤相關(guān)應(yīng)用的研究進(jìn)展

王亞敏，謝夢(mèng)洲，2，張超文，瞿昊宇，向 茗，朱建平，肖作為

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南省藥食同源功能性食品工程技術(shù)研究中心，湖南長(zhǎng)沙410208;2.抗腫瘤中藥創(chuàng)制技術(shù)湖南省工程研究中心，湖南長(zhǎng)沙410007）

1 灰樹花生物學(xué)概述

灰樹花（Griflola frondosa）是一種珍稀的藥食兩用真菌，主要生長(zhǎng)在亞熱帶至溫帶。在日本稱其為舞茸，也有些國內(nèi)著作中稱其為貝葉多孔菌，民間也有稱千佛菌、栗蘑。我國較早的權(quán)威專著《中國的真菌》中以“灰樹花”為中文名稱，因此成為國內(nèi)通用的漢語名稱[1]。

灰樹花味如雞絲，肉質(zhì)脆嫩，營養(yǎng)也非常豐富，且含有多種生物活性物質(zhì)，是一種營養(yǎng)又美味的藥食兩用食材。由于其產(chǎn)量大、栽培簡(jiǎn)單，目前在全世界各地廣泛分布。在我國河北、浙江、四川、吉林、福建等省均有分布，并且在浙江慶元縣、河北遷西縣等省已實(shí)現(xiàn)規(guī)?；耘啵a(chǎn)量逐年增加?！皯c元灰樹花”在2014年獲得農(nóng)業(yè)部第3批農(nóng)產(chǎn)品地理標(biāo)志認(rèn)證[2-3]。

2 古代文獻(xiàn)記載

灰樹花在我國民間有著悠久的食用歷史，并在公元2世紀(jì)的《太上靈寶芝草品》中就有配圖及文字記載，書中稱灰樹花為白玉芝，并詳細(xì)描述了灰樹花的形態(tài)特征。宋代的陳仁玉也在《菌譜》記錄了灰樹花是一種食用菌，“味甘、平、無毒，可治痔瘡”。關(guān)于灰樹花在日本文獻(xiàn)中最早的記載出現(xiàn)于《溫故齋菌譜》中，書中對(duì)灰樹花的繪圖和描述，可以確認(rèn)其為灰樹花無疑。日本學(xué)者貝原益軒于1709年首次在學(xué)術(shù)上研究了舞茸（灰樹花），并指出其有“潤(rùn)肺保肝，扶正固本”的功效。1941年，向坂正次于我國東北地區(qū)采收標(biāo)本后，編著于《滿州野生食用菌植物圖說》一書中[4]。

3 灰樹花現(xiàn)代研究進(jìn)展

灰樹花是一種富含膳食纖維、蛋白質(zhì)、多種礦物質(zhì)元素的食物，被稱為“食用菌王子”“華北人參”[5]?，F(xiàn)代研究認(rèn)為，灰樹花具有抗腫瘤、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、降血糖、降血壓、抗抑郁、抗HIV病毒等作用。中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所和農(nóng)業(yè)部質(zhì)檢中心對(duì)其營養(yǎng)素含量進(jìn)行了檢測(cè)，證實(shí)灰樹花營養(yǎng)豐富。每100 g干灰樹花中含有蛋白質(zhì)25.2 g，人體所需氨基酸18種，其中人體必需氨基酸占45.5%，精氨酸、賴氨酸，以及與鮮味有關(guān)的門冬氨酸和谷氨酸含量也都比較高，還富含多種有益的礦物質(zhì)和維生素，其中維生素B1（VB1）和維生素E（VE）含量高于一般食用菌。此外，還含有葉酸、乳酸、琥珀酸等多種有機(jī)酸，能促進(jìn)兒童身體健康成長(zhǎng)和智力發(fā)育[6]。

3.1 灰樹花抗腫瘤相關(guān)活性及應(yīng)用研究

灰樹花的抗腫瘤作用發(fā)揮主要依靠提高機(jī)體自身的免疫力，不是直接殺死腫瘤細(xì)胞，其作用主要表現(xiàn)在抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，防止正常細(xì)胞癌變，以及與放射療法和化學(xué)療法協(xié)同發(fā)揮作用，提高癌癥的治療效果與降低放療、化療的副作用等方面[7]?；覙浠ㄖ兄饕纳锘钚猿煞质嵌嗵穷愇镔|(zhì)，灰樹花多糖（Polysaccharides of griflola frondosa，PGF）是灰樹花中最主要的一類活性成分，它主要來源于灰樹花的子實(shí)體與菌絲體或發(fā)酵液中分離得到的一類富含β-1,6-糖苷鍵及β-1,3-糖苷鍵的真菌多糖[8]，它可以增強(qiáng)機(jī)體免疫力來抑制腫瘤細(xì)胞，并且與其他物質(zhì)發(fā)揮協(xié)同作用誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞死亡。日本的難波宏彰等研究人員從全世界范圍內(nèi)的真菌藥物中挑選出數(shù)十種大型藥用真菌進(jìn)行研究，如靈芝、羊肚菌、香菇、灰樹花、松茸、冬蟲夏草、茯苓、云芝、平菇、猴頭菇等，得出結(jié)論認(rèn)為灰樹花的抗癌效果優(yōu)于其他真菌。從此，針對(duì)灰樹花相關(guān)的抗腫瘤研究引起關(guān)注，并在全世界開展開來。也有外國研究人員進(jìn)行了細(xì)胞試驗(yàn)結(jié)果認(rèn)為，灰樹花多糖對(duì)腫瘤的抑制率為86.3%，是所有真菌生物活性物質(zhì)中抗腫瘤活性最強(qiáng)的，而香菇多糖、金針菇多糖、雙孢蘑菇多糖、糙皮側(cè)耳多糖的抑制率則分別為77.0%，61.7%，71.3%和62.7%[9]。

胡馨予等人[10]進(jìn)行體外細(xì)胞試驗(yàn)證明，灰樹花提取物可以有效降低PLC/PRF/5和HepG2細(xì)胞存活率，提高細(xì)胞乳酸脫氫酶釋放，并進(jìn)一步用BALB/c雄性裸小鼠腋下接種肝癌PLC/PRF/5細(xì)胞，經(jīng)試驗(yàn)證明，灰樹花可有效抑制在 PLC/PRF/5異位荷瘤裸鼠模型中腫瘤的生長(zhǎng)。Zhao F等人[11]以人肝癌SMMC-7721和HepG2細(xì)胞進(jìn)行了體外細(xì)胞凋亡和自噬試驗(yàn)，經(jīng)過測(cè)定發(fā)現(xiàn)，灰樹花多糖與VC聯(lián)合應(yīng)用能夠誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721和HepG2細(xì)胞凋亡和自噬，為灰樹花多糖聯(lián)合用藥的體內(nèi)研究奠定了前期的研究基礎(chǔ)。Lin C等人[12]通過體內(nèi)和體外研究發(fā)現(xiàn)灰樹花的冷水提取物可以通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自噬和凋亡來抑制肝癌的生長(zhǎng)，而且冷水提取物的抗肝癌細(xì)胞效應(yīng)優(yōu)于熱水提取物。

在灰樹花的功能研究方面，Kodama N等人[13]認(rèn)為是灰樹花中的MD-組分，可以刺激免疫細(xì)胞的活性，從而表現(xiàn)出強(qiáng)勁的抗癌作用，并進(jìn)行了臨床試驗(yàn)，其中有68.9%的乳腺癌患者、62.5%的肺癌患者和58.2%的肝癌患者的腫瘤縮小，臨床癥狀也得到了極大的改善。Zhang Y等人[14]進(jìn)行了灰樹花多糖在乳腺癌方面的活性和機(jī)制研究，先在體外做了MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞試驗(yàn)，后進(jìn)行裸鼠 MCF-7腫瘤移植體內(nèi)試驗(yàn)，結(jié)果證明灰樹花多糖是通過線粒體依賴性途徑誘導(dǎo)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞凋亡。

李小定等人[15]經(jīng)試驗(yàn)證明，熱水提取所得灰樹花粗多糖與經(jīng)純化后多糖均能抑制荷瘤小鼠S180肉瘤的生長(zhǎng)，同時(shí)能提高小鼠免疫器官的質(zhì)量，但灰樹花粗品中可能由于比純品中保留更具抑瘤活性的多糖，且各種活性多糖也可能具有協(xié)同作用，因此比純品抑制腫瘤的作用更強(qiáng)。Vetvicka V等人[16]給小鼠喂食灰樹花β-葡聚糖單獨(dú)組、香菇粉單獨(dú)組和灰樹花β-葡聚糖加香菇粉組，以測(cè)量吞噬作用、NK細(xì)胞活性和分泌il-6，il-12，IFN-γ以及C反應(yīng)蛋白（CRP），發(fā)現(xiàn)三者都有顯著的防御反應(yīng)刺激，而灰樹花-香菇組合＞灰樹花單獨(dú)＞香菇粉單獨(dú)，這為藥食用真菌的聯(lián)合應(yīng)用提供了依據(jù)。劉佳等人[17]經(jīng)過動(dòng)物試驗(yàn)對(duì)比灰樹花子實(shí)體粗粉與超微粉對(duì)Hep-A-22荷瘤小鼠的抑瘤作用發(fā)現(xiàn)，兩者均具有抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用，且腫瘤抑制效果具有明顯的量效關(guān)系，超微粉高劑量組抑瘤率51.05%，粗粉高、劑量組抑瘤率為44.21%，灰樹花超微粉高劑量組（1 500 mg/kg） 抑瘤效果最佳。Chen X D等人[18]的研究表明，低分子量的灰樹花多糖具有更好的抗腫瘤活性。Ting Z等人[19]對(duì)比發(fā)現(xiàn)酶解處理后提取的灰樹花多糖（FGFP）比熱水浸提提取的灰樹花多糖（GFP）表現(xiàn)出更強(qiáng)的羥基自由基、DPPH自由基和2,2-azino-bis（3） -乙基苯并噻唑-6磺酸（ABTS） 自由基的清除力，但是該課題并沒有進(jìn)行抗腫瘤方面的試驗(yàn)。因此，粗多糖和純化后的多糖抗腫瘤活性還需要更加周密的試驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行對(duì)比。

3.2 灰樹花在腫瘤治療中的輔助作用研究

腫瘤患者在放化療后常會(huì)降低或破壞免疫系統(tǒng)，而灰樹花多糖能幫助免疫細(xì)胞保持最佳活性而最大限度地減少化療引起的不良反應(yīng)，通過臨床的試驗(yàn)研究，應(yīng)用灰樹花多糖90%的患者惡心、脫發(fā)等不良反應(yīng)減輕，有83%的患者疼痛減輕[20]。顏燕等人[21]通過對(duì)正常ICR小鼠后60Co-γ射線進(jìn)行1次全身照射后連續(xù)30 d灌胃給予灰樹花多糖，并在輻照前后進(jìn)行外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)，輻照后骨髓細(xì)胞DNA含量檢測(cè)和血清超氧化物歧化酶（SOD）活力測(cè)定，結(jié)果顯示灰樹花多糖能增強(qiáng)小鼠的體液免疫和細(xì)胞免疫功能，以及單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能，并使外周血白細(xì)胞數(shù)和骨髓細(xì)胞DNA含量增加，血清超氧化物歧化酶（SOD）活力明顯增強(qiáng)，說明灰樹花多糖對(duì)輻射損傷具有一定的防護(hù)作用。

賀長(zhǎng)生等人[22]將灰樹花多糖通過灌胃給藥來測(cè)試對(duì)消炎痛所致胃黏膜損傷模型的輔助保護(hù)作用。結(jié)果表明，灰樹花多糖能夠顯著降低胃黏膜的損傷程度，為灰樹花多糖在緩解腫瘤患者的胃腸道癥狀方面的應(yīng)用是一個(gè)重要的啟示。此外，雷萍等人[23]也通過試驗(yàn)證實(shí)對(duì)脾虛癥灰樹花多糖也有良好的效果，他們連續(xù)10 d給脾虛模型小鼠腹腔注射純度為45%的灰樹花多糖，結(jié)果發(fā)現(xiàn)灰樹花中、高劑量組可以改善脾虛時(shí)所致的CD4+/CD8+T細(xì)胞比值降低，使Th2細(xì)胞向Th1細(xì)胞轉(zhuǎn)化，從而達(dá)到改善脾虛癥的目的。

腫瘤患者在患病期間，由于對(duì)疾病的恐懼和各種治療引起的不安，情志會(huì)受到很多負(fù)面的影響，導(dǎo)致情緒抑郁，但是抗抑郁的藥物又大多會(huì)才產(chǎn)生更多的副作用，Bao H等人[24]將灰樹花子實(shí)體粉末摻進(jìn)鼠料中喂給CD-1小鼠并進(jìn)行尾懸液試驗(yàn)（TST）、強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)（FST） 和曠場(chǎng)試驗(yàn)（OFT） 發(fā)現(xiàn)，灰樹花有顯著的抗抑郁效果，且可能通過AMPA突觸傳遞的增強(qiáng)抗抑郁作用。這一發(fā)現(xiàn)對(duì)新型抗抑郁劑的開發(fā)有很大影響，通過使用藥物或食物增強(qiáng)的AMPA受體信號(hào)來治療抑郁癥。而灰樹花是一種安全的可食用蘑菇，這也提示患者治療抑郁癥時(shí)可以食用灰樹花作為膳食補(bǔ)充，而對(duì)于腫瘤患者來說更是一舉多得的良好途徑。

針對(duì)灰樹花的研究越來越廣泛，對(duì)灰樹花其他功能的發(fā)現(xiàn)也說明灰樹花能從多個(gè)方面提高患者的生活質(zhì)量，Chen Z等人[25]通過莫里斯水迷宮試驗(yàn)觀察灰樹花多糖對(duì)老齡大鼠的記憶力影響，結(jié)果表明，灰樹花多糖對(duì)于改善老年大鼠的記憶損傷有明顯的幫助，并通過進(jìn)一步機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，口服灰樹花多糖可以提高機(jī)體的抗氧化作用，以此來改善記憶力的受損，提示灰樹花多糖作為膳食補(bǔ)充可以預(yù)防大腦的退化。曹素芳等人[26]以灰樹花、黃芪和靈芝、精制蜂膠制得灰樹花復(fù)方制劑灌胃給予四氧嘧啶誘導(dǎo)的高血糖小鼠，發(fā)現(xiàn)模型組有明顯的抑制空腹血糖升高和提高糖耐量的作用，而正常小鼠的空腹血糖和體重并未受到顯著影響，由此可知，灰樹花復(fù)方制劑具有降血糖的作用。

4 灰樹花產(chǎn)品開發(fā)現(xiàn)狀及思考

灰樹花的功效性和安全性越來越被認(rèn)可，以灰樹花為原料開發(fā)的普通食品、保健食品也逐漸進(jìn)入市場(chǎng)，如鄧功成等人[27]研制的灰樹花風(fēng)味酸奶，以鮮牛奶和灰樹花菌絲體發(fā)酵菌液為原料，加入保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌發(fā)酵的酸奶具有特有的菇味清香、口感酸甜適口、凝乳均勻、色澤淡黃。李佳等人[28]采用灰樹花發(fā)酵勻漿濾液為主要原料，經(jīng)過發(fā)酵制成了灰樹花保健飲料。目前已上市的加入灰樹花的保健食品主要有增強(qiáng)免疫力類、抗疲勞類、延緩衰老類、調(diào)節(jié)血糖類、抗輻射類等，如“維吉爾膠囊”是以灰樹花提取物和淀粉為原料的免疫調(diào)節(jié)和抗輻射的保健食品；也有以多種真菌為原料復(fù)配的產(chǎn)品，如以香菇、靈芝、姬松茸、灰樹花等提取物為原料通過工藝加工的“丞燕牌紐益特固體飲料”，或者將幾種真菌的子實(shí)體破壁處理制得的“益加生物牌瑞嘉膠囊”；還有與中藥提取物配伍的“之本牌愛康軟膠囊”，是以灰樹花提取物、香菇提取物、黃芪提取物等為原料，含姬松茸破壁粉、灰樹花破壁粉、靈芝破壁孢子粉等。在灰樹花的原料利用中也分灰樹花菌絲體、子實(shí)體、提取物幾種，大多數(shù)產(chǎn)品都是以幾種大型真菌混合配伍而開發(fā)的，這說明開發(fā)和利用各種藥食用真菌已成為產(chǎn)品開發(fā)的熱點(diǎn)。

灰樹花的抗腫瘤活性、免疫活性、抗氧化活性等已得到全世界范圍內(nèi)不斷的關(guān)注和研究，不愧于“抗癌奇葩”的美譽(yù)，而其他的功效（如保護(hù)胃黏膜、抗抑郁、減輕放化療的副反應(yīng)等） 使其在腫瘤的防治中的價(jià)值更為突顯，灰樹花作為傳統(tǒng)的藥食兩用真菌，從中醫(yī)方面的功效來說其“扶正固本”的作用也通過試驗(yàn)研究得到有力的佐證，灰樹花抗癌的作用在肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌方面都有相關(guān)的試驗(yàn)研究支持，但其他癌癥相關(guān)功效報(bào)道較少或表現(xiàn)不突出，對(duì)灰樹花的應(yīng)用研究也不應(yīng)該局限于前人的研究范圍，可在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下合理組方配伍，充分發(fā)揮灰樹花的作用，拓展其應(yīng)用范圍。灰樹花健康美味的特性也為灰樹花相關(guān)藥膳產(chǎn)品提供了良好的開發(fā)思路，對(duì)灰樹花多糖的提取與應(yīng)用使開發(fā)功效顯著、營養(yǎng)美味的藥膳產(chǎn)品有了更大的空間。