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    H7N9禽流感患者外周血3種主要固有免疫細胞的變化及意義

    2018-11-29 08:06:48崔娟娟朱義玲居頌光
    檢驗醫(yī)學 2018年11期
    關(guān)鍵詞:意義差異

    崔娟娟, 孫 蔚, 張 星, 朱義玲, 居頌光

    (蘇州大學附屬第一醫(yī)院感染科,江蘇 蘇州 215006)

    2013年3月,在上海及安徽3例已死亡的患者體內(nèi)首次分離出一種新型的禽流感病毒H7N9,該病毒可導致嚴重的致死性呼吸系統(tǒng)疾病[1]。蘇州大學附屬第一醫(yī)院是蘇州市H7N9禽流感的定點收治醫(yī)院,該院感染病科近5年來共收治26例H7N9禽流感患者,其中18例好轉(zhuǎn)、7例死亡,另有1例自行出院,預(yù)后不明。目前認為H7N9禽流感患者機體免疫系統(tǒng)功能狀況是決定病情發(fā)展和預(yù)后的重要因素。免疫系統(tǒng)包括免疫器官、免疫細胞和免疫分子,其中免疫細胞分為固有免疫細胞和適應(yīng)性免疫應(yīng)答細胞。本研究旨在探討H7N9禽流感患者部分固有免疫細胞的變化,并闡明其變化的臨床意義。

    1 材料和方法

    1.1 研究對象

    參照《人感染H7N9禽流感診療方案》(2014年版)[2],選取2013年4月—2017年4月蘇州大學附屬第一醫(yī)院收治的H7N9禽流感患者(感染組)25例,其中男20例、女5例,年齡20~83歲。根據(jù)患者臨床治療轉(zhuǎn)歸分為好轉(zhuǎn)組(18例)和死亡組(7例)。以同期蘇州大學附屬第一醫(yī)院體檢健康者25名作為正常對照組,其中男16名、女9名,年齡25~75歲。2個組之間性別、年齡差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

    1.2 檢測方法

    采用肝素鈉抗凝管采集感染組住院第2天清晨、正常對照組體檢當日清晨靜脈血2 mL,上下顛倒混勻5次后備用。治療后所測數(shù)據(jù)均為患者最后1次抽血檢測結(jié)果。外周血自然殺傷(natural killer,NK)細胞、NK T細胞、單核細胞百分率采用XL AT09010流式細胞儀(美國Beckman-Coulter公司)及配套試劑檢測,檢測數(shù)據(jù)采用Flowjo7.6軟件分析。

    1.3 統(tǒng)計學方法

    采用SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計分析。呈正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以x ±s表示,組間比較采用t檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié)果

    2.1 感染組與正常對照組外周血NK細胞、NK T細胞、單核細胞百分率比較

    與正常對照組比較,感染組治療前外周血NK細胞百分率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),NK T細胞百分率明顯降低(P=0.001 8),而單核細胞百分率明顯升高(P=0.006 2)。見表1。

    表1 感染組與正常對照組3種固有免疫細胞百分率比較(%,)

    表1 感染組與正常對照組3種固有免疫細胞百分率比較(%,)

    注:與正常對照組比較,*P<0.05

    組別 例數(shù) NK細胞 NK T細胞 單核細胞感染組 25 18.47±2.04 11.31±1.20*14.27±3.73*正常對照組 25 16.68±2.30 18.53±1.72 2.81±0.43

    2.2 H7N9禽流感患者中好轉(zhuǎn)組與死亡組治療前后外周血NK細胞、NK T細胞、單核細胞百分率比較

    治療前,好轉(zhuǎn)組NK細胞百分率高于死亡組(P=0.027 1),而2個組之間NK T細胞、單核細胞間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

    與治療前相比,好轉(zhuǎn)組治療后外周血NK細胞百分率明顯下降(P=0.044 4),NK T細胞百分率明顯升高(P=0.039 0),而單核細胞百分率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。死亡組治療前后外周血NK細胞、NK T細胞、單核細胞百分率差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

    表2 好轉(zhuǎn)組與死亡組治療前后外周血NK細胞、NK T細胞、單核細胞百分率比較 (%,)

    表2 好轉(zhuǎn)組與死亡組治療前后外周血NK細胞、NK T細胞、單核細胞百分率比較 (%,)

    注:與死亡組治療前比較,*P<0.05;與同組治療前比較,#P<0.05

    組別 例數(shù) NK細胞 NK T細胞 單核細胞好轉(zhuǎn)組治療前 18 20.00±2.52*11.55±1.34 16.39±4.74治療后 18 12.65±2.30#15.58±1.24#23.42±4.18死亡組治療前 7 13.57±1.81 10.55±2.89 7.47±2.81治療后 7 12.62±2.32 4.25±0.73 5.50±1.82

    3 討論

    免疫細胞分為適應(yīng)性免疫應(yīng)答細胞(CD4+T細胞、CD8+T細胞、B淋巴細胞)和固有免疫的組成細胞(NK細胞、NK T細胞、單核細胞等)。如果這些細胞在數(shù)量上或功能上發(fā)生變化,機體免疫平衡將被打破,導致疾病發(fā)生或病情惡化。

    本研究結(jié)果顯示,與正常對照組比較,感染組治療前外周血NK T細胞百分率明顯降低,而單核細胞百分率明顯升高。治療前,H7N9禽流感患者中好轉(zhuǎn)組NK細胞百分率高于死亡組,提示NK細胞百分比可能與患者的預(yù)后相關(guān),若NK細胞百分比較高,則預(yù)后較好;好轉(zhuǎn)組治療后NK細胞百分率降低,NK T細胞百分率升高,證明治療后好轉(zhuǎn)的H7N9禽流感患者固有免疫細胞水平向正常轉(zhuǎn)變,固有免疫功能趨于正常。

    黃燕等[3]發(fā)現(xiàn)H7N9禽流感患者好轉(zhuǎn)組治療后外周血Th1細胞百分率較治療前明顯下降(P<0.05),可能與患者NK細胞水平下降,分泌的γ-干擾素(interferon gamma,IFN-γ)減少有關(guān)。單核細胞作為抗原提呈細胞,可將抗原肽-主要組織相容性復合物(major histocompatibility complex,MHC)Ⅱ類分子復合物提呈給CD4+T細胞,促進其發(fā)揮功能。本研究結(jié)果顯示,感染組外周血單核細胞百分率較高,與毛會軍等[4]的研究結(jié)果(H7N9禽流感患者治愈組治療后外周血CD4+T絕對數(shù)較治療前升高)相符。NK T細胞治療后上升可能與其殺傷病毒感染的靶細胞的功能相關(guān)。

    JI等[5]對28例H7N9禽流感患者預(yù)后影響因素分析顯示,≥60歲[比值比(odds ratio,OR) =30.0,95%可信區(qū)間(confidence interval,CI) 2.85~315.62]、有基礎(chǔ)肺部疾患(OR=14.40,95%CI 1.30~159.52)、高血壓(OR=6.67,95%CI 1.09~40.43)是死亡的危險因素。本研究中死亡組年齡為60~83歲,并伴有高血壓等慢性疾病,可能是其死亡的原因之一。

    有研究結(jié)果顯示,H7N9感染者與重癥急性呼吸綜合征及H5N1禽流感一樣存在突發(fā)的細胞因子風暴[6],機體的免疫平衡狀態(tài)被打破,表現(xiàn)為免疫抑制作用弱而炎癥反應(yīng)強的相對過激或亢進狀態(tài)。本研究結(jié)果顯示,H7N9禽流感患者好轉(zhuǎn)組外周血NK細胞、NK T細胞百分率治療前后差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而死亡組治療前后差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。由此說明細胞免疫異常在此類病毒性流感的發(fā)病機制中作用明顯,治療后若患者免疫失衡狀態(tài)得以改善,可能有較好的臨床預(yù)后。因此,監(jiān)測H7N9禽流感患者免疫細胞相關(guān)指標,對患者預(yù)后評估具有重要的參考價值。由于本研究中H7N9禽流感患者例數(shù)較少,26例患者中有1例自動出院,預(yù)后不明。此外,患者診療是否及時直接影響著病程長短及預(yù)后,且患者年齡偏高,部分患者還同時存在一定的基礎(chǔ)疾病,研究數(shù)據(jù)可能存在一定偏差。

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