• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    針刺對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血管緊張素Ⅱ及其受體1以及γ-氨基丁酸的影響*

    2018-11-30 09:15:02董愛愛郭繼龍崔依依冀雨芳李上慶劉高峰來曉云冀來喜
    中國(guó)中醫(yī)急癥 2018年11期
    關(guān)鍵詞:延髓勻漿腎小球

    董愛愛 郭繼龍 崔依依 冀雨芳 李上慶 劉高峰 來曉云 董 琦 冀來喜△

    (1.天津中醫(yī)藥大學(xué),天津 300193;2.山西中醫(yī)藥大學(xué),山西 太原 030600;3.山東省淄博市張店區(qū)中醫(yī)院,山東 淄博 255035;4.山西省中醫(yī)藥研究院,山西 030012)

    原發(fā)性高血壓(EH)是腦血管疾病的高危因素,自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)模型因可高度模擬人高血壓的形成及發(fā)展過程,且適于降壓方案的篩選,一直是眾多學(xué)者關(guān)注的熱點(diǎn)。EH病理進(jìn)展及其所致的心腦腎靶器官受損與高 RAS 活性[1]和高交感神經(jīng)興奮性[2]密切相關(guān)。經(jīng)典的RAS主要由腎素原(AGT)、腎素、ACE、血管緊張素Ⅰ(AngⅠ)、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)及其相應(yīng)的受體組成。循環(huán)中的AGT在腎素的作用下轉(zhuǎn)變成AngⅠ,AngⅠ在ACE的作用下水解為AngⅡ,后者進(jìn)而水解為AngⅢ,但因AngⅠ、AngⅢ的代謝清除率較高,因此在 RAS 中仍是 AngⅡ起主要作用[3]。AT1 受體(AT1R)介導(dǎo)的生物學(xué)效應(yīng)較AT2受體強(qiáng),其可收縮血管、刺激醛固酮釋放,進(jìn)而改變血壓、影響水/電解質(zhì)平衡[4]。外周RAS受中樞調(diào)控,中樞RAS系統(tǒng)活性與交感神經(jīng)活動(dòng)聯(lián)系密切[5],中樞交感輸出的最終共同通路[6]在延髓頭端腹外側(cè)區(qū)(RVLM)區(qū),且該區(qū)活動(dòng)受到GABA的調(diào)節(jié)[7]?;诖思凹韧n題組針穴降壓研究[8]基礎(chǔ),本研究討論針刺對(duì) SHR延髓、腎臟 AngⅡ、AT1R及交感樞紐RVLM區(qū)GABA的影響?,F(xiàn)報(bào)告如下。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選用16周雄性Wistar大鼠15只,體質(zhì)量250~290 g。 SHR大鼠 30只,體質(zhì)量 280~310 g,北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供,許可證號(hào):SCXK(京)2009-17。飼養(yǎng)于山西中醫(yī)藥大學(xué) SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。

    1.2 試藥與儀器 BP-600A全自動(dòng)大小鼠無(wú)創(chuàng)血壓測(cè)量系統(tǒng),成都泰盟軟件有限公司產(chǎn)品;Bio-RAD 680酶標(biāo)儀,美國(guó)伯樂公司產(chǎn)品。兔多克隆抗AT1抗體(博士德ZP1974BP74);兔多克隆抗GABA抗體(博奧森bs-2252R);博士德山羊抗兔IgG、卵白素-生物素結(jié)合物(SABC)、二氨基聯(lián)苯胺(DAB)。

    1.3 動(dòng)物分組 30只SHR大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為SHR組、針刺組各15只。15只WKY大鼠設(shè)為WKY組作為對(duì)照組。

    1.4 干預(yù)方法 適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后開始干預(yù)。針刺組取雙側(cè)人迎、曲池、足三里穴治療,留針20 min。每日1次,每治療 6 d,休息 1 d;療程 8周,共治療 48次。WKY組、SHR組和針刺組采用自制鼠板行相同時(shí)間、相同程度的捆綁固定,并于針刺治療結(jié)束后解除固定。每日自由食水,取材前1 d禁食水。

    1.5 標(biāo)本采集 大鼠行水合氯醛300 mg/kg,腹腔注射麻醉。眼眶采血2 mL,離心血清備用。于左側(cè)腎門處止血鉗夾閉腎動(dòng)靜脈,迅速摘取左腎,將其上極腎皮質(zhì)游離出來,按質(zhì)量(g)∶容積(mL)=1∶9 比例加入冰 0.9%氯化鈉注射液進(jìn)行勻漿,5000 r/min離心15 min取組織上清待測(cè);將余左腎冠狀切取5 mm厚,于4%多聚甲醛中4℃固定。經(jīng)左心灌流0.9%氯化鈉注射液150 mL,冰臺(tái)操作迅速取腦,去除小腦,取Obex點(diǎn)以上延髓及大腦,參照Paxinos&Watson大鼠腦圖譜可定位 RVLM[9],并將固定完的腦組織置于大鼠腦模具上選擇包含RVLM的延髓段(第十二對(duì)腦神經(jīng)頭側(cè)第一分支前 0.6~1.0 mm,中線旁開 1.7~1.9 mm,腹側(cè)表面下0.5~0.8 mm)。針頭吸取左側(cè)RVLM區(qū)組織,勻漿(同腎組織)備測(cè),剩余延髓RVLM層面腦片于4%多聚甲醛中固定。組織固定36 h后,按常規(guī)制備石蠟包埋切片,連續(xù)切片厚3 μm。按各指標(biāo)5張腦片留取備檢。

    1.6 免疫組化和圖像分析 采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色(ABC法),石蠟切片,經(jīng)二甲苯、梯度(由高至低)酒精依次脫蠟至水。3%H2O2(PBS配)15min去除內(nèi)源性過氧化物酶的活性,高壓鍋15 min熱抗原修復(fù),羊血清37℃孵育30 min以去除非特異性染色。AT1R抗體(稀釋 1∶100)、GABA 抗體(稀釋 1∶400),加一抗后于4℃過夜;加入二抗山羊抗兔IgG于37℃孵育30 min;再加SABC(卵白素-生物素結(jié)合物)37℃孵育30 min;最后用二氨基聯(lián)苯胺(DAB,博士德)顯色,蘇木素復(fù)染核30 s。用非免疫兔血清IgG(1∶5)代替一抗作陰性對(duì)照,未觀察到陽(yáng)性表達(dá)。用Image pro plus圖像軟件計(jì)算AT1R、GABA免疫組化陽(yáng)性表達(dá)平均光密度(MOD)。

    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用IBM SPSS Statistics 22統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以(±s)表示,各組間各指標(biāo)比較采用單因素方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    2.1 各組大鼠收縮壓及舒張壓比較 見表1。SHR組大鼠血壓明顯高于WKY組,針刺組血壓顯著低于SHR 組(P<0.05)。

    表1 各組大鼠血壓比較(mmHg,±s)

    表1 各組大鼠血壓比較(mmHg,±s)

    與 WKY 組比較,*P<0.05;與 SHR 組比較,△P<0.05;與針刺組比較,#P<0.05。 下同

    組別 n D B P S B P W K Y 組 1 5 9 8.0 9±2 3.3 0△ 1 1 8.2 5±6.2 8△S H R 組 1 5 1 4 0.7 5±1 4.1 3*# 1 6 5.7 5±9.0 6*#針刺組 1 5 1 2 5.9 1±1 2.5 8△ 1 5 1.7 9±7.9 4△

    2.2 各組大鼠血清、腎、延髓左側(cè)RVLM區(qū)AngⅡ水平比較 見表2。SHR大鼠血清、腎和延髓左側(cè)RVLM區(qū)勻漿AngⅡ明顯高于WKY組(P<0.05);針刺組腎和腦組織勻漿AngⅡ顯著低于SHR組(P<0.05),而血清 AngⅡ無(wú)顯著變化(P>0.05)。

    表2 各組大鼠血清、腎和延髓左側(cè)RVLM區(qū)勻漿AngⅡ比較(pg/mL,±s)

    表2 各組大鼠血清、腎和延髓左側(cè)RVLM區(qū)勻漿AngⅡ比較(pg/mL,±s)

    組 別 腎 延髓R V L M區(qū)W K Y 組 1 9 7.3 6±3 7.8 3△ 2 8 7.4 2±4 1.2 6△n 血清1 5 3 5 4.4 5±2 9.1 5△S H R 組 4 4 5.6 3±5 2.3 3*#5 2 6.1 5±6 5.8 3*#1 5 6 9 8.5 2±3 7.2 8*針刺組 1 5 6 4 2.9 4±2 9.8 3 3 3 5.2 6±4 9.5 8△ 3 9 2.4 6±4 3.6 4△

    2.3 各組腎臟AT1R、延髓右側(cè)RVLM區(qū)AT1、GABA表達(dá) 見表3,圖1,圖2。SHR組的腎臟、延髓右側(cè)RVLM區(qū)AT1R分布的MOD值顯著高于WKY組(P<0.05),GABA表達(dá)結(jié)果則是前者低于后者 (P<0.05)。與SHR組相比,針刺組AT1R表達(dá)降低,GABA表達(dá)升高(P<0.05)。

    表3 各組大鼠腎臟AT1R、延髓右側(cè)RVLM區(qū)AT1R與GABA 比較(MOD,±s)

    表3 各組大鼠腎臟AT1R、延髓右側(cè)RVLM區(qū)AT1R與GABA 比較(MOD,±s)

    ?組 別 R V L M區(qū)A T 1 R R V L M區(qū)G A B A W K Y 組 0.2 1 8±0.0 3 1△ 0.3 4 9±0.0 3 6△n 腎A T 1 R 1 5 0.1 4 4 ±0.0 2 2△S H R 組 0.4 8 5±0.0 8 3*# 0.1 6 8±0.0 4 5*#1 5 0.5 9 1±0.1 8 7*#針刺組 1 5 0.3 7 9±0.0 5 7△ 0.3 4 1±0.0 4 6△ 0.2 0 2±0.0 2 8△

    圖1 各組大鼠腎免疫組化AT1R表達(dá)(免疫細(xì)胞化學(xué)染色ABC法,400倍)

    圖2 各組延髓RVLM區(qū)免疫組化AT1R及GABA表達(dá)(免疫細(xì)胞化學(xué)染色ABC法,200倍)

    3 討 論

    本實(shí)驗(yàn)表明針刺能明顯降低SHR大鼠的血壓。降壓效應(yīng)指標(biāo)比較顯示,血漿AngⅡ水平遠(yuǎn)高于腎組織,這與龍海波等[10]研究結(jié)果一致。因腎臟局部依靠自分泌/旁分泌系統(tǒng)及腦組織血腦屏障的特殊存在,腎[11]和腦[12]的RAS活性均可獨(dú)立于循環(huán)調(diào)控。腎組織中AngⅡ水平與腎小球、腎小管內(nèi)皮細(xì)胞等部位AT1R的表達(dá)呈正相關(guān),本研究亦得出SHR組腎、延髓AngⅡ水平及AT1R表達(dá)較WKY組一致性升高。

    與WKY組比較,SHR組腎臟AT1R表達(dá)(MOD)顯著增加,且存在腎小動(dòng)脈管壁增生、腎小球基底膜皺縮、球囊間隙增寬、腎小球固縮等明顯的高血壓靶器官損傷病理改變。針刺治療組腎損害減輕,腎小球固縮發(fā)生較少,球囊間隙增寬不明顯。因此針刺治療能部分緩解腎小球萎縮,AT1R陽(yáng)性表達(dá)明顯低于模型組,可為針刺降壓及腎保護(hù)作用提供線索。腎臟局部的AngⅡ可以直接與近端腎小管AT1R相結(jié)合,導(dǎo)致腎臟高血壓、高灌注、高濾過等損傷。有研究表明[4]AngⅡ可以促進(jìn)腎小球臟層細(xì)胞肥大,使足突增寬,纖連蛋白合成增加。

    本研究表明給予針刺治療后,腎臟的AngⅡ水平低于SHR組,而對(duì)血清中的AngⅡ作用不明顯;說明針刺能使腎臟AngⅡ合成減少,與AT1R結(jié)合發(fā)揮的效應(yīng)被抑制。本實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)針刺組與模型組血清AngⅡ的差異,推測(cè)受到AT1R降低后代償性AngⅡ升高等混雜因素影響。研究表明[13],AT1R被阻斷的情況下,機(jī)體內(nèi)AngⅡ雖然會(huì)代償性升高,但并不能發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng);相反,更多的AngⅡ經(jīng)由Ang1-7及AT2R途徑發(fā)揮降壓效應(yīng)。另有研究發(fā)現(xiàn)[3],腎臟局部產(chǎn)生的AngⅡ,部分可隨尿排出;但因循環(huán)中的AngⅡ亦可通過腎小球?yàn)V過膜而重吸收,因此血循環(huán)及尿中AngⅡ水平不能反映腎臟局部的RAS活性,但腎內(nèi)的AngⅡ濃度與腎臟硬化呈正相關(guān)。這為本研究結(jié)果—針刺治療降低腎組織AngⅡ水平及AT1R陽(yáng)性表達(dá)并能部分緩解腎小球萎縮提供了理論基礎(chǔ)。

    針刺組較SHR組延髓RVLM區(qū)AngⅡ、AT1R降低而GABA則升高,提示SHR組GABA能神經(jīng)元功能降低,對(duì)RVLM區(qū)交感活動(dòng)的內(nèi)源性抑制作用減弱。另外SHR組增多的AT1R,可作用于α1腎上腺素受體從而促進(jìn)交感神經(jīng)元興奮,研究表明AngⅡ、AT1R與谷氨酸受體[14]密切相關(guān),共同參與調(diào)節(jié)交感神經(jīng)活性。腦組織AT1R表達(dá)在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元內(nèi),GABA主要由神經(jīng)元內(nèi)的谷氨酸經(jīng)谷氨酸脫羧酶(GAD)脫羧而成[15],主要儲(chǔ)存于胞漿內(nèi)。 AT1R 分布集中在血管、心、腦及腎中,介導(dǎo)AngⅡ的大部分生物學(xué)效應(yīng),引起血管收縮及靶器官損害。GABA作為抑制性神經(jīng)遞質(zhì)可抑制升壓神經(jīng)元,這種緊張性抑制作用在SHR大鼠較正常血壓大鼠明顯減弱[16]。AT1R和GABA有共同[17]的下游通路——鈣離子依賴的PKC路徑來調(diào)節(jié)蛋白的磷酸化。

    本實(shí)驗(yàn)得出,與Wistar大鼠相比,SHR大鼠的RVLM區(qū)AT1受體MOD明顯較高,而同區(qū)域GABA受體MOD明顯偏低,因此我們推測(cè)RVLM區(qū)細(xì)胞表面的AT1R、GABA受體密度差異可能是SHR對(duì)AngⅡ刺激反應(yīng)性提高及血壓升高的主要因素。研究表明[18]AngⅡ亦可影響神經(jīng)遞質(zhì)的釋放,可激活RVLM區(qū)GABA能神經(jīng)元末端的AT1R,通過G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)Gi/Go蛋白通路、NADPH-ROS氧化應(yīng)激路徑,抑制神經(jīng)突觸末端GABA的釋放,降低GABA受體的活性。本研究表明針刺能部分逆轉(zhuǎn)SHR大鼠RVLM區(qū)AngⅡ高水平及AT1R高表達(dá),并調(diào)高GABA表達(dá)水平。RVLM為重要的交感神經(jīng)通路核團(tuán)[19],能整合動(dòng)脈壓力感受器的神經(jīng)傳入及GABA能神經(jīng)元的抑制性中轉(zhuǎn)信號(hào)。

    針刺降壓作用確切,機(jī)制研究頗多。Ohsawa H等[20]通過針刺大鼠后肢足三里穴,觀察到平均動(dòng)脈壓下降和腎交感神經(jīng)活性下降,而切斷同側(cè)坐骨神經(jīng)或股神經(jīng),該效應(yīng)消失;并發(fā)現(xiàn)肢體傳入纖維與腦干胃迷走傳出節(jié)前神經(jīng)元的功能聯(lián)系比腹部傳入纖維要強(qiáng)。另外一項(xiàng)針刺對(duì)迷走和交感神經(jīng)影響的實(shí)驗(yàn)研究[21]表明,以麥角胺阻滯交感神經(jīng)節(jié)后纖維,針刺足三里穴引起的迷走神經(jīng)作用消失,說明迷走神經(jīng)是“足三里”針效的必要傳出途徑,又必須在交感神經(jīng)存在的情況下才能發(fā)生。我們認(rèn)為針刺足三里穴興奮迷走神經(jīng)能拮抗交感神經(jīng)作用,從而抑制交感興奮引起的血壓升高。這也是本實(shí)驗(yàn)針刺曲池、足三里穴降壓的理論依據(jù)。針刺人迎穴可通過刺激穴下交感神經(jīng)干和迷走神經(jīng),起到調(diào)整自主神經(jīng)功能從而降壓的作用[22]。 安娜等[23]研究亦顯示針刺人迎穴可以通過影響5-HT1A等抑制交感神經(jīng)活性,改變感覺信息傳遞,從而降壓。基于上述針刺穴位的神經(jīng)理論基礎(chǔ)及本研究結(jié)果,提示針刺人迎、曲池、足三里穴可以提高RVLM區(qū)GABA的表達(dá),降低腎組織AngⅡ、AT1R水平,抑制RAS系統(tǒng)及交感神經(jīng)傳出從而降壓。

    猜你喜歡
    延髓勻漿腎小球
    延髓梗死遠(yuǎn)期不良預(yù)后的影像學(xué)分析
    延髓不同區(qū)域梗死的預(yù)后分析
    勻漿法提取沙棗果總黃酮工藝研究
    植物研究(2018年4期)2018-07-24 00:52:26
    中西醫(yī)治療慢性腎小球腎炎80例療效探討
    不同誘導(dǎo)方式制備的大鼠肝勻漿代謝酶活性及凍儲(chǔ)方式的比較
    腎小球系膜細(xì)胞與糖尿病腎病
    前列安丸對(duì)瓊脂所致慢性前列腺炎模型大鼠前列腺勻漿中IgG和血清Zn的影響
    多種不同指標(biāo)評(píng)估腎小球?yàn)V過率價(jià)值比較
    中西醫(yī)結(jié)合治療小兒急性腎小球腎炎的療效觀察
    延髓麻痹吞咽障礙的神經(jīng)機(jī)理與臨床診斷
    久久人人精品亚洲av| aaaaa片日本免费| 在线播放国产精品三级| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 免费看a级黄色片| 亚洲成人国产一区在线观看| 夜夜爽天天搞| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产精品国产高清国产av| 久久久久久人人人人人| 村上凉子中文字幕在线| 国产成人啪精品午夜网站| aaaaa片日本免费| 国产日本99.免费观看| 国内精品久久久久久久电影| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 后天国语完整版免费观看| a在线观看视频网站| 在线观看日韩欧美| 久9热在线精品视频| 久久久国产成人免费| 久久这里只有精品19| 国产精品 欧美亚洲| 男女那种视频在线观看| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产在线观看jvid| 欧美zozozo另类| 中文字幕精品亚洲无线码一区 | 亚洲全国av大片| 欧美黄色片欧美黄色片| 一区二区三区精品91| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 色婷婷久久久亚洲欧美| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 久久这里只有精品19| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久热这里只有精品99| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 成人精品一区二区免费| 精品国产亚洲在线| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 精品国产乱码久久久久久男人| 久9热在线精品视频| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产av在哪里看| 国产三级黄色录像| 国产精华一区二区三区| 欧美中文综合在线视频| 欧美乱色亚洲激情| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲久久久国产精品| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产日本99.免费观看| 一级毛片精品| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产男靠女视频免费网站| 美女大奶头视频| 国内揄拍国产精品人妻在线 | 国产精品二区激情视频| 长腿黑丝高跟| 99国产精品99久久久久| 色播在线永久视频| 国产成人av激情在线播放| 国产伦在线观看视频一区| 免费无遮挡裸体视频| 成人av一区二区三区在线看| 国产在线观看jvid| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 日韩欧美免费精品| 1024视频免费在线观看| 国产真实乱freesex| 国产日本99.免费观看| 制服人妻中文乱码| 久久久久免费精品人妻一区二区 | 国产三级在线视频| 一区二区日韩欧美中文字幕| videosex国产| 在线观看免费日韩欧美大片| 在线看三级毛片| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 亚洲一区二区三区不卡视频| 午夜福利欧美成人| 亚洲国产精品成人综合色| www.精华液| 久久国产精品影院| 日本精品一区二区三区蜜桃| 精品无人区乱码1区二区| 黑人操中国人逼视频| 99国产极品粉嫩在线观看| 黑丝袜美女国产一区| 十分钟在线观看高清视频www| 国产精品亚洲美女久久久| 国产野战对白在线观看| 国产精品久久视频播放| 亚洲av中文字字幕乱码综合 | 国产单亲对白刺激| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 18禁国产床啪视频网站| 桃红色精品国产亚洲av| 一级毛片精品| 国产在线观看jvid| 黄片大片在线免费观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久精品人妻少妇| 满18在线观看网站| 黄色a级毛片大全视频| 黄色 视频免费看| av有码第一页| 91麻豆av在线| 国产精品99久久99久久久不卡| 在线永久观看黄色视频| 一级作爱视频免费观看| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 一进一出好大好爽视频| 可以在线观看的亚洲视频| 黑人操中国人逼视频| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 男男h啪啪无遮挡| 神马国产精品三级电影在线观看 | 中出人妻视频一区二区| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 国产三级黄色录像| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 久久精品国产亚洲av高清一级| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲片人在线观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 母亲3免费完整高清在线观看| 好男人在线观看高清免费视频 | 热99re8久久精品国产| 桃红色精品国产亚洲av| 国产极品粉嫩免费观看在线| svipshipincom国产片| 亚洲av成人一区二区三| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| www日本黄色视频网| a级毛片a级免费在线| 青草久久国产| 精品日产1卡2卡| 精品国产乱子伦一区二区三区| 日本熟妇午夜| 精品电影一区二区在线| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 免费观看人在逋| 日韩有码中文字幕| 免费无遮挡裸体视频| 久久中文看片网| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 国产成+人综合+亚洲专区| 精品国产一区二区三区四区第35| av视频在线观看入口| 日韩欧美在线二视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 51午夜福利影视在线观看| 久久精品91无色码中文字幕| 国产高清videossex| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 长腿黑丝高跟| 亚洲欧美精品综合久久99| 熟女电影av网| 国产精品精品国产色婷婷| 校园春色视频在线观看| 亚洲一区二区三区色噜噜| 亚洲人成77777在线视频| 中出人妻视频一区二区| ponron亚洲| 性色av乱码一区二区三区2| 国产成人啪精品午夜网站| 身体一侧抽搐| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 大型黄色视频在线免费观看| 久久久久久久午夜电影| 久久午夜亚洲精品久久| 日韩视频一区二区在线观看| 亚洲国产精品sss在线观看| 一个人免费在线观看的高清视频| 日本一区二区免费在线视频| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 搞女人的毛片| av天堂在线播放| 久久久水蜜桃国产精品网| 久久精品成人免费网站| 美女扒开内裤让男人捅视频| 欧美乱色亚洲激情| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 长腿黑丝高跟| 日韩高清综合在线| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 亚洲av成人一区二区三| ponron亚洲| 十八禁网站免费在线| 成年人黄色毛片网站| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 黄色成人免费大全| 男女下面进入的视频免费午夜 | 夜夜夜夜夜久久久久| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 伦理电影免费视频| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 99国产精品99久久久久| av欧美777| 可以在线观看的亚洲视频| 日韩精品中文字幕看吧| 亚洲av电影在线进入| 国产片内射在线| 欧美+亚洲+日韩+国产| cao死你这个sao货| 国产亚洲精品av在线| 午夜福利一区二区在线看| 国产极品粉嫩免费观看在线| 欧美日韩精品网址| av在线天堂中文字幕| 日韩欧美国产在线观看| 男人舔女人的私密视频| 这个男人来自地球电影免费观看| 757午夜福利合集在线观看| 亚洲精品色激情综合| 久久久国产成人精品二区| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 成人亚洲精品一区在线观看| 91老司机精品| 啦啦啦免费观看视频1| 国产av又大| 欧美国产精品va在线观看不卡| 免费在线观看完整版高清| 国产区一区二久久| 国产高清视频在线播放一区| 视频在线观看一区二区三区| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 十八禁网站免费在线| 人妻久久中文字幕网| 12—13女人毛片做爰片一| 欧美在线一区亚洲| 搡老熟女国产l中国老女人| 久久中文看片网| 欧美中文日本在线观看视频| 午夜福利高清视频| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 看免费av毛片| 午夜免费观看网址| 精品久久蜜臀av无| 日韩欧美国产一区二区入口| 男人操女人黄网站| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 成人午夜高清在线视频 | 国产黄色小视频在线观看| 男女那种视频在线观看| avwww免费| 三级毛片av免费| av免费在线观看网站| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲avbb在线观看| 亚洲中文字幕日韩| 国产精品一区二区三区四区久久 | 18禁观看日本| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 日韩中文字幕欧美一区二区| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 久久久久久国产a免费观看| 午夜免费激情av| 国产激情久久老熟女| 午夜激情av网站| 精品国产美女av久久久久小说| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲成人免费电影在线观看| 亚洲国产欧洲综合997久久, | 免费无遮挡裸体视频| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 中国美女看黄片| 亚洲在线自拍视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 大型av网站在线播放| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲精品色激情综合| 亚洲avbb在线观看| 亚洲国产看品久久| 成人国语在线视频| av中文乱码字幕在线| 1024手机看黄色片| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 69av精品久久久久久| 在线国产一区二区在线| 变态另类丝袜制服| 精品国产乱子伦一区二区三区| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 成年免费大片在线观看| 久久久久亚洲av毛片大全| 成年人黄色毛片网站| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 国产激情久久老熟女| 欧美又色又爽又黄视频| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产成人影院久久av| 欧美精品啪啪一区二区三区| 90打野战视频偷拍视频| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 亚洲免费av在线视频| 12—13女人毛片做爰片一| 这个男人来自地球电影免费观看| 少妇 在线观看| 国产黄色小视频在线观看| 看黄色毛片网站| 午夜免费观看网址| 国产片内射在线| www日本黄色视频网| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 999精品在线视频| 中国美女看黄片| 又黄又爽又免费观看的视频| 成人午夜高清在线视频 | 中国美女看黄片| 757午夜福利合集在线观看| 宅男免费午夜| 成人手机av| 男女之事视频高清在线观看| 校园春色视频在线观看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 色综合欧美亚洲国产小说| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲国产欧洲综合997久久, | 又紧又爽又黄一区二区| 深夜精品福利| 国产视频内射| 成年版毛片免费区| 亚洲久久久国产精品| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| av电影中文网址| 在线永久观看黄色视频| 日韩有码中文字幕| 色老头精品视频在线观看| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| xxxwww97欧美| 天天一区二区日本电影三级| 免费高清视频大片| 成人国语在线视频| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 亚洲国产精品999在线| 三级毛片av免费| 午夜福利高清视频| 国产成人av教育| 午夜视频精品福利| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 国产高清视频在线播放一区| 可以在线观看的亚洲视频| 丝袜在线中文字幕| 后天国语完整版免费观看| 欧美三级亚洲精品| 两性夫妻黄色片| 国产视频一区二区在线看| 夜夜爽天天搞| 亚洲五月色婷婷综合| 中国美女看黄片| 国产精品免费视频内射| 国产精品久久视频播放| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 俺也久久电影网| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 国产精华一区二区三区| 老汉色∧v一级毛片| 午夜精品在线福利| 欧美一区二区精品小视频在线| 真人一进一出gif抽搐免费| 中文亚洲av片在线观看爽| 又大又爽又粗| 久久精品91蜜桃| 日韩大码丰满熟妇| 精品国产亚洲在线| 精品熟女少妇八av免费久了| 大型黄色视频在线免费观看| 国产日本99.免费观看| 免费看a级黄色片| 两人在一起打扑克的视频| 日本五十路高清| 99久久精品国产亚洲精品| av中文乱码字幕在线| 桃色一区二区三区在线观看| 国产真人三级小视频在线观看| 婷婷丁香在线五月| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产精品永久免费网站| 亚洲第一青青草原| 成人一区二区视频在线观看| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 一级毛片高清免费大全| 久久中文字幕一级| 日韩精品中文字幕看吧| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 禁无遮挡网站| 欧美一区二区精品小视频在线| 热99re8久久精品国产| 午夜福利在线在线| 久久草成人影院| 亚洲国产精品sss在线观看| 精品久久蜜臀av无| 两个人免费观看高清视频| 制服人妻中文乱码| 哪里可以看免费的av片| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 精品久久久久久久毛片微露脸| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 亚洲成人免费电影在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 此物有八面人人有两片| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 亚洲成人精品中文字幕电影| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 一区福利在线观看| 91大片在线观看| www.999成人在线观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 日韩国内少妇激情av| 啪啪无遮挡十八禁网站| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 欧美zozozo另类| 香蕉久久夜色| 亚洲无线在线观看| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲avbb在线观看| 在线国产一区二区在线| 在线免费观看的www视频| www.www免费av| 精品熟女少妇八av免费久了| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 午夜亚洲福利在线播放| 久久 成人 亚洲| 国产成年人精品一区二区| 久久伊人香网站| 国产野战对白在线观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 亚洲电影在线观看av| 成在线人永久免费视频| 老汉色∧v一级毛片| 黄频高清免费视频| 一级毛片精品| 99精品欧美一区二区三区四区| 日本在线视频免费播放| 悠悠久久av| 禁无遮挡网站| 男人舔女人的私密视频| 国产v大片淫在线免费观看| 国产av一区二区精品久久| 男女那种视频在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 国产精品亚洲美女久久久| 啪啪无遮挡十八禁网站| 久久久久久免费高清国产稀缺| 亚洲成人久久爱视频| 午夜影院日韩av| 色综合欧美亚洲国产小说| 1024香蕉在线观看| 成人欧美大片| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 日韩大码丰满熟妇| 久久久久久九九精品二区国产 | 色综合欧美亚洲国产小说| 他把我摸到了高潮在线观看| 日日夜夜操网爽| 国产精品av久久久久免费| 亚洲最大成人中文| 青草久久国产| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲avbb在线观看| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 色播在线永久视频| 日韩av在线大香蕉| 悠悠久久av| 最新在线观看一区二区三区| 婷婷六月久久综合丁香| 国产激情欧美一区二区| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲专区国产一区二区| 久99久视频精品免费| 亚洲自拍偷在线| 国产久久久一区二区三区| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 久久青草综合色| 叶爱在线成人免费视频播放| 午夜激情av网站| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 男人舔奶头视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 久久精品影院6| 一本大道久久a久久精品| 免费看十八禁软件| 男人舔奶头视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 久久精品影院6| 又黄又粗又硬又大视频| 久久久久九九精品影院| 免费看a级黄色片| 成人18禁在线播放| 国产亚洲欧美在线一区二区| 757午夜福利合集在线观看| 91国产中文字幕| 2021天堂中文幕一二区在线观 | 18禁国产床啪视频网站| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 亚洲免费av在线视频| 亚洲激情在线av| 亚洲中文日韩欧美视频| 老鸭窝网址在线观看| 妹子高潮喷水视频| 欧美黄色淫秽网站| 国产精品免费一区二区三区在线| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 波多野结衣巨乳人妻| 男女之事视频高清在线观看| 在线观看免费视频日本深夜| 精品无人区乱码1区二区| 免费看a级黄色片| 99热6这里只有精品| 日本熟妇午夜| 成人亚洲精品一区在线观看| 99国产精品99久久久久| 午夜福利免费观看在线| 韩国av一区二区三区四区| 51午夜福利影视在线观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 日韩大尺度精品在线看网址| 91av网站免费观看| 国产亚洲av高清不卡| 日本一区二区免费在线视频| 男人舔女人下体高潮全视频| 免费观看精品视频网站| 嫩草影院精品99| 婷婷精品国产亚洲av| 在线观看免费午夜福利视频| 国产又色又爽无遮挡免费看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 99精品欧美一区二区三区四区| 久久青草综合色| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产精品野战在线观看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产一区二区在线av高清观看| 九色国产91popny在线| 男女床上黄色一级片免费看| 免费观看精品视频网站| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲中文av在线| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 怎么达到女性高潮| 男女床上黄色一级片免费看| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 久久久水蜜桃国产精品网| 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 国产高清有码在线观看视频 | 99久久综合精品五月天人人| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 最新美女视频免费是黄的| 国产精品免费一区二区三区在线| 怎么达到女性高潮| 露出奶头的视频| 香蕉久久夜色| 99国产精品一区二区蜜桃av| 亚洲熟女毛片儿| tocl精华| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 国内精品久久久久久久电影| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲av电影不卡..在线观看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 啦啦啦 在线观看视频| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲国产精品成人综合色| 亚洲专区国产一区二区| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 18禁国产床啪视频网站| 天天一区二区日本电影三级| 国产国语露脸激情在线看| 欧美激情 高清一区二区三区| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 国产麻豆成人av免费视频| 国产91精品成人一区二区三区| 日韩国内少妇激情av| 一进一出抽搐动态| 国产一卡二卡三卡精品| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 日韩有码中文字幕| 亚洲成人国产一区在线观看| 成人永久免费在线观看视频| 最近在线观看免费完整版| 一区二区日韩欧美中文字幕| 香蕉久久夜色| 久久香蕉激情| 亚洲人成网站高清观看| 香蕉丝袜av| 亚洲成人久久性| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 99在线人妻在线中文字幕| 国产精品1区2区在线观看.|