不同促凝添加劑采血管對(duì)化學(xué)發(fā)光分析技術(shù)測定甲狀腺激素的影響*

歐 超，黃文成，朱 波，黃玲莎，黃 浩

(廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，南寧 530021)

甲狀腺激素是重要的內(nèi)分泌激素，不但水平低，而且受節(jié)律生活、季節(jié)變化、晝夜更替、睡眠、飲食和應(yīng)激等各種因素的影響較大，因此對(duì)檢測方法和質(zhì)量控制提出了更高的要求。當(dāng)前較成熟的方法有放射免疫法、酶聯(lián)免疫法、化學(xué)發(fā)光法，其中化學(xué)發(fā)光法是目前公認(rèn)的各種激素檢測方法中較精確的方法，其具有敏感度高、線性范圍寬、結(jié)果穩(wěn)定等優(yōu)勢，同時(shí)對(duì)檢測過程的質(zhì)量控制也提出了更嚴(yán)格的要求[1-2]。然而，為了提高工作效率，促凝劑真空采血管普遍應(yīng)用于臨床，不同品牌真空采血管中的添加劑是否對(duì)激素檢測產(chǎn)生影響仍存在爭議[3-4]。因此，本研究分別選取兩種含有不同來源的促凝劑真空采血管，與不帶促凝劑的普通玻璃管進(jìn)行比較，檢測5項(xiàng)甲狀腺激素指標(biāo)，分析它們對(duì)檢測結(jié)果的影響，并評(píng)估其臨床使用的可接受性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取50例志愿者，采集其空腹靜脈血作為研究標(biāo)本，采用以上3種真空采血管收集血液，每種試管1支。

1.2儀器與試劑 西門子Aptio自動(dòng)化生化免疫流水線(Aptio-Advia 2400全自動(dòng)生化免疫分析儀)，嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程操作，并按照試劑說明書設(shè)置參數(shù)。檢測前進(jìn)行常規(guī)校準(zhǔn)，并確定高、中、低3種室內(nèi)質(zhì)控水平全部在控。選取3種采血管，A管為不含促凝劑的普通硅化玻璃采血管(由山東威海鴻宇公司提供)；B管為含有促凝劑的真空采血管(由山東威海鴻宇公司提供)；C管為含有硅化內(nèi)壁和促凝劑的塑料真空采血管(由美國BD公司提供)。

1.3方法 所有采集步驟均按美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)有關(guān)標(biāo)本采集和處理的相關(guān)規(guī)程執(zhí)行：使用同一批號(hào)的采血管和采血針，選取肘正中靜脈，在穿刺部位以上7.5～10.0 cm處綁扎壓脈帶，綁扎時(shí)間不超過1 min。采血后A管垂直放置，B、C管輕柔充分混勻(混勻次數(shù)按照生產(chǎn)廠商說明書要求)，剔除采血不順利的標(biāo)本，垂直放置于室溫下30～60 min，肉眼可見析出血清后以3 500 r/min離心10 min，分離血清，觀察所有標(biāo)本，肉眼未見溶血、黃疸等現(xiàn)象。

1.4檢測項(xiàng)目 為減少流水線中各儀器之間的隨機(jī)差異，本研究流水線中指定同一臺(tái)化學(xué)發(fā)光儀器測定5項(xiàng)甲狀腺激素：促甲狀腺激素(TSH)、總?cè)饧谞钕僭彼?T3)、游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、總甲狀腺素(T4)、游離甲狀腺素(FT4)。

2 結(jié) 果

2.13種不同種類真空采血管凝固時(shí)間、析出率、分離效果比較 見表1。

表1 室溫情況下3種采血管血液凝固時(shí)間及分離效果比較

2.23種真空采血管5項(xiàng)甲狀腺激素指標(biāo)檢測結(jié)果比較 見表2。

2.33種真空采血管甲狀腺激素指標(biāo)差異的臨床可接受范圍評(píng)價(jià) 見表3。對(duì)B管與A管，C管與A管，B管與C管相互間5個(gè)檢測項(xiàng)目進(jìn)行比較，對(duì)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的項(xiàng)目進(jìn)行回歸方程計(jì)算和臨床可接受范圍評(píng)價(jià)。

表2 3種真空采血管5項(xiàng)甲狀腺激素指標(biāo)檢測結(jié)果比較

注：與A管比較，*P<0.05,#P<0.05；與C管比較，△P<0.05

表3 3種真空采血管甲狀腺液素指標(biāo)差異臨床可接受范圍評(píng)價(jià)

注：r2<0.95不可接受，不用計(jì)算回歸方程；r2>0.95，且回歸方程偏差≤12.5可接受；r2>0.95，回歸方程偏差>12.5不可接受；-表示無數(shù)據(jù)

3 討 論

甲狀腺是人體重要內(nèi)分泌腺體之一[5-6]。全自動(dòng)流水線化學(xué)發(fā)光法檢測甲狀腺激素已得到廣泛應(yīng)用[7]，如何在提高工作效率的同時(shí)獲得準(zhǔn)確、可靠的測定結(jié)果是醫(yī)務(wù)、醫(yī)技工作者共同追求的目標(biāo)[8-10]，而分析前誤差占整個(gè)誤差的70%[11]。為減少分析前標(biāo)本收集整體誤差發(fā)生，合理使用促凝管，本研究對(duì)促凝管中不同添加劑對(duì)測定結(jié)果的影響進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析和臨床可接受性評(píng)估。

由表1可見，含促凝劑的B、C管無論血液凝固時(shí)間、1 h血清析出率還是血清分離效果都明顯優(yōu)于普通硅化玻璃A管，促凝管高效的分離效果有利于急診標(biāo)本的檢測和大批量自動(dòng)化分析儀高效檢測的需求，這也是促凝管受到自動(dòng)化檢測青睞的一個(gè)重要原因。由表2可見，不同添加劑在促凝的同時(shí)也帶來了一定影響，特別是一些高要求的檢測項(xiàng)目(如甲狀腺激素)：與A管比較，5項(xiàng)指標(biāo)中，B管有4項(xiàng)(TSH、T3、FT3、FT4)檢測結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，C管有1項(xiàng)(T4)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，就此結(jié)果而言，C管促凝劑對(duì)該方法該項(xiàng)目檢測結(jié)果影響相對(duì)較小，鄧勇瑩等[12]也認(rèn)為真空采血管的內(nèi)壁處理劑會(huì)對(duì)血清T3產(chǎn)生干擾。兩組含促凝劑的B管與C管之間比較，有4項(xiàng)(TSH、T3、FT3、FT4)檢測結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，原因是不同廠家的促凝劑配方可能不同。促凝劑成分主要分為兩類，一類是生物型，主要成分為凝血活酶和兔腦粉；另一類是無機(jī)型，主要成分有高嶺土、石英粉、硅石粉等[13]。配方相同，處理工藝也可能存在差異，建議在選擇促凝管前應(yīng)該先對(duì)促凝劑成分做進(jìn)一步了解，根據(jù)檢測項(xiàng)目需求確定促凝劑類型。表3進(jìn)一步說明3種真空采血管間的差異性和臨床可接受性，B廠家TSH、FT3、FT4差異有臨床意義且臨床不可接受；C廠家的T4差異有臨床意義且臨床不可接受。以上結(jié)果表明，在其他檢測條件一致的情況下，促凝劑對(duì)甲狀腺激素的部分結(jié)果不但有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而且有可能超過臨床可接受范圍。賀松等[14]、毛燕君[15]的研究也表明，不同采血管會(huì)影響生殖激素結(jié)果的測定；但與劉興楊[16]采用放射免疫分析技術(shù)的結(jié)果不一致，可見方法學(xué)是本評(píng)估的重要參考指標(biāo)之一。另外，少量標(biāo)本比較分析不具有普遍代表性，仍需后續(xù)更多、更準(zhǔn)確的對(duì)比試驗(yàn)，為適應(yīng)高效準(zhǔn)確的檢測方法和手段補(bǔ)充技術(shù)和提供理論依據(jù)。

通過本研究，對(duì)采用化學(xué)發(fā)光分析技術(shù)測定甲狀腺激素的質(zhì)量控制有了更全面的了解，為選取采血管提供了一定的理論支持，同時(shí)說明，雖然促凝管的使用可以節(jié)約血液凝固時(shí)間，減少纖維蛋白絲形成，更適合現(xiàn)代高效快速的自動(dòng)化檢測需求，但促凝管在不同檢測體系，不同檢測方法下，檢測結(jié)果可能有差異，并且有可能超過臨床可接受度。建議實(shí)驗(yàn)室在大批量使用促凝劑前，應(yīng)充分了解其成分、性質(zhì)，并進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)，清楚其可能帶來的影響，從而保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性。