HIV感染者主要免疫細胞中醫(yī)藥干預研究進展

楊紹春 蔡怡 劉彥麗 秦丹理 曹惠芬 文繼紅

摘要：人體感染HIV（human immunodeficiency virus）后，其主要免疫細胞T淋巴細胞、B淋巴細胞、NK細胞、單核-巨噬細胞等均不同程度受損，對此中醫(yī)藥干預研究取得一定效果。筆者對近幾年中醫(yī)藥干預HIV感染者主要免疫細胞相關研究進展進行綜述。

關鍵詞：HIV感染者;免疫細胞;中醫(yī)藥;干預

中圖分類號：R51291? ? 文獻標志碼：A? ? 文章編號：1007-2349（2018）06-0083-03

1 概述

獲得性免疫缺陷綜合癥（acquired immunodefi-ciency syndrome，AIDS），又稱為艾滋病，是由人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染引起的，以全身免疫系統(tǒng)嚴重損害為特征的傳染病。HIV感染者是指體內存在HIV病毒，HIV感染者CD4計數(shù)一般在350以上，尚未出現(xiàn)AIDS臨床癥狀和體征者。

免疫細胞（immune cell）俗稱白細胞，包括淋巴細胞和各種吞噬細胞等，也特指能識別抗原、產(chǎn)生特異性免疫應答的淋巴細胞等。淋巴細胞（lymphocyte），是體積最小的白細胞，由淋巴器官產(chǎn)生，是機體免疫應答功能的重要細胞成分。淋巴細胞是一類具有免疫識別功能的細胞系，按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同，可分為T淋巴細胞（又名T細胞）、B淋巴細胞（又名B細胞）和自然殺傷（NK）細胞。T細胞和B細胞都是抗原特異性淋巴細胞，都來自造血組織。T淋巴細胞隨血循環(huán)到胸腺，在胸腺激素等的作用下成熟，而B細胞在骨髓中分化成熟。

當受抗原刺激后，T淋巴細胞即轉化為淋巴母細胞，再分化為致敏T淋巴細胞，參與細胞免疫，其免疫功能主要是抗胞內感染、瘤細胞與異體細胞等;而B淋巴細胞是先轉化為漿母細胞，再分化為漿細胞，產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白（抗體），參與體液免疫，其功能是產(chǎn)生抗體，提呈抗原，以及分泌細胞內因子參與免疫調節(jié);NK細胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細胞毒效應，具有殺傷靶細胞的作用。

單核吞噬細胞系統(tǒng)（mononuclear phagocyte system）亦稱巨噬細胞系統(tǒng)（macrophage system）體內具有強烈吞噬及防御機能的細胞系統(tǒng)。包括分散在全身各器官組織中的巨噬細胞、單核細胞及幼稚單核細胞。共同起源于造血干細胞，在骨髓中分化發(fā)育，經(jīng)幼單核細胞發(fā)育成為單核細胞，在血液內停留12～102小時后，循血流進入結締組織和其他器官，轉變成巨噬細胞。功能為吞噬清除體內病菌異物及衰老傷亡細胞;活化TB淋巴細胞免疫反應。

HIV進入人體后，主要感染T淋巴細胞，單核-巨噬細胞，B淋巴細胞等[1-3]，可通過多克隆抗體激活B淋巴細胞，使外周血液中B淋巴細胞數(shù)量增加[4];CD4+T細胞的數(shù)量隨著病程進展進行性下降;T淋巴細胞功能受損，也和單核-巨噬細胞功能損害有關[5]。NK細胞的變化與HIV疾病進展相關[6]。但某一類免疫細胞計數(shù)變化與病情進展又沒有必然聯(lián)系[7]。云南省中醫(yī)中藥研究院開展艾滋病的中醫(yī)藥治療多年，臨床治療中我們發(fā)現(xiàn)大部分患者治療前后比較CD4+T細胞計數(shù)保持穩(wěn)定或有所上升，筆者觀察到對于不愿接受抗病毒治療，單純采用純中藥治療，CD4計數(shù)小于350時間超過2年以上而并未出現(xiàn)其它艾滋病期癥狀體征的病人亦不少，這群病人的免疫系統(tǒng)整體功能又如何？我們分析提出這樣的一種假說，HIV感染者主要免疫細胞計數(shù)低但各類主要免疫細胞比例處于常人一樣的平衡狀態(tài)也是CD4記數(shù)小于350但卻不發(fā)病的一個重要原因。這非常值得進一步研究，HIV感染病程中患者免疫功能平衡機制也一直是尚未解決的問題。[8]因此，筆者就中醫(yī)藥干預HIV感染者主要免疫細胞相關研究進行綜述，以期得到相關研究思路。

2 中醫(yī)藥干預研究

成熟T淋巴細胞，是鑒定T細胞的重要標志，判斷細胞免疫狀況[9-11]。肖明中等[12]研究發(fā)現(xiàn)，無癥狀期HIV感染者的中醫(yī)體質主要以氣虛質為主，不論在感染年限和臨床分期上，氣虛體質均有存在，氣虛質感染者的CD4+T淋巴細胞數(shù)量也相對偏低。楊玉琪等[13]對中醫(yī)藥治療的HIV/AIDS患者4545例按照治療前CD4基線不同進行分層研究，觀察患者治療初始（0個月）和治療后不同時間點（6、12、18、24、30、36、42、48、54、60、66、72個月）的T細胞亞群計數(shù)。結果發(fā)現(xiàn)經(jīng)中醫(yī)藥治療后，CD4<350 cell/μL的患者其CD4+T細胞計數(shù)隨時間的變化而平穩(wěn)升高或穩(wěn)定，CD4>350 cell/μL的患者其CD4+T細胞計數(shù)隨時間的變化而穩(wěn)定或降低;CD4不同分層的患者其CD8+T細胞計數(shù)、CD4/CD8細胞比值總體維持在一定水平。趙霞等[14]在自血療法治療HIV濕疹患者臨床觀察中，發(fā)現(xiàn)自血穴位注射能提高CD4+T淋巴細胞絕對計數(shù)。楊玉琪等[15]對2005-2015年采用中醫(yī)藥治療的HIV/AIDS患者5560例從治療初始和治療后不同時間點的T淋巴細胞計數(shù)進行觀察分析，結果發(fā)現(xiàn)中醫(yī)藥治療后HIV/AIDS患者CD4+T淋巴細胞計數(shù)隨時間的變化而穩(wěn)定或升高，CD8+T淋巴細胞計數(shù)隨時間的變化而穩(wěn)定或下降，CD4+/CD8+T淋巴細胞比值隨時間的變化而升高，并得出中醫(yī)藥治療可影響CD4+和CD8+T淋巴細胞數(shù)量，可階段性地穩(wěn)定或減緩CD4+T淋巴細胞下降速度。陳昕等[16]對艾滋病病毒HIV感染者/艾滋病病人使用冰火兩重灸并聯(lián)合高效抗反轉錄病毒治療后，觀察外周血CD4+T淋巴細胞計數(shù)的變化，發(fā)現(xiàn)冰火兩重灸可明顯提升HAART初治及HAART2年后的HIV/AIDS病人的CD4+T細胞計數(shù)，尤其是在HAART初治時聯(lián)合使用冰火兩重灸，對CD4+T細胞計數(shù)的提升效果最優(yōu)。溫敏等[17]對126名HIV-1病毒載量被有效抑制（HIV-1 RNA<100拷貝/mL）的艾滋病患者隨機雙盲分組，分別給予HAART聯(lián)合康愛保生丸和HAART+安慰劑，考察12個月T細胞亞群數(shù)量的變化，并以入組時CD4+T細胞基線分層考察兩種治療方法對CD4+T細胞的干預作用，結果發(fā)現(xiàn)，各時間點兩組的T細胞亞群的絕對計數(shù)的差異無顯著性意義，12月時HAART聯(lián)合康愛保生丸能顯著提高CD4+T細胞基線<200個/μL的艾滋病患者的CD4+T絕對數(shù)量。

B淋巴細胞主要判斷體液免疫狀況。趙令齋[18]用MTT比色法檢測清開靈對H9/HIV-1ⅢB細胞（慢性感染HIV-1ⅢB的H9細胞）和MT-2細胞的毒性;采用熒光染料Calcein-AM標記的H9/HIV-1ⅢB細胞和系列稀釋的清開靈和藥物血清作用后，與MT-2細胞混合培養(yǎng)，2h后在熒光下計數(shù)融合細胞數(shù)目，分析清開靈及其藥物血清對早期細胞融合的影響;用MTT法檢測清開靈對HIV-1ⅢB感染細胞的保護作用;用HIVp24抗原試劑盒檢測HIV-1感染MT-2細胞的培養(yǎng)上清p24抗原的含量，分析清開靈對HIV-1復制的影響。結果發(fā)現(xiàn)清開靈對H9/HIV-1ⅢB細胞和MT-2細胞的CC50分別為1/5076和1/3697;抑制H9/HIV-1ⅢB細胞和MT-2細胞早期融合的EC50=1/23529，SI=636;抑制HIV-1ⅢB細胞誘導MT-2細胞形成合胞體的EC50=1/19802，SI=536;H9/HIV-1ⅢB細胞和MT-2細胞混合培養(yǎng)和HIV-1ⅢB感染MT-2細胞時，清開靈保護病毒感染細胞免于死亡的EC50分別為1/16667和1/14493，SI分別為451和392;抑制p24抗原產(chǎn)生的EC50=1/17544，SI=475;清開靈藥物血清也可抑制H9/HIV-1ⅢB細胞和MT-2細胞的早期融合，保護細胞免于死亡。因而得出清開靈及其藥物血清體外有一定的抗HIV-1活性，作用機制可能是多靶點的，不僅可抑制病毒進入，還可抑制病毒的復制?，F(xiàn)代醫(yī)學研究發(fā)現(xiàn)隨著HIV疾病進展，HIV感染者調節(jié)性T細胞上B、T淋巴細胞衰減因子表達升高，與疾病進展顯著相關[19]。

單核巨噬細胞因其表面也具有CD4受體，所以也易被HIV侵犯，但其感染率遠遠低于CD4+T淋巴細胞。陳朝等[20]建立小鼠免疫缺損模型，觀察艾靈顆粒對免疫缺損小鼠單核細胞吞噬功能及CD3、CD4數(shù)目的影響，結果發(fā)現(xiàn)艾靈顆粒可顯著提高免疫缺損小鼠單核細胞吞噬功能，升高免疫缺陷小鼠的CD3、CD4的數(shù)目。張曼等[21]對靜脈吸毒HIV-1感染者TH17/Treg失衡與疾病進展及單核細胞活化水平的相關性進行研究，發(fā)現(xiàn)HIV-1感染吸毒人群中TH17和Treg百分比和TH17/Treg比值均明顯失衡，且與病毒載量和單核細胞活化標志sCD14均呈負相關，提示TH17/Treg失衡與HIV感染所致病毒復制和免疫活化密切相關。

NK細胞的變化與HIV疾病進展相關[22]。HAART治療過程中HIV-1病毒可能通過某種方式繼續(xù)損害NK細胞[23]。李承乘等[24]對HIV肺部感染患者與老年肺部感染患者外周血淋巴細胞表型進行比較研究發(fā)現(xiàn)，與老年肺部感染患者相比，HIV肺部感染患者CD4+T、CD16+CD56+NK細胞數(shù)量均下降，CD8+T細胞數(shù)量上升，差異均有統(tǒng)計學意義（P<005），獲得性免疫缺陷導致的免疫功能損傷更為嚴重，其機體免疫能力下降程度大于老年肺部感染人群。目前中藥對NK細胞數(shù)量及活性影響的研究比較熱門，主要是清熱解毒、扶正固本、活血化瘀類中藥[25-27]，中藥復方對NK細胞活性的有待進一步研究。

3 小結

針對HIV感染者主要免疫細胞中醫(yī)藥干預研究取得一定效果，但是如何評價免疫系統(tǒng)整體功能，如何判定疾病進展依然是擺在我們面前的大問題。[28]這關系到中醫(yī)藥治療對患者免疫功能的精確切入點。擬開展[29-30]正常人、中西醫(yī)結合治療組、純HAART治療組的病人的各類主要免疫細胞的比例狀態(tài)的觀察研究，可以探索HIV感染者免疫系統(tǒng)各類細胞比例動態(tài)情況與疾病進展、免疫系統(tǒng)整體功能的相關性，以期望發(fā)現(xiàn)并提出中醫(yī)藥特色的艾滋病療效評價免疫學指標，為中醫(yī)藥治療艾滋病提供臨床應用基礎研究的支撐，值得進一步進行研究。

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