吳睿智,李培培,邢江盼,王曉丹,宮新城
(河北農(nóng)業(yè)大學(xué)中獸醫(yī)學(xué)院,河北 保定 071001)
家兔夏季繁殖性能低下,被誤認(rèn)為是一種正常的生理習(xí)性,現(xiàn)在研究發(fā)現(xiàn),造成這種情況的原因主要是夏季氣溫升高導(dǎo)致的公兔精液品質(zhì)降低。使用激素類藥物可以短時(shí)間內(nèi)改善家兔性欲,但對于精子的產(chǎn)生、成熟效果不大。中藥飼料添加劑無有害殘留、耐藥性小、毒副作用小等天然優(yōu)點(diǎn),利用中藥飼料添加劑生態(tài)養(yǎng)兔具有較高的經(jīng)濟(jì)效益和發(fā)展前景。為改善夏季公兔繁殖能力低下的情況,試驗(yàn)選用滋陰助陽、健脾消暑的中藥組成方劑“消暑促精散”,加入兔日糧中,研究其對公兔精液品質(zhì)及睪丸、附睪的影響。
1.1 藥品 五味子、菟絲子、枸杞子、車前子、覆盆子、黨參、黃芩、淫羊藿、白術(shù)、廣藿香,購自河北省萬國藥房,粉碎備用。
1.2 試驗(yàn)器材 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(alit001艾利特國際貿(mào)易有限公司)。獸用血細(xì)胞分析儀(KT6280,南京普朗醫(yī)療設(shè)備有限公司)。自制假陰道采精器。1 mL注射器、蓋玻片、載玻片、擦鏡紙等從保定試劑公司購買。
1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組飼養(yǎng) 新西蘭成年種公兔24只、母兔5只,體重約3.0 kg,購自河北農(nóng)業(yè)大學(xué)兔場,全價(jià)飼料飼養(yǎng)5 d后,將公兔隨機(jī)分為對照組和試驗(yàn)組,每組12只。試驗(yàn)組每天飼喂中藥4.4 g/只,全價(jià)飼料正常飼喂;對照組及母兔飼喂全價(jià)飼料。
1.4 消暑促精散對公兔繁殖能力的影響 公兔每3 d采精1次,并觀察記錄爬跨情況、檢測精液品質(zhì);試驗(yàn)第30天測量體溫。試驗(yàn)35天剖殺所有公兔,取睪丸、附睪制備切片鏡檢。
2.1 氣溫記錄 夏季氣候炎熱,試驗(yàn)時(shí)間為7月31日至9月3日。試期間最高氣溫為8月3日,34℃,每日最高溫度平均為30℃。
2.2 公兔爬跨情況 夏季氣溫升高,公兔性欲下降,使用“消暑促精散”后,各組公兔每3 d觀察并記錄1次爬跨情況。如表1所示,試驗(yàn)組有爬跨行為的公兔數(shù)量明顯升高,為(8.46±1.16)只/d,與對照組相比差異顯著(P<0.05)。
2.3 公兔采精量情況 試驗(yàn)開始后,每3 d采精1次,并記錄采精量。如表2所示,試驗(yàn)組公兔采精量為0.79±0.16 mL,與對照組相比差異顯著(P<0.05)。
表1 消暑促精散對公兔爬跨行為的影響
表2 采精量變化
2.4 各組公兔精液品質(zhì)情況 采精后,測定各組精子總數(shù)、精子密度、存活率和畸形率。如表3所示,試驗(yàn)組公兔精子總數(shù)升高為(1 858.31±461.25)個(gè)/20 uL,精子密度升高為(2.0581±0.42)107/mL,精子畸形率降為(29.12±0.0784)%,與對照組相比差異顯著(P<0.05)。給藥組精子存活率上升,為(27.78±0.0411)%,與對照組并無顯著差異。
表3 公兔精液品質(zhì)情況
2.5 各組公兔體溫情況 在試驗(yàn)第30天測定兩組公兔的體溫情況,如表4所示,結(jié)果顯示試驗(yàn)組公兔體溫為(38.24±0.39)℃,與對照組無顯著差異。由此可知,消暑促精散不會(huì)對公兔體溫產(chǎn)生較大影響。
表4 公兔體溫變化
2.6 公兔睪丸組織切片 睪丸是精子的生成部位。曲精小管內(nèi)含有不同發(fā)育階段的生精細(xì)胞和支持細(xì)胞等。給藥組使用消暑促精散后,睪丸組織與對照組發(fā)生變化。如中插彩版圖1所示,給藥組睪丸縱隔結(jié)構(gòu)清晰,曲細(xì)精管間質(zhì)排列緊密,基膜與管壁完整,管腔中可見游離的精子。而對照組曲細(xì)精管管腔擴(kuò)張,生精細(xì)胞分布較疏松,管腔內(nèi)游離精子量少于給藥組。
2.7 公兔附睪組織切片 睪丸生成的精子儲(chǔ)存在附睪中,由附睪組織切片可見,給藥組附睪管腔內(nèi)胞質(zhì)飽滿,精子較多,偶見生精細(xì)胞。對照組附睪主細(xì)胞胞質(zhì)疏松明顯,胞內(nèi)空泡化程度較大,附睪管腔內(nèi)精子明顯少于給藥組。在40×物鏡下觀察,見中插彩版圖2。利用ImageJ軟件,計(jì)算得給藥組儲(chǔ)精面積為(40 464.78 ±362.49)μm,而對照組中儲(chǔ)精面積為(4 627.07 ±413.29)μm,差異顯著(P <0.05)。
研究表明,夏季高溫會(huì)影響公兔的精液品質(zhì),使精液量減少,精子密度降低,精子畸形率增加[1],但是到目前為止,可以解決這一問題的中藥飼料添加劑仍有待開發(fā)。為提高夏季公兔繁殖能力,本試驗(yàn)采用中藥飼料添加劑“消暑促精散”,以補(bǔ)腎益精的古方“五子衍宗丸”(由五味子、菟絲子、枸杞子、車前子、覆盆子組成)為基礎(chǔ),添加黨參、白術(shù)、淫羊藿、廣藿香、黃芩,共計(jì)10味藥材。其中黨參可補(bǔ)氣養(yǎng)血;白術(shù)健脾;淫羊藿可補(bǔ)腎陽,強(qiáng)筋骨;廣藿香可芳香化濕,和中解暑;黃芩可清熱燥濕,使用“消暑促精散”可對公兔夏季繁殖能力產(chǎn)生促進(jìn)作用。試驗(yàn)結(jié)果顯示,試驗(yàn)組公兔爬跨行為明顯增強(qiáng),采精量明顯增高,公兔精液品質(zhì)上升,公兔體溫維持正常水平,睪丸生精能力增強(qiáng),附睪儲(chǔ)精面積增大,由此可見,中藥飼料添加劑“消暑促精散”確實(shí)可以對公兔夏季繁殖能力產(chǎn)生促進(jìn)作用。
研究“五子衍宗丸”對公兔夏季繁殖能力的試驗(yàn)[2]中,藥物確實(shí)可以提高公兔繁殖能力,但給藥的公兔體溫普遍升高。而此次試驗(yàn)中,使用“消暑促精散”的公兔體溫正常,且繁殖能力增強(qiáng)。公兔體溫的維持可能與組方中含有的黃芩和廣藿香有關(guān),黃芩有清熱燥濕的功效,黃芩苷可通過抵抗睪丸支持細(xì)胞熱應(yīng)激、調(diào)控睪丸支持細(xì)胞分泌產(chǎn)物水平,改善睪丸支持細(xì)胞功能,進(jìn)而改善生精功能[3]。廣藿香祛濕解暑,可有效抵抗夏季高溫對公兔生殖發(fā)育的影響,有研究表明,廣藿香通過增強(qiáng)血清超氧化物歧化酶活性,降低肌酸激酶活性,從而保護(hù)家兔免受熱應(yīng)激造成的氧化損傷,以抵抗夏季高溫[4]。因此,“消暑促精散”中所含的黃芩、廣藿香兩味藥,可有效消暑降溫,此方劑可有效提高公兔夏季繁殖能力。
弓素梅[5]等研究表明,中藥飼料添加劑可以實(shí)現(xiàn)動(dòng)物性食品安全生產(chǎn),提高養(yǎng)殖效率,對畜牧業(yè)發(fā)展有深遠(yuǎn)意義?!跋畲倬ⅰ痹谖逦蹲?、菟絲子、枸杞子、車前子、覆盆子補(bǔ)腎益精的基礎(chǔ)上,加淫羊藿以助腎陽,加黨參、白術(shù)健脾,以后天補(bǔ)益先天,加黃芩、廣藿香防治夏季高溫,可有效提高公兔夏季繁殖能力,并維持公兔正常體溫。將“消暑促精散”在兔業(yè)養(yǎng)殖中推廣,預(yù)計(jì)將有較好的經(jīng)濟(jì)效益和發(fā)展前景。