抗抑郁新制劑復方佛手口服液研究概況*

張春燕，范小冬，孔文強，謝星星，周春陽，杜 彪

（1.西南醫(yī)科大學附屬醫(yī)院藥物臨床試驗機構(gòu)，四川 瀘州 646000；2.四川省南充市西充縣人民醫(yī)院藥劑科，四川 南充 637200；3.西南醫(yī)科大學藥學院，四川 瀘州 646000；4.西南醫(yī)科大學附屬醫(yī)院藥劑科，四川瀘州 646000；5.川北醫(yī)學院藥學院，四川 南充 637000；6.重慶三峽中心醫(yī)院藥學部，重慶 404000）

抑郁癥的發(fā)病機制至今尚不明確，遺傳因素、心理因素、環(huán)境因素、免疫功能等多種因素與抑郁癥的發(fā)生及發(fā)展關(guān)系密切［1］。目前，臨床使用的大多數(shù)抗抑郁藥主要以“單胺類遞質(zhì)假說”作用機制為目標開發(fā)的調(diào)節(jié)突觸間隙單胺類神經(jīng)遞質(zhì)［如5-羥色胺（5-HT）、去甲腎上腺素（NE）、多巴胺等］水平而發(fā)揮抗抑郁作用，常規(guī)抗抑郁藥物主要有三環(huán)類抗抑郁藥物、選擇性5-HT再攝取抑制劑（SSRI）、單胺氧化酶抑制劑、選擇性NE／5-HT再攝取抑制劑等［2］，這些抗抑郁藥物存在起效時間較長、復發(fā)率較高、臨床治愈率低且殘留癥狀突出等共性問題。近年來，中藥治療抑郁癥研究取得了較大進展，主要涉及有柴胡、白芍、枳殼、淫羊藿、石菖蒲等單味中草藥，以及常用中藥復方如逍遙散、開心散、小柴胡湯、四逆散等多種制劑［3］。中藥通過多途徑、多層次、多靶點治療抑郁癥，彌補了西藥的不足。復方佛手口服液（曾用名安康口服液）是重慶三峽中心醫(yī)院根據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論合理組方而成的抗抑郁新制劑。在此對復方佛手口服液的研究概況進行綜述，為中藥復方制劑治療抑郁癥提供新的治療方案。

1 概述

組方：佛手 100 g，郁金 90 g，酸棗仁 50 g，柴胡、桑椹、大棗各45 g，甘草25 g，矯味劑單糖漿100 mL，以及一定量的附加劑如防腐劑等。

組方原則：佛手、柴胡為君藥，有疏肝理氣功效；郁金、酸棗仁為臣藥，郁金有理氣祛痰功效，酸棗仁有養(yǎng)心安神、健腦寧志功效；桑椹補血滋陰，生津潤燥；大棗補中益氣，養(yǎng)氣安神。諸藥合用，方證合拍，共同起到抗抑郁的良好功效。

處方制備：按處方組成，將處方量的藥材剪碎，倒入燒杯，加入適量去離子水，直至藥材被完全浸沒，浸沒1 h后緩慢加熱，保持微沸1 h，分離煎煮液，藥渣再加入適量去離子水繼續(xù)煎煮0.5 h，分離煎煮液2次，合并3次煎出液，過濾，去除濾渣，將濾液低溫濃縮至一定量，加入單糖漿100 mL，再濃縮至1 000 mL，加入1%殼聚糖，靜置約12 h，吸取上清液，棄掉沉淀物，再加入一定劑量的防腐劑，分裝，即得。

臨床應用：適用于年齡18～63歲的符合《中國精神疾病分類方案與診斷標準（第三版）》診斷的輕中度抑郁癥患者。本品每1 mL含生藥0.38 g，每日口服2次，1次20 mL，療程為6周。

2 現(xiàn)代藥理學研究

佛手為蕓香科植物佛手Citrus medicaL.var.sarcodactylisSwingle的干燥果實，功能疏肝理氣、和胃止痛、燥濕化痰，用于肝胃氣滯、胸脅脹痛、胃脘痞滿、食少嘔吐、咳嗽痰多［4］178-179。佛手的主要化學成分有揮發(fā)油、黃酮類、多糖、微量元素、多酚、氨基酸、香豆素、甾醇類等［5］。佛手具有止咳平喘祛痰、抗腫瘤、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)作用，以及抑菌、抗炎、抗抑郁作用等［6］。高洪元等［7］探討了佛手揮發(fā)油對慢性應激所致大鼠抑郁模型的干預作用，采用低、中、高劑量對90只Wistar大鼠進行試驗后，發(fā)現(xiàn)佛手揮發(fā)油呈劑量依賴性地改善大鼠抑郁行為及生化指標，推測佛手抗抑郁作用機制可能與調(diào)節(jié)血清中皮質(zhì)酮水平和海馬組織神經(jīng)營養(yǎng)因子表達水平有關(guān)。蘆紅等［8］采用小鼠強迫游泳試驗和小鼠懸尾試驗探討了川佛手提取物的抗抑郁作用，研究證實，川佛手揮發(fā)油、川佛手水提后醇提浸膏和正丁醇浸膏均有明顯的抗抑郁作用，但未發(fā)現(xiàn)川佛手水提浸膏的抗抑郁作用，推測原因可能與水提浸膏內(nèi)雜質(zhì)過多有關(guān)。因此，除雜質(zhì)也是復方佛手口服液制備的關(guān)鍵步驟。宋美卿等［9-10］采用慢性不可預見性溫和應激配合孤養(yǎng)的造模方法，研究著名中醫(yī)教育家施今墨的行氣疏肝對藥香櫞佛手的抗抑郁作用，發(fā)現(xiàn)香櫞、佛手對藥不同劑量組對大鼠體質(zhì)量、糖水偏愛率、曠場試驗各指標有不同程度提高作用，證明其可能通過提高機體各種非特異性刺激的抵抗力而發(fā)揮抗抑郁作用。

郁金為姜科植物溫郁金Curcuma wenyujinY.H.Chen et C.Ling，姜黃Curcuma longaL.，廣西莪術(shù)Curcuma kwangsiensisS.G.Lee et C.F.Liang 或蓬莪術(shù)Curcuma phaeocaulisVal.的干燥塊根，功能活血止痛、行氣解郁、清心涼血、利膽退黃，用于胸脅刺痛、胸痹心痛、經(jīng)閉痛經(jīng)、乳房脹痛、熱病神昏、癲癇發(fā)狂、血熱吐衄、黃疸尿赤［4］208。郁金的化學成分主要有揮發(fā)性成分如倍半萜類、姜黃素、微量元素、多糖、谷甾醇等成分［11］，主要有抗癌、保肝、調(diào)血脂、抑菌、抗炎、抗血小板聚集、抗氧化、抗抑郁作用［12-13］。

柴胡為傘形科植物柴胡Bupleurum chineseDC.或狹葉柴胡Bupleurum scorzonerifoliumWilld.的干燥根，按性狀不同，分別習稱“北柴胡”“南柴胡”，功能疏散退熱、疏肝解郁、升舉陽氣，用于感冒發(fā)熱、寒熱往來、胸脅脹痛、月經(jīng)不調(diào)、子宮脫垂、脫肛［4］280-281，主要化學成分有皂苷、揮發(fā)油、黃酮、多糖、腺苷、氨基酸等［14］。藥理學研究發(fā)現(xiàn)，柴胡主要有抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、鎮(zhèn)靜、調(diào)血脂、保護胃黏膜、保肝、抗病毒作用［15］。

桑椹為?？浦参锷orus albaL.的干燥果穗，功能滋陰補血、生津潤燥，用于肝腎陰虛、眩暈耳鳴、心悸失眠、須發(fā)早白、津傷口渴、內(nèi)熱消渴、腸燥便秘［4］300，主要成分有蛋白質(zhì)、氨基酸、多糖、纖維、維生素、礦物質(zhì)等，具有免疫調(diào)節(jié)、促進造血干細胞生長、抗氧化、調(diào)血脂、保肝、降血糖、抗癌、促進新陳代謝、延緩衰老等藥理作用［16］。

大棗為鼠李科植物棗Ziziphus jujubaMill.的干燥成熟果實，功能補中益氣、養(yǎng)血安神、用于脾虛食少、乏力便溏、婦人臟躁［4］22-23，主要化學成分有三萜、皂苷、生物堿、黃酮、糖苷、核苷、糖類、蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、酰胺類、有機酸、甾體等［17］。大棗具有增強免疫、抑制腫瘤、抗氧化、保肝、抗過敏、抗疲勞等作用［18］。

酸棗仁為鼠李科植物酸棗Ziziphus jujubaMill.var.Spinosa（Bunge）Hu ex H.F.Chou 的干燥成熟種子，功能養(yǎng)心補肝、寧心安神、斂汗、生津，用于虛煩不眠、驚悸多夢、體虛多汗、津傷口渴［4］366-367，主要化學成分有皂苷、黃酮、三萜、生物堿、脂肪油、甾體、酚酸、多種氨基酸和微量元素等，具有鎮(zhèn)靜催眠、抗驚厥、抗焦慮、抗抑郁、抗應激性潰瘍、抗心律失常、抗心肌缺血、強心、防動脈粥樣硬化、調(diào)血脂、降壓、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗脂質(zhì)過氧化等藥理作用［19］。

甘草為豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensisFisch.，脹果甘草Glycyrrhiza inflataBat.或光果甘草Glycyrrhiza glabraL.的干燥根和根莖，功能補脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛、調(diào)和諸藥，用于脾胃虛弱、倦怠乏力、心悸氣短、咳嗽痰多、脘腹及四肢攣急疼痛、癰腫瘡毒，可緩解藥物毒性、烈性［4］86-87，主要化學成分有三萜（包括甘草酸和甘草次酸等）、生物堿、黃酮、多糖等，具有抗炎、降低膽固醇、抗病毒等藥理作用［20］。

3 生產(chǎn)工藝

3.1 提取工藝單因素試驗

參考文獻［21-22］確定了以浸泡時間、提取時間、提取次數(shù)、加水量為影響因素。按處方量（佛手100g，郁金90 g，酸棗仁 50 g，柴胡、桑椹、大棗各 45 g，甘草 25 g），稱取藥材，以浸泡時間、提取時間、提取次數(shù)、加水量為考察因素，煎煮藥材后的水提取液過濾，合并收集濾液，將濾液低溫濃縮至一定量，測定干膏得率和橙皮苷含量，初步確定了各因素的水平。

3.2 提取工藝優(yōu)化

單因素試驗無法反映出多個因素間相互作用的結(jié)果，可能對試驗結(jié)果造成較大影響，因此采用中心組合設計-響應面試驗法對提取時間和加水量2個重要因素進行進一步考察，綜合分析，確定了提取工藝的最優(yōu)條件并進行驗證。

3.3 澄清工藝研究

制備口服液的凈化過程中，須對提取液進行除雜，傳統(tǒng)方法如改變?nèi)軇O性的水提醇沉法、借助外力的超速離心法、膜分離技術(shù)的膜分離法、吸附技術(shù)的大孔樹脂吸附法等，各有的優(yōu)點和不足［23］。醇沉法使用的溶劑乙醇易揮發(fā)，有效成分易損失，成本高。超速離心法操作簡便、快速，但適用于除去泥沙或藥材細渣，無法除去水溶性雜質(zhì)。大孔樹脂吸附法的孔徑大小不同決定了保留化學成分有差異，且存在殘留問題至今尚未很好地解決。原工藝水煎液根據(jù)傳統(tǒng)煎劑的提取方法，采用L9（34）正交表進行試驗，以加水量、煎煮時間、煎煮次數(shù)作為考察因素，以干膏得率、橙皮苷含量為考察指標，篩選最優(yōu)提取方法［24］。原工藝去除雜質(zhì)分別采用了水提醇沉法和水提漢威斯特天然澄清劑澄清法。ZTC1+1Ⅲ型天然澄清劑屬新型食品加工助劑，采用了“1+1”澄清技術(shù)，具有高效、不影響有效成分、不需調(diào)整pH、不引入異味、不殘留、安全無毒、使用方便、熱穩(wěn)定性好、費用低廉的特點［25］。澄清工藝條件篩選采用正交試驗，以天然澄清劑2組分加入量比例、水提液溫度、放置時間為因素，以澄清度、沉降時間、過濾時間按（4∶3∶3）的權(quán)重比進行加權(quán)綜合評分作為評價指標。該除雜工藝有待優(yōu)化，下一步研究計劃將進行澄清工藝單因素試驗考察［26］。考察因素主要有：澄清劑2組分加入順序、澄清劑用量、藥液濃度、加入澄清劑時的溫度、攪拌速率、保溫時間及靜置時間。評價指標也可進一步改進，以橙皮苷保留率、固形物去除率、鞣質(zhì)去除率、蛋白質(zhì)去除率、澄明度得分按照不同權(quán)重分數(shù)得出綜合評分，其計算公式為：綜合評分＝橙皮苷保留率×20+固形物去除率×20+鞣質(zhì)去除率×20+蛋白質(zhì)去除率×20+澄明度得分 ×20。

4 質(zhì)量標準

組方中的佛手、柴胡為君藥，郁金、酸棗仁為臣藥，原質(zhì)量標準主要采用薄層色譜法對君藥佛手、臣藥郁金進行薄層定性鑒別；采用高效液相色譜法測定復方制劑中的橙皮苷含量，作為含量檢測的控制標準。研究發(fā)現(xiàn)，薄層色譜主斑點清晰、集中、分離效果好；橙皮苷檢測線性 范 圍 為 0.0416 8 ～0.416 8 μg，平 均 回 收 率 為98.11% ，RSD為 0.25%［27］。2015 年版《中國藥典 （一部）》推薦佛手橙皮苷含量測定流動相為甲醇-水-冰醋酸（33 ∶63 ∶2，V/V/V），但由于復方中藥制劑，提取的成分復雜，橙皮苷未能較好地與雜質(zhì)峰分離，故采用乙腈-4%醋酸溶液（15∶85，V/V），可達到基線分離，理論板數(shù)達4 000以上，重復性較好。該口服液的處方是7味中藥組成的復方制劑，化學成分復雜，在原質(zhì)量標準中將橙皮苷作為含量檢測的控制指標，質(zhì)量可控性較差，難以反映出復方佛手口服液的整體質(zhì)量，因此該質(zhì)量標準有待提高。下一步研究將在對佛手、郁金進行薄層定性鑒別的基礎上，增加2種君藥佛手、柴胡及2種臣藥郁金、酸棗仁的主成分含量測定進行，以對質(zhì)量控制標準進行補充。

5 臨床研究

早期進行的復方佛手口服液對比阿米替林治療抑郁癥的臨床研究［28］，實行分組對照研究，分別給予復方佛手口服液和阿米替林治療，療程為6周。采用漢密頓抑郁量表（HAMD）和Asberg氏抗抑郁劑副反應量表（SERS）進行療效和安全性評估。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩組療效指標顯效率、有效率、HAMD量表分值和減分率差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；安全性指標Asberg量表評分差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）?？梢?，復方佛手口服液治療抑郁癥療效良好，且安全性較好。