滇產(chǎn)白及與其習(xí)用品的對(duì)比鑒別研究

朱新焰 石亞娜 楊竹雅 張彬若 王家金 季鵬章

摘要：目的對(duì)滇產(chǎn)白及、黃花白及和小白及藥材進(jìn)行鑒別，建立3種滇產(chǎn)“白及”的對(duì)比鑒別方法。方法應(yīng)用性狀與顯微鑒別方法，著重對(duì)藥材表面特征、橫切面及粉末等顯微特征等進(jìn)行研究。結(jié)果滇產(chǎn)白及與其習(xí)用品黃花白及、小白及在藥材性狀、顯微特征上具有較高的相似性，同時(shí)找出了三者間的明顯差異;應(yīng)用性狀與顯微鑒別方法可以很好的鑒別三種習(xí)用品。結(jié)論黃花白及與小白及有其習(xí)用的合理性，應(yīng)對(duì)二者的安全性、藥效等進(jìn)行深入研究，為資源的保護(hù)和利用提供依據(jù)。本文建立了一套利用性狀和顯微特征鑒別三種滇產(chǎn)“白及”的方法，可有效應(yīng)用于相關(guān)藥材的鑒別研究。

關(guān)鍵詞：白及;習(xí)用品;性狀鑒別;顯微鑒別

中圖分類號(hào)：R2825? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B? ? 文章編號(hào)：1007-2349（2018）06-0072-04

Comparative Study on Bletilla Striata in Yunnan and its Relative Byproducts

ZHU Xin-yan1，SHI Ya-na1，YANG Zhu-ya2，ZHANG Bin-ruo2，WANG Jia-jin1，JI Peng-zhang1

（1 .Institute of Medicinal Plants，Yunnan Academy of Agricultural Sciences，Kunming 650223，China;

2. Yunnan University of Traditional Chinese Medicine，Kunming 650500，China）

【Abstract】Objective：To identify bletilla striata in Yunnan，Huanghua bletilla striata and small bletilla striata and to establish the comparative identification method for three types of bletilla striata growing in Yunnan Methods：Traits of application and methods of microscopic identification were investigated，mainly focusing on surface characteristics of herbs，cross sections，powder and other characteristics in microscopy Results：There was a high similarity in traits and microscopic characteristics among bletilla striata in Yunnan，Huanghua bletilla striata and small bletilla striata，while significant difference could be found，so that the three types of bletilla striata could be identified by traits of application and microscopic characteristics Conclusion：The deep investigation of rationality，safety and efficacy of Huanghua bletilla striata and small bletilla striata can lay the evidence for protection and utility of resources Our paper is to introduce a set of methods to identify the “bletilla striata” by using the traits and microscopic characteristics，which can be effectively applied to the identification of related medical materials

【Key words】bletilla striata，relative byproducts，identification of traits，microscopic identification

白及[Bletilla striata（Thunb）Reichbf]、黃花白及[Bletilla ochracea Schltr]和小白及[Bletilla formosana（Hayata）Schltr]均為蘭科白及屬多年生草本植物。白及的塊莖為我國(guó)傳統(tǒng)中藥，李時(shí)珍釋其名，曰：“其根白色連及而生故曰‘白及”。具有收斂止血、消腫生肌之功，可用于治療咳血、吐血、外傷出血、瘡瘍出血、皮膚皴裂、肺結(jié)核咳血、潰瘍病出血等癥[1]?，F(xiàn)已開(kāi)發(fā)出白及顆粒、快胃片、云南白藥、復(fù)方白及膏等中成藥品種。黃花白及和小白及在云南民間常充當(dāng)白及使用，均為云南民族民間習(xí)用品。

白及類資源廣泛分布于我國(guó)華中至西南的廣袤區(qū)域[2]，云南省為白及資源的主要分布區(qū)及產(chǎn)區(qū)之一[3]。根據(jù)第四次中藥資源普查及民族民間醫(yī)生用藥調(diào)查的結(jié)果來(lái)看，目前云南省的市售白及藥材中，常見(jiàn)的混用品有黃花白及和小白及，二者在藥材性狀、民間習(xí)用情況及藥物功效等方面幾乎與白及等同，在民間常充當(dāng)白及使用，為習(xí)用品。但作為白及藥材的合法來(lái)源，《中國(guó)藥典》僅收載了白及[4]。目前對(duì)白及、黃花白及和小白及的資源及藥效的比對(duì)研究尚不多見(jiàn)[5]。白及已列為云南省重要瀕危、特色中藥材品種，但白及的需求量卻有較大缺口，因此，開(kāi)展“白及”類藥材的研究，對(duì)品種保護(hù)及替代品的開(kāi)發(fā)具有十分重要的意義。本研究對(duì)三種滇產(chǎn)“白及”類習(xí)用藥材開(kāi)展原植物性狀、藥材性狀及顯微特征等方面的比對(duì)鑒別研究，擬建立一套正品“白及”與同屬習(xí)用品的鑒別方法，為白及與其近緣種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂及資源的開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。本論文中的滇產(chǎn)白及和習(xí)用藥材系指蘭科白及屬植物白及、黃花白及和小白及的假鱗莖[6]。

1 材料、儀器與方法

1.1.材料

1.1.1.樣品與試劑藥材樣品：實(shí)驗(yàn)用的白及、黃花白及和小白及均采自云南文山和蒙自，樣品經(jīng)鑒定學(xué)名后，憑證標(biāo)本存放于云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所標(biāo)本室。試劑：水合氯醛、甘油、鹽酸、碘等試劑均為分析純。

1.1.2.主要儀器HS-2026型生物組織切片機(jī)，Nikon 80i顯微鏡，ES-300生物組織冷凍包埋機(jī)，BT-330型生物組織攤片烤片機(jī)，DHG-9023A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，F(xiàn)A1004電子分析天平等。

1.2.試驗(yàn)方法

1.2.1.性狀鑒別以藥材外部形態(tài)特征及感官觀察等方法進(jìn)行性狀鑒別[7]。

1.2.2.顯微鑒定[8]橫切面特征將3種樣品做挑選及凈化等處理后，用等量水合氯醛浸泡 24 h進(jìn)行軟化，利用組織切片機(jī)對(duì)樣品的假鱗莖進(jìn)行橫切，切片厚度約 40～50μm，水合氯醛透化、裝片，用顯微鏡觀察，在顯微鏡下觀察樣品的細(xì)胞結(jié)構(gòu);并用Nikon DS-Fi1 數(shù)碼成像系統(tǒng)進(jìn)行拍攝。粉末特征：將各樣品藥材干燥、粉碎，過(guò)100目篩。取適量粉末放于載玻片，樣品粉末先用醋酸甘油裝片，再用水合氯醛加熱透化后裝片，分別在顯微鏡下觀察樣品的微觀結(jié)構(gòu)。淀粉粒的鑒別用碘試液，草酸鈣結(jié)晶的鑒別用稀鹽酸，黏液細(xì)胞的鑒別用墨汁和亞甲藍(lán)試液。

2 結(jié)果與分析

2.1.性狀鑒定結(jié)果白及 呈不規(guī)則扁球形，有2～4個(gè)爪狀分枝，同年生藥材，較黃花白及和小白及大。表面淺白色、灰白色或黃白色，有數(shù)圈同心環(huán)節(jié)（荸薺環(huán)帶狀）和灰色點(diǎn)狀須根痕，上面有突起的莖痕，下面有連接另一塊莖的痕跡，質(zhì)堅(jiān)硬，不易折斷，斷面乳白色至類白色，角質(zhì)樣，可見(jiàn)散在的點(diǎn)狀維管束。味苦，嚼之有黏性;黃花白及 呈不規(guī)則扁斜卵形，多為2～3個(gè)爪狀分枝（可見(jiàn)4個(gè)），同年生藥材，略比白及小，比小白及大。表面黃白色、淺黃色，其它性狀與白及相似;小白及 呈不規(guī)則扁斜卵球形、長(zhǎng)卵形，常為2～3個(gè)爪狀分枝（多為2個(gè)，罕見(jiàn)4個(gè)），同年生藥材，比白及與黃花白及都小。表面灰白色或黃白色，其它性狀與白及相似。

白及、黃花白及、小白及3種藥材如圖1所示;三者的外部特征比較結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2.顯微鑒定結(jié)果

2.2.1.橫切面特征白及 ①表皮細(xì)胞1列，細(xì)胞近圓形或橢圓形，微波狀排列，外被有角質(zhì)層。②基本薄壁組織細(xì)胞大小不一，類圓形或不規(guī)則形，細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)散在的淀粉粒。③黏液細(xì)胞近圓形或橢圓形，散在分布于皮層中，有的內(nèi)含草酸鈣針晶束。④維管束多數(shù)，散在分布，外韌型，韌皮部外側(cè)環(huán)被排列緊密的纖維束，纖維束木化程度高。橫切面的顯微特征見(jiàn)圖2-（1）。

黃花白及 ①表皮細(xì)胞1列，細(xì)胞長(zhǎng)圓形或不規(guī)則形，大小不一;波狀排列，外被有角質(zhì)層。②基本薄壁組織細(xì)胞類圓形或不規(guī)則形，細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)散在的淀粉粒。③黏液細(xì)胞圓形或橢圓形，散在分布于皮層中，有的內(nèi)含草酸鈣針晶束。④維管束散在分布，外韌型，韌皮部外側(cè)環(huán)被排列緊密的纖維束，纖維束木化程度較低。橫切面的顯微特征見(jiàn)圖2-（2）。

小白及 ①表皮細(xì)胞1列，細(xì)胞類圓形，外被有角質(zhì)層。②基本薄壁組織細(xì)胞類圓形或不規(guī)則形，不含淀粉粒。③黏液細(xì)胞較多，圓形或橢圓形，散在分布于皮層中，有的內(nèi)含草酸鈣針晶束。④維管束散在分布，外韌型或雙韌型，纖維束非木化。橫切面的顯微特征見(jiàn)圖2-（3）。

2.2.2.粉末特征 白及 粉末淡黃白色。①表皮細(xì)胞垂周壁深波狀彎曲，略增厚，木化，孔溝明顯。表面觀形狀不規(guī)則;斷面觀類方形，被較厚的角質(zhì)層。下皮細(xì)胞呈多角形，壁稍彎曲，有的連珠狀增厚。②草酸鈣針晶束存在于大的類圓形粘液細(xì)胞中;或散在，針晶長(zhǎng)15～116 μm。③黏液細(xì)胞甚大，類圓形或橢圓形，直徑280～385 μm，內(nèi)含草酸鈣針晶束。④導(dǎo)管主要為梯紋、螺紋導(dǎo)管，也有網(wǎng)紋導(dǎo)管;直徑14～45 μm。⑤纖維成束，壁木化，具人字形或橢圓形紋孔，有的稍彎曲。⑥淀粉粒單粒類圓形，臍點(diǎn)呈人字形或裂隙狀，也有點(diǎn)狀臍點(diǎn);直徑 5～19 μm。復(fù)粒常由2～3分粒組成，可見(jiàn)4分粒。糊化淀粉粒常成團(tuán)塊，無(wú)色。粉末特征見(jiàn)圖3-（1）。

黃花白及 粉末淡黃白色。①表皮細(xì)胞垂周壁波狀彎曲，增厚，木化，孔溝明顯。表面觀多呈五或六邊形;斷面觀類長(zhǎng)方形，被較厚的角質(zhì)層。下皮細(xì)胞呈多角形，壁稍彎曲，有的連珠狀增厚。②草酸鈣針晶束存在于大的類圓形粘液細(xì)胞中;或散在，針晶長(zhǎng)13～108 μm。③黏液細(xì)胞甚大，類圓形或橢圓形，直徑265～377 μm，內(nèi)含草酸鈣針晶束。④導(dǎo)管主要為梯紋、螺紋導(dǎo)管，也有網(wǎng)紋導(dǎo)管;直徑 13～40 μm。⑤纖維多成束，壁木化，有的具人字形紋孔，有的彎曲。⑥淀粉粒單粒類圓形，臍點(diǎn)呈人字形或裂隙狀，也有點(diǎn)狀臍點(diǎn);偶見(jiàn)復(fù)粒。直徑 3～16 μm。糊化淀粉粒常成團(tuán)塊，無(wú)色。粉末特征見(jiàn)圖3-（2）。

小白及 粉末淡黃白色。①表皮細(xì)胞垂周壁波狀彎曲，增厚，木化，孔溝明顯。表面觀形狀不規(guī)則;斷面觀類長(zhǎng)方形，被角質(zhì)層。下皮細(xì)胞呈多角形，壁彎曲，有的連珠狀增厚。②草酸鈣針晶束存在于大的類圓形粘液細(xì)胞中;或散在，針晶長(zhǎng)10～98 μm。③黏液細(xì)胞甚多，類圓形或橢圓形，直徑260～375 μm，內(nèi)含草酸鈣針晶束。④導(dǎo)管主要為梯紋、螺紋導(dǎo)管;直徑 10～38 μm。⑤纖維成束或散在，具橢圓形紋孔，稍彎曲。⑥淀粉粒不可見(jiàn)。粉末特征見(jiàn)圖3-（3）。

3 小結(jié)與討論

本文通過(guò)對(duì)滇產(chǎn)白及與其習(xí)用藥材黃花白及和小白及的藥材性狀、顯微特征的對(duì)比鑒別及分析，找出了三種習(xí)用藥材的主要區(qū)別，得到以下結(jié)論：（1）滇產(chǎn)白及、黃花白及、小白及在植物形態(tài)、藥材性狀、顯微特征等方面都有較高的相似度，主要區(qū)別及鑒別要點(diǎn)在于：①白及與黃花白及的葉為長(zhǎng)圓形或長(zhǎng)橢圓形，小白及的葉則多為長(zhǎng)披針形或線型披針形，明顯窄于前兩者。②白及的花瓣與萼片為紫紅色或紅色。小白及多為粉紅色、淺紅色，可見(jiàn)白色。黃花白及則為黃色、黃白色[9]。白及與黃花白及唇盤上的5條縱脊?fàn)铖奁?，僅在中裂片上波狀彎曲，中間三條褶片時(shí)而不彎曲或略彎曲，褶片在唇盤先端不彎曲或彎曲不明顯。而小白及的5條褶片則從中裂片基部彎曲延伸至唇盤先端。③白及可見(jiàn)4個(gè)爪狀分枝，而黃花白及與小白及則偶見(jiàn)或少見(jiàn)。在等年生的藥材個(gè)頭上，白及略大于黃花白及，小白及最小。④白及與黃花白及的基本薄壁組織細(xì)胞內(nèi)和粉末中含有淀粉粒，白及明顯多于黃花白及。白及有較多的復(fù)粒，而黃花白及主要為單粒，偶見(jiàn)復(fù)粒;小白及則無(wú)淀粉粒。⑤小白及中黏液細(xì)胞明顯多于白及和黃花白及，而白及、黃花白及、小白及所含針晶長(zhǎng)度則依次減小。⑥白及與黃花白及的纖維束為外韌型，木質(zhì)化;而小白及纖維束則可見(jiàn)雙韌型，并且非木化。因此，從以上的形態(tài)及顯微特征的明顯區(qū)別可以將三者進(jìn)行鑒別。

（2）白及、黃花白及、小白及為同屬近緣種植物，結(jié)合第四次全國(guó)中藥資源普查的資源分布情況、民族民間醫(yī)生用藥及民間習(xí)用的調(diào)查結(jié)果來(lái)看，三者具有相同的用法;黃花白及與小白及藥材充當(dāng)正品白及使用有其合理性及必然性。而白及在野生及自然狀態(tài)或人工栽培條件下繁殖速度都很慢[10]，又因白及的藥用價(jià)值和工業(yè)價(jià)值得到持續(xù)開(kāi)發(fā)，資源供不應(yīng)求、日趨匱乏。導(dǎo)致價(jià)格持續(xù)走高，人為摻假嚴(yán)重，混偽品多達(dá)十余種。本研究可為白及類資源的保護(hù)和新資源的開(kāi)發(fā)利用，提供科學(xué)基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

[1]明·李時(shí)珍本草綱目草部（第十二卷）[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1999：765，718，766

[2]任風(fēng)鳴，劉 艷，李瀅，等白及屬藥用植物的資源分布及繁育[J].中草藥，2016，24（47）：4478-4486

[3]彭翠仙，向建英云南野生藥用白及及其混偽品現(xiàn)狀調(diào)查[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（32）：11279-11281

[4]國(guó)家藥典委員會(huì)中國(guó)藥典，一部[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：103

[5]翟 萌白及及其混淆品、偽品的生藥學(xué)對(duì)比研究[D].成都：成都中醫(yī)藥大學(xué)，2012

[6]中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所云南植物志（第十四卷）[M].北京：科學(xué)出版社，2003：348-352

[7]李 敏，周 娟中藥材質(zhì)量與控制[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2005：277-280

[8]徐國(guó)鈞，徐珞珊中藥材粉末顯微鑒定[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1986，274-275

[9]中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所云南植物志（第十四卷）[M].北京：科學(xué)出版社，2003：348-352

[10]林伊利，李偉平，馬丹丹，等白及組培快繁的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華中醫(yī)學(xué)刊，2012，30（2）：336