石家莊地區(qū)蛋雞新城疫、禽流感H9抗體檢測及免疫程序初探

曹立輝 劉學(xué)彬 胡建建 王春肖 張曉云 高國權(quán) 馮國瑞

摘要：為了掌握蛋雛雞和青年雞的新城疫（ND）和禽流感H9抗體消長規(guī)律，形成雛雞、青年雞推薦免疫程序，在1、3、6、10、14、20、28、42、54、65、94、114日齡隨機(jī)抽取24只雞采血進(jìn)行抗體監(jiān)測。結(jié)果可知雛雞1～6日齡ND抗體水平先升高再降低，6日齡即達(dá)到71092;7日齡免疫后沒有產(chǎn)生足夠的抗體，至20日齡達(dá)到41092;20日齡免疫后ND抗體在一直上升，至54日齡開始下降，此后開始上升，但至114日齡抗體又開始下降;禽流感H9抗體在7日齡、20日齡免疫后，直至42日齡后才上升，并于55日齡第三次免疫后高于101092，此后至114日齡一直高于101092。綜上，根據(jù)本試驗結(jié)果制定了適合石家莊地區(qū)的免疫程序。

關(guān)鍵詞：ND;禽流感H9;抗體消長規(guī)律;推薦免疫程序

H9亞型禽流感與新城疫（ND）仍然是危害養(yǎng)禽業(yè)的嚴(yán)重疫病，雞群一旦感染，傳播迅速，數(shù)天內(nèi)波及全群，發(fā)病率和死亡率甚至超過90%，給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。焦鳳超等^[1]對產(chǎn)蛋異常的蛋雞群進(jìn)行新城疫帶毒檢測，陽性率為45.00%;張恒^[2]監(jiān)測鄱陽湖地區(qū)活禽市場、家禽散養(yǎng)戶、養(yǎng)殖場，2015、2016年度禽流感H9陽性率分別為11.53%和1.03%。雖然疫控中心有免疫程序指導(dǎo)養(yǎng)殖場，但是個別雞場可能由于防控不當(dāng)，死雞、淘雞現(xiàn)象普遍，制定出適合石家莊地區(qū)實際情況的免疫程序已經(jīng)刻不容緩。只有在整個養(yǎng)殖周期中至少要保證禽流感H9抗體和ND抗體在8log2以上方可達(dá)到保護(hù)作用。

1材料與方法

1.1試驗材料

禽流感病毒H9亞型血凝抑制試驗抗原和禽流感病毒H9亞型陽性血清由哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)，雞新城疫病毒血凝抑制試驗（ HI）抗原、雞新城疫病毒血凝抑制試驗（ HI）陽性血清購自青島易邦生物工程有限公司。

1.2試驗動物

1日齡海蘭灰產(chǎn)蛋雞，存欄2，000羽，正定縣某養(yǎng)殖場飼養(yǎng)。按常規(guī)飼養(yǎng)方法飼養(yǎng)。其免疫接種程序見表1，所有疫苗均購自正規(guī)生產(chǎn)廠家。

1.3試驗方法

在1、3、6、1 0、1 4、20、28、42、54、65、94、1 14日齡隨機(jī)抽取24只雞采血進(jìn)行ND、禽流感H9抗體檢測。為避免出現(xiàn)試劑、人為操作對試驗結(jié)果的影響，在每次采血完畢分離血清后冷凍，試驗結(jié)束后解凍由一名試驗人員一次性進(jìn)行檢測。

1.4試驗方法及標(biāo)準(zhǔn)

ND抗體檢測方法按HA-HI，標(biāo)準(zhǔn)為GB/T16550-2008;禽流感H9抗體按HA-HI方法，標(biāo)準(zhǔn)為GB/T18936-2003。

1.5試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

在檢測結(jié)果中去掉一個最大值和一個最小值，要求最大值和最小值差≥3時方可進(jìn)行最大差異化處理。試驗數(shù)據(jù)采用EXCEL進(jìn)行分析，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2結(jié)果與分析

2.1雛雞（1—28日齡）抗體監(jiān)測結(jié)果

2.2青年雞（29—114日齡）抗體監(jiān)測結(jié)果

雛雞ND抗體監(jiān)測結(jié)果（表2）表明，新城疫抗體1日齡為8.141092、3日齡為9.431092、6日齡為7.67log92、此后至20日為4.63log2，均為下降趨勢，說明7日齡免疫后至20日齡沒有產(chǎn)生足夠抗體，分析原因一方面是黏膜免疫起作用而檢測的是體液免疫（即循環(huán)抗體），另一方面油苗有較長時間的免疫空白期;20日齡免疫7d后（28日齡）抗體隨即上升，得益于7日齡免疫細(xì)胞記憶作用。新城疫7日齡免疫后，一直下降，20日齡免疫以后抗體提升較快，所以20日齡加強免疫是必須的。

雛雞禽流感H9抗體監(jiān)測結(jié)果表明，禽流感H9抗體在雛雞階段一直處于下降趨勢。

青年雞ND抗體監(jiān)測結(jié)果（表3）表明，42日齡抗體升高，54日齡下降，50日齡第三次免疫后至94日齡抗體一直升高，94日齡最高為10.53log2;隨后開始下降，114日齡降為8.91log2。

青年雞禽流感H9抗體監(jiān)測結(jié)果表明，42～114日齡抗體一直保持高位，免疫3次聯(lián)苗效果不錯。

3討論和小結(jié)

3.1免疫程序制定依據(jù)

由以上試驗可知，雛雞1—6日齡ND抗體水平先升高再降低，6日齡即達(dá)到7log2;7日齡免疫后沒有產(chǎn)生足夠的抗體，至20日齡達(dá)到4log2; 20日齡免疫后ND抗體在一直上升，至54日齡開始下降，所以ND疫苗在55日齡第三次免疫為佳。此后開始上升，但至114日齡，抗體又開始下降，所以115日齡第四次加強免疫較好。ND疫苗有活疫苗和滅活疫苗，而且ND病毒只有一個血清型，兩種疫苗互相促進(jìn)抗體的生長，7、20、55、1 1 0日齡免疫足可以達(dá)到抵御外界病毒的作用。

禽流感H9抗體在7日齡、20日齡免疫后，直至42日齡后才上升，并于55日齡第三次免疫后高于10log2，此后至114日齡一直高于10log2。

3.2由試驗結(jié)果推薦適合當(dāng)?shù)氐拿庖叱绦?/p>

另外，為充分考慮雛雞免疫系統(tǒng)不健全、免疫應(yīng)答系統(tǒng)還沒有充分建立，7日齡免疫新一支一法一流油苗對機(jī)體刺激性大，同時又有點眼的活疫苗，建議使用免疫增強劑促進(jìn)抗體的生成、減輕免疫應(yīng)激反應(yīng)。

建議使用優(yōu)勢流行毒株、針對性更強、免疫副反應(yīng)小的疫苗，能夠提前2～3天產(chǎn)生抗體，縮短免疫空白期，并且免疫持續(xù)期長，保護(hù)率更高，保證抗體水平均一穩(wěn)定。

疫苗接種免疫還應(yīng)該充分考慮雞場的生物安全措施是否完善，只要環(huán)境中沒有野毒存在或者很少，不會消耗機(jī)體抗體，細(xì)胞免疫會維持很長時間^[3]。臨床監(jiān)測抗體是確定免疫時間最可靠的、最直接的依據(jù)。

冬季春季是禽病多發(fā)季節(jié)，防控壓力較大，而且日齡越小，感染率越高^[4];應(yīng)該嚴(yán)格做好免疫工作，加強雞群的飼養(yǎng)管理和雞舍環(huán)境衛(wèi)生的管理，嚴(yán)格執(zhí)行衛(wèi)生防疫措施，雖然抗體水平普遍較高，但仍出現(xiàn)病毒感染、產(chǎn)蛋率下降、死亡等問題，可能是因為免疫不到位或者毒株發(fā)生變異。因此應(yīng)根據(jù)實際情況制定合適的免疫程序，做好免疫，保證抗體水平均一，提高保護(hù)率。

參考文獻(xiàn)

[1]焦鳳超，李迎曉，張敏，等信陽地區(qū)商品蛋雞新城疫血清流行病學(xué)調(diào)查[J]黑龍江畜牧獸醫(yī)，2017（02下）：126- 128

[2]張恒2015-2016年鄱陽湖地區(qū)禽流感病毒分子流行病學(xué)研究[D]北京中國疾控中心病毒病所201 7

[3]祁興運蛋雞場疫苗的使用策略[J]當(dāng)代畜禽養(yǎng)殖業(yè)，2017（05）：46-47

[4]汪招雄，歐陽金旭，楊玉瑩，楊豐利，江濤，陳雪嬌規(guī)模化蛋雞場H9N2亞型禽流感疫苗免疫效果調(diào)查[J]中國動物傳染病學(xué)報，2016，24（01）：15-21