脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2、頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管與頸動(dòng)脈粥樣硬化及缺血性腦卒中的相關(guān)性研究

田 曄， 賈 歡， 田 暉， 魏敬美， 于 萍， 郭 力， 李 彬

腦卒中尤其是缺血性腦卒中以其高發(fā)病率、高復(fù)發(fā)率、高死亡率及高致殘率成為全世界密切關(guān)注的衛(wèi)生問(wèn)題。在缺血性腦卒中諸多可能病因中，臨床最常見(jiàn)的即為大動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)，而頸動(dòng)脈不穩(wěn)定斑塊的脫落及破裂又是缺血性腦卒中發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[1，2]。研究表明，動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成及不穩(wěn)性與內(nèi)皮損傷、氧化應(yīng)激、炎細(xì)胞的浸潤(rùn)及新生血管生成等因素密切相關(guān)[3]。動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)的新生血管發(fā)育不成熟，通透性增高，加重脂質(zhì)、炎性細(xì)胞等物質(zhì)沉積，新生血管破裂還易引起斑塊內(nèi)出血，加重斑塊的易損性。同時(shí)斑塊內(nèi)增多的炎性物質(zhì)可刺激巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生基質(zhì)蛋白酶等更多的炎性因子，進(jìn)一步加重斑塊易損性和新生血管生成[4]。

近些年來(lái)超聲造影(Contrast-enhanced Ultrasonography，CEUS)技術(shù)發(fā)展突飛猛進(jìn)，在檢測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊新生血管方面發(fā)揮著越來(lái)越大的作用。CEUS 技術(shù)具有較高的時(shí)間分辨率及空間分辨率，且造影劑微氣泡具有類(lèi)似紅細(xì)胞的血流動(dòng)力學(xué)特征，可作為血管內(nèi)示蹤劑，CEUS 對(duì)活體頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管的檢測(cè)具有很高的敏感性，而且具有半定量、定量評(píng)價(jià)的功能[5]。

研究顯示，炎性因子不僅在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展及破裂的過(guò)程具有重要的作用，同時(shí)也可以刺激斑塊內(nèi)新生血管的生成，加重斑塊的不穩(wěn)定性，與急性腦血管事件發(fā)生密切相關(guān)[6]。近些年來(lái)，脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lipoprotein Associated Phospholipase A2，Lp-PLA2)在動(dòng)脈粥樣硬化及其相關(guān)心腦血管疾病中引起廣泛關(guān)注。Lp-PLA2是一種非Ca2+依賴(lài)性的絲氨酸酯酶，屬于磷脂酶A2超家族中的成員。70%～80%的Lp-PLA2在血漿中通過(guò)載脂蛋白B(Apolipoprotein B，ApoB)與低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein Cholesterol，LDL)結(jié)合。Lp-PLA2在水解氧化型低密度脂蛋白(Oxidized Low Density Lipoprotein，ox-LDL)的過(guò)程中可以生成氧化型游離脂肪酸(Oxidized Free Fatty Acids，ox-FFA)和溶血卵磷脂(Lyso-phosphatidylcholine，lyso-PC)兩種較強(qiáng)的致炎物質(zhì)，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成，加重斑塊的不穩(wěn)性[7]。

目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)于Lp-PLA2水平、頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管與頸動(dòng)脈粥樣硬化，尤其是與缺血性腦卒中的相關(guān)性仍存在一定爭(zhēng)議。本研究旨在探討Lp-PLA2水平與頸動(dòng)脈粥樣硬化和缺血性腦卒中的相關(guān)性，并通過(guò)CEUS的方法研究頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)與缺血性腦卒中及Lp-PLA2的關(guān)系。

1 資料和方法

1.1 一般資料 收集2016年12月～2017年12月于河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院治療經(jīng)頸動(dòng)脈超聲檢測(cè)雙側(cè)頸動(dòng)脈至少一處內(nèi)膜中層厚度(IMT) >1.5 mm且為低回聲或不均質(zhì)回聲斑的患者60例為病例組，其中男性34例，女性26例，平均年齡(60.27±8.11)歲，高血壓患者33例，糖尿病患者22例，吸煙者22例，飲酒者10例。收集同期在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院體檢中心體檢經(jīng)頸動(dòng)脈超聲檢測(cè)未發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的健康體檢者60例為對(duì)照組，其中男性32例，女性28例，平均年齡(58.33±7.60)歲，高血壓患者19例，糖尿病患者2例，吸煙者14例，飲酒者9例。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)除急性前循環(huán)腦梗死且同側(cè)頸動(dòng)脈存在低回聲或不均質(zhì)回聲斑塊外的其他類(lèi)型腦梗死；腦出血、腦血管畸形等顱腦疾病。(2)各種嚴(yán)重先天性心臟病、各種嚴(yán)重冠心病、各種嚴(yán)重心律失常；嚴(yán)重的肺部疾病(慢性阻塞性肺疾病、彌漫性肺間質(zhì)疾病，重癥肺炎)，各種原因引起的呼吸衰竭；(3)合并有嚴(yán)重肝腎功能損害者(肝酶和肌酐超出正常值3倍以上者)；(4)合并各種急慢性感染性疾病患者；(5)原發(fā)性血脂蛋白異常及繼發(fā)性脂蛋白代謝異常(未控制的糖尿病、甲狀腺功能減退癥、腎病綜合征、肝內(nèi)外膽管阻塞及其他肝病、胰腺炎、異常球蛋白血癥、乙醇中毒；(6)意識(shí)障礙、卒中所致感覺(jué)性失語(yǔ)或嚴(yán)重肢體癱瘓而不能完成檢查、其他對(duì)診查不依從者；(7)妊娠期、哺乳期及準(zhǔn)備妊娠的婦女；(8)有造影劑過(guò)敏者及嚴(yán)重的過(guò)敏體質(zhì)者；(9)患者近期酗酒或藥物濫用史；(10)正在參加其他臨床試驗(yàn)的患者或3 m內(nèi)參加過(guò)臨床試驗(yàn)者；(11)合并多系統(tǒng)嚴(yán)重疾病、多器官功能不全及自身免疫性疾病者等；(12)無(wú)法靜脈給藥的患者；(13)拒絕簽署知情同意書(shū)者；(14)精神類(lèi)疾病患者及正在或曾經(jīng)服用抗精神病藥物者；(15)各種外傷患者。所有入選患者及健康體檢者均由其本人或監(jiān)護(hù)者簽署知情同意書(shū)，并提供血樣，過(guò)程符合醫(yī)學(xué)倫理及人道主義要求。

1.2 方法

1.2.1 血液指標(biāo)測(cè)定 住院患者于入院次日晨抽取空腹靜脈血標(biāo)本，健康對(duì)照者于體檢當(dāng)日抽取空腹靜脈血標(biāo)本，所得標(biāo)本一部分進(jìn)行血常規(guī)、生化全項(xiàng)及凝血常規(guī)檢查，另一部分放入促凝管內(nèi)，充分混合均勻，于標(biāo)本采集30 min內(nèi)在2～8 ℃環(huán)境下以3000 r/min離心15 min，留取血清，-80 ℃ 保存?zhèn)溆?。血清Lp-PLA2采用南京諾爾曼生物技術(shù)有限公司的NORMAN 系列散射比濁分析儀及Lp-PLA2測(cè)定試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，嚴(yán)格按照說(shuō)明說(shuō)進(jìn)行操作。

1.2.2 頸動(dòng)脈超聲造影檢查 對(duì)所有病例組患者進(jìn)行頸動(dòng)脈超聲造影檢查，采用型號(hào)為GE Logiq E9型的彩色多普勒超聲診斷儀，探頭采用ML6-15型探頭，探頭頻率為6～15 MHz，造影時(shí)機(jī)械指數(shù)調(diào)節(jié)為0.05～0.08，焦點(diǎn)設(shè)置為2～3 cm，增益設(shè)定為95%。采用意大利 Bracco公司的第二代超聲造影劑聲諾維(SonoVue)，主要活性成分為六氟化硫(sF6)。首先應(yīng)用常規(guī)二維超聲縱向橫向分別檢查雙側(cè)頸動(dòng)脈的斑塊位置、大小、形態(tài)及其回聲特點(diǎn)，非腦梗死患者選取斑塊厚度>1.5 mm的體積最大的斑塊為研究對(duì)象，急性前循環(huán)腦梗死者選取病灶對(duì)應(yīng)側(cè)最大斑塊為研究對(duì)象，雙側(cè)梗死者選取斑塊大者，記錄斑塊位置、大小、形態(tài)及回聲特點(diǎn)。切換到超聲造影模式前選取好最合適位置，應(yīng)用團(tuán)注法將造影劑混懸液經(jīng)留置針進(jìn)行快速注射，注射0.9 ml后立即推注0.9%氯化鈉溶液5 ml，同時(shí)啟動(dòng)計(jì)時(shí)器并進(jìn)行圖像視頻采集，保持探頭固定，記錄觀察1.5 min左右。依據(jù)國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)對(duì)斑塊的穩(wěn)定程度設(shè)定分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[8]。分為4個(gè)等級(jí)：斑塊內(nèi)無(wú)增強(qiáng)的新生血管信號(hào)為Ⅰ級(jí)；斑塊內(nèi)部或周邊數(shù)個(gè)點(diǎn)狀增強(qiáng)的新生血管信號(hào)為Ⅱ級(jí)；斑塊周邊和內(nèi)部散在點(diǎn)狀及線樣增強(qiáng)的新生血管信號(hào)為Ⅲ級(jí)；斑塊內(nèi)部和周邊彌漫點(diǎn)狀及線樣增強(qiáng)的新生血管信號(hào)為Ⅳ級(jí)(見(jiàn)圖1)。

1.2.3 頭部核磁共振檢查(Magnetic Resonance Imaging，MRI) 對(duì)病例組患者行頭部核磁共振檢查，設(shè)備采用型號(hào)為GESigna3.0T超導(dǎo)型的核磁共振掃描儀，所得到的影像學(xué)圖像經(jīng)至少2名影像科專(zhuān)業(yè)神經(jīng)組診斷醫(yī)師閱片，當(dāng)出現(xiàn)意見(jiàn)不同情況時(shí)，醫(yī)師間協(xié)商討論后得出一致結(jié)論。根據(jù)頭部核磁檢查結(jié)果，將病例組患者分為腦梗死組和非腦梗死組。

2 結(jié) 果

2.1 病例組與對(duì)照組比較

2.1.1 基礎(chǔ)臨床資料比較 本研究共納入符合入組標(biāo)準(zhǔn)的頸動(dòng)脈粥樣硬化患者60例，體檢中心健康體檢者60例，兩組在性別、年齡、吸煙、飲酒方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，在高血壓、糖尿病方面差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見(jiàn)表1)。

2.1.2 血液學(xué)指標(biāo)比較 病例組的Lp-PLA2，LDL明顯高于對(duì)照組，高密度脂蛋白(High Density Lipoprotein Cholesterol，HDL)低于對(duì)照組，三項(xiàng)指標(biāo)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，兩組Lp-PLA2，LDL，HDL水平分別為(257.23±131.99)ng/ml、(171.55±80.91)ng/ml；(3.13±0.73)mmol/L、(2.85±0.71)mmol/L和(1.09±0.24)mmol/L、(1.37±0.28)mmol/L(見(jiàn)表2)。

2.2 腦梗死組與非腦梗死組比較

2.2.1 頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)比較 將病例組60例患者根據(jù)頭顱核磁共振檢查是否存在梗死灶分為腦梗死組和非腦梗死組，其中腦梗死組40例，非腦梗死組20例，均行頸動(dòng)脈超聲造影檢查，并對(duì)兩組頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)進(jìn)行比較。其中腦梗死組Ⅰ級(jí)1例(2.5%)、Ⅱ級(jí)10例(25.0%)、Ⅲ級(jí)18例(45.0%)、Ⅳ級(jí)11例(27.5%)，中位等級(jí)為Ⅲ級(jí)；非腦梗死組Ⅰ級(jí)4例(20.0%)、Ⅱ級(jí)9例(45.0%)、Ⅲ級(jí)3例(15.0%)、Ⅳ級(jí)4例(20.0%)，中位等級(jí)為Ⅱ級(jí)。兩組頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見(jiàn)表3)。

2.2.2 血液學(xué)指標(biāo)比較 腦梗死組與非腦梗死組Lp-PLA2，LDL，HDL水平分別為(266.40±123.52)ng/ml、(238.90±149.18)ng/ml；(3.21±0.75)mmol/L、(2.98±0.66)mmol/L和(1.09±0.21)mmol/L、(1.10±0.29)mmol/L。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，兩組在Lp-PLA2，LDL，HDL水平方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(見(jiàn)表4)。

2.3 不同頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)的Lp-PLA2比較 病例組60例患者根據(jù)頸動(dòng)脈超聲造影斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)分為4組，其中Ⅰ級(jí)5例、Ⅱ級(jí)19例、Ⅲ級(jí)21例、Ⅳ級(jí)15例。各等級(jí)Lp-PLA2水平分別為(186.80±108.27)ng/ml、(255.68±112.67)ng/ml、(271.66±119.87)ng/ml、(262.46±176.38)ng/ml。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，Lp-PLA2與頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(見(jiàn)表5)。

2.4 Lp-PLA2與頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成的相關(guān)性 對(duì)病例組及對(duì)照組患者以是否存在頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊為自變量，以血清Lp-PLA2水平為因變量進(jìn)行單因素分析，結(jié)果示Lp-PLA2水平與頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成相關(guān) (OR=1.007，95%CI1.004～1.011)，將高血壓、糖尿病、腦梗死加入進(jìn)行調(diào)整，通過(guò)多因素分析顯示Lp-PLA2水平與頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成仍具有相關(guān)性(OR=1.005，95%CI1.000～1.010)，將高血壓、糖尿病、腦梗死、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白加入進(jìn)行調(diào)整，多因素分析結(jié)果顯示，Lp-PLA2水平不再是頸動(dòng)脈斑塊形成的獨(dú)立危險(xiǎn)因素 (OR=1.004，95%CI0.999～1.010) (見(jiàn)表6)。

2.5 頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)與腦梗死的相關(guān)性 對(duì)病例組的患者以是否發(fā)生腦梗死為自變量，以頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)為因變量，采用Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，新生血管Ⅲ級(jí)與頸動(dòng)脈粥樣硬化患者發(fā)生腦梗死密切相關(guān)(OR=24，95%CI1.952～295.061)，其他3個(gè)等級(jí)未發(fā)現(xiàn)明顯相關(guān)性(見(jiàn)表7)。

表1 病例組與對(duì)照組基礎(chǔ)臨床資料的比較[n(%)]

P<0.05 表示兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

表2 病例組與對(duì)照組血液學(xué)指標(biāo)的比較

P<0.05 表示兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

表3 腦梗死組與非腦梗死組頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)比較[n(%)]

P<0.05表示兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

表4 腦梗死組與非腦梗死組血液學(xué)指標(biāo)比較[n(%)]

P>0.05表示兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

表5 不同頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)的Lp-PLA2比較

P>0.05表示兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

表6 Lp-PLA2與頸動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性

模型1：調(diào)整高血壓、糖尿病、腦梗死；模型2：調(diào)整高血壓、糖尿病、腦梗死、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白

表7 頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)與腦梗死的相關(guān)性

圖1 頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)：A 新生血管I級(jí)；B 新生血管Ⅱ級(jí)；C 新生血管III級(jí)；D 新生血管ⅳ級(jí)

3 討 論

動(dòng)脈粥樣硬化是缺血性腦血管病、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病等威脅人類(lèi)健康常見(jiàn)的缺血性心腦血管疾病的最主要病理基礎(chǔ)。大量研究證明，動(dòng)脈粥樣硬化是一種血管壁的慢性炎性反應(yīng)疾病，其發(fā)生和發(fā)展與炎細(xì)胞的浸潤(rùn)及炎性因子的參與密切相關(guān)[9]。Lp-PLA2屬于磷脂酶A2超家族中的一員，又被稱(chēng)為血小板活化因子乙酰水解酶(Platelet Activating Factor-acetylhydrolase，PAF-AH)，它是一種非Ca2+依賴(lài)性的絲氨酸酯酶，由441個(gè)氨基酸組成，相對(duì)分子質(zhì)量為45KD[10]。血漿中絕大多數(shù)的Lp-PLA2通過(guò)載脂蛋白B與低密度脂蛋白結(jié)合，少量通過(guò)其他載脂蛋白與高密度脂蛋白、極低密度脂蛋白、脂蛋白a等結(jié)合[11]。Lp-PLA2水解ox-LDL可生成ox-FFA和lyso-PC，這兩種較強(qiáng)的致炎物質(zhì)通過(guò)氧化應(yīng)激反應(yīng)損傷內(nèi)皮細(xì)胞，誘導(dǎo)黏附因子表達(dá)，促進(jìn)巨噬細(xì)胞吞噬ox-LDL成為泡沫細(xì)胞，同時(shí)刺激血管平滑肌細(xì)胞增殖，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成，還能引起多種炎性因子釋放，刺激斑塊內(nèi)產(chǎn)生更多的Lp-PLA2，使斑塊不穩(wěn)定性明顯增加[12]。Mannheim等[13]研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)癥狀性頸動(dòng)脈狹窄患者行頸動(dòng)脈內(nèi)膜剝脫術(shù)，病理檢查顯示斑塊內(nèi)Lp-PLA2及l(fā)yso-PC水平均增高，并且呈一定的正相關(guān)性。Yang等[14]對(duì)前循環(huán)腦梗死患者的頸動(dòng)脈斑塊進(jìn)行多普勒超聲評(píng)估發(fā)現(xiàn)，混合斑塊組和穩(wěn)定斑塊組Lp-PLA水平顯著低于不穩(wěn)定斑塊組，多因素分析顯示Lp-PLA2水平是頸動(dòng)脈斑塊形成及其易損性的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一。

本研究通過(guò)對(duì)60例頸動(dòng)脈存在不穩(wěn)定斑塊的動(dòng)脈粥樣硬化患者和60例無(wú)頸動(dòng)脈斑塊的健康對(duì)照者進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，兩組之間在高血壓、糖尿病方面存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，兩組血液中Lp-PLA2、LDL、HDL水平均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。Logistic回歸分析顯示，Lp-PLA2是頸動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)因素(OR=1.007，95%CI1.004～1.011)，校正高血壓、糖尿病后并未改變Lp-PLA2與頸動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性(OR=1.005，95%CI1.000～1.010)，進(jìn)一步校正LDL與HDL后Lp-PLA2與頸動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性降低(OR=1.004，95%CI0.999～1.010)，不再是其獨(dú)立的危險(xiǎn)因素。此結(jié)果也表明，Lp-PLA2在促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化形成的過(guò)程中與LDL、HDL等脂類(lèi)存在一定的相關(guān)性。

目前研究多認(rèn)為動(dòng)脈粥樣硬化是缺血性腦卒中的主要病理基礎(chǔ)，而炎性因子在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成、發(fā)展、破裂中起著不可忽視的作用[15]，越來(lái)越多的研究關(guān)注到動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)炎性因子與缺血性腦血管事件之間的關(guān)系，Lp-PLA2被認(rèn)為是心血管事件的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，并得到了廣泛的證實(shí)，但Lp-PLA2與缺血性腦血管病的相關(guān)性仍存在一定的爭(zhēng)議[16]。本研究中，60例頸動(dòng)脈粥樣硬化患者根據(jù)頭部核磁共振是否存在腦梗死病灶分為腦梗死組和非腦梗死組，統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，兩組間在Lp-PLA2水平方面并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。本研究并未發(fā)現(xiàn)Lp-PLA2與腦梗死之間的相關(guān)性，可能與樣本量小有關(guān)，同時(shí)本研究中腦梗死組與非腦梗死組患者均為頸動(dòng)脈存在不穩(wěn)定斑塊者，且為橫斷面研究，而Lp-PLA2又與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定性密切相關(guān)，故兩組之間的差異性會(huì)因此而削弱，非腦梗死組患者隨著時(shí)間推移可能會(huì)發(fā)生缺血性心腦血管事件。另外，Lp-PLA2有兩種常用的檢測(cè)方法，一種是含量檢測(cè)，一種是活動(dòng)度檢測(cè)，研究發(fā)現(xiàn)含量檢測(cè)易受LDL、HDL等脂類(lèi)物質(zhì)影響，而活動(dòng)度檢測(cè)可能相對(duì)更穩(wěn)定，但兩者在預(yù)測(cè)疾病方面并不能完全相互替代[17]。本研究?jī)H應(yīng)用了含量一種檢測(cè)方法，結(jié)果尚缺少全面性。但是，曼哈頓研究在2014年公布的結(jié)果顯示，對(duì)1946例受試者平均隨訪11 y，最終151例發(fā)生缺血性腦卒中，校正相關(guān)危險(xiǎn)因素后Lp-PLA2含量和活動(dòng)度水平與缺血性腦卒中無(wú)顯著相關(guān)性[18]。Tai等[19]研究也發(fā)現(xiàn)Lp-PLA2含量和活動(dòng)度水平與急性缺血性腦血管事件無(wú)明顯的相關(guān)性。因此，有關(guān)Lp-PLA2水平與缺血性腦卒中的相關(guān)性及其預(yù)測(cè)價(jià)值仍需要更多高水平的研究進(jìn)一步探究。

動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的易損性與脂質(zhì)核心增大、纖維帽變薄、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)以及斑塊內(nèi)新生血管形成關(guān)系密切[3，20]。斑塊內(nèi)新生血管是動(dòng)脈粥樣斑塊不穩(wěn)定性的重要原因之一，易誘發(fā)斑塊內(nèi)出血、刺激炎性因子生成，導(dǎo)致斑塊破裂，繼發(fā)性血栓形成、栓子脫落導(dǎo)致心腦血管事件發(fā)生[21，22]。近些年來(lái)，CEUS技術(shù)的發(fā)展使得實(shí)時(shí)、定量觀測(cè)頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管得以實(shí)現(xiàn)，研究發(fā)現(xiàn)CEUS顯示的斑塊內(nèi)新生血管密度及斑塊的增強(qiáng)程度與斑塊的回聲有關(guān)，新生血管密度、增強(qiáng)程度越高，斑塊高危性越大，并且CEUS的結(jié)果與組織學(xué)檢測(cè)結(jié)果相一致[23]。研究發(fā)現(xiàn)，斑塊內(nèi)新生血管密度及增強(qiáng)強(qiáng)度與癥狀性頸動(dòng)脈粥樣硬化患者斑塊的不穩(wěn)定性以及發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)心腦血管事件密切相關(guān)[24，25]。本研究的結(jié)果一定程度上與上述研究相一致，通過(guò)對(duì)腦梗死組與非腦梗死組患者行頸動(dòng)脈超聲造影發(fā)現(xiàn)，兩組間在新生血管等級(jí)方面有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，腦梗死組的新生血管等級(jí)以III級(jí)為主，非腦梗死組以II級(jí)為主，其III、IV級(jí)新生血管比例明顯高于非腦梗死組。這也說(shuō)明，高等級(jí)新生血管與頸動(dòng)脈斑塊不穩(wěn)定性及腦梗死的發(fā)生存在一定的相關(guān)性。通過(guò)Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，新生血管III級(jí)與頸動(dòng)脈粥樣硬化患者發(fā)生腦梗死密切相關(guān)(OR=24，95%CI1.952-295.061)。Huang等[26]對(duì)存在頸動(dòng)脈軟斑的缺血性腦卒中患者和非缺血性腦卒中患者行CEUS檢查，同樣發(fā)現(xiàn)，斑塊內(nèi)新生血管的等級(jí)越高，缺血性腦卒中發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)越大，但兩組在造影劑峰強(qiáng)度和達(dá)峰時(shí)間方面并無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)新生血管結(jié)構(gòu)不成熟，內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)育異常及內(nèi)皮間連接不完整，導(dǎo)致其通透性增強(qiáng)，各類(lèi)物質(zhì)易在斑塊內(nèi)沉積和易發(fā)生滲漏，也可引起斑塊內(nèi)炎性反應(yīng)以及血管反應(yīng)，刺激巨噬細(xì)胞分泌更多的炎性因子，加重斑塊的不穩(wěn)定性[4，27]。在本研究中，將60例頸動(dòng)脈粥樣硬化患者根據(jù)CEUS檢查中新生血管等級(jí)分為4組，探究Lp-PLA2水平與斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)之間的相關(guān)性，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析并未發(fā)現(xiàn)兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。盡管?chē)?guó)內(nèi)一些小樣本量研究顯示Lp-PLA2與斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)存在相關(guān)性，但尚缺乏大規(guī)模、高質(zhì)量研究證實(shí)。Kolodgie等[28]通過(guò)尸檢發(fā)現(xiàn)，因冠狀動(dòng)脈相關(guān)事件猝死的患者，其動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)Lp-PLA2的含量隨著斑塊的發(fā)生、發(fā)展逐漸增高，高濃度的Lp-PLA2多分布在壞死核心、易損破裂斑塊等部位。Dallit等[13]也通過(guò)免疫組化等方法發(fā)現(xiàn)，Lp-PLA2主要分布在壞死的脂質(zhì)核心區(qū)。另外，研究發(fā)現(xiàn)，斑塊內(nèi)新生血管多起自動(dòng)脈外膜，由動(dòng)脈外膜向斑塊內(nèi)生長(zhǎng)，可進(jìn)入斑塊中心、斑塊肩部及內(nèi)膜[29]，Saito等[25]通過(guò)頸動(dòng)脈內(nèi)膜剝脫術(shù)發(fā)現(xiàn)，斑塊內(nèi)新生血管在斑塊肩部更多見(jiàn)。我們推斷，Lp-PLA2水平升高和斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)增高都能夠一定程度上影響動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性，但其在斑塊內(nèi)的主要分布部位及作用機(jī)制存在一定的差異，因此兩者之間并無(wú)明顯的相關(guān)性。本研究尚存在一些不足之處，首先本研究樣本量較小，在混在因素較多的情況下可能一定程度上影響研究結(jié)果，需要更大樣本量，更高質(zhì)量的研究來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證。其次，本研究?jī)H檢測(cè)了Lp-PLA2的含量，并未進(jìn)行活動(dòng)度檢測(cè)與分析，結(jié)果尚不夠全面。另外，目前國(guó)際上對(duì)超聲造影的新生血管分級(jí)尚無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，并且超聲檢查均具有一定的主觀性，為了減小主觀因素影響，本研究均由同一組超聲科專(zhuān)家全程進(jìn)行操作。此外，由于技術(shù)條件限制，本研究?jī)H采用二維超聲在單一平面對(duì)斑塊內(nèi)新生血管進(jìn)行評(píng)估，結(jié)果存在一定的誤差，而三維立體超聲評(píng)價(jià)斑塊內(nèi)新生血管相對(duì)更加全面。

綜上所述，Lp-PLA2水平與頸動(dòng)脈粥樣硬化不穩(wěn)定斑塊形成具有一定的相關(guān)性，是頸動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)因素，并在一定程度上受LDL、HDL等因素的影響。Lp-PLA2水平與缺血性腦卒中無(wú)明顯的相關(guān)性，尚需更多研究進(jìn)一步證實(shí)。頸動(dòng)脈斑塊內(nèi)新生血管等級(jí)與缺血性腦卒中的發(fā)生相關(guān)，新生血管等級(jí)高者(Ⅲ、Ⅳ級(jí))，更易發(fā)生缺血性腦卒中，但尚未發(fā)現(xiàn)新生血管等級(jí)與Lp-PLA2水平之間的相關(guān)性，需要更多大樣本量、高質(zhì)量的研究來(lái)共同探討。