黃芪阿膠補(bǔ)鐵口服液改善大鼠缺鐵性貧血研究

林健 張衛(wèi)華 林蔚 宮秀秀 鐘禮云 陳冠敏

[摘要]目的 了解黃芪阿膠補(bǔ)鐵口服液改善缺鐵性貧血的效果。方法 選取74只大鼠，采用缺鐵性飼料方法建立大鼠貧血模型，取造型成功動(dòng)物，據(jù)血紅蛋白（Hb）水平，采用隨機(jī)區(qū)組法分成低、中、高3個(gè)樣品劑量組和低鐵對(duì)照組，分別按3.33 ml/kg BW、6.67 ml/kg BW和20.0 ml/kg BW和去離子水給予大鼠灌胃32 d。觀察比較大鼠體重、血紅蛋白（Hb）、紅細(xì)胞壓積（Hct）和紅細(xì)胞游離原卟啉（FEP）。結(jié)果 大鼠體重與低鐵對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），黃芪阿膠補(bǔ)鐵口服液3個(gè)劑量組的血紅蛋白（Hb）（F=161.156）和紅細(xì)胞壓積（Hct）（F=78.771）均顯著高于低鐵對(duì)照組（P<0.05），紅細(xì)胞游離原卟啉（FEP）值（F=170.516）均顯著低于低鐵對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 黃芪阿膠補(bǔ)鐵口服液具有改善缺鐵性貧血的功能。

[關(guān)鍵詞]黃芪阿膠補(bǔ)鐵口服液；大鼠；貧血

[中圖分類號(hào)] R285.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2018）9（c）-0035-03

Research on improving the iron-deficiency anemia in rats by Huangqi Ejiao Butie Oral Solution

LIN Jian1，2 ZHANG Wei-hua3，4 LIN Wei1 GONG Xiu-xiu3，4 ZHONG Li-yun1 CHEN Guan-min1，2

1. Fujian Provincial Key Laboratory of Zoonosis Research （Fujian Center for Disease Control and Prevention）， Fujian Province， Fuzhou 350001， China； 2. Teaching Base of Fujian Medical University， Fujian Province， Fuzhou 350001， China； 3. Beijing Body Revival Pharmaceutical Technology Development Co.， Ltd.， Beijing 100088 China； 4. Zhuhai Branch， Beijing Body Revival Pharmaceutical Technology Development Co.， Ltd.， Guangdong Province， Zhuhai 519040， China

[Abstract] Objective To get known the effect of Huangqi Ejiao Butie Oral Solution in improving iron-deficiency anemia. Methods Seventy-four rats were selected. The an animal model of anemia using iron-deficiency diet was established. These rat models were divided into the low-， medium-， and high-dose sample groups and low-iron group by random block based on the hemoglobin （Hb） level， 3.33 ml/kg BW， 6.67 ml/kg BW and 20.0 ml/kg BW， and deionized water for 32-day intragastric administration in turn. The rats′ weight， Hb， hematocrit （Hct） and free erythrocyte protoporphyrin （FEP） were observed. Results There was no significant difference in rat body weight in these sample groups compared with low-iron control group （P>0.05）. The Hb （F=161.156） and Hct （F=78.771） in the three dose groups using Huangqi Ejiao Butie Oral Solution were significantly higher than those in the low-iron control group （P<0.05）. The value of FEP （F=170.516） was significantly lower compared with that in the low-iron control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion Huangqi Ejiao Butie Oral Solution can improve iron-deficiency anemia.

[Key words] Huangqi Ejiao Butie Oral Solution； Rat； Anemia

缺鐵性貧血（IDA）是全世界發(fā)病率最高的營(yíng)養(yǎng)缺乏性疾病之一[1]，IDA可引起認(rèn)知發(fā)育不良和嬰幼兒不可逆的聽(tīng)覺(jué)和視覺(jué)系統(tǒng)損傷[2-3]，孕婦貧血可造成胎兒發(fā)育不良和低出生體重[4-5]。

黃芪阿膠補(bǔ)鐵口服液由乳酸亞鐵、阿膠、黃芪、當(dāng)歸、女貞子、大棗等配方組成，乳酸亞鐵為其補(bǔ)充鐵來(lái)源的主要成分，輔以阿膠、黃芪、當(dāng)歸、女貞子、大棗等藥食兩用材料，其中黃芪、當(dāng)歸、女貞子、大棗采用了先進(jìn)的工藝技術(shù)提取有效成分后加入乳酸亞鐵和阿膠，制成便于服用的口服液。為了解黃芪阿膠補(bǔ)鐵口服液改善大鼠IDA效果，本研究采用大鼠營(yíng)養(yǎng)性缺鐵模型，進(jìn)行了改善貧血試驗(yàn)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1原料來(lái)源

黃芪、當(dāng)歸、女貞子：石家莊市柏林藥材加工廠；阿膠：河南輔仁堂制藥有限公司；大棗：佳縣東方紅棗業(yè)有限公司；乳酸亞鐵：鄭州瑞普生物工程有限公司。

1.2樣品制備

取黃芪、當(dāng)歸、女貞子、大棗提取，濾過(guò)，合并濾液，減壓濃縮。取阿膠粉碎、加水，加熱融化。取乳酸亞鐵及輔料加水溶解。將以上液體合并、過(guò)濾，加水至所需體積。樣品為濃縮液，每ml樣品相當(dāng)于2 ml黃芪阿膠補(bǔ)鐵口服液成品。

1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

清潔級(jí)SD雄性大鼠74只，體重40～50 g。購(gòu)自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（滬）2012-0002號(hào)。

1.4飼養(yǎng)環(huán)境

福建省疾控中心SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（閩）2012-0008號(hào)。

1.5分組方法

采用隨機(jī)區(qū)組法。

1.6低鐵飼料

低鐵飼料購(gòu)于南通特洛菲飼料科技有限公司。低鐵飼料配方為玉米淀粉、蛋清蛋白、蔗糖、玉米油、纖維素、混合礦物鹽（AIN-93G-MX）、混合維生素（AIN-93G-VX）、L-胱氨酸和氯化膽堿。

1.7研究指標(biāo)

血紅蛋白（Hb）、紅細(xì)胞壓積（Hct）、紅細(xì)胞游離原卟啉（FEP）。

1.8測(cè)試儀器及生產(chǎn)廠家

電子天平（常熟雙杰測(cè)試儀器廠）、雅培血球分析儀（美國(guó)雅培制藥有限公司）、930N熒光分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

1.9試劑來(lái)源

大鼠血紅蛋白和紅細(xì)胞壓積測(cè)定試劑（美國(guó)雅培制藥有限公司）；游離原卟啉測(cè)定試劑（阿拉丁試劑有限公司）。

1.10缺鐵性貧血大鼠模型的建立

健康斷乳雄性大鼠74只，適應(yīng)4 d后喂飼低鐵飼料及去離子水（采用不銹鋼籠及食罐），自第15天起，每7天選取部分大鼠采尾血測(cè)Hb，至多數(shù)動(dòng)物Hb<100 g/L時(shí)，測(cè)全部大鼠的體重及Hb。

1.11實(shí)驗(yàn)方法

選取Hb<100 g/L的造模成功大鼠40只作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，根據(jù)貧血大鼠Hb水平和體重，將動(dòng)物隨機(jī)分為低鐵對(duì)照組和3個(gè)樣品組，每組10只，各組均繼續(xù)喂飼低鐵飼料。3個(gè)樣品組劑量分別為3.33 ml/kg BW、6.67 ml/kg BW和20.0 ml/kg BW，分別稱取樣品（每ml樣品相當(dāng)于2 ml黃芪阿膠補(bǔ)鐵口服液成品）加蒸餾水配成16.6、33.3和100.0 ml/100 ml濃度。各樣品劑量組分別給予不同劑量的受試樣品，低鐵對(duì)照組給予等量去離子水，各組大鼠灌胃體積均為10 ml/kg BW。每7天稱重并記錄。連續(xù)給予32 d灌胃后，測(cè)定大鼠體重、Hb、Hct和FEP。

1.12統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 22.0軟件進(jìn)行分析。組間比較采用單因素方差分析，經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)，方差齊的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用LSD法，方差不齊或非正態(tài)的數(shù)據(jù)先行變量轉(zhuǎn)換再統(tǒng)計(jì)，前后比較采用配對(duì)資料t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1四組試驗(yàn)前后大鼠體重的比較

試驗(yàn)前后各劑量組大鼠體重與低鐵對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；試驗(yàn)后各劑量組大鼠體重均增加（P<0.05）（表1）。

2.2四組試驗(yàn)前后Hb的比較

試驗(yàn)后各劑量組大鼠Hb濃度均高于低鐵對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且自身前后升高幅度均>10 g/L（表2）。

2.3四組試驗(yàn)前后Hct、FEP含量的比較

試驗(yàn)后各劑量組Hct均高于低鐵對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；FEP含量均低于低鐵對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表3）。

3討論

硫酸亞鐵等無(wú)機(jī)鐵為第1代鐵劑，硫酸亞鐵中的鐵以二價(jià)形式存在，比元素鐵和三價(jià)更容易吸收，但無(wú)機(jī)鐵服用后，解離速度快，存在嚴(yán)重的腸胃刺激，產(chǎn)生惡心、嘔吐、腹痛、便秘等癥狀。乳酸亞鐵為第2代鐵劑。它提高了鐵的吸收率和生物利用度，同時(shí)以離子作用+配位作用的方式替代傳統(tǒng)無(wú)機(jī)鐵的單一離子作用形式，服用后可在胃酸作用下，可緩慢釋放鐵離子，避免了局部高濃度鐵離子對(duì)消化道的刺激，降低了胃腸道副作用，降低了毒性反應(yīng)[6]。乳酸亞鐵用于臨床治療IDA有較好的效果[7]。

資料表明，中藥聯(lián)合鐵劑可在短時(shí)間內(nèi)提高IDA患者的Hb濃度，降低IDA患者FEP的水平，效果好于單一使用鐵劑，且對(duì)人體的血常規(guī)和生化指標(biāo)無(wú)不良影響[8-9]。

清代藥物學(xué)著作《本草思辨錄》稱阿膠為“補(bǔ)血圣藥”，IDA臨床癥狀在中醫(yī)中屬于血虛和脾虛范疇， 是因脾運(yùn)失健而致氣血生化不足產(chǎn)生的疾病，臨床表現(xiàn)屬氣血兩虛證?，F(xiàn)代研究表明阿膠含有甘氨酸成分通過(guò)調(diào)節(jié)血清鐵，可促進(jìn)Hb合成[10]。此外，阿膠中微量元素含量以鐵為最高，達(dá)到其他元素（鋅、銅、錳）10倍以上[11]，這些鐵元素也可以為Hb的構(gòu)成提供物質(zhì)基礎(chǔ)。方中黃芪大補(bǔ)脾肺之氣，以資氣血生化之源。當(dāng)歸甘辛而溫，養(yǎng)血和營(yíng)，藥理學(xué)研究表明，當(dāng)歸中的多糖能促進(jìn)造血干細(xì)胞的增殖、分化，刺激紅細(xì)胞的生成，增強(qiáng)造血系統(tǒng)的功能[12]。此外，利用大鼠研究當(dāng)歸多糖鐵復(fù)合物與硫酸亞鐵作為補(bǔ)鐵劑的補(bǔ)鐵效果比較時(shí)發(fā)現(xiàn)，多糖鐵復(fù)合物在大鼠體內(nèi)鐵吸收率更高，吸收更快[13]。女貞子養(yǎng)陰益腎，作為改善IDA配伍成分，具有較好提升HB、RBC及全血鐵的效果，并能提高鐵的生物利用率[14]。大棗中和諸藥，健脾和胃，緩補(bǔ)氣血?，F(xiàn)代研究表明，大棗提取物對(duì)IDA大鼠HGB、HCT、RBC、PLT等指標(biāo)均有明顯改善作用，大棗提取物可明顯升高IDA大鼠血清鐵含量、鐵飽和度及肝臟鐵含量，并明顯降低血清未飽和鐵結(jié)合力，從現(xiàn)代藥理角度證實(shí)了大棗具有改善IDA的作用[15]。