馬齒莧不同極性部位的抗炎活性評(píng)價(jià)

陳新江 夏佳音

[摘要]目的 比較馬齒莧不同極性部位（水、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚）提取物的抗炎活性。方法 馬齒莧不同極性部位提取物作用于體外培養(yǎng)的小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7，MTT法測(cè)定細(xì)胞活力，Griess試劑盒測(cè)定細(xì)胞分泌一氧化氮（NO）的水平。結(jié)果 馬齒莧水、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚提取物均能促進(jìn)RAW264.7巨噬細(xì)胞的增殖；乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚提取物均能抑制LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞分泌NO。結(jié)論 馬齒莧乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚提取物具有潛在的抗炎活性。

[關(guān)鍵詞]馬齒莧；極性部位；RAW264.7細(xì)胞；一氧化氮；抗炎

[中圖分類號(hào)] R961.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2018）9（b）-0008-05

[Abstract] Objective To compare the anti-inflammatory activity of different polar parts （water， ethanol， n-butyl alcohol， ethyl acetate， petroleum ether） extracts of Portulaca oleracea L.. Methods Different polar parts extracts of Portulaca oleracea L. acted on mouse macrophage RAW264.7 cultured in vitro. MTT method was used to determine the cell vitality of the different extracts and Griess kit was used to measure the level of nitric oxide （NO） secreted by cells. Results Extracts of purslane water， n-butyl alcohol， ethyl acetate and petroleum ether could promote the proliferation of RAW264.7 macrophages. Extracts of ethanol， n-butanol， ethyl acetate， and petroleum ether could prevent macrophages induced by LPS from secreting NO. Conclusion Extracts of purslane ethanol， n-butanol， ethyl acetate and petroleum ether have potential anti-inflammatory activity.

[Key words] Portulaca oleracea L.； Polar regions； RAW264.7 cells； Nitric oxide； Anti-inflammatory

馬齒莧（Portulaca oleracea L.），素有“天然抗生素”之稱[1]。歷代醫(yī)家和民間醫(yī)生，均知曉馬齒莧清熱解毒消炎的功能。《本草綱目》言其“散血消腫，利腸滑胎，解毒通淋”；《新修本草》曰其“主諸腫瘺疣目，諸淋，金瘡血流……”?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，馬齒莧具有明顯的抗炎作用[2]。馬齒莧水煎液降低異位性皮炎患者血清總IgE，減緩皮膚炎癥[3]，水醇提取物可以通過抑制腫瘤壞死因子（TNF-α）和抗炎活性來改善大鼠海馬中脂多糖誘發(fā)的被動(dòng)回避學(xué)習(xí)記憶和TNF-α損傷[4]。馬齒莧提取液可以減少濕疹大鼠皮膚的炎癥反應(yīng)，對(duì)濕疹皮膚具有明顯的療效[5-6]。馬齒莧水提物對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎保護(hù)作用[7]。金天云等[8]發(fā)現(xiàn)馬齒莧化學(xué)成分具有抗炎活性，對(duì)脂多糖誘導(dǎo)RAW264.7巨噬細(xì)胞中一氧化氮（NO）的產(chǎn)生具有強(qiáng)的抑制作用。

目前，馬齒莧抗炎活性研究只限于水和乙醇[9-11]，Liu等[12]研究發(fā)現(xiàn)80%乙醇提取物能夠顯著減少TNF-α活化的小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7內(nèi)促炎因子白細(xì)胞介素6（IL-6）、TNF-α的產(chǎn)生。Yue等[13]研究發(fā)現(xiàn)80%乙醇提取物上調(diào)了鼠肺NF-κB水平，減少ROS的產(chǎn)生并顯著降低了炎癥因子IL-1β和TNF-α水平。Meng等[14]從水提取物的50%乙醇部分中分離得到一種具有抗炎活性的生物堿oleracone。但未見馬齒莧不同極性部位（石油醚、正丁醇、乙酸乙酯、乙醇和水）提取物抗炎效果比較的研究報(bào)道。因此，本研究將考察各種提取物對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞增殖作用和脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞炎癥模型分泌NO的影響，以期為后續(xù)抗炎物質(zhì)基礎(chǔ)研究、抗炎藥物和其他抗炎產(chǎn)品的開發(fā)提供理論依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1材料

1.1儀器與設(shè)備

XDS-1A倒置顯微鏡（上海精密儀器儀表有限公司）；xMark微孔板吸光度分光光度計(jì)（美國BIO-RAD公司）；VS-840K（U）超凈工作臺(tái)（蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司）；Steri-Cycle CO2培養(yǎng)箱（美國Thermo公司）；LDZX-50KBS立式壓力蒸汽滅菌器（上海申安醫(yī)療器械廠）；DW-86L288超低溫冰箱（青島海爾股份有限公司）；HYRO-4.0超純水儀（西安優(yōu)普儀器設(shè)備有限公司）；MS105 1/10萬電子分析天平（梅特勒-托利多常州公司）；TD20002A電子天平（浙江力辰儀器科技有限公司）；6202型高速粉碎機(jī)（北京開創(chuàng)同和科技發(fā)展有限公司）；L80-2型離心機(jī)（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司）；KQ-250E超聲波清洗儀（寧波江南儀器廠）；RE-52B旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海博通化學(xué)科技有限公司）；SHZ-D（III）循環(huán)水式真空泵（鄭州科豐儀器設(shè)備有限公司）；MH-2型微量振蕩器（海門市其林貝爾儀器制造有限公司）；Millex-GP針頭濾器（美國Millipore公司）；Grade2快速定性濾紙（英國Whatman公司）。

1.2藥材與試劑

小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7細(xì)胞株受贈(zèng)于浙江中醫(yī)藥大學(xué)；馬齒莧藥材（康美藥業(yè)股份有限公司，產(chǎn)地：廣東，批號(hào)：161011731），按照《中國藥典》2015年版一部鑒定為馬齒莧科植物馬齒莧Portulaca oleracea L.；LPS（美國sigma公司）；DMEM高糖培養(yǎng)基（液態(tài)，新西蘭Gibco公司）；新生胎牛血清（澳大利亞Cellmax公司）；DMSO（美國sigma公司）；青鏈霉素雙抗液（杭州諾揚(yáng)生物技術(shù)有限公司）；Griess試劑（上海碧云天生物技術(shù)有限公司）；無菌PBS緩沖液（吉諾生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司）；乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚（30～60℃）（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，分析純）。

2方法

2.1樣品的制備

2.1.1不同極性部位提取物的制備 取馬齒莧藥材粉碎，制成馬齒莧粉，過20目篩，儲(chǔ)于干燥器中備用。將馬齒莧粉分別加入到石油醚（30～60℃）、乙醚、乙酸乙酯、乙醇、水中，料液比1∶30（m∶V），40℃，60%功率超聲提取30 min，布氏漏斗抽濾2次，50℃左右減壓濃縮至膏狀，4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2.1.2含藥培養(yǎng)液的制備 將“2.1.1項(xiàng)”下制得的石油醚、乙醚、乙酸乙酯、乙醇提取物加入DMSO溶液，40℃超聲溶解，配置成提取物質(zhì)量濃度分別為0.4、0.4、0.4、1.6 g/ml的母液。水提取物加入超純水，40℃超聲溶解，配置成質(zhì)量濃度為0.4 g/ml母液。在超凈工作臺(tái)下，精密吸取50 μl石油醚、乙醚、乙酸乙酯、乙醇和水提取物母液，先加入1200 μl DMEM高糖培養(yǎng)基稀釋25倍，混勻后，取1 ml混合液加入9 ml DMEM高糖培養(yǎng)基稀釋10倍，混勻，最終獲得質(zhì)量濃度分別為1.6、1.6、1.6、6.4 mg/ml及1.6 mg/ml的含藥培養(yǎng)液，0.22 μm微孔濾膜過濾除菌，再用DMEM培養(yǎng)基將上述5種含藥培養(yǎng)液分別作1∶1、1∶2、1∶4倍比稀釋，各得到3種不同濃度的提取物，現(xiàn)用現(xiàn)配。

2.2 LPS刺激巨噬細(xì)胞RAW264.7構(gòu)建炎癥細(xì)胞模型

常規(guī)培養(yǎng)巨噬細(xì)胞RAW 264.7，37℃，5% CO2，DMEM培養(yǎng)基（含10%熱滅活胎牛血清，100 U/ml青霉素和100 μg/ml鏈霉素）。將對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞接種至96孔板中，接種濃度4×105個(gè)/ml，100 μl/孔，接種細(xì)胞總數(shù)為4×104個(gè)/孔，置于5% CO2，37℃的細(xì)胞培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24 h后，加入含2 μg/ml LPS的DMEM培養(yǎng)基100 μl/孔，LPS刺激終濃度為1 μg/ml，刺激24 h。

2.3 RAW264.7細(xì)胞給藥濃度篩選

通過MTT法檢測(cè)藥物毒性試驗(yàn)來確定藥物最大安全劑量，篩選出適宜的給藥濃度。常規(guī)培養(yǎng)RAW 264.7細(xì)胞，將對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞接種于96孔板中，接種濃度8×104個(gè)/ml，100 μl/孔，接種細(xì)胞總數(shù)為8×103個(gè)/孔，置于含5% CO2、37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24 h后用于實(shí)驗(yàn)。①對(duì)照組：每孔加入100 μl DMEM培養(yǎng)基（含0.2%DMSO）；②加藥組：每孔加入100 μl“2.1.2”中配制的各種不同濃度藥物，設(shè)3個(gè)復(fù)孔。藥物作用24 h后，加入5 mg/ml現(xiàn)配噻唑藍(lán)（MTT）溶液，20 μl/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4 h，棄液體，拍干，加入150 μl/孔DMSO，振蕩10 min，用酶標(biāo)儀于490/630 nm雙波長下測(cè)定吸光度，每組取3孔平均數(shù)，計(jì)算細(xì)胞存活率[（A加藥組/A對(duì)照組）×100%]，選取90%以上細(xì)胞存活率所對(duì)應(yīng)的藥物質(zhì)量濃度用于下一步實(shí)驗(yàn)。

2.4 MTT法檢測(cè)RAW264.7細(xì)胞增殖活性

常規(guī)培養(yǎng)RAW264.7細(xì)胞，將對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞接種于96孔板中，接種濃度8×104個(gè)/ml，100 μl/孔，接種細(xì)胞總數(shù)為8×103個(gè)/孔，置于含5% CO2、37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24 h后用于實(shí)驗(yàn)。①對(duì)照組：每孔加入100 μl DMEM培養(yǎng)基；②加藥組：100 μl“2.1.2”中配制的不同濃度藥物，設(shè)4個(gè)復(fù)孔。藥物作用24 h后，加入5 mg/ml現(xiàn)配MTT溶液，20 μl/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4 h，棄液體，拍干，加入150 μl/孔DMSO，振蕩10 min，用酶標(biāo)儀于490/630 nm雙波長下測(cè)定吸光度，每組取4孔平均數(shù)，計(jì)算細(xì)胞增殖率[（A加藥組-A對(duì)照組）/A對(duì)照組×100%]。

2.5酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法檢測(cè)RAW264.7細(xì)胞分泌NO的水平

根據(jù)“2.2”所述建立RAW264.7巨噬細(xì)胞炎癥模型，設(shè)立對(duì)照組（不加LPS）、模型組（加入1 μg/ml LPS誘導(dǎo)，每孔加入100 μl DMEM培養(yǎng)基）、藥物組（加入1 μg/ml LPS誘導(dǎo)，每孔加入100 μl“2.1.2”中配制的不同濃度藥物）。設(shè)3個(gè)復(fù)孔，在37℃、5% CO2條件下培養(yǎng)24 h后，取細(xì)胞上清液，參照試劑盒說明書進(jìn)行，570 nm處測(cè)定吸光度，計(jì)算RAW264.7巨噬細(xì)胞上清液中NO的含量。

2.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。采用單因素方差分析（one-way ANOVA）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3結(jié)果

3.1 RAW264.7巨噬細(xì)胞給藥質(zhì)量濃度的篩選結(jié)果

通過MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力，評(píng)價(jià)馬齒莧不同濃度提取物對(duì)于細(xì)胞存活率的影響，結(jié)果提示，加藥組的馬齒莧正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物質(zhì)量濃度均在200～800 μg/ml，水提取物、乙醇提取物的質(zhì)量濃度分別為200～400 μg/ml、800～1600 μg/ml時(shí)，其細(xì)胞存活率均大于對(duì)照組的100%以上；水提取物、乙醇提取物的質(zhì)量濃度分別為800 μg/ml、3200 μg/ml時(shí)，其細(xì)胞存活率略低，但均大于對(duì)照組的90%以上（圖1）。

3.2馬齒莧提取物對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞增殖作用的影響

馬齒莧正丁醇、乙酸乙酯和石油醚提取物在各種質(zhì)量濃度下的細(xì)胞增殖率均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。其中，馬齒莧正丁醇提取物質(zhì)量濃度200、400、800 μg/ml時(shí)的細(xì)胞增殖率顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），質(zhì)量濃度在800 μg/ml時(shí)，其細(xì)胞增殖率達(dá)到最高，為（37.70±5.57）%。石油醚提取物的質(zhì)量濃度在400、800 μg/ml時(shí)的細(xì)胞增殖率顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），質(zhì)量濃度在800 μg/ml時(shí)的細(xì)胞增殖率達(dá)到最高，為（57.7±4.74）%。馬齒莧水提取物的質(zhì)量濃度在800 μg/ml時(shí)的細(xì)胞增殖率與對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），質(zhì)量濃度在400 μg/ml時(shí)的細(xì)胞增殖率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），質(zhì)量濃度在200 μg/ml時(shí)的細(xì)胞增殖率也高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），其增殖率隨著濃度的降低而升高。馬齒莧乙醇提取物的質(zhì)量濃度在800、1600、3200 μg/ml時(shí)的細(xì)胞增殖率與對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

3.3馬齒莧提取物對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞分泌NO的影響

試劑盒測(cè)定硝酸及亞硝酸鹽的含量可間接反映NO的釋放量，模型組的LPS刺激RAW 264.7巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO的能力明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），提示成功建立了炎癥細(xì)胞模型。結(jié)果提示，加藥組的馬齒莧水提取物的質(zhì)量濃度在200～800 μg/ml，以及正丁醇提取物質(zhì)量濃度在200、400 μg/ml時(shí)，與模型組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。加藥組的乙酸乙酯提取物質(zhì)量濃度在200、400 μg/ml時(shí)，NO釋放量低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。加藥組的乙醇提取物、正丁醇提取物、乙酸乙酯質(zhì)量濃度均在800 μg/ml，以及石油醚提取物質(zhì)量濃度在400 μg/ml時(shí)，NO釋放量低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。乙醇提取物的質(zhì)量濃度在1600、3200 μg/ml時(shí)，石油醚提取物的質(zhì)量濃度在800 μg/ml時(shí)，NO釋放量明顯低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）（圖2）。

4討論

巨噬細(xì)胞在炎癥中的地位尤為重要[15]，其主要作用表現(xiàn)在活化的巨噬細(xì)胞能夠分泌炎癥介質(zhì)，減少巨噬細(xì)胞炎癥介質(zhì)的分泌是檢測(cè)藥物抗炎效果的一個(gè)重要因素[16]。NO是活化的巨噬細(xì)胞分泌的一種重要的炎癥介質(zhì)[17]，過量產(chǎn)生的NO在炎癥反應(yīng)的發(fā)生與發(fā)展中起著多種作用。研究表明，NO在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、潰瘍性結(jié)腸炎、癲癇、充血性心力衰竭等炎癥性疾病的產(chǎn)生、發(fā)展過程中起重要作用[18]。此外，當(dāng)NO高速率產(chǎn)生時(shí)，NO能與O2-結(jié)合形成過氧亞硝基陰離子[19]，可能是導(dǎo)致細(xì)胞損傷、能量耗竭和細(xì)胞死亡的重要因素，也是NO產(chǎn)生病理損傷作用的重要環(huán)節(jié)[20]。鑒于NO途徑在炎癥產(chǎn)生過程的重要作用，因此能夠減少NO生成的藥物，具有潛在的抗炎活性。近年采用LPS誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7所建立的巨噬細(xì)胞炎癥模型已被廣泛用于確定物質(zhì)抗炎活性和研究抗炎機(jī)制的模型[21-25]。抑制巨噬細(xì)胞過量分泌炎癥介質(zhì)NO己經(jīng)成為治療炎癥反應(yīng)和疾病的主要研究靶點(diǎn)，是炎癥治療的有效手段之一[26]。因此，本研究設(shè)計(jì)了以細(xì)胞增殖率、細(xì)胞上清中NO的分泌量為考察指標(biāo)，綜合評(píng)價(jià)馬齒莧不同極性部位提取物對(duì)巨噬細(xì)胞增殖的影響和抗炎活性。

為了排除不同提取物可能對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞產(chǎn)生毒性刺激，使得細(xì)胞的正常增殖因抑制而對(duì)功能評(píng)價(jià)造成偏差，本研究首先對(duì)不同提取物在細(xì)胞水平上的安全性進(jìn)行了評(píng)估。MTT可通過與活細(xì)胞線粒體中的酶產(chǎn)生顯色反應(yīng)，因而可直接反映活細(xì)胞數(shù)量，并可依此測(cè)算細(xì)胞存活率。研究提示，馬齒莧水提取物、正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物之后要進(jìn)行的研究濃度范圍內(nèi)，細(xì)胞存活率均大于對(duì)照組的90%以上。本研究中，水提取物與乙醇提取物都較易溶解，樣品濃度最高可達(dá)到3200 μg/ml，但前期研究提示，水提取物質(zhì)量濃度在1600、3200 μg/ml時(shí)，細(xì)胞存活率均小于對(duì)照組的90%，因此后續(xù)并未對(duì)上述2個(gè)質(zhì)量濃度展開研究。而正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物因?yàn)檩^難溶解，因此實(shí)驗(yàn)樣品的濃度最高只能達(dá)到800 μg/ml。因此，本研究對(duì)質(zhì)量濃度在800 μg/ml以下的水提取物、正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物及質(zhì)量濃度在3200 μg/ml以下的乙醇提取物進(jìn)行了后續(xù)研究。

本研究結(jié)果提示，質(zhì)量濃度在800 μg/ml時(shí)，水和乙醇提取物沒有促細(xì)胞增殖能力，而石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物則表現(xiàn)出不同程度的促細(xì)胞增殖能力，推測(cè)促細(xì)胞增殖的物質(zhì)極性較弱。石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物三者相比較，乙酸乙酯提取物的促細(xì)胞增殖能力明顯低于石油醚和正丁醇提取物，從極性的角度看，乙酸乙酯的極性在石油醚和正丁醇之間，然而提取物作用效果和物質(zhì)的溶解規(guī)律存在不一致性，推測(cè)乙酸乙酯可能對(duì)于促細(xì)胞增殖物質(zhì)具有影響作用。研究提示，水提取物質(zhì)量濃度在200～800 μg/ml時(shí)，隨著濃度的降低，其細(xì)胞增殖率隨之升高，推測(cè)800 μg/ml水提物中可能含有對(duì)細(xì)胞有毒性的物質(zhì)，同時(shí)也存在促細(xì)胞增殖物質(zhì)，此時(shí)毒性物質(zhì)的作用大于促細(xì)胞增殖物質(zhì)的作用，隨著毒性物質(zhì)濃度降低，對(duì)細(xì)胞的毒性作用隨之降低，而此時(shí)，促細(xì)胞增殖物質(zhì)的作用開始大于毒性作用，漸漸表現(xiàn)出促細(xì)胞增殖作用。

本研究結(jié)果也提示，馬齒莧乙醇、正丁醇、乙酸乙酯和石油醚提取物可以減少由LPS刺激RAW264.7巨噬細(xì)胞分泌NO（P<0.05），4種提取物隨著濃度的升高，對(duì)NO的抑制作用呈現(xiàn)從弱到強(qiáng)、從無到有的現(xiàn)象，可能具有一定的量效關(guān)系。前期研究提示，相同質(zhì)量的馬齒莧原料經(jīng)過提取后獲得的5種提取物中，石油醚提取物的獲得量是最少的，而且在800 μg/ml濃度時(shí)，其NO釋放量低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），推測(cè)石油醚提取物是最有效的抗炎活性部位。馬齒莧水提取物在濃度200～800 μg/ml時(shí)，對(duì)NO沒有抑制作用（P>0.05），而國內(nèi)研究學(xué)者發(fā)現(xiàn)馬齒莧水提取物具有抗炎活性[22]，推測(cè)可能是由研究材料不同所導(dǎo)致的，比如產(chǎn)地因素，另外也有可能是前期處理方法不同所導(dǎo)致的，本研究中的水提取物由超聲提取獲得的，而先前文獻(xiàn)報(bào)道的水提取物通過煎煮法獲得。本研究結(jié)果和文獻(xiàn)報(bào)道[22]的乙醇提取物抗炎活性強(qiáng)于水提取物這一結(jié)論相符。

綜上所述，本研究摸索了馬齒莧不同極性部位提取物用于體外細(xì)胞試驗(yàn)的安全濃度范圍，以及在安全濃度范圍內(nèi)不同提取物對(duì)巨噬細(xì)胞的增殖作用和對(duì)LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞釋放NO的抑制作用，本研究結(jié)果提示，馬齒莧水、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚部位具有促巨噬細(xì)胞增殖的作用，馬齒莧乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚部位能夠抑制LPS刺激的巨噬細(xì)胞釋放NO，因此具有潛在的抗炎活性，而石油醚部位是潛在的最有效的抗炎活性部位，這為后續(xù)抗炎物質(zhì)基礎(chǔ)研究、抗炎藥物和其他抗炎產(chǎn)品的開發(fā)提供了理論依據(jù)。

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