• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    明膠微球的制備及其在口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用*

    2019-01-04 23:23:12王德飛
    關(guān)鍵詞:明膠牙髓種植體

    王德飛 秦 爽 劉 紅

    微球(microspheres,MS)是一種將藥物分子包裹于高分子聚合物中以實(shí)現(xiàn)藥物長(zhǎng)時(shí)間平穩(wěn)釋放的緩釋藥物傳遞系統(tǒng),是粒徑尺寸大小分布在5~250μm 之間的球狀實(shí)體[1]。制備微球的材料有明膠、海藻酸鈉、聚乳酸(polylactide,PLA)、聚乳酸·羥基乙酸共聚物(poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA)等[2]。其中,明膠是應(yīng)用最廣泛的微球材料之一。明膠微球具有制備簡(jiǎn)便、價(jià)格低廉、載藥量高、分散性好、組織相容性好和生物可降解性等多種優(yōu)勢(shì)[3]。尤其在口腔頜面骨缺損的修復(fù)、種植修復(fù)、牙髓再生、牙周組織再生領(lǐng)域被用作載體時(shí),在提高生長(zhǎng)因子和藥物穩(wěn)定性、減緩?fù)会尩确矫嫒〉幂^為理想的效果。制備明膠微球的常用方法有乳化溶劑萃取法、相分離法、噴霧干燥法、膜乳化法[4]。

    1.制備方法

    1.1 乳化溶劑萃取法 乳化溶劑萃取法是制備微球應(yīng)用最廣泛的方法。首先將制備微球的材料在有機(jī)溶劑中溶解,形成油相;油相通過(guò)均勻化和超聲等物理方法在含有乳化劑的連續(xù)水相中乳化,溶劑萃取進(jìn)入水相,然后蒸發(fā)溶劑、過(guò)濾、洗滌和凍干得到微球。根據(jù)用于微球制備的乳化液數(shù)量,乳化溶劑萃取法可分為單乳溶劑萃取法和雙乳溶劑萃取法[5-8]。該方法主要優(yōu)點(diǎn)是不需要任何專門的設(shè)備可以在廣泛尺寸范圍內(nèi)批量生產(chǎn)微球,并且可選擇合適的溶劑將生物活性分子封裝在微球材料中,但是此方法的成本較高,難以控制微球的粒徑分布,水溶性生物活性分子(如蛋白質(zhì))的包封效率相對(duì)較低[4]。

    1.2 相分離法 將制備微球的材料溶解在溶劑中,然后將溶液通過(guò)注射器/針頭或壓電噴嘴滴加到液氮中,將溫度降至低于溶劑的冰點(diǎn)使相分離;通過(guò)升華或浸出去除溶劑,生成具有多孔形態(tài)特征的微球[9]。該制備方法簡(jiǎn)單可行,但易受溶液濃度和控制溫度的影響。

    1.3 噴霧干燥法 將制備微球的材料溶解于低沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑中,形成單相或多相的膠體;然后將溶液霧化、氮?dú)飧稍?,通過(guò)對(duì)干燥室進(jìn)出口溫度調(diào)整可以制備不同形態(tài)的微球[10]。一般情況下,噴霧干燥法制備的微球受工藝參數(shù)的影響很大,其粒徑和產(chǎn)率主要受聚合物濃度和泵速的影響[11]。

    1.4 膜乳化法 以聚乙烯醇和十二烷基硫酸鈉為連續(xù)相,將制備微球的材料溶于二氯甲烷成為分散相,通過(guò)施加氮?dú)鈮毫π纬删鶆蛞旱危蝗缓笸ㄟ^(guò)微攪拌的連續(xù)相流動(dòng)分離出液滴形成O/W 乳液;最后蒸發(fā)二氯甲烷、液滴凝固,獲得均勻的微球。膜乳化過(guò)程中獲得均勻液滴的關(guān)鍵是分散相與親水性膜之間高的界面張力,否則液滴會(huì)在膜上擴(kuò)散,難以自發(fā)分離。膜乳化法的最大優(yōu)點(diǎn)是獲得高包封率的均勻微球,并可通過(guò)選擇微球尺寸來(lái)調(diào)控微球的釋放行為,而且溫和的制備條件可以保持蛋白質(zhì)/肽類藥物的生物活性[12]。

    明膠微球具有優(yōu)良的性能及多樣化的制備方法,為其在口腔領(lǐng)域的應(yīng)用提供了條件。下面,就目前利用不同方法制備的明膠微球在口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用進(jìn)行闡述。

    2.應(yīng)用

    2.1 口腔頜面外科領(lǐng)域應(yīng)用 針對(duì)頜骨的骨缺損,以往多采用全身性的藥物治療,但全身用藥常伴隨一定的并發(fā)癥,因此可以考慮局部應(yīng)用促進(jìn)成骨的各類生長(zhǎng)因子對(duì)其進(jìn)行治療。

    降鈣素基因相關(guān)肽(Calcitonin gene related peptide,CGRP)對(duì)局部調(diào)控骨代謝起著重要作用,不僅可以促進(jìn)成骨細(xì)胞中環(huán)磷酸腺苷的形成,刺激骨髓干細(xì)胞有絲分裂和間充質(zhì)細(xì)胞的分化,而且能通過(guò)與破骨細(xì)胞的降鈣素受體結(jié)合來(lái)抑制破骨細(xì)胞的骨吸收活性[13]。劉偉等[14]利用乳化交聯(lián)的方法制備負(fù)載不同濃度的CGRP 的明膠緩釋微球,并將其植入骨質(zhì)疏松兔的股骨缺損中。組織學(xué)顯示CGRP在濃度為10-6mol/L 時(shí)其新生骨組織比例最高。最終結(jié)果證明負(fù)載CGRP 的明膠緩微球的緩釋時(shí)間可達(dá)20 天且有效地促進(jìn)骨質(zhì)疏松兔骨質(zhì)缺損區(qū)的成骨。

    類胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(insulin-like growth factors-1,IGF-1)可明顯提高生物材料的生物活性,促進(jìn)有絲分裂,刺激成骨細(xì)胞的增殖及膠原合成,促進(jìn)骨折的愈合,且有時(shí)間和劑量依賴性[15]。落全祥等[16]用乳化交聯(lián)法制備IGF-1/明膠微球復(fù)合物,平均粒徑為(20.33±3.67)um,將其置于兔下頜骨缺損處以作為實(shí)驗(yàn)組。對(duì)照組植入空白明膠微球(GMs)。從血清學(xué)方面觀察其對(duì)兔下頜骨缺損修復(fù)的影響。研究表明IGF-1/GMs12 天時(shí)IGF-1累計(jì)釋放率達(dá)93%,能促進(jìn)頜骨缺損早期愈合。

    乳鐵蛋白作為一種新型的骨生長(zhǎng)因子,通過(guò)調(diào)節(jié)骨的生長(zhǎng)和代謝過(guò)程發(fā)揮功能,促進(jìn)骨骼生長(zhǎng)。Ulas,G?rmez 等[17]用乳化交聯(lián)法制備加載牛乳鐵蛋白(bovine lactoferrin,bLF)的明膠微球,觀察其與有機(jī)牛骨結(jié)合后在骨骼再生上的作用。結(jié)果表明明膠微球作為載體24 天內(nèi)釋放了約3mgbLF,有利于發(fā)揮bLF 促進(jìn)成骨細(xì)胞活性的作用,并且通過(guò)增加微球的交聯(lián)密度,可以將bLF 釋放的持續(xù)時(shí)間從幾個(gè)小時(shí)延長(zhǎng)至幾周。

    2.2 種植、修復(fù)領(lǐng)域應(yīng)用 口腔種植領(lǐng)域最新研究熱點(diǎn)主要是如何改進(jìn)種植體表面處理方式在達(dá)到促進(jìn)早期骨結(jié)合目的的同時(shí),降低種植體周圍感染的發(fā)生。鈦及其合金材料由于具有良好的生物相容性和機(jī)械性能,現(xiàn)已廣泛用于牙植入體、骨科及整形外科等領(lǐng)域。盡管鈦基植入材料具有優(yōu)良的性能,但其存在的骨整合性差和細(xì)菌感染問(wèn)題,往往會(huì)導(dǎo)致臨床植入手術(shù)的失敗。

    有資料顯示,電泳沉積是一種利用溶劑中帶電粒子或分子在基片材料表面聚集的處理技術(shù),廣泛適用于處理生物分子和生物實(shí)體的表面[18]。電泳沉積技術(shù)因其成本相對(duì)低廉、所需設(shè)備簡(jiǎn)單、能在室溫和高純度條件下對(duì)材料進(jìn)行加工,以及能夠產(chǎn)生大范圍的涂層厚度和包覆復(fù)雜的三維和多孔結(jié)構(gòu)等優(yōu)點(diǎn),在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域引起了越來(lái)越多的關(guān)注[19]。研究顯示通過(guò)電泳沉積技術(shù)在鈦表面成功地制備的殼聚糖/明膠涂層,為進(jìn)一步負(fù)載功能性分子提供了基礎(chǔ)[20]。

    研究證明骨保護(hù)素(osteoclastogenesis inhibitory factor,OPG)可以有效預(yù)防骨吸收[21]。基質(zhì)細(xì)胞衍生因子(SDF-1)/基質(zhì)細(xì)胞衍生因子受體(CXCR4)被證實(shí)參與組織再生和器官形成,越來(lái)越多的證據(jù)表明SDF 對(duì)于牙齒以及骨骼的組織再生或修復(fù)起著不可或缺的作用[22]。馬瑞[23]采用振蕩滲涂交聯(lián)法將雙層包載重組人骨形成蛋白-2(Recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)/SDF-1/OPG 明膠微球交聯(lián)于純鈦微弧氧化涂層的微孔中,成功制備出新型功能性涂層。研究顯示:新型功能性涂層不僅表面形貌良好,pH 值在7.4 時(shí)30 天內(nèi)三種因子釋藥率可達(dá)80%,并且具有一定的促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞募集歸巢、促進(jìn)其向成骨分化的能力以及一定的抑制破骨細(xì)胞分化成熟的作用。

    種植體周圍炎對(duì)種植體的長(zhǎng)期穩(wěn)定產(chǎn)生很大的影響,會(huì)引起骨吸收甚至種植失敗[24]。研究表明種植體周圍炎的發(fā)病率高達(dá)47%[25]。牙周炎患者較牙周健康人群對(duì)種植體周圍炎有著更高的易感性,研究表明有牙周炎病史的患者相較于牙周健康患者,種植后長(zhǎng)期效果不佳,表現(xiàn)為探診深度更大,邊緣骨吸收嚴(yán)重,以及種植體周圍炎發(fā)生的可能性增加[26]。Lu han[27]等制備了負(fù)載骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(bone morphogenetic protein2,BMP-2)和萬(wàn)古霉素(Van)的GMs-GO/Ti 支架緩釋系統(tǒng)。研究表明Van 在GMs-GO/Ti 支架上表現(xiàn)為緩釋,21d 后釋放率為63.4±3.4%;純Ti 支架中BMP 2 的釋放速率高于GMs-GO/Ti 支架材料的BMP-2 釋放速率。用GMs 分別包封小分子藥物和蛋白質(zhì),可以使藥物和蛋白質(zhì)得到有效的釋放。利用了GMs 的高承載能力和GO 的高比表面積,賦予支架具有骨誘導(dǎo)和抗菌雙重功能,滿足骨組織再生的要求。

    2.3 牙體牙髓領(lǐng)域的應(yīng)用 再生牙髓學(xué)的目標(biāo)是實(shí)現(xiàn)牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體的再生。牙髓干細(xì)胞在牙體組織再生過(guò)程中具有巨大的潛在價(jià)值[28]。

    骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)被認(rèn)為在牙源性分化中扮演著重要的角色。Srisuwan T[29]建立了一個(gè)研究牙髓干細(xì)胞(Dental pulp stem cells,DPSCs)存活和生成牙髓組織潛能的體內(nèi)模型。將DPSCs 與含或不含緩釋骨形態(tài)發(fā)生蛋白-4(BMP-4)和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2(fibroblast growth factor-2,F(xiàn)GF-2)的明膠微球混合。明膠微球的孔隙率為94.24±0.52%,表觀密度為94.24±0.52%。30 天內(nèi)累計(jì)緩釋率達(dá)90%。細(xì)胞懸液被移植到大鼠腹股溝帶血管蒂的組織工程室,2 周后,觀察到腔內(nèi)新生組織和新生血管的形成。在牙本質(zhì)周圍,特別是血管蒂周圍和明膠微球附近發(fā)現(xiàn)DPSCs。移植8 周后細(xì)胞存活。牙本質(zhì)涎磷蛋白陽(yáng)性基質(zhì)的產(chǎn)生,顯示出牙髓祖細(xì)胞的再生功能。本研究證明了該組織工程模型在研究大鼠牙髓細(xì)胞及其在牙髓再生方面的潛力,為利用這一技術(shù)尋找替代療法提供了可能。

    全根管牙組織再生一直是再生牙髓學(xué)領(lǐng)域面臨的最大挑戰(zhàn)之一,也是其臨床應(yīng)用的最大障礙之一。Li X 等[30]設(shè)計(jì)并合成了一個(gè)獨(dú)持的層次化負(fù)載生長(zhǎng)因子的納米纖維微球支架系統(tǒng)。在該體系中,血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)與肝素結(jié)合,被包裹在肝素偶聯(lián)的明膠納米球中,并在可注射左旋聚乳酸(poly(Llactide),PLLA)微球的納米纖維中進(jìn)一步固定。這種分層微球系統(tǒng)不僅可以避免VEGF 變性和加速降解,而且可以很好地控制其持續(xù)釋放。此外,納米纖維PLLA 微球融合了細(xì)胞外基質(zhì)模擬結(jié)構(gòu)和多孔注射形式,有效容納DPSCs,支持其增殖和牙髓組織形成。體內(nèi)研究顯示,髓樣組織在整個(gè)根尖和根中三分之一成功再生,并達(dá)到了全根管冠方三分之一。

    2.4 牙周領(lǐng)域應(yīng)用 牙周組織工程是本世紀(jì)初提出的一種基于分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的牙周再生新范式。實(shí)現(xiàn)牙周再生是治療晚期牙周炎所致牙周缺損的重要臨床目標(biāo)。牙周再生是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,涉及到各種細(xì)胞類型的分化,并在正確的位置和環(huán)境中產(chǎn)生足夠數(shù)量的細(xì)胞[31]。生長(zhǎng)因子通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、細(xì)胞活性、趨化性和細(xì)胞分化促進(jìn)牙周膜內(nèi)某些細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化[32]。從理論上講,生長(zhǎng)因子通過(guò)激活和分化所需的細(xì)胞類型,可以使牙周組織再生。生長(zhǎng)因子是一種內(nèi)源性信號(hào)分子,可調(diào)節(jié)細(xì)胞在機(jī)體修復(fù)過(guò)程中的遷移、增殖和分化。但是其存在穩(wěn)定性差、體內(nèi)半衰期短等缺點(diǎn)[33]。如何使生長(zhǎng)因子持續(xù)、高效釋放以促進(jìn)種子細(xì)胞定向分化和維持細(xì)胞表型是當(dāng)前面臨的關(guān)鍵性問(wèn)題之一[34]。Nakahara T[35]等以膠原海綿支架和含有堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)的明膠微球組成的夾心膜作為緩釋系統(tǒng)植入到比格犬雙側(cè)牙槽骨缺損處,研究表明:明膠微球作為bFGF 載體起著重要的作用。在其植入后4 周內(nèi)維持穩(wěn)定的bFGF的釋放,牙周組織內(nèi)有大量毛細(xì)血管增生和新生骨形成。

    3.展望

    明膠微球含有許多化學(xué)官能團(tuán),包括羧基、硫醇、羥基和氨基,對(duì)生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子具有較高的負(fù)載能力。除蛋白質(zhì)外,GMs 還能包封小分子藥物,如萬(wàn)古霉素、多索紅霉素和雙氯芬酸鈉。由于其優(yōu)異的生物相容性、低毒和大劑量的承載能力,已顯示出作為化學(xué)藥物和基因運(yùn)載載體的潛在應(yīng)用前景;另外多孔明膠微球密度低,比表面面積大,吸收性能好,在組織再生支架的研制中有著廣泛的應(yīng)用前景[36]。雖然制備具有預(yù)定義孔隙率的明膠微球仍有很大的挑戰(zhàn)性[37]。但隨著明膠微球制備方法的不斷改進(jìn)和創(chuàng)新,其在口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。

    猜你喜歡
    明膠牙髓種植體
    翼突種植體植入術(shù)的研究進(jìn)展
    CBCT在牙體牙髓病診治中的臨床應(yīng)用
    微種植體與J鉤內(nèi)收上前牙后的切牙位置變化比較
    Biodentine在牙體牙髓病治療中的研究進(jìn)展
    牙髓牙周聯(lián)合治療逆行性牙髓炎的效果
    短種植體在上頜后牙缺失區(qū)的應(yīng)用分析
    牙周牙髓綜合征92例的綜合治療
    種植體周圍炎齦溝液中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-6的表達(dá)及臨床意義
    超高壓明膠理化性質(zhì)分析
    復(fù)凝法制備明膠微球
    河南科技(2014年22期)2014-02-27 14:18:07
    秋霞在线观看毛片| 亚洲成色77777| 久久午夜福利片| 久久av网站| 国模一区二区三区四区视频| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲精品456在线播放app| 欧美精品国产亚洲| 欧美日韩综合久久久久久| 纯流量卡能插随身wifi吗| 亚洲国产最新在线播放| 日本黄大片高清| 久久人人爽人人片av| 精品久久久久久电影网| 中文字幕人妻丝袜制服| 青春草视频在线免费观看| 欧美日韩av久久| 七月丁香在线播放| 成人综合一区亚洲| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 成人国产麻豆网| videosex国产| 久久久国产欧美日韩av| 一本一本综合久久| 热re99久久国产66热| 久久婷婷青草| 久久人人爽人人爽人人片va| freevideosex欧美| 亚洲经典国产精华液单| 一个人免费看片子| 91精品国产国语对白视频| 亚洲av成人精品一二三区| 成人毛片60女人毛片免费| 三级国产精品欧美在线观看| 黑丝袜美女国产一区| 新久久久久国产一级毛片| 蜜桃国产av成人99| a级毛片免费高清观看在线播放| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 男女免费视频国产| 自线自在国产av| 婷婷色综合www| av福利片在线| 一级毛片aaaaaa免费看小| 亚洲精品一区蜜桃| 内地一区二区视频在线| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 在线免费观看不下载黄p国产| 香蕉精品网在线| 国产精品蜜桃在线观看| 美女视频免费永久观看网站| 免费日韩欧美在线观看| 欧美日韩视频精品一区| 国产精品久久久久久精品古装| 久久久久视频综合| 成人免费观看视频高清| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 丰满乱子伦码专区| 99热网站在线观看| 欧美精品一区二区大全| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 欧美成人午夜免费资源| 老司机影院成人| av国产精品久久久久影院| 在线观看三级黄色| 中国三级夫妇交换| 精品国产一区二区久久| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲中文av在线| 亚洲人成网站在线观看播放| 乱人伦中国视频| 999精品在线视频| 最近2019中文字幕mv第一页| 黑人欧美特级aaaaaa片| 97在线视频观看| xxx大片免费视频| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲国产精品专区欧美| 成人国语在线视频| 午夜日本视频在线| 精品酒店卫生间| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 成人国语在线视频| 日本与韩国留学比较| 全区人妻精品视频| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久久国产欧美日韩av| videos熟女内射| av在线app专区| 男女无遮挡免费网站观看| 91成人精品电影| 国产深夜福利视频在线观看| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 日韩,欧美,国产一区二区三区| 亚洲少妇的诱惑av| 欧美 日韩 精品 国产| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产色爽女视频免费观看| 九九爱精品视频在线观看| 高清毛片免费看| 国产在视频线精品| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲少妇的诱惑av| 特大巨黑吊av在线直播| 如何舔出高潮| 性色av一级| 精品少妇内射三级| 丰满乱子伦码专区| 男女边吃奶边做爰视频| 一级片'在线观看视频| 26uuu在线亚洲综合色| 91国产中文字幕| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 久久久国产精品麻豆| 十八禁高潮呻吟视频| av线在线观看网站| 国产精品一二三区在线看| 久久韩国三级中文字幕| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 老熟女久久久| 午夜激情av网站| 热99国产精品久久久久久7| 99久国产av精品国产电影| 日日爽夜夜爽网站| 91久久精品国产一区二区三区| 国产男人的电影天堂91| 少妇人妻久久综合中文| 亚洲熟女精品中文字幕| 欧美精品一区二区大全| 国产免费又黄又爽又色| 插阴视频在线观看视频| 青青草视频在线视频观看| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| .国产精品久久| 亚洲第一av免费看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 日日啪夜夜爽| 美女福利国产在线| 只有这里有精品99| 最近中文字幕2019免费版| 三上悠亚av全集在线观看| 午夜福利影视在线免费观看| xxxhd国产人妻xxx| 国产成人精品婷婷| 一级毛片 在线播放| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 亚洲欧洲日产国产| 亚洲av成人精品一二三区| 亚洲一区二区三区欧美精品| 永久免费av网站大全| 国产成人精品久久久久久| 高清视频免费观看一区二区| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲精品第二区| 在线观看美女被高潮喷水网站| 美女国产视频在线观看| 全区人妻精品视频| 热99久久久久精品小说推荐| 18禁观看日本| av黄色大香蕉| 国产亚洲一区二区精品| 国产高清有码在线观看视频| 高清av免费在线| 一本色道久久久久久精品综合| 日韩制服骚丝袜av| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | av国产精品久久久久影院| 亚洲精品国产色婷婷电影| 久久久久视频综合| 一级毛片 在线播放| 最黄视频免费看| 成人国产麻豆网| 久久99精品国语久久久| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 在线播放无遮挡| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 亚洲国产日韩一区二区| 久久久久久久久久成人| 免费观看在线日韩| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产日韩欧美在线精品| 日本91视频免费播放| 亚洲精品中文字幕在线视频| 插阴视频在线观看视频| 国产一区二区在线观看av| 国产精品 国内视频| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 免费观看性生交大片5| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 黑丝袜美女国产一区| 免费高清在线观看日韩| 免费大片黄手机在线观看| 另类亚洲欧美激情| 午夜免费观看性视频| 国产成人午夜福利电影在线观看| 欧美激情国产日韩精品一区| 久热这里只有精品99| 久热这里只有精品99| 国产不卡av网站在线观看| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 婷婷色综合大香蕉| 日本-黄色视频高清免费观看| 亚洲成人av在线免费| kizo精华| 国产成人精品一,二区| 亚洲精品久久成人aⅴ小说 | 熟女av电影| 欧美变态另类bdsm刘玥| 99国产精品免费福利视频| 久久鲁丝午夜福利片| 国产熟女欧美一区二区| 久久久精品区二区三区| 高清视频免费观看一区二区| 在线观看免费日韩欧美大片 | 久久久精品94久久精品| 亚洲人与动物交配视频| 在线观看一区二区三区激情| 久久99热这里只频精品6学生| 成人影院久久| 毛片一级片免费看久久久久| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 免费观看在线日韩| 天堂中文最新版在线下载| 黄色配什么色好看| 一个人看视频在线观看www免费| 日韩欧美一区视频在线观看| 日本91视频免费播放| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 尾随美女入室| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产日韩欧美亚洲二区| 飞空精品影院首页| 精品久久久噜噜| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 久久人人爽人人片av| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 在线免费观看不下载黄p国产| 97在线视频观看| 曰老女人黄片| 熟女人妻精品中文字幕| 国产高清有码在线观看视频| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 久久免费观看电影| 久久女婷五月综合色啪小说| 国产男人的电影天堂91| av免费在线看不卡| 国产精品一区二区在线不卡| av在线播放精品| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 中国三级夫妇交换| 久久精品国产亚洲网站| 一区二区日韩欧美中文字幕 | 久久女婷五月综合色啪小说| 18+在线观看网站| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 在线观看免费视频网站a站| 高清午夜精品一区二区三区| 亚洲国产av新网站| 男人操女人黄网站| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲精品一区蜜桃| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 最新的欧美精品一区二区| 美女国产视频在线观看| 99久久精品一区二区三区| 99九九线精品视频在线观看视频| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲av福利一区| 日韩一区二区三区影片| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 久久久久久人妻| 婷婷色综合大香蕉| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 嫩草影院入口| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 久久久久久久久久久丰满| 国产片内射在线| 在线看a的网站| 亚洲四区av| 高清av免费在线| 各种免费的搞黄视频| 国产精品人妻久久久影院| 久久韩国三级中文字幕| 在线精品无人区一区二区三| 欧美性感艳星| 99国产综合亚洲精品| 97精品久久久久久久久久精品| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产不卡av网站在线观看| 777米奇影视久久| 国产成人精品无人区| 嘟嘟电影网在线观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 免费av不卡在线播放| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 免费高清在线观看视频在线观看| 一级毛片 在线播放| 久久久久久久亚洲中文字幕| av视频免费观看在线观看| 成年人免费黄色播放视频| 熟女电影av网| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 久久精品人人爽人人爽视色| 女人精品久久久久毛片| 丝袜脚勾引网站| 在线观看免费视频网站a站| 国产 精品1| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 黄色欧美视频在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 99热网站在线观看| 久久精品国产亚洲网站| 欧美一级a爱片免费观看看| 欧美bdsm另类| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 男女国产视频网站| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲精品美女久久av网站| 国产av精品麻豆| xxxhd国产人妻xxx| 高清欧美精品videossex| 欧美三级亚洲精品| 色吧在线观看| 女人精品久久久久毛片| 国产免费一区二区三区四区乱码| 春色校园在线视频观看| 美女中出高潮动态图| 视频在线观看一区二区三区| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 午夜久久久在线观看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 婷婷色av中文字幕| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 秋霞在线观看毛片| 精品人妻偷拍中文字幕| 最黄视频免费看| 免费观看无遮挡的男女| 999精品在线视频| 日本欧美视频一区| 伦理电影大哥的女人| 午夜福利网站1000一区二区三区| www.色视频.com| av在线播放精品| 韩国av在线不卡| 久久久a久久爽久久v久久| 五月开心婷婷网| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 亚洲精品中文字幕在线视频| 少妇的逼水好多| 欧美三级亚洲精品| 午夜激情久久久久久久| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 成人免费观看视频高清| 满18在线观看网站| 久久久久久久久大av| 午夜91福利影院| 丁香六月天网| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲国产av新网站| 青春草亚洲视频在线观看| 丝袜美足系列| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 少妇被粗大猛烈的视频| 国产成人91sexporn| 我的女老师完整版在线观看| 国产成人91sexporn| 精品久久国产蜜桃| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 亚洲精品第二区| 成人综合一区亚洲| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲av欧美aⅴ国产| 我的女老师完整版在线观看| 最近中文字幕高清免费大全6| a级毛片黄视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲国产日韩一区二区| 久久热精品热| 最近最新中文字幕免费大全7| 日本爱情动作片www.在线观看| 欧美精品亚洲一区二区| 国产 精品1| 精品人妻一区二区三区麻豆| 高清视频免费观看一区二区| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 一区二区三区免费毛片| 国产精品熟女久久久久浪| 晚上一个人看的免费电影| 国产日韩欧美亚洲二区| 91成人精品电影| av在线app专区| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产亚洲精品久久久com| 免费观看的影片在线观看| 日韩免费高清中文字幕av| 国产黄色视频一区二区在线观看| 国产精品久久久久久精品古装| 另类精品久久| 国产精品久久久久久精品古装| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产 精品1| 青春草国产在线视频| 99热这里只有精品一区| 免费黄频网站在线观看国产| 97在线人人人人妻| videos熟女内射| 极品少妇高潮喷水抽搐| 久久99热6这里只有精品| 欧美丝袜亚洲另类| 亚洲精品456在线播放app| 高清毛片免费看| 国产日韩欧美亚洲二区| 老女人水多毛片| 18+在线观看网站| 欧美精品一区二区大全| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 亚洲精品日韩av片在线观看| av天堂久久9| 一本一本综合久久| 国产在线一区二区三区精| 欧美+日韩+精品| 亚洲av欧美aⅴ国产| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 亚洲国产色片| 秋霞伦理黄片| av福利片在线| 亚洲国产精品一区三区| 婷婷成人精品国产| 久久热精品热| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲精品国产av蜜桃| 伦理电影大哥的女人| 亚洲av.av天堂| 婷婷色综合www| 免费看不卡的av| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产精品国产av在线观看| 日韩一本色道免费dvd| 国产片内射在线| 亚洲av综合色区一区| 国产成人一区二区在线| 精品国产一区二区久久| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 日本欧美视频一区| 大话2 男鬼变身卡| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 免费观看的影片在线观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 两个人的视频大全免费| 午夜激情久久久久久久| 一本一本综合久久| 少妇 在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 五月天丁香电影| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 男女边吃奶边做爰视频| 久久午夜福利片| 成年av动漫网址| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 亚洲内射少妇av| 少妇人妻精品综合一区二区| 午夜免费男女啪啪视频观看| 日韩av在线免费看完整版不卡| 久久ye,这里只有精品| 在线免费观看不下载黄p国产| av专区在线播放| 日韩av不卡免费在线播放| 天堂8中文在线网| 国产精品久久久久久久久免| 777米奇影视久久| 美女cb高潮喷水在线观看| 亚洲第一av免费看| 欧美三级亚洲精品| 日韩中文字幕视频在线看片| 五月天丁香电影| 考比视频在线观看| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 三上悠亚av全集在线观看| 99久久综合免费| 久久精品国产a三级三级三级| 欧美精品一区二区免费开放| av国产精品久久久久影院| 欧美xxxx性猛交bbbb| 日本黄色日本黄色录像| 国产精品人妻久久久影院| 国产乱来视频区| 少妇被粗大的猛进出69影院 | av在线老鸭窝| 国产精品不卡视频一区二区| 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲欧洲国产日韩| 国产成人av激情在线播放 | av卡一久久| 免费看光身美女| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产视频首页在线观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 欧美另类一区| 少妇熟女欧美另类| 亚洲精品美女久久av网站| av在线观看视频网站免费| 色视频在线一区二区三区| 十八禁高潮呻吟视频| 欧美xxⅹ黑人| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产视频内射| 欧美人与善性xxx| 最新中文字幕久久久久| 日本av手机在线免费观看| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲国产成人一精品久久久| 91aial.com中文字幕在线观看| av女优亚洲男人天堂| 色网站视频免费| 天美传媒精品一区二区| 人妻一区二区av| 青春草亚洲视频在线观看| 久久狼人影院| 97在线视频观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| av一本久久久久| 亚洲在久久综合| 9色porny在线观看| 久久亚洲国产成人精品v| 国产精品女同一区二区软件| 久久亚洲国产成人精品v| 免费av中文字幕在线| 日韩欧美一区视频在线观看| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 熟妇人妻不卡中文字幕| 人人妻人人澡人人看| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产色婷婷99| 国产精品免费大片| 久久久国产欧美日韩av| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲精品久久成人aⅴ小说 | 国产成人aa在线观看| 日韩av不卡免费在线播放| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲精品日韩av片在线观看| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲av成人精品一二三区| 午夜福利视频在线观看免费| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 久久狼人影院| 国产视频首页在线观看| 日韩成人伦理影院| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 99九九在线精品视频| 国产免费福利视频在线观看| 下体分泌物呈黄色| 18在线观看网站| 国产视频内射| 99热国产这里只有精品6| 乱人伦中国视频| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 男女边吃奶边做爰视频| 一级毛片aaaaaa免费看小| 久久ye,这里只有精品| 亚洲精品美女久久av网站| 国产成人a∨麻豆精品| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 免费看av在线观看网站| 久久久久精品久久久久真实原创| 十八禁高潮呻吟视频| 一级片'在线观看视频| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 国产黄片视频在线免费观看| 国产精品.久久久| 热99国产精品久久久久久7| freevideosex欧美| 三上悠亚av全集在线观看| 最近最新中文字幕免费大全7| 日韩一区二区视频免费看| av天堂久久9| 黄色一级大片看看| 最近手机中文字幕大全| 久久热精品热| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 少妇人妻 视频| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 黄片播放在线免费| 伦理电影大哥的女人| 国内精品宾馆在线| 免费高清在线观看视频在线观看| 婷婷色av中文字幕| 草草在线视频免费看| 男女无遮挡免费网站观看| 成人漫画全彩无遮挡| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 丰满少妇做爰视频| 久久免费观看电影| 中文字幕制服av|