NLM患者外周血免疫球蛋白、自身抗體和補(bǔ)體水平的變化及臨床價(jià)值分析

謝丹萍 張金珍 盧永芳

[摘要] 目的 觀察非哺乳期乳腺炎（NLM）患者外周血免疫球蛋白、自身抗體和補(bǔ)體水平的變化并分析臨床價(jià)值。方法 將2016年2月～2017年2月我院76例NLM患者納入研究組，將同期確診的76例健康體檢者納入對(duì)照組。比較兩組患者外周血免疫球蛋白（lgG、lgM、lgA）、補(bǔ)體（C3、C4）及T淋巴細(xì)胞亞群（CD4+、CD8+、CD3+）水平差異，觀察自身抗體[抗核抗體（ANA）、抗組蛋白抗體（AHA）]表達(dá)情況。 結(jié)果 兩組外周血lgG水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。研究組外周血部分免疫球蛋白（lgM、lgA）、補(bǔ)體（C3、C4）水平及自身抗體（ANA、AHA）陽(yáng)性率高于對(duì)照組（P<0.05），T淋巴細(xì)胞亞群（CD4+、CD8+、CD3+）水平則低于對(duì)照組（P<0.05）。 結(jié)論 NLM患者相對(duì)于健康人群外周血免疫球蛋白、補(bǔ)體水平及自身抗體陽(yáng)性率將顯著上升，外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平則顯著降低，監(jiān)測(cè)上述指標(biāo)對(duì)NLM患者疾病診斷治療有一定提示或評(píng)估作用。

[關(guān)鍵詞] 非哺乳期乳腺炎；免疫球蛋白；自身抗體；補(bǔ)體；T淋巴細(xì)胞亞群

[中圖分類(lèi)號(hào)] R655.8 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2018）21-0131-03

[Abstract] Objective To observe the changes of peripheral blood immunoglobulins， autoantibodies and complement levels in patients with non-lactating mastitis（NLM） and analyze the clinical value. Methods From February 2016 to February 2017， 76 NLM patients from our hospital were included in the study group. 76 healthy people who were diagnosed in the same period were included in the control group. The differences of the levels of immunoglobulins （lgG， lgM， lgA）， complements （C3， C4）， and T lymphocyte subsets （CD4+， CD8+， and CD3+） in the peripheral blood were compared between the two groups. The autoantibodies [antinuclear antibody （ANA）， anti-histone antibody （AHA）] expressions were observed. Results There was no statistically significant difference in lgG levels in peripheral blood between the two groups（P>0.05）. The positive rate of immunoglobulins（lgM， lgA）， complements（C3， C4） and autoantibodies （ANA， AHA） in the peripheral blood in the study group was higher than that in the control group（P<0.05）. The levels of T lymphocyte subsets （CD4+， CD8+， and CD3+） were lower than those in the control group（P<0.05）. Conclusion The positive rate of immunoglobulins， complements and autoantibodies in peripheral blood of NLM patients will increase significantly compared with healthy individuals. Peripheral blood T lymphocyte subsets are significantly lower. Monitoring the above indicators can provide some indications or assessments for the diagnosis and treatment of NLM.

[Key words] Non-lactating mastitis （NLM）； Immunoglobulins； Autoantibodies； Complements； T lymphocyte subsets

隨著人們健康意識(shí)的提高和生活環(huán)境的改善，作為女性常見(jiàn)疾病的乳腺炎中哺乳期乳腺炎發(fā)病率明顯下降，但非哺乳期乳腺炎（NLM）發(fā)病率卻呈上升趨勢(shì)[1]。該類(lèi)疾病起病急緩不一，可數(shù)天內(nèi)表現(xiàn)為紅腫熱痛、乳房膿腫甚至竇道形成等情況的急性癥狀，也可僅表現(xiàn)為遷延難愈的無(wú)痛性乳房腫塊的慢性癥狀[2]。同時(shí)，無(wú)明顯炎癥表現(xiàn)的NLM與乳腺癌常難以進(jìn)行鑒別診斷，易導(dǎo)致誤診誤治，又因目前尚無(wú)有效的特異性治療措施，部分患者常需行乳房切除治療，對(duì)患者身心健康造成了嚴(yán)重影響。該疾病發(fā)病機(jī)制尚未闡明，相關(guān)研究顯示其可能與免疫反應(yīng)有關(guān)[3]。對(duì)此，本研究觀察NLM患者和健康人群間各免疫功能指標(biāo)水平差異，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2016年2月～2017年2月我院76例NLM患者納入研究組，將同期確診的76例健康體檢者納入對(duì)照組。兩組患者均為女性，其中研究組年齡21～44歲，平均（32.81±6.49）歲；病程0.5～24個(gè)月，平均（5.21±1.01）個(gè)月；發(fā)病乳房左側(cè)37例，右側(cè)33例，雙側(cè)6例。對(duì)照組年齡22～45歲，平均（34.12±7.43）歲。兩組間年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 納入、排除標(biāo)準(zhǔn)[4]

納入標(biāo)準(zhǔn)：研究組患者均符合NLM診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]且經(jīng)手術(shù)病理確診；對(duì)照組均為我院女性健康體檢，無(wú)任何乳房疾?。蛔栽负炗喼橥鈺?shū)者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等免疫性疾病者；臨床資料不全者；不能提供病理診斷的NLM患者。

1.3 方法

以普通促凝管采集患者入院第2天清晨空腹靜脈血9 mL；取3 mL采用西門(mén)子特定蛋白儀BNⅡ檢測(cè)外周血免疫球蛋白（lgG、lgM、lgA）、補(bǔ)體（C3、C4）及T淋巴細(xì)胞亞群（CD4+、CD8+、CD3+）水平；抗核抗體（ANA）檢測(cè)采用間接免疫熒光法，取3 mL血液，離心分離血清，1∶100稀釋并點(diǎn)樣，將Hep-2/猴肝包被的基質(zhì)玻片反扣于樣板上，18℃～25℃溫育30 min，緩沖液沖洗后加熒光二抗18℃～25℃溫育30 min，緩沖液沖洗，甘油封片，熒光顯微鏡下Hep-2細(xì)胞無(wú)熒光染色為陰性，有熒光染色并可辨熒光模型則判為陽(yáng)性，試劑盒來(lái)自德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)股份有限公司；抗組蛋白抗體（AHA）檢測(cè)采用免疫印跡法，取3 mL血液，離心分離血清，緩沖液1∶101稀釋，膜條以緩沖液預(yù)處理5 min，吸除孵育槽液體，加入1.5 mL血清樣本，18℃～25℃溫育30 min，緩沖液清洗3次，每次5 min，加入1.5 mL底物液孵育10 min，蒸餾水清洗3次，每次1 min，取出膜條風(fēng)干，按標(biāo)記位置判讀結(jié)果，與非抗原區(qū)比較，相應(yīng)抗原處呈深色條帶判為陽(yáng)性，無(wú)條帶出現(xiàn)則判為陰性。以肝素抗凝管采集患者入院第2天清晨空腹靜脈血3 mL，采用BD FACSCalibur流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞亞群（CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD3+）水平。

1.4 觀察指標(biāo)

比較兩組患者外周血免疫球蛋白（lgG、lgM、lgA）、補(bǔ)體（C3、C4）及T淋巴細(xì)胞亞群（CD4+、CD8+、CD3+）水平差異，觀察自身抗體（ANA、AHA）表達(dá)情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組外周血lgG、lgM、lgA水平比較

兩組外周血lgG水平無(wú)明顯差異（P>0.05）。研究組外周血lgM、lgA水平高于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2兩組外周血C3、C4水平比較

研究組外周血C3、C4水平高于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 兩組外周血CD4+、CD8+、CD3+水平比較

研究組外周血CD4+、CD8+、CD3+水平低于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表3。

2.4 兩組外周血ANA、AHA表達(dá)情況比較

研究組外周血ANA、AHA陽(yáng)性率高于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表4。

3 討論

NLM常見(jiàn)病理類(lèi)型主要為漿細(xì)胞性乳腺炎（PCM）和肉芽腫性乳腺炎（GM），該疾病臨床表現(xiàn)變化多樣且無(wú)特征性表現(xiàn)，診斷主要依靠病理檢查[6]。目前NLM病因尚不明確，缺乏明確的微生物學(xué)結(jié)果支持，尚無(wú)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范的治療方案。臨床多采用激素、抗生素以及手術(shù)等方式治療該疾病，取得了一定效果。但由于對(duì)NLM認(rèn)識(shí)不足，常出現(xiàn)病情反復(fù)、遷延難愈等情況，手術(shù)治療亦對(duì)患者身心健康造成嚴(yán)重影響。有研究認(rèn)為該疾病為一種存在免疫功能紊亂的自身免疫性疾病[7]。

IgG主要在機(jī)體組織中發(fā)揮促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬和激活補(bǔ)體系統(tǒng)等作用。IgM作為體液免疫應(yīng)答中最先產(chǎn)生的主要分布于血液中的抗體，可快速有效地激活補(bǔ)體系統(tǒng)[8]。而IgA主要在上皮表面發(fā)揮中和抗體作用[9]。本研究中研究組患者外周血IgA、IgM及補(bǔ)體（C3、C4）水平高于對(duì)照組，提示NLM患者補(bǔ)體系統(tǒng)因體內(nèi)免疫球蛋白（IgA、IgM）水平升高而激活，以介導(dǎo)免疫損傷。趙海軍等[10]研究顯示，非特異性、特異性免疫反應(yīng)補(bǔ)體系統(tǒng)均有參與，該系統(tǒng)的活化介導(dǎo)炎癥性疾病、自身免疫性疾病等疾病的組織炎癥損傷，與本研究基本一致。

CD3+代表T淋巴細(xì)胞的總數(shù)，分為CD4+和CD8+亞群[11]。CD4+為輔助/誘導(dǎo)細(xì)胞（Th/Ti），可輔助效應(yīng)細(xì)胞由T細(xì)胞的轉(zhuǎn)變生成過(guò)程，誘導(dǎo)B細(xì)胞生成抗體，活化巨噬細(xì)胞[12]。CD8+為抑制/殺傷細(xì)胞（Ts/CTL），可抑制T細(xì)胞活化、B細(xì)胞產(chǎn)生抗體，并可產(chǎn)生細(xì)胞毒作用[13]。CD8+功能降低，機(jī)體免疫應(yīng)答過(guò)強(qiáng)，可能導(dǎo)致超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病[14]。CD4+和CD8+協(xié)同制約維持免疫應(yīng)答穩(wěn)定，在清除異物抗原的同時(shí)避免損傷自身組織[15]。ANA可與細(xì)胞核起反應(yīng)，無(wú)器官和種屬特異性[16-17]。在多種AID中均可檢測(cè)出AHA陽(yáng)性，其對(duì)AID的診斷意義明確[18]。本研究中研究組患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平低于對(duì)照組，ANA、AHA陽(yáng)性率高于對(duì)照組，提示NLM患者免疫功能減退且免疫紊亂，對(duì)異物抗原清除功能降低并可能對(duì)自身組織造成損傷。胡朝軍等[19]研究發(fā)現(xiàn)，自身免疫疾?。ˋID）患者血循環(huán)中分布有自身抗體，其針對(duì)自身組織器官，造成自身免疫損傷，與本研究基本一致。

綜上所述，NLM患者相對(duì)于健康人群外周血免疫球蛋白、補(bǔ)體水平及自身抗體陽(yáng)性率將顯著上升，外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平則顯著降低，提示NLM為一種存在免疫功能紊亂的自身免疫性疾病，監(jiān)測(cè)患者上述指標(biāo)水平對(duì)該疾病的診斷、治療及療效評(píng)估重要意義。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 畢卓芳，邱飛，葉茂清，等. 非哺乳期乳腺炎與乳腺癌的超聲影像學(xué)表現(xiàn)及鑒別價(jià)值[J].廣州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，45（2）：69-71.

[2] 侯浩，潘立群. 加減透膿散治療非哺乳期乳腺炎的臨床觀察[J]. 世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2017，12（2）：230-233.

[3] 張智，邵淑芹，黃志偉，等. 35例非哺乳期乳腺炎的外科治療[J]. 中國(guó)現(xiàn)代普通外科進(jìn)展，2017，20（1）：60-62.

[4] 夏亞茹，陳紅風(fēng)，葉媚娜，等. 非哺乳期乳腺炎患者外周血T淋巴細(xì)胞、免疫球蛋白及補(bǔ)體水平的變化[J]. 中華乳腺病雜志（電子版），2012，6（5）：504-514.

[5] 楊昂，肖學(xué)紅，王志龍，等. 非哺乳期乳腺炎的磁共振診斷[J]. 廣東醫(yī)學(xué)，2015，36（10）：1561-1563.

[6] 肖薔，張超杰. 非哺乳期乳腺炎的現(xiàn)代研究進(jìn)展[J]. 醫(yī)學(xué)與哲學(xué)，2013，34（6）：7-13.

[7] 許銳，郭倩倩，楊樂(lè)平，等. 非哺乳期乳腺炎患者血液中自身抗體和免疫指標(biāo)的變化及其臨床意義[J]. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，36（8）：1157-1159，1168.

[8] 孟金麗. 不同類(lèi)型乳腺炎性疾病的MRI研究進(jìn)展[J]. 臨床放射學(xué)雜志，2017，36（11）：1726-1729.

[9] 陳帆帆，馮佳梅，高晴倩，等. 非哺乳期乳腺炎病人外周血免疫功能檢測(cè)及其臨床意義[J].外科理論與實(shí)踐，2015，20（3）：252-254.

[10] 趙海軍，馬俊旭，李靜亞，等. 康復(fù)新液聯(lián)合三苯氧胺治療乳頭凹陷漿細(xì)胞乳腺炎導(dǎo)管瘺的研究[J]. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2015，24（31）：3451-3453.

[11] 高雙英，吳靜. 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞檢測(cè)在漿細(xì)胞性乳腺炎患者篩查中的臨床價(jià)值[J]. 醫(yī)學(xué)綜述，2015，21（16）：3060-3062.

[12] 董明春，葉光榮，張偉，等. 抗生素聯(lián)合強(qiáng)的松治療急性膿腫型非哺乳期乳腺炎的療效觀察及對(duì)外周血CD4+/CD8+比值的影響[J]. 河北醫(yī)學(xué)，2016，22（1）：95-99.

[13] 張超杰，孔成. 非哺乳期乳腺炎的免疫學(xué)研究進(jìn)展[J]. 大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，36（4）：307-313.

[14] 郭萬(wàn)桃，趙海軍，李芳軍，等. 生脈注射液聯(lián)合利美達(dá)松對(duì)急性哺乳期乳腺炎免疫指標(biāo)影響的研究[J]. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2014，27（29）：3257-3259.

[15] 閆云珍. 康復(fù)新液聯(lián)合散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)漿細(xì)胞乳腺炎手術(shù)預(yù)后及免疫指標(biāo)的影響[J].華西藥學(xué)雜志，2016， 31（4）：441-442.

[16] 黃鴻鑫，宋武琦，張鳳民，等. 自身抗體及其作用與機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 國(guó)際免疫學(xué)雜志，2015，38（6）：581-585.

[17] 覃仕鋒，李春美. 自身抗體檢測(cè)在自身免疫性疾病中的價(jià)值[J]. 中國(guó)免疫學(xué)雜志，2015，3（3）：401-403.

[18] 周鑫昀，陳惠. 自身免疫性疾病新型自身抗體研究進(jìn)展[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2017，32（6）：543-548.

[19] 胡朝軍，陳華，王立，等. 體檢人群中自身抗體篩查的臨床意義[J]. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，37（11）：847-850.

（收稿日期：2018-05-09）