潰瘍性結(jié)腸炎和結(jié)直腸癌患者血清MUC1的表達水平及臨床意義

鄧 磊，何 松，趙曉莉（重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院消化科，重慶400010）

炎癥性腸病是一組多病因引起的、異常免疫介導(dǎo) 的腸道慢性及復(fù)發(fā)性炎癥，潰瘍性結(jié)腸炎（UC）是炎癥性腸病的主要類型之一，其臨床特點為反復(fù)發(fā)作的腹痛、腹瀉及黏液血便。UC在我國的發(fā)病率逐年提高，躍升為腸道的常見炎癥性疾病之一，病程中腸道炎癥反復(fù)發(fā)作刺激腸道組織，可導(dǎo)致結(jié)直腸惡性腫瘤的發(fā)生[1]。UC相關(guān)性結(jié)直腸癌為UC嚴(yán)重并發(fā)癥之一，雖然其只占所有結(jié)直腸癌的1%～2%，但占UC患者死因的10%～15%[2]。近年來，有關(guān)黏蛋白基因的異常表達在消化道疾病的發(fā)生發(fā)展中的研究日益增多。有研究發(fā)現(xiàn)，基因MUC1在UC及結(jié)直腸癌患者中的表達異常，表明MUC1與腫瘤、炎癥的發(fā)生有關(guān)[3-4]。本研究主要目的是通過檢測入組對象的血清MUC1（sMUC1）水平，比較各組間差異，了解sMUC1在UC及結(jié)直腸患者中表達的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年9月至2016年10月于本院確診的UC患者31例（UC組）作為研究對象，其中男 13例，女 18例；年齡 17～85歲，平均（55.67±19.61）歲。結(jié)直腸癌（結(jié)直腸癌組）31例患者中男19例，女12例；年齡 43～86 歲，平均（63.51±10.29）歲，將結(jié)直腸癌組根據(jù)淋巴結(jié)及臟器轉(zhuǎn)移情況分為轉(zhuǎn)移組和未轉(zhuǎn)移組。健康體檢人員31例（對照組），其中男17例，女14例；年齡 34～73歲，平均（56.25±11.58）歲。入組標(biāo)準(zhǔn)：UC組遵循《炎癥性腸病診斷與治療的共識意見（2012年·廣州）》[5]的診斷標(biāo)準(zhǔn)；結(jié)直腸癌組術(shù)前未接受放化療，以術(shù)后病理檢查確診結(jié)直腸癌。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并自身免疫性疾病及其他系統(tǒng)腫瘤（如胰腺癌、乳腺癌等）患者。本研究已通過本院倫理委員會審查同意。2組患者年齡、血紅蛋白、清蛋白等臨床指標(biāo)比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。2組患者僅血紅蛋白、清蛋白及C反應(yīng)蛋白水平與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

1.2 方法 通過本院病案系統(tǒng)收集入組病例的性別、年齡、清蛋白、血紅蛋白、C反應(yīng)蛋白及癌胚抗原等相關(guān)臨床資料。入組對象禁飲8 h、禁食12 h后采靜脈血4 mL，3 000 r/min離心10 min，取上層血清，保存于-80℃冰箱。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）方法檢測入組對象sMUC1水平（試劑盒購自武漢伊萊瑞特生物科技有限公司，按說明書方法進行檢測）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS22.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料均以表示，各組數(shù)據(jù)差異比較采用獨立樣本t檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

sMUC1檢測結(jié)果顯示：UC組為1.1～19.88 U/mL，平均（8.64±6.09）U/mL；結(jié)直腸癌組為 2.5～29.87 U/mL，平均（9.98±7.75）U/mL，其中轉(zhuǎn)移組為（13.80±9.69）U/mL，未轉(zhuǎn)移組為（6.82±3.58）U/mL；對照組為 0.98～12.9 U/mL，平均（6.06±3.49）U/mL。結(jié)直腸癌組和 UC 組的sMUC1水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.014、0.047，P＜0.05），轉(zhuǎn)移組高于未轉(zhuǎn)移組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.010）；但結(jié)直腸癌組與UC組sMUC1表達水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.453）。

3 討 論

UC是炎癥性腸病種類之一，腸道存在慢性復(fù)發(fā)性炎癥，病程越長，腸道炎癥刺激越重，癌變風(fēng)險也逐漸增加。所以UC相關(guān)性癌變也是當(dāng)下的研究熱點之一。近年來，許多動物實驗發(fā)現(xiàn)，黏蛋白的異常表達，與炎癥及腫瘤的發(fā)生發(fā)展密不可分，可能是UC及其癌變的發(fā)生發(fā)展機制之一，故本研究主要探討sMUC1在結(jié)直腸癌及UC患者中表達的臨床意義。

黏蛋白是一組大分子的糖蛋白，主要分布于腺體管道及自然腔道上皮細(xì)胞表面，對黏膜起到水化、潤滑和保護作用，在腸道上皮細(xì)胞表面組成黏液屏障，如果黏蛋白出現(xiàn)異常表達，會導(dǎo)致腸道屏障結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而啟動腸道炎癥[6]。黏蛋白種類很多，包括MUC1、MUC2、MUC3、MUC13及 MUC17 等，可以劃分為分泌型黏蛋白和膜結(jié)合型黏蛋白，而膜結(jié)合型黏蛋白的主要類型就是MUC1[7-8]。既往研究表明，MUC1可調(diào)節(jié)多種信號通路，從而影響細(xì)胞的增殖和凋亡，進而維持腸道內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，所以，MUC1的破壞或表達異常，都可能使腸道形成易感環(huán)境，從而導(dǎo)致炎癥或相關(guān)腫瘤的發(fā)生[9]。MUC1基因的表達，在大多數(shù)上皮細(xì)胞中都處于基線水平，若MUC1基因的表達失控，大量MUC1蛋白通過信號通路（TAK1→NF-κB）的調(diào)節(jié)，可促進結(jié)直腸炎癥及腫瘤的發(fā)生[10-11]。同樣，在正常結(jié)直腸組織中，MUC1基因也處于基線表達水平，其表達產(chǎn)物為高度糖基化的MUC1蛋白，但是在UC和結(jié)直腸癌組織中，MUC1的表達量明顯增高，且糖基化程度也降低，提示MUC1基因糖基化程度在慢性炎癥及炎癥相關(guān)性腫瘤的發(fā)生中起著重要作用[12]。近年來在動物模型中也發(fā)現(xiàn)，在給炎癥性腸病模型小鼠接種MUC1疫苗后，其發(fā)生炎癥性腸病的時間較對照組明顯推遲，且能夠阻止其惡變[13]。并且在敲除白細(xì)胞介素10（IL-10）基因的小鼠（炎癥性腸病老鼠模型）中轉(zhuǎn)入人MUC1基因后，與單純敲除IL-10基因的小鼠比較，這種MUC1陽性的小鼠炎癥發(fā)生早、程度重、癌變率高[12]?？傊鲜鲅芯勘砻?，MUC1的異常表達可能導(dǎo)致腸道炎癥的發(fā)生及癌變。本研究結(jié)果顯示，MUC1在結(jié)直腸癌及UC患者血清中的表達水平明顯高于對照組（P＜0.05），與多數(shù)研究結(jié)果一致，提示通過檢測sMUC1水平，對UC和結(jié)直腸癌的診斷有參考價值。

表1 各組臨床資料比較（±s）

表1 各組臨床資料比較（±s）

注：與對照組比較，aP＜0.05

組別結(jié)直腸癌組UC組對照組男（n）19 13 17女（n）12 18 14年齡（歲）63.51±10.29a 55.67±19.61 56.25±11.58血紅蛋白（g/L）127.87±21.84 117.03±25.69a 133.41±13.71清蛋白（g/L）40.52±4.14 37.29±8.06a 42.37±5.45 C反應(yīng)蛋白（g/L）16.59±34.33 25.23±39.62a 5.87±4.74癌胚抗原（ng/mL）12.13±31.58 22.27±83.74 2.16±1.58

NIV[14]的薈萃分析結(jié)果表明，MUC1基因在UC患者的腸道組織中，尤其是在破潰的隱窩膿腫部位的表達水平明顯升高。同時也有研究發(fā)現(xiàn)，在上皮來源的惡性腫瘤患者中，不僅可在腫瘤組織中檢測出MUC1蛋白，而且在血清中也可檢測到該蛋白[13]，提示其與腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移相關(guān)，可以作為腫瘤轉(zhuǎn)移的一項評價指標(biāo)。

MUC1蛋白脫去胞質(zhì)與胞膜相連部分，則可在血清中被檢測，這應(yīng)該是蛋白酶水解MUC1蛋白的結(jié)果[15]。因此可以通過實驗方法檢測血清中MUC1水平。本研究通過對入組病例sMUC1水平的測定，發(fā)現(xiàn)其表達水平較對照組均升高，且結(jié)直腸癌組中，有轉(zhuǎn)移組sMUC1水平較無轉(zhuǎn)移組明顯升高，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。同時，sMUC1水平在結(jié)直腸癌組普遍高于UC組，雖差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），但這可能是本研究樣本量偏少所導(dǎo)致，還有待進一步擴大樣本量進行深入研究?？傊?，本研究發(fā)現(xiàn)，MUC1基因在UC及結(jié)直腸癌患者中高表達，提示其與炎癥性疾病及相關(guān)腫瘤的發(fā)生有關(guān)，對炎癥程度判斷、是否癌變及腫瘤轉(zhuǎn)移也有一定提示意義。但目前尚不能將其作為UC和結(jié)直腸癌的獨立檢測指標(biāo)，還需進一步的大樣本量研究來探討。

綜上所述，MUC1的異常表達與UC的發(fā)生發(fā)展及癌變有關(guān)，檢測sMUC1的表達水平，對UC患者炎癥成端、癌變風(fēng)險，以及對結(jié)直腸癌患者腫瘤轉(zhuǎn)移的情況均有一定參考價值，也可為其治療提供新的思路。