• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    蒙藥朱日很滴丸抗動脈粥樣硬化作用的研究

    2018-11-24 02:54:06郭俊英韓瑞蘭王躍武曹俊彥邢煜舒
    西北藥學(xué)雜志 2018年6期
    關(guān)鍵詞:劑量血清模型

    郭俊英,韓瑞蘭*,王躍武,曹俊彥,張 謙,邢煜舒

    (1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,呼和浩特 010059;2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)新藥安全評價研究中心,呼和浩特 010059)

    心血管疾病是嚴(yán)重影響人類健康的疾病之一,動脈粥樣硬化是心血管疾病的共同病理學(xué)基礎(chǔ)[1],可累及冠狀動脈、頸動脈、主動脈和腎動脈等大中動脈血管,并最終引發(fā)冠心病、心絞痛和心律失常等相關(guān)心血管疾病和腦、腎血管疾病[2],因此,尋找有效治療動脈粥樣硬化疾病的藥物是目前藥學(xué)工作者研究的熱點(diǎn)。蒙醫(yī)藥治療心血管疾病具有有效性、無明顯毒性和不良反應(yīng)的優(yōu)勢[3-4]。蒙藥朱日很滴丸原處方系蒙醫(yī)臨床經(jīng)驗(yàn)方,由廣棗、紅花、梔子、肉豆蔻、草果、檀香、沉香、阿魏、冰片和牛黃10味藥組成。制備方法:按照處方比例稱取廣棗、紅花和梔子,粉碎成粗粉,通過乙醇回流,得醇提物。將上述3種提取物按照處方量折算,與牛黃、冰片混勻,過120目篩,細(xì)粉備用。按照處方比例稱取肉豆蔻、阿魏、沉香、檀香和草果5味藥材,混合粉碎,過10目篩,CO2超臨界萃取,得萃取物。按照處方比例混合醇提物、牛黃、冰片和萃取物,與滴丸基質(zhì)混合,在80 ℃下熔化后,制備滴丸。冷卻劑選擇二甲基硅油。滴丸成型后取出,除去表面二甲基硅油,包衣,即得。朱日很滴丸具有清心火、化瘀血和改善心功能的作用,用于心慌、氣短和胸悶煩躁,臨床上主治冠心病、心絞痛和心律失常等,療效好[5-8]。但其是否具有抗動脈粥樣硬化作用尚未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過建立兔動脈粥樣硬化模型,考察蒙藥朱日很滴丸抗動脈粥樣硬化的作用,為臨床用藥提供理論依據(jù)。

    1 儀器與材料

    1.1儀器 BSA224S型電子天平(美國賽多利斯科學(xué)儀器有限公司);Leica ASP200S型封閉式全自動組織脫水機(jī),Leica EG150H型分體式組織包埋機(jī),Leica RM2135型切片機(jī),Leica HI1210型攤片機(jī),Leica AUTO STAINER XL型全自動染色機(jī)(德國徠卡公司);SAPPHIRE600全自動生化分析儀(山東博科生物產(chǎn)業(yè)有限公司)。

    1.2試藥 朱日很滴丸(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)蒙醫(yī)藥研究院);羧甲基纖維素鈉(天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所)。

    1.3動物 普通級日本大耳白兔60只,雌雄各半,體質(zhì)量2.5±0.3 kg,購自內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)動物生產(chǎn)中心,動物許可證號:SCXK(蒙)2015-0001。

    2 方法

    2.1分組及給藥 將60只日本大耳白兔隨機(jī)分為溶媒對照組、模型組、朱日很滴丸高、中、低劑量組和普羅布考組,每組10只,雌雄各半。溶媒對照組,普通飼料喂養(yǎng),其余各組均給予高脂飼料+牛血清白蛋白(在喂養(yǎng)高脂飼料的基礎(chǔ)上于第1和4周時耳緣靜脈注射牛血清白蛋白,250 mg·kg-1)。第8周造模成功后(第8周,各組兔耳中央動脈采集血液,檢測血脂,與溶媒對照組比較,其余各組血脂顯著升高),朱日很滴丸高、中和低劑量組在模型組喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上,分別灌胃給予朱日很滴丸116,365和1 160 mg·kg-1,普羅布考組在模型組喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上,灌胃給予普羅布考 26 mg·kg-1,溶媒對照組和模型組在原有喂養(yǎng)方式的基礎(chǔ)上,灌胃給予等體積羧甲基纖維素鈉,每日1次,連續(xù)4周。各組兔均單籠飼養(yǎng),足量飲食,自由飲水,共喂養(yǎng)12周。

    2.2測定攝食量和動物體質(zhì)量變化 實(shí)驗(yàn)開始的第1~2周和7~8周測定各組家兔的攝食量和體質(zhì)量值。

    2.3血清中各指標(biāo)檢測 分別于實(shí)驗(yàn)0,4,8和12周時,從兔耳中央動脈采集血液4~5 mL,置于不含抗凝劑的普通采血管中,離心,取血清,用全自動生化儀測定CHOL、LDL、TG和HDL水平。并用12周時取得的血清,按照Elisa試劑盒操作步驟,測定各組血清中IL-6、TNF-α、SOD、MDA和ox-LDL的含量。

    2.4主動脈油紅O染色測定斑塊覆蓋率 將解剖所得主動脈用蒸餾水沖洗后,置于油紅O染液中浸泡8~10 min,取出,置于體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇中分化后,用蒸餾水沖洗,拍照,用image Pro plus 6.0圖像分析軟件進(jìn)行分析,計(jì)算斑塊覆蓋率。

    2.5主動脈HE染色分析 給藥結(jié)束后,向兔耳緣靜脈注射空氣,形成空氣栓塞,將兔處死。取主動脈,置于體積分?jǐn)?shù)為4%的中性甲醛中固定后,經(jīng)脫水、透明、浸蠟、包埋和切片處理,進(jìn)行HE染色,光學(xué)顯微鏡下觀察。

    3 結(jié)果

    3.1實(shí)驗(yàn)動物數(shù)量分析 納入日本大耳白兔60只,死亡7只。溶媒對照組:死亡1只,死亡原因不明;模型組:死亡1只,死于腹瀉、厭食;朱日很滴丸低劑量組:死亡1只,將藥物灌入肺部致死;朱日很滴丸中劑量:死亡1只,腦癱致死;朱日很滴丸高劑量組:死亡1只,突發(fā)死亡,尸檢發(fā)現(xiàn)肺部感染;普羅布考組:死亡2只,1只死于腹瀉厭食,1只死亡原因不明。實(shí)驗(yàn)過程中,總存活率為88%,最終計(jì)入結(jié)果分析的兔數(shù)量為53只。

    3.2各組攝食量和體質(zhì)量變化結(jié)果 見表1。

    表1兔的平均攝食量和體質(zhì)量增加值

    Tab.1 The average intake and the increasing weight of rabbits

    組別0~8周平均攝食量/g·只-10~8周體質(zhì)量增加值/kg·只-1溶媒對照組129.08±14.360.73±0.27模型組98.85±10.36**0.88±0.40朱日很滴丸低劑量組105.31±11.01**0.84±0.22朱日很滴丸中劑量組101.14±12.42**0.81±0.36朱日很滴丸高劑量組100.23±8.43**0.83±0.32普羅布考組99.97±9.03**0.87±0.34

    注:與溶媒對照組比較**P<0.01。

    由表1可知,與溶媒對照組比較,模型組、朱日很滴丸各劑量組和普羅布考組的攝食量顯著降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但其體質(zhì)量無明顯變化,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    3.3各組血清中TG、LDL、HDL和CHOL含量的測定結(jié)果 見表2。由表2可知,第8周時,與溶媒對照組比較,模型組血脂成分幾乎均顯著升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。第12周朱日很滴丸組給藥結(jié)束后,與模型組比較,朱日很滴丸各劑量組血清中TG、LDL和CHOL的含量低于模型組,HDL的含量高于模型組,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    表2血清中TG,LDL,HDL和CHOL的含量

    Tab.2 The content of TG,LDL,HDL and CHOL in serum

    組別TG/mmol·L-1 0周 4周 8周 12周 LDL/mmol·L-1 0周 4周 8周 12周溶媒對照組0.76±0.150.80±0.240.70±0.170.77±0.160.17±0.090.21±0.070.23±0.070.18±0.09模型組0.88±0.180.94±0.112.46±1.21**3.60±1.21**0.21±0.143.75±4.33*11.41±4.04**21.18±6.49**朱日很滴丸低劑量組0.86±0.131.11±0.21*2.61±1.23** 3.32±0.53#0.18±0.083.45±3.33 9.89±3.03** 20.04±5.31# 朱日很滴丸中劑量組0.77±0.09 1.01±1.05* 2.50±1.66**3.19±2.31#0.15±0.053.05±4.02 10.02±6.83**19.87±10.86#朱日很滴丸高劑量組0.74±0.14 1.21±0.31*2.48±1.21**3.02±0.91#0.14±0.03 3.55±2.1210.09±4.56**18.44±5.33#普羅布考組0.81±0.071.02±0.13*2.54±1.42** 3.21±0.99# 0.16±0.053.25±1.1111.21±3.89**15.24±4.31## 組別HDL/mmol·L-1 0周 4周 8周 12周 CHOL/mmol·L-1 0周 4周 8周 12周溶媒對照組0.22±0.120.26±0.070.22±0.120.22±0.120.81±0.350.94±0.171.02±0.210.81±0.35模型組0.22±0.080.32±0.180.50±0.160.68±0.12*0.88±0.327.59±8.41*20.36±4.68**32.97±3.50**朱日很滴丸低劑量組0.29±0.070.28±0.090.56±0.120.72±0.21#0.86±0.335.89±3.21*15.66±4.52**31.88±3.41#朱日很滴丸中劑量組0.31±0.060.27±0.150.67±0.14*0.87±0.62#0.79±0.215.46±5.41*14.78±2.00**30.89±0.36#朱日很滴丸高劑量組0.24±0.020.29±0.080.54±0.130.90±0.33#0.80±0.215.58±1.32*16.75±3.88**29.87±4.12#普羅布考組0.26±0.040.31±0.030.51±0.180.71±0.28#0.79±0.126.21±2.48**19.32±5.01**25.12±3.21##

    注:與溶媒對照組比較*P<0.05,**P<0.01;與模型組比較#P>0.05,##P<0.05。

    3.4各組血清中炎癥因子IL-6和TNF-α的含量測定結(jié)果 見表3。由表3可知,與溶媒對照組比較,模型組血清中IL-6和TNF-α的含量均顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與模型組比較,朱日很滴丸各劑量組血清中IL-6和TNF-α的含量顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

    3.5各組血清中SOD、MDA和ox-LDL的含量測定結(jié)果 見表4。由表4可知,與溶媒對照組比較,模型組血清中MDA和ox-LDL的含量顯著升高,SOD的含量顯著降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與模型組比較,朱日很滴丸各劑量組血清中MDA和ox-LDL的含量顯著降低,SOD的含量均顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

    3.6各組主動脈油紅O染色及斑塊覆蓋率測定結(jié)果 見圖1和圖2。由圖1和圖2可知,與溶媒對照組比較,模型組的斑塊覆蓋率顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與模型組比較,朱日很滴丸各劑量組主動脈的斑塊覆蓋率均顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

    表3血清中炎癥因子IL-6和TNF-α的含量

    Tab.3 The content of IL-6 and TNF-αin serum

    組別IL-6/pg·mL-1TNF-α/pg·mL-1溶媒對照組400.25±95.47340.43±78.88模型組1 600.68±300.74**1 900.26±310.83**朱日很滴丸低劑量組1 200.11±147.12##1 483.76±212.13##朱日很滴丸中劑量組900.27±137.33##1 172.76±210.11##朱日很滴丸高劑量組700.24±128.32##863.34±119.56##普羅布考組720.89±127.25##660.87±109.89##

    注:與溶媒對照組比較**P<0.01;與模型組比較##P<0.01。

    表4血清中SOD、MDA和ox-LDL的含量

    Tab.4 The contents of SOD,MDA and ox-LDL in serum

    組別SOD/U·mL-1MDA/ng·mL-1ox-LDL/ng·mL-1溶媒對照組176.33±1.8270.15±11.314.27±0.80模型組70.8±18.53**205.53±31.35**6.67±1.91**朱日很滴丸低劑量組94.78±11.21#164.80±41.21#3.64±1.23##朱日很滴丸中劑量組118.8±11.51##144.40±20.98##2.87±0.98##朱日很滴丸高劑量組180.31±18.23##124.21±18.88##2.56±0.56##普羅布考組178.11±19.45##119.23±20.93##2.47±0.75##

    注:與溶媒對照組比較**P<0.01;與模型組比較#P<0.05,##P<0.01。

    圖1主動脈油紅O染色

    A.溶媒對照組;B.模型組;C.普羅布考組;D.朱日很滴丸低劑量組;E.朱日很滴丸中劑量組;F.朱日很滴丸高劑量組。

    Fig.1 The oil red staining of rabbit aorta

    A.control group;B.model group;C.probucol group;D.low dose group of Zhurihen Dropping Pills;E.middle dose group of Zhurihen Dropping Pills;F.high dose group of Zhurihen Dropping Pills.

    3.7各組兔主動脈的HE染色結(jié)果 見圖3。由圖3可知,與溶媒對照組比較,模型組平滑肌增生明顯,細(xì)胞排列紊亂,內(nèi)膜層泡沫細(xì)胞增多,管壁明顯增厚,彈性纖維層結(jié)構(gòu)不清,形成纖維增生性動脈粥樣硬化斑塊。與模型組比較,朱日很滴丸高劑量組細(xì)胞排列較整齊,平滑肌增生不明顯,內(nèi)膜層泡沫細(xì)胞較少,病變較輕,朱日很滴丸中、低劑量組相應(yīng)病變均有減輕。

    圖2兔主動脈斑塊覆蓋率

    A.溶媒對照組;B.模型組;C.普羅布考組;D.朱日很滴丸低劑量組;E.朱日很滴丸中劑量組;F.朱日很滴丸高劑量組。

    注:與溶媒對照組比較**P<0.01;與模型組比較##P<0.01。

    Fig.2 The plaque coverage rate of rabbit aorta

    A.control group;B.model group;C.probucol group;D.low dose group of Zhurihen Dropping Pills;E.middle dose group of Zhurihen Dropping Pills;F.high dose group of Zhurihen Dropping Pills.

    Note:**P<0.01 compared with vehicle control group;##P<0.01 compared with model group.

    圖3各組兔主動脈HE染色結(jié)果(×40)

    A.溶媒對照組;B.模型組;C.普羅布考組;D.朱日很滴丸低劑量組;E.朱日很滴丸中劑量組;F.朱日很滴丸高劑量組。

    Fig.3 The HE staining result of rabbit aorta(×40)

    A.control group;B.model group;C.probucol group;D.low dose group of Zhurihen Dropping Pills;E.middle dose group of Zhurihen Dropping Pills;F.high dose group of Zhurihen Dropping Pills.

    4 討論

    動脈粥樣硬化主要發(fā)生在大動脈及中動脈,特別是冠狀動脈、腦動脈等部位,并最終引發(fā)冠心病、心絞痛和心律失常等相關(guān)心血管疾病和腦血管疾病[9]。本實(shí)驗(yàn)采用油紅O染色測定兔主動脈斑塊覆蓋率,結(jié)果顯示,朱日很滴丸各劑量組能顯著降低主動脈斑塊覆蓋率;主動脈的HE染色結(jié)果顯示,朱日很滴丸各劑量組能顯著減輕平滑肌增生,與模型組比較,細(xì)胞排列紊亂狀況明顯減輕,內(nèi)膜層泡沫細(xì)胞明顯減少,管壁增厚狀況、彈性纖維層結(jié)構(gòu)不清狀況減輕。綜上所述,蒙藥朱日很滴丸能夠發(fā)揮抗兔動脈粥樣硬化的作用。

    動脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜,學(xué)者們曾提出了許多發(fā)病假說,如內(nèi)皮損傷、氧化應(yīng)激、感染、慢性炎癥和血脂蛋白學(xué)說等[10]。有些發(fā)病理論如感染假說已被否定,有些學(xué)說如血脂蛋白、氧化、慢性炎癥反應(yīng)和血管平滑肌增殖學(xué)說則逐步得到公認(rèn)[11-12]。從脂蛋白方面講,隨著對脂蛋白研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)主要是低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平與動脈粥樣硬化的發(fā)生呈正相關(guān),其機(jī)制是LDL可通過apoB100與細(xì)胞外基質(zhì)相互作用沉積在動脈內(nèi)膜下形成粥樣斑塊[13];而高密度脂蛋白中的膽固醇(HDL-C)是將膽固醇逆向運(yùn)輸?shù)礁闻K處理的,可降低血中膽固醇水平,從而抵抗動脈粥樣硬化。從炎癥方面講,動脈粥樣硬化是一種慢性炎癥疾病[14],以內(nèi)皮損傷為主要特征,可累及單核/巨噬細(xì)胞,多種炎性遞質(zhì)如IL-6和TNF-α等分泌增加[15]。IL-6是重要的趨化因子,能在病灶局部募集多種炎性介質(zhì),可加強(qiáng)巨噬細(xì)胞對低密度脂蛋白的攝入,促進(jìn)泡沫細(xì)胞的形成;TNF-α是體內(nèi)重要的炎性介質(zhì),能夠直接造成細(xì)胞損傷,也能招募炎性細(xì)胞,誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞的損傷,誘導(dǎo)單核細(xì)胞的遷移并與內(nèi)皮細(xì)胞黏附以及泡沫細(xì)胞的形成有關(guān),同時還能影響斑塊的穩(wěn)定性,深度參與動脈粥樣硬化的形成和發(fā)展[16-17]。從氧化應(yīng)激方面講,近幾年越來越多的證據(jù)表明超氧化物陰離子、羥自由基等活性氧的產(chǎn)生與抗氧化系統(tǒng)活性之間的失衡導(dǎo)致的氧化應(yīng)激與動脈粥樣硬化形成有關(guān)[18]。SOD是機(jī)體內(nèi)主要的抗氧化酶和超氧自由基清除劑,其活性水平的高低代表了組織清除自由基的能力,MDA是細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化的終產(chǎn)物,其表達(dá)水平高低是機(jī)體內(nèi)的脂質(zhì)過氧化程度的重要標(biāo)志和動脈粥樣硬化的病變指標(biāo)[19]。LDL本身對動脈粥樣硬化的形成并沒有直接作用,過量的LDL會滯留于內(nèi)皮下,經(jīng)過細(xì)胞氧化修飾形成ox-LDL,而ox-LDL會加速泡沫細(xì)胞形成,加劇血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)氧化脂質(zhì)的積累,促進(jìn)炎性反應(yīng),導(dǎo)致AS纖維斑塊增大[20],促進(jìn)血管平滑肌的增生等,是形成動脈粥樣硬化的關(guān)鍵因素。

    本實(shí)驗(yàn)主要從血脂蛋白、氧化應(yīng)激、炎癥和血管平滑肌增殖等方面綜合考察了蒙藥朱日很滴丸的抗動脈粥樣硬化作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在動脈粥樣硬化形成后給予一定時間的朱日很滴丸雖然能使TG、LDL和CHOL的含量小幅降低,HDL的含量小幅升高,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明朱日很滴丸抗動脈粥樣硬化作用與降血脂作用關(guān)聯(lián)度不大。蒙藥朱日很滴丸能有效降低建模后家兔血清中IL-6、TNF-α、ox-LDL和MDA的含量,提高SOD的活性。結(jié)果表明,蒙藥朱日很滴丸抗動脈粥樣硬化作用與其抗炎、抗氧化應(yīng)激密切相關(guān),其更深層次及其他方面的機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

    猜你喜歡
    劑量血清模型
    一半模型
    結(jié)合劑量,談輻射
    ·更正·
    血清免疫球蛋白測定的臨床意義
    中老年保健(2021年3期)2021-08-22 06:50:04
    Meigs綜合征伴血清CA-125水平升高1例
    90Sr-90Y敷貼治療的EBT3膠片劑量驗(yàn)證方法
    慢性鼻-鼻竇炎患者血清IgE、IL-5及HMGB1的表達(dá)及其臨床意義
    重要模型『一線三等角』
    重尾非線性自回歸模型自加權(quán)M-估計(jì)的漸近分布
    3D打印中的模型分割與打包
    天堂√8在线中文| 亚洲成国产人片在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 美女扒开内裤让男人捅视频| 手机成人av网站| ponron亚洲| 欧美激情 高清一区二区三区| 日韩视频一区二区在线观看| 桃红色精品国产亚洲av| 色尼玛亚洲综合影院| 精品久久久精品久久久| ponron亚洲| 色尼玛亚洲综合影院| 757午夜福利合集在线观看| 91成人精品电影| 国产精品一区二区三区四区久久 | 人成视频在线观看免费观看| 国产激情久久老熟女| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 亚洲国产欧美一区二区综合| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 亚洲中文字幕日韩| 国产欧美日韩一区二区三| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲欧美激情综合另类| 精品国产国语对白av| 18禁观看日本| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 精品欧美国产一区二区三| av天堂久久9| 国产精品免费视频内射| 婷婷六月久久综合丁香| 久久久久国内视频| 九色国产91popny在线| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲,欧美精品.| 最近最新免费中文字幕在线| www.熟女人妻精品国产| 午夜两性在线视频| 国产精品免费一区二区三区在线| 欧美乱妇无乱码| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 丝袜在线中文字幕| videosex国产| 亚洲欧美激情综合另类| 欧美激情久久久久久爽电影 | 成熟少妇高潮喷水视频| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 亚洲国产看品久久| 日韩av在线大香蕉| svipshipincom国产片| 曰老女人黄片| 国产免费av片在线观看野外av| av网站免费在线观看视频| 精品日产1卡2卡| 中文字幕精品免费在线观看视频| 亚洲片人在线观看| 亚洲国产精品成人综合色| 91麻豆av在线| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲,欧美精品.| 91国产中文字幕| 两个人看的免费小视频| 午夜两性在线视频| 国产精品日韩av在线免费观看 | 亚洲第一av免费看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 亚洲avbb在线观看| 亚洲av五月六月丁香网| av在线播放免费不卡| 亚洲一码二码三码区别大吗| 制服人妻中文乱码| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 久久久国产成人免费| 欧美成人免费av一区二区三区| 精品一区二区三区av网在线观看| 999久久久精品免费观看国产| 深夜精品福利| 国内精品久久久久久久电影| 国产亚洲精品av在线| 国产精品亚洲一级av第二区| 午夜福利18| 91av网站免费观看| www.熟女人妻精品国产| 亚洲三区欧美一区| 午夜福利欧美成人| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲人成伊人成综合网2020| 国产在线精品亚洲第一网站| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 久久精品91蜜桃| 亚洲久久久国产精品| 国产欧美日韩一区二区精品| 91精品国产国语对白视频| 久久人人97超碰香蕉20202| 91成年电影在线观看| aaaaa片日本免费| av电影中文网址| 免费少妇av软件| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产精品永久免费网站| 亚洲精品国产区一区二| 久久久久久久午夜电影| 91麻豆av在线| 身体一侧抽搐| 久久久久久久午夜电影| 午夜久久久在线观看| 在线观看免费视频日本深夜| 日韩三级视频一区二区三区| 精品日产1卡2卡| 亚洲专区国产一区二区| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 两人在一起打扑克的视频| 超碰成人久久| 岛国视频午夜一区免费看| 亚洲人成电影免费在线| 天天一区二区日本电影三级 | 免费在线观看日本一区| 久久国产乱子伦精品免费另类| 欧美成人性av电影在线观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 久久精品91蜜桃| 美女高潮到喷水免费观看| 很黄的视频免费| 亚洲自偷自拍图片 自拍| av在线播放免费不卡| 99riav亚洲国产免费| 精品国内亚洲2022精品成人| 色在线成人网| 一本久久中文字幕| 国产熟女xx| 国产真人三级小视频在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 黄片播放在线免费| 91字幕亚洲| 一夜夜www| 午夜成年电影在线免费观看| 国产高清视频在线播放一区| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 久久香蕉精品热| 国产精品二区激情视频| www国产在线视频色| 亚洲色图av天堂| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲成av人片免费观看| 亚洲专区字幕在线| 少妇被粗大的猛进出69影院| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 黄色毛片三级朝国网站| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 久9热在线精品视频| 9191精品国产免费久久| 国产不卡一卡二| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 午夜久久久久精精品| 老熟妇仑乱视频hdxx| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 午夜福利成人在线免费观看| 一进一出抽搐gif免费好疼| 嫩草影院精品99| 亚洲国产中文字幕在线视频| 男人舔女人的私密视频| 久久久久久久久久久久大奶| 丁香六月欧美| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 超碰成人久久| АⅤ资源中文在线天堂| 国产成人啪精品午夜网站| 欧美日韩黄片免| 免费高清在线观看日韩| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 色播亚洲综合网| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久九九热精品免费| 精品久久久精品久久久| 黄片小视频在线播放| 国产国语露脸激情在线看| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产一卡二卡三卡精品| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 成年人黄色毛片网站| 韩国av一区二区三区四区| avwww免费| 精品欧美国产一区二区三| 国产亚洲精品一区二区www| 少妇被粗大的猛进出69影院| 美女 人体艺术 gogo| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 久久精品人人爽人人爽视色| 久久伊人香网站| 成人av一区二区三区在线看| 啪啪无遮挡十八禁网站| 欧美日本视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 两人在一起打扑克的视频| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲av第一区精品v没综合| 人人澡人人妻人| 亚洲美女黄片视频| 真人一进一出gif抽搐免费| 无限看片的www在线观看| 在线免费观看的www视频| 性少妇av在线| 在线观看www视频免费| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 可以在线观看毛片的网站| 欧美在线黄色| 国产麻豆69| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 最近最新中文字幕大全免费视频| 精品高清国产在线一区| 日本 av在线| 日本一区二区免费在线视频| 成人特级黄色片久久久久久久| 叶爱在线成人免费视频播放| av天堂久久9| 人人妻人人澡欧美一区二区 | 自线自在国产av| 夜夜爽天天搞| 国产成+人综合+亚洲专区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产亚洲欧美精品永久| 国产男靠女视频免费网站| 嫁个100分男人电影在线观看| 91九色精品人成在线观看| 国产欧美日韩一区二区三| e午夜精品久久久久久久| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产高清有码在线观看视频 | 热99re8久久精品国产| av免费在线观看网站| 久久久国产精品麻豆| 国产av一区在线观看免费| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 一本久久中文字幕| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产高清videossex| 免费看a级黄色片| 青草久久国产| av免费在线观看网站| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 看免费av毛片| 久久中文看片网| 十分钟在线观看高清视频www| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲av熟女| 91精品国产国语对白视频| 亚洲片人在线观看| 大码成人一级视频| 亚洲精品一区av在线观看| 国产精华一区二区三区| 国产精品1区2区在线观看.| 成在线人永久免费视频| 欧美一级a爱片免费观看看 | 中文字幕人成人乱码亚洲影| 老司机午夜十八禁免费视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费| av网站免费在线观看视频| 国产熟女xx| 亚洲,欧美精品.| 一进一出抽搐动态| 搡老熟女国产l中国老女人| 精品国产美女av久久久久小说| 夜夜夜夜夜久久久久| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲精华国产精华精| 香蕉久久夜色| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 91老司机精品| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲成人精品中文字幕电影| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 久久婷婷成人综合色麻豆| 老鸭窝网址在线观看| 国产亚洲精品av在线| 亚洲精品美女久久av网站| 午夜成年电影在线免费观看| avwww免费| 国产区一区二久久| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 一区在线观看完整版| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲av熟女| 91在线观看av| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 久久热在线av| 国产精品,欧美在线| 成人三级做爰电影| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 国产成人av教育| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 一区二区三区精品91| 国产乱人伦免费视频| 免费观看人在逋| 真人做人爱边吃奶动态| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 黑人欧美特级aaaaaa片| 男女下面进入的视频免费午夜 | 正在播放国产对白刺激| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 国产精品二区激情视频| 久久久久久久久免费视频了| 在线永久观看黄色视频| 黄色丝袜av网址大全| 99re在线观看精品视频| 成年女人毛片免费观看观看9| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产精品亚洲一级av第二区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 亚洲第一电影网av| 精品一品国产午夜福利视频| 欧美中文综合在线视频| 国产主播在线观看一区二区| 日本三级黄在线观看| 搡老岳熟女国产| 桃色一区二区三区在线观看| 日本五十路高清| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲五月婷婷丁香| 妹子高潮喷水视频| 视频在线观看一区二区三区| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 亚洲七黄色美女视频| av电影中文网址| 免费高清在线观看日韩| 韩国av一区二区三区四区| 久久久久久国产a免费观看| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 少妇被粗大的猛进出69影院| 天堂影院成人在线观看| 精品人妻在线不人妻| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 人人妻人人澡欧美一区二区 | 午夜福利一区二区在线看| 人妻久久中文字幕网| 精品久久久久久,| e午夜精品久久久久久久| 波多野结衣高清无吗| 在线观看日韩欧美| 麻豆久久精品国产亚洲av| 禁无遮挡网站| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 女警被强在线播放| 国产精品影院久久| 亚洲一区高清亚洲精品| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 首页视频小说图片口味搜索| 国产成人系列免费观看| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 一级a爱片免费观看的视频| 国产97色在线日韩免费| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 成年女人毛片免费观看观看9| 无遮挡黄片免费观看| 国产97色在线日韩免费| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 黄片播放在线免费| 日韩三级视频一区二区三区| 色综合婷婷激情| 亚洲无线在线观看| 国产成人免费无遮挡视频| 99在线人妻在线中文字幕| 淫妇啪啪啪对白视频| 男女床上黄色一级片免费看| 一级毛片精品| or卡值多少钱| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 18禁美女被吸乳视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 欧美国产精品va在线观看不卡| а√天堂www在线а√下载| 欧美乱色亚洲激情| cao死你这个sao货| 久热爱精品视频在线9| 中国美女看黄片| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 久久久久九九精品影院| 色哟哟哟哟哟哟| 99精品久久久久人妻精品| 男人舔女人的私密视频| 桃色一区二区三区在线观看| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 黄色丝袜av网址大全| 国产91精品成人一区二区三区| 久久午夜综合久久蜜桃| 免费在线观看完整版高清| 91老司机精品| 视频区欧美日本亚洲| 中文字幕高清在线视频| 免费观看人在逋| 亚洲国产精品合色在线| 午夜福利在线观看吧| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| tocl精华| 男人舔女人的私密视频| 在线av久久热| 国产一区在线观看成人免费| 级片在线观看| 国产黄a三级三级三级人| 国产成人免费无遮挡视频| 国产成人精品在线电影| 不卡av一区二区三区| 国产成人精品无人区| 午夜激情av网站| 丝袜人妻中文字幕| 久久久久久人人人人人| 最新在线观看一区二区三区| 国产不卡一卡二| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产91精品成人一区二区三区| 国产成人av激情在线播放| 欧美日本中文国产一区发布| 色播在线永久视频| 亚洲一码二码三码区别大吗| 欧美成人午夜精品| 操出白浆在线播放| 最好的美女福利视频网| 亚洲av电影不卡..在线观看| 一进一出好大好爽视频| 怎么达到女性高潮| 淫秽高清视频在线观看| 岛国在线观看网站| 日韩高清综合在线| 老司机靠b影院| 国内精品久久久久久久电影| 亚洲国产看品久久| 亚洲情色 制服丝袜| 国产精品九九99| 精品国产国语对白av| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 好男人电影高清在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 99国产精品99久久久久| а√天堂www在线а√下载| 亚洲av片天天在线观看| 免费高清在线观看日韩| 美女国产高潮福利片在线看| 一区二区三区精品91| 欧美一区二区精品小视频在线| 日本vs欧美在线观看视频| 国产成人系列免费观看| 国产精品一区二区在线不卡| 国产精品日韩av在线免费观看 | 久久久久九九精品影院| 成人国产一区最新在线观看| 精品欧美一区二区三区在线| 国产私拍福利视频在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲av五月六月丁香网| 后天国语完整版免费观看| 嫩草影视91久久| 中文字幕色久视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 淫妇啪啪啪对白视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 国产私拍福利视频在线观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲精品中文字幕在线视频| 最近最新中文字幕大全免费视频| 91在线观看av| 国产精品日韩av在线免费观看 | 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产亚洲欧美98| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产麻豆成人av免费视频| 久久婷婷成人综合色麻豆| 青草久久国产| 激情视频va一区二区三区| 免费看十八禁软件| 一级a爱视频在线免费观看| 日韩av在线大香蕉| 美女国产高潮福利片在线看| 最近最新中文字幕大全免费视频| 日韩国内少妇激情av| 日本a在线网址| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 亚洲国产精品合色在线| 狠狠狠狠99中文字幕| 超碰成人久久| 日本a在线网址| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产伦人伦偷精品视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲,欧美精品.| xxx96com| 亚洲第一青青草原| 九色国产91popny在线| 免费av毛片视频| 日本三级黄在线观看| 国产av一区二区精品久久| 亚洲精品国产一区二区精华液| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 欧美中文日本在线观看视频| 91成人精品电影| 国产精品亚洲av一区麻豆| 丁香欧美五月| 91麻豆av在线| 国产一区在线观看成人免费| 人妻久久中文字幕网| 日本欧美视频一区| 首页视频小说图片口味搜索| 一级a爱片免费观看的视频| 精品欧美一区二区三区在线| 亚洲第一av免费看| 亚洲avbb在线观看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 中文字幕久久专区| 高清黄色对白视频在线免费看| 国产一区二区三区视频了| 国产成人欧美在线观看| 亚洲久久久国产精品| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 欧美成狂野欧美在线观看| 色在线成人网| 午夜免费鲁丝| 最近最新中文字幕大全免费视频| 成人av一区二区三区在线看| 亚洲精品国产一区二区精华液| 国产午夜精品久久久久久| 曰老女人黄片| 午夜老司机福利片| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 日韩欧美免费精品| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产精品亚洲av一区麻豆| 亚洲男人天堂网一区| 老司机深夜福利视频在线观看| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 国产在线观看jvid| 日韩大尺度精品在线看网址 | 国产成人欧美| 欧美另类亚洲清纯唯美| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 欧美日韩精品网址| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 他把我摸到了高潮在线观看| 美国免费a级毛片| 午夜福利视频1000在线观看 | 黄片播放在线免费| 狠狠狠狠99中文字幕| 一区二区三区高清视频在线| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 亚洲无线在线观看| 久热爱精品视频在线9| 日本vs欧美在线观看视频| 在线免费观看的www视频| 日韩国内少妇激情av| 99精品久久久久人妻精品| 国产高清激情床上av| 亚洲中文日韩欧美视频| a在线观看视频网站| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产99久久九九免费精品| 老鸭窝网址在线观看| 午夜免费成人在线视频| 人人澡人人妻人| 大型av网站在线播放| 欧美+亚洲+日韩+国产| 制服人妻中文乱码| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 午夜福利高清视频| 亚洲精品国产色婷婷电影| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲成人久久性| 午夜久久久在线观看| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 夜夜躁狠狠躁天天躁| 69av精品久久久久久| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久热在线av| 99国产精品一区二区蜜桃av| 此物有八面人人有两片| 黑人欧美特级aaaaaa片| 人成视频在线观看免费观看| 婷婷精品国产亚洲av在线| 精品第一国产精品| 69av精品久久久久久| 国产av在哪里看| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 好男人电影高清在线观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 制服丝袜大香蕉在线| 日韩免费av在线播放| 久久影院123| 99国产精品一区二区蜜桃av| 午夜免费成人在线视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 母亲3免费完整高清在线观看| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 高潮久久久久久久久久久不卡| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲国产毛片av蜜桃av|